（江蘇專版）高中生物【同步測(cè)評(píng)】第3章 基因工程 第4章 生物技術(shù)的安全性與倫理問(wèn)題（人教2019版選擇性必修3）

第3章基因工程第4章生物技術(shù)的安全性與倫理問(wèn)題測(cè)評(píng)卷一、單項(xiàng)選擇題(共15小題,每小題2分,共30分,每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.基因工程是對(duì)DNA的設(shè)計(jì)施工,下列“工具”在基因工程中不會(huì)使用的是()A.限制酶 B.DNA連接酶 C.質(zhì)?；虿《?D.RNA復(fù)制酶2.基因工程的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體,下列不屬于載體作用的是()A.載體能防止目的基因被受體細(xì)胞限制酶“切割”B.載體能協(xié)助目的基因在受體細(xì)胞中復(fù)制C.載體含有啟動(dòng)子和終止子可協(xié)助目的基因表達(dá)D.載體具有標(biāo)記基因,便于篩選含目的基因的受體細(xì)胞3.下列關(guān)于植物基因工程應(yīng)用的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()A.將動(dòng)物的某種蛋白質(zhì)基因?qū)胫参矬w中用來(lái)生產(chǎn)該蛋白質(zhì)B.植物基因工程可用來(lái)培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物C.利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因,使其能夠生產(chǎn)人類所需要的藥物D.通過(guò)植物基因工程培育的抗蟲(chóng)植物必然可以抗病毒4.作物脫毒、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、抗除草劑作物、可保存的干擾素,依次應(yīng)用下列哪項(xiàng)生物技術(shù)?()①基因工程②細(xì)胞工程③蛋白質(zhì)工程④胚胎工程A.①②②③ B.②①①③ C.②①②③ D.②①②④5.蛛絲的強(qiáng)度和柔韌度得益于蛛絲蛋白的特殊布局。有人試圖通過(guò)破解蛛絲蛋白的結(jié)構(gòu)推測(cè)出相應(yīng)的基因結(jié)構(gòu),用以指導(dǎo)對(duì)蠶絲蛋白的修改,讓蠶也吐出堅(jiān)韌的絲。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A.蠶合成像蛛絲蛋白一樣堅(jiān)韌的絲的過(guò)程不遵循“中心法則”B.上述過(guò)程運(yùn)用的蛋白質(zhì)工程技術(shù)是基因工程的延伸C.可以利用核酸分子雜交技術(shù)檢測(cè)是否有目標(biāo)蛋白的合成D.利用基因工程技術(shù)不能改變基因上特定位點(diǎn)的核苷酸序列6.2022年3月8日,史上首例接受了“豬心臟”移植手術(shù)的患者在術(shù)后2個(gè)月去世。盡管沒(méi)能最終救回他,但也延長(zhǎng)了患者的壽命。據(jù)悉,手術(shù)使用的“豬心臟”源于基因被改造過(guò)的實(shí)驗(yàn)豬,這項(xiàng)技術(shù)有望解決器官移植面臨的器官短缺的難題。下列關(guān)于器官移植的說(shuō)法,不正確的是()A.通常器官移植要面臨的難題之一是由T淋巴細(xì)胞引起的免疫排斥B.該實(shí)驗(yàn)豬可能通過(guò)基因敲除技術(shù)“敲除”了引起人免疫系統(tǒng)反應(yīng)的抗原基因C.為保證該豬任何內(nèi)臟都能供人體移植,需要在原腸胚時(shí)期對(duì)豬的細(xì)胞進(jìn)行改造D.我國(guó)支持的治療性克隆也能解決器官短缺的難題7.2022年有報(bào)道稱一個(gè)病毒研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)目前導(dǎo)致全球大規(guī)模疫情的新冠病毒的基因中,居然含有某國(guó)的一個(gè)公司在2016年2月申請(qǐng)的專利基因片段,而這個(gè)基因序列通過(guò)自然進(jìn)化隨機(jī)出現(xiàn)在新冠病毒中的概率是三萬(wàn)億分之一,此新聞引發(fā)全球高度關(guān)注,生物技術(shù)誤用、謬用讓全球生物安全形勢(shì)日益嚴(yán)峻。下列有關(guān)生物技術(shù)安全性的敘述,不正確的是()A.我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識(shí)制度B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身是中性的,我們要靠確鑿的證據(jù)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿嬤M(jìn)行思考和辯論C.我國(guó)政府主張全面禁止和徹底銷毀生物武器D.為防止生物技術(shù)用于生產(chǎn)生物武器,嚴(yán)禁進(jìn)行生物技術(shù)的新研究8.生物安全是指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康以及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B.由于技術(shù)問(wèn)題,生殖性克隆可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆動(dòng)物C.為避免可能產(chǎn)生的基因歧視,基因檢測(cè)機(jī)構(gòu)不能隨意泄露基因檢測(cè)的結(jié)果D.從外來(lái)入侵害蟲(chóng)的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理,不會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響9.生長(zhǎng)激素是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)及生物實(shí)驗(yàn)中常用的重要物質(zhì),最初生長(zhǎng)激素是從牛和豬腦垂體中提取出來(lái)的,但副作用過(guò)大。而化學(xué)合成的方法效率較低,沒(méi)有實(shí)用價(jià)值,因此,采用基因工程方法大規(guī)模生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素是滿足臨床大量需求的重要手段。該過(guò)程所用的質(zhì)粒A與含生長(zhǎng)激素基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()圖1圖2注:限制性核酸內(nèi)切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為5'-G↓GATCC-3'、5'-T↓GATCA-3'、5'-↓GATC-3'、5'-A↓AGCTT-3'。A.圖1的質(zhì)粒與目的基因結(jié)合后不可直接導(dǎo)入受體細(xì)胞B.BamHⅠ酶和BclⅠ酶酶切的DNA末端連接,連接部位用酶Sau3AⅠ一定能切開(kāi)C.用Sau3AⅠ酶切圖1所示的質(zhì)粒A得到DNA片段對(duì)RNA聚合酶有一定的親和力D.生長(zhǎng)激素基因可以嵌入羊基因組的任何位置,以得到轉(zhuǎn)基因羊并對(duì)生長(zhǎng)激素進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)10.某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn),同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因,獲得此質(zhì)粒的農(nóng)桿菌表現(xiàn)出對(duì)兩種抗生素的抗性。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過(guò)程,如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖分析,下列表述錯(cuò)誤的是()A.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),選用HindⅢ和SalⅠ兩種酶切割目的基因的兩端及質(zhì)?？煞乐鼓康幕蚝唾|(zhì)粒的自身環(huán)化B.用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農(nóng)桿菌時(shí),發(fā)現(xiàn)含有目的基因的農(nóng)桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),說(shuō)明抗四環(huán)素基因未起到標(biāo)記基因的作用C.采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是因?yàn)檗r(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞時(shí),重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA能將目的基因插入煙草細(xì)胞的染色體DNA上D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草植株,依據(jù)的原理是高度分化的植物細(xì)胞具有發(fā)育成完整植株的能力11.[2023江蘇南通如皋中學(xué)高二月考]在基因工程操作中常用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)不同DNA片段。科研人員利用EcoRⅠ和SmaⅠ兩種限制酶處理某DNA分子,得到如下電泳圖譜。其中1號(hào)泳道是標(biāo)準(zhǔn)DNA樣品,2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)分別是EcoRⅠ單獨(dú)處理、SmaⅠ單獨(dú)處理、EcoRⅠ和SmaⅠ共同處理后的電泳結(jié)果。下列說(shuō)法正確的是()A.該DNA可能是含1000bp的環(huán)狀DNA分子 B.電泳圖譜中DNA片段越小,距離起點(diǎn)越近C.EcoRⅠ和SmaⅠ能夠催化DNA的氫鍵斷裂 D.EcoRⅠ和SmaⅠ的切點(diǎn)最短相距約800bp12.新冠病毒為RNA病毒,其序列中具有RNA聚合酶基因,無(wú)逆轉(zhuǎn)錄酶基因,快速準(zhǔn)確的檢測(cè)對(duì)疫情防控起著至關(guān)重要的作用。病毒的檢測(cè)方法有:①用“新冠病毒核酸檢測(cè)試劑盒”,檢測(cè)病毒的遺傳物質(zhì)RNA;②特異性抗原蛋白檢測(cè),即檢測(cè)病毒表面的一種糖蛋白;③特異性抗體檢測(cè),即檢測(cè)感染者體內(nèi)通過(guò)免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的某種抗體。下列說(shuō)法不正確的是()A.方法①②③都需要從患者體內(nèi)采集病毒樣本B.方法②③都需要用到抗原—抗體雜交的方法C.某人有可能①②為陽(yáng)性、③為陰性,也可能③為陽(yáng)性、①②為陰性D.由于RNA比DNA穩(wěn)定性差,往往將病毒樣本的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,擴(kuò)增之后進(jìn)行分段測(cè)序,在該過(guò)程中需要用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶13.[2023江蘇常州三中高三模擬]自然界中很少出現(xiàn)藍(lán)色的花,天然藍(lán)色花產(chǎn)生的主要原因是花瓣細(xì)胞液泡中花青素在堿性條件下顯藍(lán)色。我國(guó)科學(xué)家利用鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)構(gòu)建基因表達(dá)載體(如下圖),通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入白玫瑰中,在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中形成穩(wěn)定顯色的靛藍(lán)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.上述獲得藍(lán)色玫瑰的方案中需要轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因B.將idgS基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)使用的限制酶是SpeⅠ和SacⅠC.sfp和idgS基因具有各自的啟動(dòng)子,前者調(diào)控后者的表達(dá)D.農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色體DNA上14.[2023江蘇揚(yáng)州高二統(tǒng)考期末]大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后,擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上,靜置一段時(shí)間,質(zhì)粒分布在上清液中,利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA,用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物,電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述錯(cuò)誤的是()A.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液,可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下鑒定DNAB.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理C.根據(jù)電泳結(jié)果,質(zhì)粒上一定沒(méi)有限制酶I和Ⅱ的酶切位點(diǎn),而有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)D.用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒,被染色的質(zhì)粒還需要通過(guò)紫外燈照射才能看到結(jié)果15.[2023山東棗莊高二期中]新冠病毒的檢測(cè)可以采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))的方法,RT-PCR的具體過(guò)程如下圖,下列敘述正確的是()A.PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶B.過(guò)程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行5次循環(huán)的擴(kuò)增,理論上需要32個(gè)引物BC.該技術(shù)可用于獲取并大量擴(kuò)增目的基因,所得基因不含啟動(dòng)子D.PCR反應(yīng)中周期性的溫度設(shè)置是特定的,與擴(kuò)增的目的基因和引物無(wú)關(guān)二、不定項(xiàng)選擇題(共5小題,每小題3分,共15分,每小題有一個(gè)或多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求,全部選對(duì)得3分,選對(duì)但不全的得1分,有選錯(cuò)的得0分)16.[2023山東菏澤一中高二月考]限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并使特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。修飾酶能對(duì)DNA或RNA的堿基進(jìn)行修飾,防止DNA或RNA被限制酶破壞。某些噬菌體能寄生在特定大腸桿菌體內(nèi)進(jìn)行繁殖。下列敘述正確的是()A.不能被噬菌體侵染的大腸桿菌,細(xì)胞膜上可能沒(méi)有噬菌體可識(shí)別的特異性受體B.能被噬菌體侵染的大腸桿菌,體內(nèi)無(wú)核糖體,不能合成破壞外源DNA的限制酶C.能寄生于大腸桿菌的噬菌體,DNA上一定沒(méi)有大腸桿菌限制酶的識(shí)別位點(diǎn)D.能寄生于大腸桿菌的噬菌體,DNA上可能也存在與大腸桿菌相同的修飾物17.[2023江蘇淮安馬壩高級(jí)中學(xué)高二期中]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),PVY-CP基因位于某種環(huán)狀DNA分子中。將PVY-CP基因?qū)腭R鈴薯,使之表達(dá)即可獲得抗PVY病毒的馬鈴薯。下圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程,相關(guān)酶切位點(diǎn)如下表所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()BamHⅠHindⅢBglⅡSmaⅠA.推測(cè)Klenow酶的功能與DNA聚合酶類似B.由步驟③獲取的目的基因有1個(gè)黏性末端C.步驟④應(yīng)選用的限制酶是BamHⅠ和SmaⅠD.NPTⅡ基因可能是用于篩選的標(biāo)記基因18.下表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn),圖1為某種質(zhì)粒,圖中標(biāo)出了限制酶的酶切位點(diǎn),圖2為某種目的基因及限制酶的酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖2中的目的基因定向插入質(zhì)粒中。下列有關(guān)敘述正確的是()限制酶BamHⅠEcoRⅠHindⅢNheⅠMunⅠ識(shí)別序列和切割位點(diǎn)G↓GATCCG↓AATTCA↓AGCTTG↓CTAGCC↓AATTG圖1圖2A.目的基因必須插入啟動(dòng)子和終止子之間B.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)一定要用到DNA連接酶C.切割圖中目的基因和質(zhì)粒時(shí)必須選用相同的限制酶D.切割目的基因和質(zhì)粒時(shí)一定用到的酶是HindⅢ19.人凝血酶Ⅲ是一種分泌蛋白,可預(yù)防和治療急慢性血栓。重組人凝血酶Ⅲ是世界上首個(gè)上市的動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的重組蛋白藥物。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.可從人細(xì)胞中提取RNA后利用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)獲取目的基因B.目的基因的上游需連接在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)基因的啟動(dòng)子上C.用顯微注射技術(shù)將表達(dá)載體導(dǎo)入乳腺細(xì)胞來(lái)獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物D.用大腸桿菌和酵母菌作為受體細(xì)胞都能獲得活性高的人凝血酶Ⅲ20.[2023江蘇南京高二?？计谥衇胰島素可用于治療糖尿病,但胰島素注射后易在皮下堆積,需較長(zhǎng)時(shí)間才能進(jìn)入血液,進(jìn)入血液后又易被分解,因此治療效果受到影響。下圖是新的速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程,有關(guān)敘述正確的是()A.新的胰島素的預(yù)期功能是構(gòu)建新胰島素模型的主要依據(jù)B.新的胰島素生產(chǎn)過(guò)程中不涉及中心法則C.用大腸桿菌生產(chǎn)的胰島素不具有生物學(xué)活性D.新的胰島素功能的發(fā)揮必須依賴于蛋白質(zhì)正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)三、非選擇題(共5小題,共55分)21.(10分)用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過(guò)程中需要使用多種工具酶,其中4種限制性內(nèi)切核酸酶的切割位點(diǎn)如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接。上圖中酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。

(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是。

(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征。如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn),可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能;質(zhì)粒DNA分子上有,便于外源DNA插入;質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因),利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞,方法是

。

(4)表達(dá)載體含有啟動(dòng)子,啟動(dòng)子是指

。

22.(16分)下圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程,綠色熒光蛋白基因有720個(gè)堿基對(duì)(bp),質(zhì)粒有5369個(gè)堿基對(duì)(bp)。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。(1)質(zhì)粒中“氨芐青霉素抗性基因”的作用是。研究發(fā)現(xiàn)復(fù)制原點(diǎn)處的A和T特別多,有利于DNA復(fù)制時(shí)過(guò)程的發(fā)生。

(2)限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是5'-G↓GATCC-3',該酶切形成的黏性末端是。

(3)已知圖中質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ、HindⅢ雙酶切割后進(jìn)行電泳,出現(xiàn)了一條長(zhǎng)度為5300bp的DNA條帶,則重組質(zhì)粒的長(zhǎng)度為的DNA片段條帶。

(4)過(guò)程①②用兩種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,與單一酶切相比,其優(yōu)勢(shì)有。過(guò)程②通過(guò)PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn),進(jìn)行PCR時(shí),需要在兩種引物的端分別添加BamHⅠ和HindⅢ的識(shí)別序列。

(5)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌前,要用CaCl2處理大腸桿菌,其目的是;進(jìn)行篩選時(shí),大腸桿菌培養(yǎng)基中除需要加入水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源、瓊脂等物質(zhì)外,還要分別添加。

23.(14分)基因工程自20世紀(jì)70年代興起后,得到了飛速的發(fā)展,在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面展示出廣闊的前景,請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題。(1)利用基因工程技術(shù),可以讓哺乳動(dòng)物批量生產(chǎn)藥物,科學(xué)家構(gòu)建羊乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)胰島素,應(yīng)先從人體細(xì)胞中獲取RNA,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,再經(jīng)PCR擴(kuò)增后獲得大量胰島素基因。以單鏈cDNA為模板在PCR儀中進(jìn)行n次循環(huán),需要消耗個(gè)引物。

(2)科學(xué)家構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器需將胰島素基因與等調(diào)控元件重組在一起,通過(guò)顯微注射法導(dǎo)入的受體細(xì)胞是。若要檢測(cè)目的基因是否反向插入,(填“能”或“不能”)根據(jù)帶標(biāo)記的目的基因單鏈作探針的核酸分子雜交結(jié)果判斷。

(3)與乳腺生物反應(yīng)器相比,用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的優(yōu)勢(shì)在于:。(答兩點(diǎn)即可)

(4)從上述流程可知,制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程中的主要技術(shù)可能有:。(答出兩點(diǎn)即可)

24.(8分)枯草桿菌產(chǎn)生的蛋白酶具有催化分解蛋白質(zhì)的特性,但其極易被氧化而失效?？茖W(xué)家將枯草桿菌蛋白酶分子中的第222位氨基酸替換后,雖然其水解活性有所下降,但抗氧化能力大大提高。用這種水解酶作為洗滌劑,可以有效地除去血漬、奶漬等蛋白質(zhì)污漬。它的改造過(guò)程如下:預(yù)期蛋白質(zhì)功能→①設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→②推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→③找到并改變基因中脫氧核苷酸序列→④生產(chǎn)相應(yīng)蛋白質(zhì)。回答下列問(wèn)題。(1)改造枯草桿菌蛋白酶的生物技術(shù)是。

(2)改造后的枯草桿菌中控制合成蛋白酶的基因與原來(lái)相比,至少有個(gè)堿基對(duì)發(fā)生變化。

(3)科學(xué)家對(duì)枯草桿菌蛋白酶分子所做的改造工作,是對(duì)已知蛋白質(zhì)進(jìn)行。

(4)通過(guò)③過(guò)程獲得的脫氧核苷酸序列不是完整的基因,要使這一序列能夠表達(dá)并發(fā)揮作用,還必須在序列的上、下游加上和,在這個(gè)過(guò)程中需要酶的參與。

25.(7分)治療性克隆一般是先從需要救治的病人身上提取一個(gè)細(xì)胞,然后將該細(xì)胞的遺傳物質(zhì)置于一個(gè)去除了細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,該重組細(xì)胞開(kāi)始自行分裂,直至形成一個(gè)早期胚胎,從這個(gè)早期胚胎中即可提取胚胎干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞經(jīng)過(guò)相應(yīng)的技術(shù)處理,便可培育成遺傳特性與病人完全吻合的細(xì)胞、組織或器官。如圖所示為人類“治療性克隆”的大概過(guò)程,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)相同的胚胎干細(xì)胞,“克隆”的結(jié)果卻各種各樣,有的是神經(jīng)細(xì)胞,有的是血細(xì)胞,有的是肌肉細(xì)胞,其根本原因是。

(2)③構(gòu)建的重組細(xì)胞發(fā)育的過(guò)程中,細(xì)胞開(kāi)始分化發(fā)生在期,從細(xì)胞水平上看,卵裂的分裂方式是。

(3)治療性克隆所用的主要技術(shù)是和胚胎干細(xì)胞培養(yǎng),要想獲得基因型完全相同的胚胎,可采用技術(shù)。

(4)治療性克隆解決了臨床上和的問(wèn)題。

第3、4章測(cè)評(píng)1.D基因工程需要用的“工具”有三種,即限制酶、DNA連接酶、載體(質(zhì)?；虿《?,不需要RNA復(fù)制酶。2.A載體不能防止目的基因被受體細(xì)胞限制酶“切割”,A項(xiàng)錯(cuò)誤;載體在受體細(xì)胞中能夠穩(wěn)定存在,并且自我復(fù)制,使目的基因數(shù)量擴(kuò)大,B項(xiàng)正確;啟動(dòng)子是RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn),能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程,終止子控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束,所以載體含有的啟動(dòng)子和終止子可協(xié)助目的基因的表達(dá),C項(xiàng)正確;載體具有標(biāo)記基因,標(biāo)記基因便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞,D項(xiàng)正確。3.D所有生物共用一套遺傳密碼,因此將動(dòng)物的某種蛋白質(zhì)基因?qū)胫参矬w中用來(lái)生產(chǎn)該蛋白質(zhì),A項(xiàng)正確;可以將某些比如抗逆性、高產(chǎn)等基因?qū)胫参矬w內(nèi),培育出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物,B項(xiàng)正確;利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因,使其能夠生產(chǎn)人類所需要的藥物,比如紫草寧等藥品,C項(xiàng)正確;用基因工程培育的抗蟲(chóng)植物只含有抗蟲(chóng)特性,不能抗病毒,D項(xiàng)錯(cuò)誤。4.B作物脫毒屬于細(xì)胞工程的應(yīng)用;改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)、抗除草劑作物屬于基因工程的應(yīng)用;可保存的干擾素屬于蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用。5.B蠶合成像蛛絲蛋白一樣堅(jiān)韌的絲的過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄、翻譯兩個(gè)過(guò)程,遵循“中心法則”,A項(xiàng)錯(cuò)誤;基因控制蛋白質(zhì)的合成,因此要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,最終還必須通過(guò)改造或合成基因來(lái)完成,故上述過(guò)程運(yùn)用的蛋白質(zhì)工程技術(shù)是基因工程的延伸,B項(xiàng)正確;核酸分子雜交技術(shù)不能檢測(cè)蛋白質(zhì),可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)蛋白質(zhì),C項(xiàng)錯(cuò)誤;利用基因工程技術(shù)可以改變基因上特定位點(diǎn)的核苷酸序列,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的改造,D項(xiàng)錯(cuò)誤。6.C人體免疫系統(tǒng)中T淋巴細(xì)胞分裂、分化形成細(xì)胞毒性T細(xì)胞會(huì)攻擊移植的器官,所以通常器官移植要面臨的難題之一是由T淋巴細(xì)胞引起的免疫排斥,A項(xiàng)正確;由于移植的器官會(huì)引發(fā)人體免疫反應(yīng),所以通過(guò)基因敲除技術(shù)“敲除”了引起人免疫系統(tǒng)反應(yīng)的抗原基因,就會(huì)避免這個(gè)現(xiàn)象的發(fā)生,B項(xiàng)正確;由于在原腸胚已經(jīng)發(fā)生了分化,所以應(yīng)該對(duì)豬的卵原細(xì)胞或者受精卵進(jìn)行改造,才能夠保證該豬任何內(nèi)臟都能供人體移植,C項(xiàng)錯(cuò)誤;治療性克隆指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植,也能解決器官短缺的難題,D項(xiàng)正確。7.D我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識(shí)制度,制定實(shí)施了《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識(shí)管理辦法》,A項(xiàng)正確;轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身是中性的,理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)需要以完備的相關(guān)科學(xué)知識(shí)為基礎(chǔ),還應(yīng)該看到人們的觀點(diǎn)受到許多復(fù)雜的政治、經(jīng)濟(jì)和文化等因素的影響,最重要的是我們要靠確鑿的證據(jù)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿嬤M(jìn)行思考和辯論,B項(xiàng)正確;我國(guó)政府重申支持《禁止生物武器公約》的宗旨和目標(biāo),全面嚴(yán)格履行公約義務(wù),主張全面禁止和徹底銷毀生物武器等各類大規(guī)模殺傷性武器,C項(xiàng)正確;生物武器具有強(qiáng)大的傳染性和致病力,應(yīng)在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器,并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散,但生物技術(shù)本身是中性的,不應(yīng)嚴(yán)禁進(jìn)行生物技術(shù)的新研究,D項(xiàng)錯(cuò)誤。8.D在生物恐怖威脅不斷上升、全球傳染病疫情頻發(fā)的情況下,消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面,A項(xiàng)正確;由于克隆技術(shù)尚不成熟,如重構(gòu)胚胎成功率低,移植入母體子宮后胚胎著床率低、流產(chǎn)率高、胎兒畸形率高,出生后死亡率高等,現(xiàn)在進(jìn)行生殖性克隆很可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆動(dòng)物,B項(xiàng)正確;為了盡力規(guī)避基因診斷的風(fēng)險(xiǎn),避免可能產(chǎn)生的基因歧視,基因檢測(cè)機(jī)構(gòu)不能隨意泄露基因檢測(cè)的結(jié)果,C項(xiàng)正確;從外來(lái)入侵害蟲(chóng)的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理,由于短期內(nèi)天敵沒(méi)有資源和空間等的限制,可能會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響,D項(xiàng)錯(cuò)誤。9.D圖1的質(zhì)粒與目的基因結(jié)合后不可直接導(dǎo)入受體細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選,A項(xiàng)正確;BamHⅠ的酶切位點(diǎn)是5'-G↓GATCC-3',BclⅠ的酶切位點(diǎn)是5'-T↓GATCA-3',Sau3AⅠ的酶切位點(diǎn)是5'-↓GATC-3',BamHⅠ酶和BclⅠ酶酶切的DNA末端連接后,一定含有5'-↓GATC-3'切點(diǎn),連接部位用酶Sau3AⅠ一定能切開(kāi),B項(xiàng)正確;用Sau3AⅠ酶切圖1所示的質(zhì)粒A得到DNA片段中可能含有啟動(dòng)子,啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn),對(duì)RNA聚合酶有一定的親和力,C項(xiàng)正確;基因表達(dá)具有選擇性,如將生長(zhǎng)激素基因嵌入羊基因組的任何位置,不一定在哪些細(xì)胞能表達(dá),不利于生長(zhǎng)激素的收集,D項(xiàng)錯(cuò)誤。10.B在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),選用HindⅢ和SalⅠ兩種不同的限制酶切割目的基因的兩端及質(zhì)粒可防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化,A項(xiàng)正確;所給的限制酶在質(zhì)粒上的切割位點(diǎn)都位于抗四環(huán)素基因的部位,如果目的基因插入質(zhì)粒中,得到重組質(zhì)粒,則含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌只含有完整的抗氨芐青霉素基因,不含完整的抗四環(huán)素基因(被目的基因破壞),則含有目的基因的農(nóng)桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),這能說(shuō)明抗四環(huán)素基因起到了標(biāo)記基因的作用,B項(xiàng)錯(cuò)誤;農(nóng)桿菌中的T-DNA可轉(zhuǎn)移至煙草細(xì)胞,并整合到煙草細(xì)胞染色體的DNA上,因此將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,C項(xiàng)正確;植物組織培養(yǎng)技術(shù)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性,D項(xiàng)正確。11.A用EcoRⅠ單獨(dú)處理(2號(hào))或用SmaⅠ單獨(dú)處理(3號(hào))都只得到一種大小為1000bp的DNA片段,說(shuō)明該DNA最可能是含1000bp的環(huán)狀DNA分子,A項(xiàng)正確;電泳圖譜中DNA片段越小,距離起點(diǎn)越遠(yuǎn),說(shuō)明圖上側(cè)端為起始端,B項(xiàng)錯(cuò)誤;EcoRⅠ和SmaⅠ都是限制酶,限制酶切割DNA分子,破壞的是作用位點(diǎn)上兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵,C項(xiàng)錯(cuò)誤;兩種限制酶同時(shí)切割時(shí)會(huì)產(chǎn)生800bp和200bp兩種長(zhǎng)度的DNA片段,所以兩種限制酶的酶切位點(diǎn)最短相距200bp,D項(xiàng)錯(cuò)誤。12.A新冠病毒為RNA病毒,具有RNA聚合酶基因,無(wú)逆轉(zhuǎn)錄基因,其RNA首先侵入機(jī)體,經(jīng)過(guò)復(fù)制并指導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)合成,進(jìn)而完成病毒自身的增殖過(guò)程,同時(shí)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,抗體產(chǎn)生的快慢可能會(huì)因人而異,據(jù)此推測(cè),RNA檢測(cè)和抗原蛋白檢測(cè)需要從患者體內(nèi)采集病毒樣本,而抗體檢測(cè)不需要采集病毒樣本,A項(xiàng)錯(cuò)誤;方法②③都是檢測(cè)蛋白質(zhì),都需要用到抗原—抗體雜交的方法,B項(xiàng)正確;某人有可能①②為陽(yáng)性、③為陰性,即感染了新冠病毒但還未產(chǎn)生抗體,也可能③為陽(yáng)性、①②為陰性,即抗體陽(yáng)性,可能感染該病毒但痊愈或注射疫苗產(chǎn)生了抗體,C項(xiàng)正確;由于RNA相比DNA穩(wěn)定性差,往往將病毒樣本的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,該過(guò)程中需要用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶,D項(xiàng)正確。13.A用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)導(dǎo)入白玫瑰后,在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中形成穩(wěn)定顯色的靛藍(lán),所以無(wú)需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因,A項(xiàng)錯(cuò)誤;將idgS基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)可用SpeⅠ和SacⅠ以避免產(chǎn)生相同的黏性末端發(fā)生自身環(huán)化,增加構(gòu)建成功的概率,B項(xiàng)正確;sfp和idgS基因具有各自的啟動(dòng)子,sfp可激活idgS的表達(dá),C項(xiàng)正確;將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,故農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色體DNA上,D項(xiàng)正確。14.C由于DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度較大,DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色,所以將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后,可用二苯胺試劑在沸水條件下進(jìn)行鑒定,A項(xiàng)正確;DNA帶負(fù)電,電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理,B項(xiàng)正確;因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA,限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶,可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn),也可能沒(méi)有切割位點(diǎn),C項(xiàng)錯(cuò)誤;凝膠中的DNA分子通過(guò)染色,可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái),用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒,被染色的質(zhì)粒還需要通過(guò)紫外燈照射才能看到結(jié)果,D項(xiàng)正確。15.CPCR體系中需要的是耐高溫的DNA聚合酶,不是從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶,A項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增,根據(jù)DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)可知,該過(guò)程理論上至少需要2n-1個(gè)引物B,5次循環(huán)的擴(kuò)增需要25-1=31個(gè)引物B,B項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程Ⅰ中由mRNA形成cDNA,不需要啟動(dòng)子,該技術(shù)可用于獲取并大量擴(kuò)增目的基因,所得基因不含啟動(dòng)子,C項(xiàng)正確;PCR反應(yīng)中溫度呈現(xiàn)周期性變化,其中加熱到90~95℃的目的是雙鏈DNA解聚為單鏈,然后冷卻到55~60℃使引物與互補(bǔ)DNA鏈結(jié)合,繼續(xù)加熱到70~75℃,目的是在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行延伸,所以PCR反應(yīng)中周期性的溫度可在一定范圍內(nèi)設(shè)置,不是特定的,D項(xiàng)錯(cuò)誤。16.AD不能被噬菌體侵染的大腸桿菌,細(xì)胞膜上可能沒(méi)有噬菌體可識(shí)別的特異性受體,使得噬菌體不能對(duì)其識(shí)別并侵染,A項(xiàng)正確;大腸桿菌為原核生物,體內(nèi)有核糖體,B項(xiàng)錯(cuò)誤;如果噬菌體的DNA上有修飾酶的識(shí)別位點(diǎn),修飾酶能對(duì)DNA的堿基進(jìn)行修飾,防止DNA被限制酶破壞,即使噬菌體DNA上有大腸桿菌限制酶的識(shí)別位點(diǎn),其DNA也能在大腸桿菌內(nèi)復(fù)制和表達(dá),使得噬菌體能寄生于大腸桿菌,C項(xiàng)錯(cuò)誤;能寄生于大腸桿菌的噬菌體,DNA上可能也存在與大腸桿菌相同的修飾物,防止其被大腸桿菌內(nèi)的限制酶識(shí)別并破壞,D項(xiàng)正確。17.C由圖可知,步驟②中用Klenow酶處理后,黏性末端變成平末端,說(shuō)明Klenow酶能催化DNA鏈的合成,從而將DNA片段的黏性末端變成平末端,推測(cè)Klenow酶的功能與DNA聚合酶類似,A項(xiàng)正確;據(jù)圖示可知,由步驟③獲取的目的基因一端平齊,一端為黏性末端,故共有1個(gè)黏性末端,B項(xiàng)正確;由于目的基因只有一個(gè)黏性末端,質(zhì)粒是順時(shí)針轉(zhuǎn)錄,使用BamHⅠ切割會(huì)導(dǎo)致目的基因無(wú)法轉(zhuǎn)錄,需選擇一種黏性末端相同的限制性內(nèi)切酶,另一種選擇平末端限制酶,故步驟④中選用的限制酶是BglⅡ和SmaⅠ,C項(xiàng)錯(cuò)誤;基因表達(dá)載體中除含有目的基因、啟動(dòng)子和終止子等組件外,還應(yīng)有標(biāo)記基因,據(jù)圖推測(cè),NPTⅡ基因可能是用于篩選的標(biāo)記基因,D項(xiàng)正確。18.ABD目的基因必須插入啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,A項(xiàng)正確;目的基因和質(zhì)粒的連接用DNA連接酶,B項(xiàng)正確;切割目的基因和質(zhì)粒時(shí)只要形成的末端相同,就可以將二者連接,不一定要選用相同的限制酶,C項(xiàng)錯(cuò)誤;結(jié)合圖和表格,圖中限制酶BamHⅠ的切點(diǎn)位于標(biāo)記基因內(nèi),限制酶EcoRⅠ的切點(diǎn)位于目的基因內(nèi),NheⅠ在質(zhì)粒上無(wú)相應(yīng)識(shí)別序列,且其他酶與它產(chǎn)生的黏性末端不同,故切割目的基因應(yīng)選MunⅠ和HindⅢ,質(zhì)粒上無(wú)MunⅠ的酶切位點(diǎn),由于MunⅠ與EcoRⅠ切出的黏性末端相同,故可選EcoRⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒,因此切割目的基因和質(zhì)粒時(shí)一定要用到的酶是HindⅢ,D項(xiàng)正確。19.CD可從人細(xì)胞中提取RNA后利用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)獲取目的基因,此時(shí)獲得的目的基因沒(méi)有啟動(dòng)子、終止子等,A項(xiàng)正確;動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器需要使目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá),因此目的基因的上游需連接在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)基因的啟動(dòng)子上,B項(xiàng)正確;動(dòng)物受精卵全能性最高,用顯微注射技術(shù)將表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵來(lái)獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,在乳腺細(xì)胞中表達(dá)特定的基因是由于啟動(dòng)子的作用,而并非將目的基因?qū)肴橄偌?xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;大腸桿菌是原核生物,不具有加工分泌蛋白的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,若用大腸桿菌作為受體細(xì)胞難以獲得活性高的人凝血酶Ⅲ,D項(xiàng)錯(cuò)誤。20.ACD構(gòu)建新胰島素模型主要從新胰島素預(yù)期的功能出發(fā),A項(xiàng)正確;新的胰島素生產(chǎn)過(guò)程中,涉及轉(zhuǎn)錄、翻譯等過(guò)程,涉及中心法則,B項(xiàng)錯(cuò)誤;大腸桿菌屬于原核生物,不具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,其不能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行相應(yīng)的加工,產(chǎn)生的胰島素不具有生物學(xué)活性,C項(xiàng)正確;結(jié)構(gòu)決定功能,新的胰島素功能的發(fā)揮必須依賴于蛋白質(zhì)正確的高級(jí)結(jié)構(gòu),D項(xiàng)正確。21.答案(1)EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ(2)磷酸二酯鍵(3)自我復(fù)制一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)用含有該種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞,能存活的細(xì)胞含有質(zhì)粒載體(4)一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位解析(1)E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端,故EcoRⅠ、PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接;T4DNA連接酶可以連接黏性末端和平末端,故EcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。(2)DNA連接酶可催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成磷酸二酯鍵。(3)復(fù)制原點(diǎn)可以確保質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制。質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),酶切后可以產(chǎn)生不同的末端,便于外源DNA插入。標(biāo)記基因有助于篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞,方法是用含有該種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞,不含質(zhì)粒載體的細(xì)胞被抗生素殺死,能存活的細(xì)胞含有質(zhì)粒載體。(4)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。22.答案(1)鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞(供重組DNA的鑒定和選擇)解旋(2)5'-G

3'-CCTAG或GATCC-3'

G-5'(3)6020bp(4)可以避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化,可使目的基因定向插入質(zhì)粒中(可以避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化,可避免目的基因與質(zhì)粒反向連接)5'(5)使大腸桿菌處于感受態(tài)(或處于容易吸收DNA的狀態(tài))四環(huán)素、氨芐青霉素解析(1)氨芐青霉素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因,質(zhì)粒中標(biāo)記基因的作用都是便于鑒別和篩選目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。A—T堿基對(duì)之間形成兩個(gè)氫鍵,C—G堿基對(duì)之間形成三個(gè)氫鍵,研究發(fā)現(xiàn)復(fù)制原點(diǎn)處的A和T特別多,說(shuō)明氫鍵較少,便于解旋過(guò)程的發(fā)生。(2)限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是5'-G↓GATCC-3',則該酶切割DNA后形成的黏性末端是5'-G

3'-CCTAG或GATCC-3'

G-5'。(3)綠色熒光蛋白基因有720個(gè)堿基對(duì)(bp),質(zhì)粒有5369個(gè)堿基對(duì)(bp),質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ、HindⅢ雙酶切割后進(jìn)行電泳,出現(xiàn)了一條長(zhǎng)度為5300bp的DNA條帶,說(shuō)明5300bp的DNA條帶是原質(zhì)粒中切去部分片段的質(zhì)粒,重組質(zhì)粒的長(zhǎng)度=5300+720=6020bp。(4)用同一種酶切割目的基因和質(zhì)粒,可形成相同的黏性末端,在質(zhì)粒和目的基因連接的時(shí)候可能出現(xiàn)反向連接,目的基因和