巴氏桿菌及相關(guān)屬課件

巴氏桿菌及相關(guān)屬

巴氏桿菌病豬表現(xiàn)急性胸膜肺炎巴氏桿菌模式圖第一節(jié)

巴氏桿菌屬(Pasteurella)

本屬細(xì)菌已報(bào)道有20多種，多殺性巴氏桿菌是本屬中最重要的畜禽致病菌，其次是溶血性巴氏桿菌，后者新近被劃入新建立的曼氏桿菌屬，更名為溶血性曼氏桿菌。我國(guó)較常見的鴨疫巴氏桿菌現(xiàn)已劃出本屬，并更名為鴨疫里氏桿菌。多殺性巴氏桿菌(P·multocida)

本菌是引起多種畜禽巴氏桿菌病(亦稱出血性敗血癥)的病原體，主要使動(dòng)物發(fā)生出血性敗血病或傳染性肺炎。本菌廣泛分布于世界各地，正常存在于多種健康動(dòng)物的口腔和咽部黏膜，當(dāng)動(dòng)物處于應(yīng)激狀態(tài)，機(jī)體抵抗力低下時(shí)，細(xì)菌侵人體內(nèi)，大量繁殖并致病，發(fā)生內(nèi)源性傳染。形態(tài)及染色

為球桿狀或短桿狀菌，兩端鈍圓，大小為0.25～0.4um×0.5～2.5um。單個(gè)存在，有時(shí)成雙排列。病料涂片用瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí)，可見典型的兩極著色，即菌體兩端染色深，中間淺，無鞭毛，不形成芽孢，新分離的強(qiáng)毒菌株有莢膜，革蘭氏染色陰性。

鴨霍亂心血涂片培養(yǎng)及生化特性

需氧或兼性厭氧菌。對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較嚴(yán)格。在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘩，在麥康凱培養(yǎng)上不生長(zhǎng)。在加有血液、血清或微量血紅素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。最適溫度為37℃，pH7.2～7.4。在血清瓊脂平板上培養(yǎng)24h，可長(zhǎng)成淡灰白色、閃光的露珠狀小菌落。在血瓊脂平板上，長(zhǎng)成水滴樣小菌落，無溶血現(xiàn)象。

血清型

本菌主要以其莢膜抗原和菌體抗原區(qū)分血清型，前者有6個(gè)型，后者分為16個(gè)型。1984年Cater提出本菌血清型的標(biāo)準(zhǔn)定名:以阿拉伯?dāng)?shù)字表示菌體抗原型，大寫英文字母表示莢膜抗原型。我國(guó)分離的禽多殺性巴氏桿菌以5:A為多，其次為8:A;豬的以5:A和6:B為主，8:A與2:D其次;羊的以6:B為多;家兔的以7:A為主，其次是5:A。C型菌是犬、貓的正常棲居菌，F(xiàn)型主要發(fā)現(xiàn)于火雞，致病作用均不清楚。抵抗力

本菌抵抗力不強(qiáng)。在無菌蒸餾水和生理鹽水中很快死亡。在陽(yáng)光中暴曬lOmin，或在56℃l5min或60℃10min，可被殺死。廄肥中可存活1個(gè)月，埋入地下的病死雞尸，經(jīng)4個(gè)月仍殘存活菌。在空氣干燥中2～3d可死亡。3%石炭酸、3%福爾馬林，10%石灰乳，2%來蘇兒，0·5%～1%氫氧化鈉等5min可殺死本菌。

對(duì)青霉素、鏈霉素、四環(huán)素、土霉素、磺胺類及許多新的抗菌藥物敏感。本菌接種馬丁肉湯或其平板，生長(zhǎng)后置4℃保存，每半月應(yīng)移植一次。凍干菌種在低溫中可保存長(zhǎng)達(dá)26年。致病性與免疫性

本菌是多種動(dòng)物的重要病原菌。對(duì)雞、鴨、鵝、野禽、豬、牛、羊、馬、兔等都可致病，急性型呈出血性敗血癥迅速死亡;亞急性型于黏膜關(guān)節(jié)等部位，發(fā)生出血性炎癥等;慢性型則呈現(xiàn)萎縮性鼻炎(豬、羊)、關(guān)節(jié)炎及局部化膿性炎癥等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中小鼠極易感染，鴿對(duì)殺禽亞種的易感性強(qiáng)。癥狀

急性型是本病主要和常見的病型。除具有敗血癥的一般癥狀外，還表現(xiàn)急性胸膜肺炎。

屬于D血清型的某些菌株能產(chǎn)生一種耐熱的外毒素，分子量約150000，對(duì)Vero細(xì)胞有毒性，可致豚鼠皮膚壞死及小鼠死亡。用此毒素接種豬可復(fù)制典型的豬萎縮性鼻炎(AR），從而修正了波氏桿菌是AR的病原菌的觀點(diǎn)。在大多數(shù)情況下，AR由產(chǎn)毒素的本菌與波氏桿菌混合感染所致，本菌起主導(dǎo)作用。

帶菌健康動(dòng)物具有一定程度的免疫力。動(dòng)物患病痊愈后，可獲得較強(qiáng)的免疫。國(guó)內(nèi)外已研制出多種滅活、弱毒菌苗以及其莢膜亞單位疫苗。該菌的高免多價(jià)血清具有良好的緊急預(yù)防和治療作用。微生物學(xué)診斷1·顯微鏡檢查采取滲出液、心血、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓等新鮮病料涂片或觸片，以堿性美藍(lán)液或瑞氏染色液染色，顯微鏡檢查，如發(fā)現(xiàn)典型的兩極著色的短桿菌，結(jié)合流行病學(xué)及剖檢，即可作初步診斷。但慢性病例或腐敗材料不易發(fā)現(xiàn)典型菌體，須進(jìn)行培養(yǎng)和動(dòng)物試驗(yàn)。

2·分離培養(yǎng)最好用血瓊脂平板和麥康凱瓊脂同時(shí)進(jìn)行分離培養(yǎng)，麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在血瓊脂上生長(zhǎng)良好，菌落不溶血，革蘭氏染色為陰性球桿菌。將此菌接種在三糖鐵培養(yǎng)基上可生長(zhǎng)，使底部變黃。必要時(shí)可進(jìn)一步做生化反應(yīng)作鑒定。

3.動(dòng)物試驗(yàn)用病料研磨制成懸液，或用分離培養(yǎng)菌，皮下注射小鼠、家兔或鴿，動(dòng)物多在24～48h內(nèi)死亡。由于健康動(dòng)物呼吸道內(nèi)?？蓭Ь?，所以應(yīng)參照患畜的生前臨床癥狀和剖檢變化，結(jié)合分離菌株的毒力試驗(yàn)，作出最后診斷。

若要鑒定莢膜抗原和菌體抗原型，則要用抗血清或單克隆抗體進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)。檢測(cè)動(dòng)物血清中的抗體，可用試管凝集、間接凝集、AGP或ELISA。附：禽霍亂霍亂禽

禽霍亂又稱禽巴氏桿菌病，是由多殺性巴氏桿菌引起的多種家禽的急性敗血性傳染病，以全身出血性變化和肝臟多發(fā)性壞死為特征?；魜y禽【流行特點(diǎn)】

霍亂禽

本病呈世界性流行，雞、鴨、鵝等多種家禽和野禽均可感染發(fā)病，鴨、火雞、鵪鶉和雞最易感。以3～4月齡育成禽和產(chǎn)蛋禽多見。放牧或野禽比籠養(yǎng)禽更易感染發(fā)病。四季均可發(fā)病，以潮濕多雨的夏季發(fā)病率最高?？山?jīng)消化道、呼吸道感染，也可經(jīng)破損的皮膚黏膜感染，帶菌禽是主要傳染源。應(yīng)激因素如氣候突變、運(yùn)輸、換料、免疫接種、驚嚇等是本病發(fā)生的誘因。霍亂禽【臨床特征】霍亂禽

禽霍亂禽霍亂最急性型常無前驅(qū)癥狀，突然倒地、拍翅、抽搐、掙扎、迅速死亡。通常在夜間死亡，多見于肥大的禽口鼻內(nèi)有黏液霍亂禽慢性型表現(xiàn)為精神沉郁，消瘦，肉髯腫脹、變厚霍亂禽【大體病變】霍亂禽急性型可見心包積有多量淡黃色或黃紅色液體霍亂禽心臟冠狀脂肪霍亂禽乃至整個(gè)心臟表面有彌漫性出血點(diǎn)霍亂禽

肝臟腫脹，淤血、出血呈深褐色霍亂禽

腸管膨脹，漿膜面充血、出血霍亂禽病雞腺胃漿膜面及外周脂肪彌漫性出血點(diǎn)霍亂禽

腹部脂肪彌漫性出血點(diǎn)霍亂禽胰腺充血、出血霍亂禽【防治要點(diǎn)】霍亂禽

禽場(chǎng)內(nèi)不隨便引進(jìn)成禽，同一禽場(chǎng)內(nèi)不飼養(yǎng)不同種類家禽，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，保持禽場(chǎng)衛(wèi)生，定期消毒，一旦有應(yīng)激發(fā)生，應(yīng)適時(shí)使用抗應(yīng)激藥物。目前有弱毒疫苗和滅活疫苗可用于預(yù)防，但免疫期一般只有3個(gè)月，免疫保護(hù)率也不理想。對(duì)已發(fā)病的禽群，可選用增效磺胺、土霉素、氯霉素、氧氟沙星等藥物內(nèi)服，或用鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素等肌肉注射，均有良好療效?；魜y禽第二節(jié)里氏桿菌屬

鴨疫里氏桿菌是本屬的代表種，原名鴨疫巴氏桿菌。Rossau等(1991)和Segers(1993)先后證實(shí)，該菌與巴氏桿菌屬的rRNA不同源，是革蘭氏陽(yáng)性需氧菌的rRNA第5超屬，與黃桿菌等相近，因此建議建立里氏桿菌新屬，菌名亦作相應(yīng)改變,這一變動(dòng)目前己被普遍采納。本屬歸于哪一科，地位未定。

鴨疫里氏桿菌是雛鴨傳染性漿膜炎的病原菌?？梢?～8同齡、尤其2～3周齡雛鴨大批發(fā)病、死亡，生長(zhǎng)發(fā)育嚴(yán)重受阻。形態(tài)及染色

菌體呈桿狀或橢圓形，大小0.3～0.5um×0.7～6.5um，偶見個(gè)別長(zhǎng)絲狀，長(zhǎng)11～24um。多為單個(gè)，少數(shù)成雙或短鏈排列?？尚纬汕v膜，無芽孢，無鞭毛。瑞氏染色可見兩極著色。革蘭氏染色陰性。培養(yǎng)及生化特性

本菌營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。初次分離培養(yǎng)缸中，37℃培養(yǎng)24～48h，生長(zhǎng)的菌落無色素，呈圓形、微突起、表面光滑、奶油狀，直徑1～2mm。在含血清或胰蛋白胨酵母的肉湯中，37℃48h培養(yǎng)，呈上下一致輕微渾濁，管底有少量沉淀。 生化性狀不活潑。血清型

比較復(fù)雜，分型體系原先亦較混亂，1991年Sandhu等將其統(tǒng)一歸并為19型，以阿拉伯?dāng)?shù)字定名，1995年又在泰國(guó)發(fā)現(xiàn)20、21型。各國(guó)發(fā)現(xiàn)的血清型不盡相同，且因時(shí)間變化異。如美國(guó)以1、2、5型為主，丹麥1979年僅見1型，1980年則主要為3型。東南亞的血清型較多，且陸續(xù)發(fā)現(xiàn)新型。國(guó)內(nèi)從京、滬、穗、閩、川等地分離的100多個(gè)菌株鑒定結(jié)果均屬1型，近年報(bào)道有2型等存在。不同血清型及同型不同毒株的毒力有差異。

抵抗力

本菌對(duì)外界環(huán)境抵抗力不強(qiáng)。鮮血瓊脂培養(yǎng)物置4℃冰箱保存容易死亡，通常4～5d應(yīng)繼代一次毒力會(huì)因此逐漸減弱。對(duì)慶大霉素、氯霉素、新霉素、狀觀霉素、磺胺喹沙琳等敏感。但易形成耐藥性。致病性與免疫性本菌主要感染雛鴨，尤其2～3周齡者，引起急性或慢性的敗血癥和漿膜炎。也從患敗血癥的雞、鵝、火雞、野生水禽分離。兔和小鼠不易感。琢鼠腹腔注射大量細(xì)菌可致死。國(guó)外和國(guó)內(nèi)已研究成功某些血清型的滅活菌苗和弱毒菌苗，具有良好的免疫效果。

病初患鴨精神沉郁，縮頸，腿發(fā)軟，不愿意走動(dòng)鴨疫里氏桿菌病

肝臟微腫，表面有纖維素性滲出物鴨疫里氏桿菌病微生物學(xué)診斷

取發(fā)病初期病鴨的腦及心血，用巧克力培養(yǎng)基容易分離到本菌。肝、脾分離率低，僅10%左右。分離時(shí)應(yīng)同時(shí)接種麥康凱培養(yǎng)基，以便及時(shí)區(qū)別大腸桿菌。分離的細(xì)菌應(yīng)進(jìn)行葡萄糖和蔗糖發(fā)酵試驗(yàn)，也可接種小鼠，與多殺性巴氏菌相區(qū)別。第五節(jié)嗜血桿菌屬

嗜血桿菌是一群酶系統(tǒng)不完全的革蘭氏陰性桿菌，生長(zhǎng)需要血液中的生長(zhǎng)因子，尤其是X因子和V因子。常見的動(dòng)物源嗜血桿菌有8種。 嗜血桿菌存在于人和動(dòng)物的呼吸道黏膜，常分離自人和動(dòng)物的各種病灶和分泌物。本屬細(xì)菌引起的畜禽疫病在世界許多國(guó)家發(fā)現(xiàn)。形態(tài)及染色

多為短桿狀，也有呈球、桿狀或長(zhǎng)絲狀等多形性。大小為1.5×0.3～0.4um。多單個(gè)、也有短鏈排列。無鞭毛，無芽孢，新分離的致病菌株有莢膜。美藍(lán)染色呈兩極，革蘭氏染色為陰性。流感嗜血桿菌培養(yǎng)特性

需氧或兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度37℃，pH7.6～7.8。初次分離培養(yǎng)時(shí)供給5%～10%CO2可促進(jìn)生長(zhǎng)。本屬菌生長(zhǎng)需供給X因子和V因子。 本屬菌在巧克力瓊脂上，經(jīng)37℃24～48h培養(yǎng)，生長(zhǎng)的菌落呈圓形、隆起、表面光滑、邊緣整齊、灰白色半透明的小菌落。菌落的大小可因菌種和培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)程度不同而異，從針尖大直至綠豆大小。本屬菌的生化反應(yīng)較弱，對(duì)糖類發(fā)酵多不穩(wěn)定。抵抗力

本屬菌對(duì)外界的抵抗力不強(qiáng)。干燥環(huán)境中易死亡，60℃5～20min被殺死，4℃中一般只能存活7～l0天，故分離到的嗜血桿菌要及時(shí)移植或凍干保存。常用消毒劑都容易殺滅。致病性及免疫性

本屬菌可致人和動(dòng)物多種疾病，其毒力因子包括莢膜，菌毛和內(nèi)毒素等。耐過嗜血桿菌所致疫病的畜禽具有較強(qiáng)的免疫力，以體液免疫為主。流感嗜血稈菌及副流感嗜血桿菌僅見于人，前者可致各種呼吸道感染及小兒急性腦膜炎等，后者存在正常上呼吸道，可致尿道炎。副豬嗜血桿菌可引起豬的格氏病,表現(xiàn)為多發(fā)性漿膜炎，包括心肌炎、腹膜炎、胸膜炎、腦膜炎以及關(guān)節(jié)炎。本菌也常與豬流感病毒聯(lián)合引起豬流感。副禽嗜血稈菌可引致雞鼻炎、打噴嚏及面部水腫、產(chǎn)蛋減少，對(duì)雛雞致病力較強(qiáng)。鵪鶉易感。慢性感染及外觀健康禽為帶菌者。本菌定殖于禽上呼吸道及竇腔，在環(huán)境中很快死亡。眼瞼水腫、呼吸困難傳染性鼻炎微生物學(xué)診斷1·顯微鏡檢查采取腦脊液(離心沉淀物)、血液、分泌液等病料，涂片，美藍(lán)染色，鏡檢，呈兩極