血液病基因檢測(cè)的臨床意義

關(guān)于血液病基因檢測(cè)的臨床意義

PH染色體[t(9;22)(q34;q11),BCR/ABL]陽(yáng)性

的慢性髓系白血病（CML）

慢性中性粒細(xì)胞白血?。–NL）

慢性嗜酸粒細(xì)胞白血病/高嗜酸粒細(xì)胞綜征

（CEL/HES）

真性紅細(xì)胞增多癥（PV）

慢性原發(fā)性骨髓纖維化（伴髓外造血）

（CIMF）

原發(fā)性血小板增多癥（ET）

不能分類骨髓增生性疾病

七類

骨髓增生性腫瘤（MPN）第2頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月骨髓增生異常/骨髓增生性腫瘤

（MDS/MPN）

是一種克隆性造血干細(xì)胞疾病，特點(diǎn)表現(xiàn)為MDS與MPD交疊，有多種“有效”造血及病態(tài)造血存在。

慢性粒-單核細(xì)胞白血?。–MML）

不典型慢性髓系白血?。╝CML）

幼年型粒-單核細(xì)胞白血?。↗MML）

不能分類的MDS/MPD

四類第3頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月骨髓增生異常綜合征（MDS）

MDS也是克隆性疾病，以無(wú)效造血為其特征引起血細(xì)胞減少，骨髓及血象一至多系細(xì)胞病態(tài)造血。第4頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月MDS亞型分類亞型外周血象骨髓象

1.難治性貧血貧血；未見(jiàn)或罕見(jiàn)

僅紅系增生異常，（RA）原始細(xì)胞原始細(xì)胞＜5%，環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞＜15%

2.難治性貧血伴貧血；未見(jiàn)或罕見(jiàn)

僅紅系增生異常，環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞原始細(xì)胞原始細(xì)胞＜5%，（ＲＡＲＳ）環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞≥15%

3.難治性血細(xì)胞減少血細(xì)胞減少（二系或二系或多系細(xì)胞增生異常伴多系增生異常全系）；未見(jiàn)Auer小體；≥10%；原始細(xì)胞＜5%，（RCMD）未見(jiàn)或罕見(jiàn)原始細(xì)胞；未見(jiàn)Auer小體；單核細(xì)胞＜1×109/L環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞＜15%4.難治性血細(xì)胞減少血細(xì)胞減少（二系或二系或多系細(xì)胞增生異常伴多系增生異常和全系）；未見(jiàn)Auer小體；≥10%；原始細(xì)胞＜5%，環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞單核細(xì)胞＜1×109/L未見(jiàn)Auer小體；（RCMD-RS）環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞≥15%

第5頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月

亞型外周血象骨髓象5.難治性貧血伴血細(xì)胞減少，一系或多系細(xì)胞增生異常；原始細(xì)胞增多1型原始細(xì)胞＜5%原始細(xì)胞5%~9%；（RAEB-1）未見(jiàn)Auer小體；未見(jiàn)Auer小體；單核細(xì)胞＜1×109/L6.難治性貧血伴血細(xì)胞減少，一系或多系細(xì)胞增生異常；原始細(xì)胞增多2型原始細(xì)胞5%~19%原始細(xì)胞10%~19%；（RAEB-2）Auer小體（±）；Auer小體（±）；單核細(xì)胞＜1×109/L7.未歸類的MDS血細(xì)胞減少，單一髓系細(xì)胞增生異常；（MDS-U）未見(jiàn)或罕見(jiàn)原始細(xì)胞；原始細(xì)胞＜5%；未見(jiàn)Auer小體；未見(jiàn)Auer小體；8.5q-綜合征貧血；少葉核巨核細(xì)胞正常或增多；[del（5q）]血小板計(jì)數(shù)正?；蛟龈撸辉技?xì)胞＜5%；原始細(xì)胞＜5%；細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)僅見(jiàn)

del（5q）異常；未見(jiàn)Auer小體；第6頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月

AML是髓系原始細(xì)胞克隆性增生疾病，WHO分型將AML分為：

1.

伴有特殊染色體的AML

2.伴有病態(tài)造血的AML

3.治療相關(guān)的AML和MDS

※4.不伴特殊細(xì)胞遺傳易位的AML

四亞型。

急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）第7頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月1．伴有特殊細(xì)胞遺傳易位的AML

（1）伴有t(8;21)(q22;q22)AML,

AML1（CBFα）/ETO的AML

（2）伴有inv(16)(p13;q22)或

t(16;16)(p13;q22),

CBFβ/MYH11的骨髓嗜酸粒細(xì)胞增多的AML

（3）伴有t(15;17)(q22;q11-12),PML/RARα

及變異的急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL）

（4）伴有11q23(MLL)異常增生的AML

第8頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月2．伴有多系血細(xì)胞增生異常的

急性髓細(xì)胞白血病

（1）由MDS或MDS/MPD轉(zhuǎn)化而成

（2）發(fā)病前無(wú)MDS病史

第9頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月

3．治療相關(guān)的AML和MDS

（1）與烷化劑相關(guān)

（2）與拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑相關(guān)

（一些可以是淋巴系）

（3）其他第10頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月

4．不伴特殊細(xì)胞遺傳易位的AML

（1）未分化AML

（2）未成熟AML

（3）成熟AML

（4）急性粒-單核細(xì)胞白血病

（5）急性單核細(xì)胞白血病

（6）急性紅白血病

（7）急性巨核細(xì)胞白血病

（8）急性嗜堿細(xì)胞白血病

（9）伴骨髓纖維化的急性全髓增生

（10）髓細(xì)胞肉瘤第11頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第12頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月淋系腫瘤：

B系腫瘤和T/NK細(xì)胞系腫瘤

又可分為兩大類型：

前體淋巴細(xì)胞腫瘤（淋系白血?。?/p>

外周或成熟淋巴細(xì)胞腫瘤（淋巴瘤）

前者指淋巴細(xì)胞分化的早期階段起源的腫瘤

后者是分化成熟階段來(lái)源的腫瘤第13頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月B細(xì)胞系腫瘤

前體B細(xì)胞腫瘤前體B淋巴母細(xì)胞白血病/淋巴瘤（B-ALL/LBL）

成熟（周圍）B細(xì)胞腫瘤

B-慢性淋巴細(xì)胞性白血病/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤（B-CLL/SLL）

B-細(xì)胞幼淋巴性細(xì)胞白血病（B-PLL）淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤（LPL）

Burkitt淋巴瘤（BL）多毛細(xì)胞白血?。℉CL）漿細(xì)胞骨髓瘤/漿細(xì)胞瘤（PCM/PCL）

脾邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤，±絨毛狀淋巴細(xì)胞（SMZL）結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤，MALT型（MALT-MZL）結(jié)型邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤，±單核細(xì)胞樣B細(xì)胞（MZL）濾泡性淋巴瘤（FL）套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）第14頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月T細(xì)胞和NK細(xì)胞系腫瘤前體T細(xì)胞腫瘤前體T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤/白血?。═-LBL/ALL）成熟（周圍）T細(xì)胞腫瘤

T-細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞白血病（T-PLL）

T-大顆粒淋巴細(xì)胞白血?。═-LGL）侵襲性NK細(xì)胞白血病（ANKCL）成人T細(xì)胞淋巴瘤/白血?。ˋTCL/L）

結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤，鼻型（NK/TCL）腸病型T細(xì)胞/淋巴瘤（ITCL）肝脾γδT細(xì)胞淋巴瘤皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤蕈樣真菌病/Sezary綜合征（MF/SS）間變性大細(xì)胞淋巴瘤（ALCL）第15頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月霍奇金淋巴瘤（霍奇金?。┙Y(jié)節(jié)性淋巴細(xì)胞為主型霍奇金淋巴瘤（NLPHL）經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤

結(jié)節(jié)硬化型霍奇金淋巴瘤，1和2級(jí)（NSHL）富于淋巴細(xì)胞經(jīng)典霍奇金淋巴瘤混合細(xì)胞型霍奇金淋巴瘤（MCHL）淋巴細(xì)胞消減型霍奇金淋巴瘤（LDHL）第16頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月白血病

基因檢測(cè)第17頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月

基因突變是指由于DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的_________________而引起的___________的改變。┯┯┯┯

ＡＴＧＣ

ＴＡＣＧ

┷┷┷┷┯┯┯┯┯

ＡＴＡＧＣ

ＴＡＴＣＧ

┷┷┷┷┷┯┯┯

ＡＧＣ

ＴＣＧ

┷┷┷┯┯┯┯

ＡＣＧＣ

ＴＧＣＧ

┷┷┷┷增添替換缺失（D）（d1）（d2）（d3）增添、缺失或替換基因結(jié)構(gòu)基因突變一定會(huì)導(dǎo)致生物性狀的改變嗎?第18頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月mRNA:GAA甲乙丙丁DNA堿基對(duì)替換，不一定引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)論:堿基對(duì)替換一定會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變嗎?氨基酸:天冬氨酸天冬氨酸谷氨酸纈氨酸GAUGACGUA第19頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月1、二戰(zhàn)時(shí)，美國(guó)在日本的廣島、長(zhǎng)崎投下兩顆原子彈，導(dǎo)致白血病患者出生率增加。

2、蘇丹紅進(jìn)入人體可產(chǎn)生致癌作用。3、乙肝病毒使肝細(xì)胞進(jìn)一步變異，肝細(xì)胞不凋亡，而且不斷地再生，就形成了肝癌。內(nèi)因：DNA復(fù)制時(shí)自身也偶爾發(fā)生錯(cuò)誤物理因素化學(xué)因素生物因素基因突變?cè)颍旱?0頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月基因突變的特點(diǎn)

大多數(shù)基因突變對(duì)生物體是有害的，只有少數(shù)是有利的，有些既無(wú)害也無(wú)益。多數(shù)有害第21頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月結(jié)果：增殖過(guò)度，分化阻斷，凋亡受抑第22頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月白血病的分子檢測(cè)SouthernblotNorthernblotWesternblotFISHPCR測(cè)序芯片第23頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月白血病的分子檢測(cè)PCR方法優(yōu)點(diǎn)快速靈敏特異PCR方法缺點(diǎn)假陽(yáng)性假陰性！第24頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月白血病的分子檢測(cè)PCR：僅適用于染色體斷裂點(diǎn)叢集于相對(duì)小的范圍內(nèi)（<2kb），如T-ALL中SIL-TAL1。

RT-PCR：可用于染色體斷裂點(diǎn)跨越很大的區(qū)域的融合基因。

巢式RT-PCR：可顯著提高反應(yīng)的特異性，增加擴(kuò)增效率。RQ-PCR：可定量擴(kuò)增產(chǎn)物。第25頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月白血病分子檢測(cè)的臨床應(yīng)用白血病的分子生物學(xué)檢查對(duì)白血病診斷分型及預(yù)后判斷有以下幾方面意義：補(bǔ)充MIC檢查的不足發(fā)現(xiàn)新的亞型監(jiān)測(cè)白血病的微小殘留病灶（MRD）為研究白血病的發(fā)病機(jī)制打下基礎(chǔ)第26頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月白血病分子檢測(cè)的臨床應(yīng)用PCR方法檢測(cè)MRD常用的分子標(biāo)志

第27頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第28頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第29頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第30頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月AML1-ETOt(8;21)(q22;q22)6~8%原發(fā)性AML，在M2中的陽(yáng)性率為20~40%，在M2b中陽(yáng)性率為90%少見(jiàn)于M4和M1，極少見(jiàn)于MDS和骨髓增生綜合癥AML1-ETO+白血病細(xì)胞有一定程度的分化能力，能分化至較成熟的嗜中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，且對(duì)化療反應(yīng)較敏感

AML1-ETO+患者對(duì)大劑量阿糖胞苷治療效果好，具有較高的緩解率，無(wú)病生存期長(zhǎng)，預(yù)后較其他AML亞型（M3除外）好第31頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月AML1-ETO對(duì)初發(fā)患者進(jìn)行t(8;21)和AML1-ETO融合基因的檢測(cè)對(duì)其預(yù)后判斷及治療方案的制定相當(dāng)重要AML1-ETO定性結(jié)果不能用于評(píng)價(jià)患者M(jìn)RD情況RQ-PCR能實(shí)時(shí)反映體內(nèi)AML1-ETO水平。連續(xù)定量AML1-ETO轉(zhuǎn)錄本水平可判定有高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的患者，以便及早治療干預(yù)以防血液學(xué)復(fù)發(fā)第32頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第33頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月PML-RARαt(15;17)(q22;q21)，98%M3患者陽(yáng)性繼t(15;17)之后，又先后發(fā)現(xiàn)4種M3特異的累及RARα的變異性染色體易位：t(5;17)(q35;q21)，t(11;17)(q13;q21)，dup(17)(q21.3;q23)，t(11;17)(q23;q21)

分別產(chǎn)生NPM-RARα，NuMA-RARα和PLZF-RARα，

STAT5b-RARα融合基因臨床上，具有PLZF-RARα或STAT5b-RARα融合基因患者對(duì)ATRA治療不敏感，其余三種染色體易位患者經(jīng)ATRA治療可獲完全緩解

第34頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月PML-RARαAPL累及的RARα基因及其伙伴基因結(jié)構(gòu)示意圖

第35頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月PML-RARα由于PML基因斷裂點(diǎn)不同，產(chǎn)生3種不同的PML-RARα異構(gòu)體

約55%的M3患者為L(zhǎng)型，40%為S型，5%為V型，且每位患者只表達(dá)一種PML-RARα融合蛋白形態(tài)學(xué)上S型白血病細(xì)胞常為低分化的并且這些患者可見(jiàn)繼發(fā)細(xì)胞遺傳學(xué)異常，V型APL患者的白血病細(xì)胞體外對(duì)ATRA的敏感度低

第36頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月PML-RARαRT-PCR檢測(cè)PML-RARα是敏感且特異的APL診斷方法，還能用于治療后MRD監(jiān)測(cè)。PML-RARα陽(yáng)性提示的分子復(fù)發(fā)常早于臨床復(fù)發(fā)3-6個(gè)月，為臨床采取進(jìn)一步治療措施提供了保障RQ-PCR能有效反映患者在發(fā)病、治療、緩解、復(fù)發(fā)整個(gè)過(guò)程的白血病細(xì)胞負(fù)荷，在MRD監(jiān)測(cè)中比RT-PCR具有更高價(jià)值

第37頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第38頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月FLT3基因突變Fms-relatedtyrosinekinase3FLT3為III型受體酪氨酸激酶家族（還包括c-FMS，PDGFRβ和c-KIT）成員之一，該類受體因在造血過(guò)程中造血細(xì)胞的增殖和存活中發(fā)揮重要調(diào)控作用據(jù)報(bào)道，F(xiàn)LT3-ITD和D835突變?cè)贏ML中陽(yáng)性率分別為24%(385/1585)和7%(30/429)，總陽(yáng)性率超過(guò)30%，使其成為AML中最普遍發(fā)生突變的靶基因許多臨床研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)LT3突變還與臨床預(yù)后密切相關(guān)，尤對(duì)60歲以下的AML患者，F(xiàn)LT3突變患者預(yù)后較差，且可獨(dú)立于核型之外第39頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月CBFβ-MYH11inv(16)(p13;q22)及t(16;16)(p13;q22)主要見(jiàn)于M4Eo，10%不伴異常嗜酸細(xì)胞M4，少見(jiàn)于M2CBFβ-MYH11融合蛋白通過(guò)干擾核心結(jié)合因子（corebindingfactor,CBF）的轉(zhuǎn)錄激活作用而致病具有CBFβ-MYH11的患者對(duì)化療敏感，預(yù)后較好，故提高檢測(cè)率尤具臨床意義

第40頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月CBFβ-MYH11CBFβ-MYH11具有多種變異型，其中最常見(jiàn)的為A型，占80%RT-PCR檢測(cè)CBFβ-MYH11進(jìn)行MRD監(jiān)測(cè)顯示，大部分患者在完全緩解時(shí)PCR轉(zhuǎn)陰，但仍有小部分長(zhǎng)期存活者PCR仍為陽(yáng)性最新研究采用RQ-PCR檢測(cè)CBFβ-MYH11轉(zhuǎn)錄本水平來(lái)評(píng)價(jià)M4Eo患者M(jìn)RD情況，預(yù)示復(fù)發(fā)

第41頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第42頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月DEK-CANt(6;9)(p23;q34)主要見(jiàn)于M2或M4，也見(jiàn)于M1，MDS-RAEB伴DEK-CAN的患者年齡一般較輕，且預(yù)后較差此類患者進(jìn)行分子監(jiān)測(cè)有助于判斷患者預(yù)后，調(diào)整治療方案

第43頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月WT-1基因高表達(dá)Wilmstumor1是無(wú)特異分子異常的急性白血病患者理想的MRD檢測(cè)指標(biāo)伴此基因高表達(dá)者預(yù)后差，且表達(dá)程度與預(yù)后相關(guān)第44頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月BCR-ABLt(9;22)(q34;q11)15~30%成人ALL及3~5%兒童ALL9號(hào)染色體的斷裂點(diǎn)與CML相同，但22號(hào)染色體斷裂點(diǎn)具有異質(zhì)性

此融合蛋白p190刺激細(xì)胞增殖的能力比p210要強(qiáng)。在轉(zhuǎn)基因試驗(yàn)中觀察到p190誘發(fā)的白血病具有起病早、發(fā)展快和惡性程度高的特點(diǎn)BCR-ABL+ALL患者預(yù)后差，5年存活率<20%，因此這些患者在緩解后需進(jìn)行骨髓移植治療

第45頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月BCR-ABL對(duì)于自體或異體移植ALL患者，移植前后BCR-ABL的有無(wú)以及BCR-ABL的轉(zhuǎn)錄本類型與預(yù)后有關(guān)第46頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月第47頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月E2A-PBX1t(1;19)(q23;p13)5~6%兒童ALL和3%成人ALL此類患者具有高的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，高的血清乳酸脫氫酶及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，預(yù)后差，平均無(wú)病生存期（DFS）僅6個(gè)月，3年DFS為20%，需給予這些患者強(qiáng)化治療才能獲得較好的預(yù)后核型和E2A-PBX1檢測(cè)對(duì)此類患者的診斷和治療方案的選擇至關(guān)重要E2A-PBX1的預(yù)后價(jià)值需更多的臨床研究證實(shí)第48頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月TEL-AML1t(12;21)(p13;q22)25%兒童ALL，是兒童ALL中最常見(jiàn)的分子異常目前為止尚未在T-ALL，AML或NHL中發(fā)現(xiàn)t(12;21)，在嬰兒白血病中極少報(bào)道，在成人白血病患者中頻率很低（<2%）此類患者發(fā)病年齡?。?歲~10歲），WBC計(jì)數(shù)低（<50000/L），免疫表型為前B-ALL此類患者對(duì)治療反應(yīng)佳，完全緩解時(shí)間長(zhǎng)，預(yù)后好第49頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月TEL-AML1由于12p和21q末端在常規(guī)顯帶中很相似，因此常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)方法檢出率僅0.05%，需應(yīng)用FISH或RT-PCR方法提高檢測(cè)陽(yáng)性率TEL基因重排是獨(dú)立預(yù)后因素，RT-PCR檢測(cè)TEL-AML1融合基因能將低危險(xiǎn)度與高危險(xiǎn)度的ALL患者區(qū)分開(kāi)來(lái)。因此早期檢測(cè)TEL-AML1融合基因?qū)εR床預(yù)后，確定合適的治療方案都有重要意義第50頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月MLL相關(guān)融合基因累及MLL基因的分子異常見(jiàn)于5.2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，還可見(jiàn)于治療相關(guān)白血病，尤接受topoisomeraseII抑制劑治療的患者M(jìn)LL基因涉及五十余種染色體易位，產(chǎn)生不同的融合蛋白，且每種融合蛋白都與特定的白血病表型相關(guān)。最常見(jiàn)的有：

t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4融合基因ALLt(9;11)(p22;q23)MLL-AF9融合基因AMLt(11;19)(p13;q23)MLL-ENL融合基因AML及ALL第51頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月MLL相關(guān)融合基因MLL相關(guān)融合蛋白的致病性還不清楚，推測(cè)其可能具有雙重作用：

——融合蛋白可能獲得新的功能，促使細(xì)胞轉(zhuǎn)化

——MLL發(fā)生斷裂后，缺失鋅指結(jié)構(gòu)域的MLL不能與DNA結(jié)合，失去其轉(zhuǎn)錄活化功能，使受MLL調(diào)節(jié)的靶基因（HOX基因）表達(dá)異常，也影響造血細(xì)胞的發(fā)育

第52頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月MLL-AF4t(4;11)(q21;q23)t(4;11)的發(fā)生率在不同年齡段是不同的，在嬰兒ALL中最多見(jiàn)，為50~70%，而在兒童和成人中較低，分別為2%和3~6%此類患者發(fā)病年齡低（通常<2歲），白細(xì)胞計(jì)數(shù)高，常伴有內(nèi)臟巨大并累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)此類患者病情兇險(xiǎn)，預(yù)后差。患者對(duì)標(biāo)準(zhǔn)治療方案很可能無(wú)效，需給予強(qiáng)化治療。目前應(yīng)用高劑量Ara-C治療，使這些患者預(yù)后有所提高

第53頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月MLL-AF4對(duì)≤2歲的嬰幼兒急性白血病患者應(yīng)常規(guī)進(jìn)行MLL-AF4融合基因的檢測(cè)以篩選出高?；颊撸o予強(qiáng)化治療提高生存率RT-PCR可在所有t(4;11)患者初發(fā)時(shí)檢測(cè)到MLL-AF4融合基因。由于該融合基因累及的2個(gè)基因的斷裂點(diǎn)變異性較大，因此PCR應(yīng)包括所有斷裂點(diǎn)以免產(chǎn)生假陰性結(jié)果

第54頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月TAL1基因重排（1）

t(1;14)(p32;q11)，TAL1-TCRδ融合基因

3%T-ALL

易位使TAL1基因與TCRδ位點(diǎn)并置，其5′端正常轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)被TCRδ5′部分所取代，而后者在T細(xì)胞中有高表達(dá)

第55頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月TAL1基因重排（2）1p32缺失，SIL-TAL1融合基因

16~26%T-ALL，該重組僅見(jiàn)于T-ALL，是T-ALL的一個(gè)有用的克隆標(biāo)志缺失部分可能為TAL1基因的調(diào)控序列，使TAL1基因表達(dá)失控，導(dǎo)致與染色體易位相似的表型常規(guī)遺傳學(xué)方法檢測(cè)不到這一異常，而SIL-TAL1融合處特異的序列能作為這類患者特異的分子標(biāo)志用于PCR檢測(cè)第56頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月TAL1基因重排（3）TAL1異常僅見(jiàn)于T-ALL，尚未見(jiàn)于B-ALL，AML和T細(xì)胞NHL，是兒童T-ALL中最常見(jiàn)非隨機(jī)遺傳缺陷，是監(jiān)測(cè)大多數(shù)T-ALL的侯選基因伴TAL1異常的患者血象表現(xiàn)為高白細(xì)胞計(jì)數(shù)，高血紅蛋白含量，免疫表型為CD2+/CD10–盡管在治療反應(yīng)上，有TAL1重排患者和無(wú)TAL1重排患者無(wú)顯著差異，但伴TAL1重排患者4年無(wú)事件生存率（EFS）高于不伴TAL1重排的患者，分別為59±11%和44±7%，提示伴TAL1重排患者預(yù)后較好

第57頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月HOX11基因異常表達(dá)

t(10;14)(q24;q11)，t(7;10)(q34;q24)7%的T-ALL易位使HOX11基因受控于TCRδ和TCRβ基因調(diào)控序列，導(dǎo)致其異常表達(dá)另有部分HOX11高表達(dá)患者核型正常伴有此種異常的患者對(duì)聯(lián)合化療反應(yīng)好，預(yù)后也較其他T-ALL患者要好，完全緩解率為100%，平均無(wú)病生存期為46個(gè)月，3年無(wú)病生存率為75%第58頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月HOX11L2基因異常表達(dá)t(5;14)(q35;q32)20%的兒童T-ALL易位使HOX11L2基因處于CTIP2調(diào)控元件的控制下，而CTIP2基因在T淋巴細(xì)胞分化時(shí)高度表達(dá)在隨訪患者中檢測(cè)到高水平HOX11L2說(shuō)明白血病細(xì)胞的存在，強(qiáng)烈預(yù)示復(fù)發(fā)，而完全緩解患者HOX11L2表達(dá)水平迅速降低，并維持在一個(gè)低水平?？梢?jiàn)HOX11L2的表達(dá)水平可作為MRD檢測(cè)的標(biāo)志

第59頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月NOTCH1基因突變NOTCH1信號(hào)對(duì)CLP(commonlymphoidprogenitors)向T細(xì)胞定向以及前T細(xì)胞受體復(fù)合物組裝是必須的35-50%T-ALL患者存在此基因突變伴NOTCH1基因突變的成年T-ALL患者預(yù)后較差第60頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月NOTCH1基因突變生存曲線第61頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月BCR-ABLt(9;22)(q34;q11)>90%CML患者BCR-ABL融合蛋白（p210）的酪氨酸蛋白激酶活性較正常ABL高，可能是BCR對(duì)ABL激酶活性調(diào)節(jié)區(qū)的作用所致由于<5%CML患者為隱匿性Ph染色體，因此無(wú)Ph染色體CML患者還需使用更靈敏的分子檢測(cè)手段如FISH或RT-PCR檢測(cè)BCR-ABL融合基因RT-PCR還能區(qū)分e1-a2和b2-a2/b3-a2二種BCR-ABL轉(zhuǎn)錄本，從而區(qū)分ALL患者與CML急淋變患者，進(jìn)而分別對(duì)兩種不同患者采用不同的治療方案CML第62頁(yè),共71頁(yè)，星期六，2024年，5月BCR-ABL巢式RT-PCR檢測(cè)BCR-ABL融合基因用于CML移植患者移植后MRD監(jiān)測(cè)?？稍诨颊哐簩W(xué)復(fù)發(fā)前的6~24個(gè)月骨髓檢測(cè)就呈陽(yáng)性。RQ-PCR還能動(dòng)態(tài)觀察患者治療后BCR