高考生物一輪復習課后限時集訓37微生物的培養(yǎng)和應用含解析新人教版

一輪復習精品資料(高中)PAGE1-微生物的培養(yǎng)和應用(建議用時：40分鐘)1．(2020·河北省高三期末)配制培養(yǎng)基時可根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求，加入某些物質(zhì)或除去某些營養(yǎng)物質(zhì)以抑制其他微生物的生長，也可以根據(jù)某些微生物對一些物理、化學因素的抗性，在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，從而篩選出待定的微生物，這種培養(yǎng)基叫作選擇培養(yǎng)基。根據(jù)有關(guān)內(nèi)容回答以下問題：(1)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的一般步驟是計算、稱量、溶化、________、________。(2)某同學在做微生物實驗時，不小心把大腸桿菌和酵母菌混合在一起。請你完成分離得到純度較高的大腸桿菌和酵母菌的實驗步驟并回答有關(guān)問題：主要步驟：①制備兩種培養(yǎng)基：一種________的培養(yǎng)基，另一種加青霉素的培養(yǎng)基。分別分成兩份，依次標上A、A′、B、B′備用。培養(yǎng)基應采用________法滅菌。②分別向A、B培養(yǎng)基中接種______________________。③接種后，放在恒溫箱中培養(yǎng)3～4天。試說明觀察到的培養(yǎng)結(jié)果：________________________________________________。④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養(yǎng)基中。⑤接種后，把A′、B′培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3～4天。第④⑤兩個步驟的目的是_________________________________?！肌冀馕觥健?1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)①青霉素不影響酵母菌的生長繁殖，但會抑制大腸桿菌的生長繁殖，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅美藍發(fā)生特定的顏色反應，使菌落呈黑色，所以一種培養(yǎng)基加入伊紅美藍，一種培養(yǎng)基加入青霉素。對培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。②分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌。③接種后培養(yǎng)的結(jié)果：伊紅美藍培養(yǎng)基上的黑色菌落是大腸桿菌，加青霉素的培養(yǎng)基上生長的菌落是酵母菌。⑤分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是獲得純度較高的大腸桿菌和酵母菌。〖〖答案〗〗(1)滅菌倒平板(2)①加入伊紅美藍高壓蒸汽滅菌②混合菌③伊紅美藍培養(yǎng)基上的黑色菌落是大腸桿菌，加青霉素的培養(yǎng)基上生長的菌落是酵母菌⑤獲得純度較高的大腸桿菌和酵母菌2．“采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定”是從自然界篩選嗜鹽菌的一般步驟?；卮鹣铝袉栴}。(1)培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應從高鹽環(huán)境采集，理由是___________________________________________________________________。(2)富集培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。對嗜鹽產(chǎn)淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)時，所用培養(yǎng)基在組成成分上的特殊之處在于__________________。在富集培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，目的是__________________________________________(答出1點即可)。(3)純種分離嗜鹽菌時，常用的兩種接種方法有________________________________________________________________，后者的效果圖如圖甲所示。甲乙(4)采用圖甲和圖乙所示的固體平板培養(yǎng)嗜鹽菌時，平板要倒置培養(yǎng)。這樣處理的目的是____________________________________________。(5)利用圖甲所示接種方法統(tǒng)計采集菌樣中微生物數(shù)量，為了使統(tǒng)計結(jié)果較為準確，隨機預留一部分空白培養(yǎng)基的用途是__________________________________；統(tǒng)計接種的培養(yǎng)基中單菌落數(shù)時，每天統(tǒng)計的結(jié)果可能不同，應以______________________為準?！肌冀馕觥健?1)嗜鹽菌喜好生活在高鹽的環(huán)境中，因此培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣，應從高鹽環(huán)境采集。(2)對嗜鹽產(chǎn)淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高鹽條件下培養(yǎng)。在富集培養(yǎng)過程中，將錐形瓶放在搖床上振蕩，除了使菌株與培養(yǎng)液充分接觸以提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率外，還能增加培養(yǎng)液中的溶氧量，以保證微生物對氧的需求。(3)純種分離嗜鹽菌時，常用的兩種接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(4)采用固體平板培養(yǎng)細菌時，為了防止平板冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(或避免培養(yǎng)基中水分的過快揮發(fā))，需要倒置培養(yǎng)。(5)利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計采集菌樣中微生物數(shù)量，為檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格，應隨機預留一部分空白培養(yǎng)基。統(tǒng)計接種的培養(yǎng)基中單菌落數(shù)時，每天統(tǒng)計的結(jié)果可能不同，應以每個平板上菌落數(shù)不變時的平均值為準?！肌即鸢浮健?1)嗜鹽菌喜好生活在高鹽的環(huán)境(2)淀粉是唯一碳源，鹽含量較高使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；增加培養(yǎng)液中的溶氧量，以保證微生物對氧的需求(答出任意1點即可)(3)平板劃線法和稀釋涂布平板法(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(或避免培養(yǎng)基中水分的過快揮發(fā))(5)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格每個平板上菌落數(shù)不變時的平均值3．(2020·安徽省定遠重點中學高三模擬)聚對苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料類水瓶的重要原料，科學家發(fā)現(xiàn)了以PET為碳源和能量來源的細菌，該發(fā)現(xiàn)對PET類材料的回收利用、環(huán)境治理意義重大。請回答下列問題：(1)實驗小組欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以________為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是____________________________________________。(2)該實驗小組選取PET濃度為800mg·L－1的富集液進行系列稀釋，分別取10－3、10－4和10－5倍數(shù)的稀釋液0.1mL涂布于培養(yǎng)基上，每個稀釋倍數(shù)涂布三個平板，各平板的菌落數(shù)分別為(286、298、297)，(35、32、31)，(36、7、2)，不適合用于計數(shù)的為________倍數(shù)的稀釋液，用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進行計數(shù)得到的細菌數(shù)不一致的原因可能是________________________________。(3)倒平板時應使錐形瓶的瓶口通過火焰，目的是________________________。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個平板不能用來培養(yǎng)大腸桿菌，原因是______________________________。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是__________________________________________________________________。(4)在保藏PET降解菌菌種時，可采取________的方法進行長期保存?！肌冀馕觥健?1)欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以PET為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌。(2)為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，據(jù)此結(jié)合題意可知：不適合用于計數(shù)的為10－5倍數(shù)的稀釋液。用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進行計數(shù)，得到的細菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10－3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果。(3)倒平板時應使錐形瓶的瓶口通過火焰，其目的是滅菌，防止微生物污染。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此這個平板不能用來培養(yǎng)大腸桿菌。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，為使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線。(4)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法?！肌即鸢浮健?1)PET增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌(2)10－5稀釋倍數(shù)為10－3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果(3)滅菌，防止微生物污染空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落(4)甘油管藏4．我國飲用水衛(wèi)生標準規(guī)定每毫升水樣中細菌總數(shù)不得大于100個，大腸桿菌不得檢出。某興趣小組為測定本地自來水中的細菌總數(shù)和是否有大腸桿菌，進行了如下實驗：①分別配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、H2O)和伊紅美藍培養(yǎng)基(成分：蛋白胨、NaCl、瓊脂、乳糖、伊紅、美藍、H2O)，滅菌。②取水樣。③先測定甲項指標：用滅菌吸管吸取1mL水樣，涂布到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中；置于37℃培養(yǎng)24h后進行菌落計數(shù)。另設(shè)一個不加水樣的空白對照組。④用濾膜法測定乙項指標，裝置和操作如圖?；卮鹣铝袉栴}：(1)步驟②取水樣前應先將自來水龍頭用火焰灼燒3min，目的是________________。(2)步驟③測定的指標甲是________。水樣涂布前無需稀釋，理由是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)步驟④測定乙項指標，主要觀察濾膜上是否會出現(xiàn)________色菌落。配制伊紅美藍培養(yǎng)基時，先用蛋白胨、NaCl、瓊脂配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基，在100kPa、121℃條件下滅菌后，冷卻至60℃左右，再加入經(jīng)70kPa、115℃條件下滅菌的乳糖、伊紅、美藍水溶液，后者滅菌條件不同的原因是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)興趣小組認為合格的自來水中細菌數(shù)量很少，擔心檢測不到，因而將取得的水樣先加入無瓊脂的營養(yǎng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，再稀釋涂布平板計數(shù)。這樣操作獲得的數(shù)據(jù)________(填“可信”或“不可信”)，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________?！肌冀馕觥健?1)實驗過程要進行嚴格的滅菌，水龍頭用火焰灼燒3min，目的是滅菌。(2)實驗過程首先要測定細菌的總數(shù)，再測定大腸桿菌數(shù)，因為自來水中細菌數(shù)量很少，所以水樣涂布前無需稀釋。(3)指標乙是大腸桿菌，大腸桿菌在伊紅美藍培養(yǎng)基上會呈現(xiàn)紫黑色并帶有金屬光澤的菌落。后者滅菌條件比前者所需要的溫度及壓強都低，是因為后者操作過程加入了乳糖，溶液中的乳糖高溫下會被破壞。(4)若將水樣先加入無瓊脂的營養(yǎng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，則原有水樣中的細菌就會在培養(yǎng)液中繁殖，稀釋涂布平板計數(shù)得到的數(shù)量不能真實反映水樣中原有的數(shù)量，因此這樣操作獲得的數(shù)據(jù)是不可信的?！肌即鸢浮健?1)滅菌(2)細菌總數(shù)自來水中細菌數(shù)量很少(3)紫黑溶液中的乳糖在高溫下會被破壞(4)不可信細菌會在營養(yǎng)培養(yǎng)液中大量繁殖，實驗中獲得的細菌數(shù)量不能真實地反映水樣中原有的數(shù)量5．(2020·湖北省高三調(diào)研)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。(1)化合物A為“目的菌”生長提供________。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的呼吸作用類型是________。篩選該目的菌所用培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上劃分屬于______________________。(2)若培養(yǎng)基需要調(diào)節(jié)pH，則應在滅菌之________(填“前”或“后”)調(diào)節(jié)。(3)該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是____________________________________________。(4)若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，可用____________________法統(tǒng)計活菌數(shù)目。(5)將獲得的3種待選微生物菌種甲、乙、丙分別接種在1L含20mg有機化合物A的相同培養(yǎng)液中培養(yǎng)(培養(yǎng)液中其他營養(yǎng)物質(zhì)充裕、條件適宜)，觀察從實驗開始到微生物停止生長所用的時間，甲、乙、丙分別為32小時、45小時、16小時，則應選擇微生物________(填“甲”“乙”或“丙”)作為菌種進行后續(xù)培養(yǎng)，理由是__________________________________________。〖〖解析〗〗(1)培養(yǎng)基的基本成分是水、碳源、氮源、無機鹽，因此用有機化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，有機化合物A為“目的菌”生長提供碳源、氮源。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的呼吸作用類型是有氧呼吸。篩選該目的菌所用培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上劃分屬于固體培養(yǎng)基。(2)制備培養(yǎng)基時應該先調(diào)節(jié)pH再滅菌。(3)該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。(4)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于統(tǒng)計活菌數(shù)目。(5)從實驗開始到微生物停止生長所用的時間，丙用時最少，說明微生物丙分解有機磷農(nóng)藥的能力比甲、乙強，因此應選擇微生物丙作為菌種進行后續(xù)培養(yǎng)。〖〖答案〗〗(1)碳源、氮源有氧呼吸固體培養(yǎng)基(2)前(3)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格(4)稀釋涂布平板(5)丙微生物丙分解有機化合物A的能力比甲、乙強6．(2020·湖北省高三期末)酸牛奶酒是在牛奶中加入乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵而成的一種乳飲料?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：(1)發(fā)酵所用牛奶在加入菌種前應進行________(填“消毒”或“滅菌”)。(2)已知“改良MC瓊脂培養(yǎng)基”中含有碳酸鈣，遇酸溶解而使培養(yǎng)基變得透明；“孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基”含氯霉素，可抑制絕大多數(shù)細菌的生長。對乳酸菌進行計數(shù)時應選擇上述________培養(yǎng)基，用________法接種，挑選出________的菌落進行計數(shù)。(3)對乳酸菌、酵母菌雙菌混合培養(yǎng)和各自單獨培養(yǎng)過程中的活菌數(shù)進行定時檢測，結(jié)果如圖。由圖可知，雙菌培養(yǎng)時兩種菌的最大活菌數(shù)均高于其單獨培養(yǎng)時，從代謝產(chǎn)物角度分析，其原因可能是______________________________________________________。共同培養(yǎng)過程中兩種生物的種間關(guān)系是________、________。圖甲發(fā)酵液中乳酸菌的數(shù)量變化圖乙發(fā)酵液中酵母菌的數(shù)量變化〖〖解析〗〗(1)牛奶在發(fā)酵前應先進行消毒處理，除去其他微生物，再加入菌種進行發(fā)酵。(2)乳酸菌進行無氧呼吸可以產(chǎn)生乳酸，遇碳酸鈣可以使培養(yǎng)基變得透明，故應該選擇改良MC瓊脂培養(yǎng)基對乳酸菌進行計數(shù)，要對乳酸菌進行計數(shù)應該選擇稀釋涂布平板法進行接種，乳酸菌可以使MC瓊脂培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈，故可以挑選出具有透明圈的菌落進行計數(shù)。(3)根據(jù)圖中曲線可以推測，酵母菌和乳酸菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物，從而相互促進生長，故雙菌培養(yǎng)時兩種菌的最大活菌數(shù)均高于其單獨培養(yǎng)時。共同培養(yǎng)過程中，乳酸菌和酵母菌既競爭資源空間又可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物，故同時存在競爭和共生關(guān)系?！肌即鸢浮健?1)消毒(2)改良MC瓊脂稀釋涂布平板具有透明圈(3)酵母菌和乳酸菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物，從而相互促進生長共生競爭7．(2020·青島市黃島區(qū)高三期末)污水的有效處理是人民群眾健康生活的保障。請回答相關(guān)問題：(1)微生物絮凝劑具有絮凝沉降廢水的作用?？蒲腥藛T通過生物技術(shù)篩選穩(wěn)定、高效的絮凝劑產(chǎn)生菌。取少量活性污泥，向其中加入________制成菌液，將菌液接種到培養(yǎng)基中進行富集培養(yǎng)，再接種到________(填物理性質(zhì))培養(yǎng)基，數(shù)天后，挑選出生長較好、表面光滑帶黏性的____________。(2)初選菌在培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)后，測定其對高嶺土懸液的絮凝效果，并與天然有機高分子絮凝劑作比較。實驗組加入含有初選菌的培養(yǎng)液，對照組應該設(shè)置兩組，它們是_____________________________________________________。(3)為研究微生物絮凝劑的加入劑量對生活污水中有機物去除效果的影響(有機物污染程度用生化需氧量COD表示)，科研小組又進行了如下實驗：將生活污水均分為多組，分別加入同濃度不同劑量的微生物絮凝劑，培養(yǎng)后取樣測定COD去除率。結(jié)果如圖，得出相應結(jié)論。請指出該實驗設(shè)計中的不嚴謹之處：____________________________________________________。投加量對COD的去除效果的影響(4)反硝化細菌能將硝態(tài)氮(如NOeq\o\al(－,3))轉(zhuǎn)化為氮氣(2NOeq\o\al(－,3)＋10e－＋12H＋→N2＋6H2O)，廣泛用于污水處理。研究人員將1g活性污泥稀釋成不同濃度的溶液，各取50μL稀釋液均勻涂布到含有溴麝香草酚藍(BTB)的初篩培養(yǎng)基上(BTB是一種酸堿指示劑，在弱酸性溶液中呈黃色，弱堿性溶液中呈藍色，中性溶液中呈綠色，初篩培養(yǎng)基呈綠色)，在適宜條件下培養(yǎng)純化，已獲得反硝化細菌。在該步驟中，初篩培養(yǎng)基中的氮源應是________。在細菌培養(yǎng)過程中，需要放置未接種的培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，其目的是________________________________。初培結(jié)束時，選擇的目標菌落周圍應呈________色?！肌冀馕觥健?1)制作菌液需要向活性污泥加入無菌水，富集培養(yǎng)后為了獲得目的菌株，需要將菌液接種到固體培養(yǎng)基中，挑選出好的菌落。(2)由于與天然有機高分子絮凝劑作比較，所以一組對照選擇加入天然有機高分子絮凝劑組，另一組選擇不含初選菌的培養(yǎng)液組作為空白對照。(3)實驗需要遵循單一變量原則，所以實驗中加入不同劑量的微生物絮凝劑導致各組實驗的液體總量存在差異，變量不單一。(4)反硝化細菌能將硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氮氣，因此要篩選出反硝化細菌，步驟1中初篩培養(yǎng)基中的氮源應是硝態(tài)氮(或NOeq\o\al(－,3))，放置未接種的培養(yǎng)基主要目的是檢驗培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否受到雜菌污染，初培結(jié)束時，反硝化細菌能將硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氮氣，消耗培養(yǎng)基中的H＋，使溶液呈弱堿性，因此選擇的目標菌落周圍應呈藍色。〖〖答案〗〗(1)菌水固體菌落(2)加入天然有機高分子絮凝劑組，加入不含初選菌的培養(yǎng)液組(3)實驗中加入不同劑量的微生物絮凝劑導致各組實驗的液體總量存在差異(4)硝態(tài)氮(或NOeq\o\al(－,3))檢驗培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否受到雜菌污染藍8．(2020·湖南省雅禮中學高三月考)據(jù)悉，在近期舉行的中國飼料發(fā)展論壇上，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸醫(yī)局局長馮忠武表示，藥物飼料添加劑將在2020年全部退出，并明確了養(yǎng)殖端減抗和限抗的時間表。(1)藥物飼料添加劑一般添加抗生素的理由是______________________。(2)濫用抗生素的后果是導致細菌的________增強，且長期使用讓畜禽機體免疫力________；抗生素在畜禽產(chǎn)品中造成殘留，對人體健康和動物產(chǎn)品的出口有很大的影響。(3)某科研小組欲調(diào)查現(xiàn)在豬群中腸道耐抗生素微生物的比例，進行了如下實驗：①培養(yǎng)基的配制和滅菌：分別配制含一定濃度抗生素的培養(yǎng)基A和________培養(yǎng)基B，用________法進行滅菌，倒平板備用。②菌種分離與培養(yǎng)：用________對豬腸腔液進行梯度稀釋，每個稀釋梯度取0.1mL，用________法接種到A、B培養(yǎng)基上各三個平板。為了排除培養(yǎng)基被污染，需設(shè)置________作為空白對照，然后在其他條件適宜的________(填“有氧”或“無氧”)環(huán)境中培養(yǎng)1～2天。③計數(shù)：選擇菌落數(shù)在________的平板進行計數(shù)，計算出______________________________。(4)全面禁抗以后，對于養(yǎng)殖場你有什么好的建議？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答一點即可)。〖〖解析〗〗(1)抗生素具有殺菌作用，可以防治畜禽疾病，提高個人經(jīng)濟效益，因此藥物飼料添加劑一般添加抗生素。(2)濫用抗生素的后果是導致細菌的耐藥性增強，且長期使用讓畜禽機體免疫力下降。(3)①分別配制含一定濃度抗生素的培養(yǎng)基A和不含抗生素的培養(yǎng)基B(相互對照)，用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，倒平板備用。②分離純化菌種時，為了對活菌進行計數(shù)，可采用稀釋涂布平板法接種于新的培養(yǎng)基平板上，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便純化菌種。因此，用無菌水對豬腸腔液進行梯度稀釋，每個稀釋梯度用稀釋涂布平板法各接種A、B培養(yǎng)基上各三個平板；為了排除培養(yǎng)基被污染，需設(shè)置接種無菌水的培養(yǎng)基作為空白對照；因為腸道微生物適宜生活在無氧的環(huán)境中，應為厭氧型微生物，所以應該在其他條件適宜的無氧環(huán)境中培養(yǎng)1～2天。③計數(shù)：選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，計算出A、B培養(yǎng)基腸腔液中微生物的比值。(4)全面禁抗以后，養(yǎng)殖場的牲畜發(fā)病情況會有所上升，養(yǎng)殖場可以：提高現(xiàn)場飼養(yǎng)管理水平，以減少疾病的發(fā)生；改善畜舍環(huán)境條件，提升動物福利，減輕應激程度。〖〖答案〗〗(1)抗生素具有殺菌作用，可以防治畜禽疾病，提高個人經(jīng)濟效益(2)耐藥性下降(3)不含抗生素的高壓蒸汽滅菌無菌水稀釋涂布平板接種無菌水的培養(yǎng)基無氧30～300A、B培養(yǎng)基腸腔液中微生物的比值(腸腔液中耐抗生素微生物的比例)(4)提高現(xiàn)場飼養(yǎng)管理水平，以減少疾病的發(fā)生；改善畜舍環(huán)境條件，提升動物福利，減輕應激程度(答一點即可)微生物的培養(yǎng)和應用(建議用時：40分鐘)1．(2020·河北省高三期末)配制培養(yǎng)基時可根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求，加入某些物質(zhì)或除去某些營養(yǎng)物質(zhì)以抑制其他微生物的生長，也可以根據(jù)某些微生物對一些物理、化學因素的抗性，在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，從而篩選出待定的微生物，這種培養(yǎng)基叫作選擇培養(yǎng)基。根據(jù)有關(guān)內(nèi)容回答以下問題：(1)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的一般步驟是計算、稱量、溶化、________、________。(2)某同學在做微生物實驗時，不小心把大腸桿菌和酵母菌混合在一起。請你完成分離得到純度較高的大腸桿菌和酵母菌的實驗步驟并回答有關(guān)問題：主要步驟：①制備兩種培養(yǎng)基：一種________的培養(yǎng)基，另一種加青霉素的培養(yǎng)基。分別分成兩份，依次標上A、A′、B、B′備用。培養(yǎng)基應采用________法滅菌。②分別向A、B培養(yǎng)基中接種______________________。③接種后，放在恒溫箱中培養(yǎng)3～4天。試說明觀察到的培養(yǎng)結(jié)果：________________________________________________。④分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養(yǎng)基中。⑤接種后，把A′、B′培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)3～4天。第④⑤兩個步驟的目的是_________________________________。〖〖解析〗〗(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)①青霉素不影響酵母菌的生長繁殖，但會抑制大腸桿菌的生長繁殖，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅美藍發(fā)生特定的顏色反應，使菌落呈黑色，所以一種培養(yǎng)基加入伊紅美藍，一種培養(yǎng)基加入青霉素。對培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。②分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌。③接種后培養(yǎng)的結(jié)果：伊紅美藍培養(yǎng)基上的黑色菌落是大腸桿菌，加青霉素的培養(yǎng)基上生長的菌落是酵母菌。⑤分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到A′、B′培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是獲得純度較高的大腸桿菌和酵母菌?！肌即鸢浮健?1)滅菌倒平板(2)①加入伊紅美藍高壓蒸汽滅菌②混合菌③伊紅美藍培養(yǎng)基上的黑色菌落是大腸桿菌，加青霉素的培養(yǎng)基上生長的菌落是酵母菌⑤獲得純度較高的大腸桿菌和酵母菌2．“采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定”是從自然界篩選嗜鹽菌的一般步驟?；卮鹣铝袉栴}。(1)培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應從高鹽環(huán)境采集，理由是___________________________________________________________________。(2)富集培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。對嗜鹽產(chǎn)淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)時，所用培養(yǎng)基在組成成分上的特殊之處在于__________________。在富集培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，目的是__________________________________________(答出1點即可)。(3)純種分離嗜鹽菌時，常用的兩種接種方法有________________________________________________________________，后者的效果圖如圖甲所示。甲乙(4)采用圖甲和圖乙所示的固體平板培養(yǎng)嗜鹽菌時，平板要倒置培養(yǎng)。這樣處理的目的是____________________________________________。(5)利用圖甲所示接種方法統(tǒng)計采集菌樣中微生物數(shù)量，為了使統(tǒng)計結(jié)果較為準確，隨機預留一部分空白培養(yǎng)基的用途是__________________________________；統(tǒng)計接種的培養(yǎng)基中單菌落數(shù)時，每天統(tǒng)計的結(jié)果可能不同，應以______________________為準?！肌冀馕觥健?1)嗜鹽菌喜好生活在高鹽的環(huán)境中，因此培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣，應從高鹽環(huán)境采集。(2)對嗜鹽產(chǎn)淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高鹽條件下培養(yǎng)。在富集培養(yǎng)過程中，將錐形瓶放在搖床上振蕩，除了使菌株與培養(yǎng)液充分接觸以提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率外，還能增加培養(yǎng)液中的溶氧量，以保證微生物對氧的需求。(3)純種分離嗜鹽菌時，常用的兩種接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(4)采用固體平板培養(yǎng)細菌時，為了防止平板冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(或避免培養(yǎng)基中水分的過快揮發(fā))，需要倒置培養(yǎng)。(5)利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計采集菌樣中微生物數(shù)量，為檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格，應隨機預留一部分空白培養(yǎng)基。統(tǒng)計接種的培養(yǎng)基中單菌落數(shù)時，每天統(tǒng)計的結(jié)果可能不同，應以每個平板上菌落數(shù)不變時的平均值為準?！肌即鸢浮健?1)嗜鹽菌喜好生活在高鹽的環(huán)境(2)淀粉是唯一碳源，鹽含量較高使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；增加培養(yǎng)液中的溶氧量，以保證微生物對氧的需求(答出任意1點即可)(3)平板劃線法和稀釋涂布平板法(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(或避免培養(yǎng)基中水分的過快揮發(fā))(5)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格每個平板上菌落數(shù)不變時的平均值3．(2020·安徽省定遠重點中學高三模擬)聚對苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料類水瓶的重要原料，科學家發(fā)現(xiàn)了以PET為碳源和能量來源的細菌，該發(fā)現(xiàn)對PET類材料的回收利用、環(huán)境治理意義重大。請回答下列問題：(1)實驗小組欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以________為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是____________________________________________。(2)該實驗小組選取PET濃度為800mg·L－1的富集液進行系列稀釋，分別取10－3、10－4和10－5倍數(shù)的稀釋液0.1mL涂布于培養(yǎng)基上，每個稀釋倍數(shù)涂布三個平板，各平板的菌落數(shù)分別為(286、298、297)，(35、32、31)，(36、7、2)，不適合用于計數(shù)的為________倍數(shù)的稀釋液，用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進行計數(shù)得到的細菌數(shù)不一致的原因可能是________________________________。(3)倒平板時應使錐形瓶的瓶口通過火焰，目的是________________________。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個平板不能用來培養(yǎng)大腸桿菌，原因是______________________________。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是__________________________________________________________________。(4)在保藏PET降解菌菌種時，可采取________的方法進行長期保存。〖〖解析〗〗(1)欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以PET為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌。(2)為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，據(jù)此結(jié)合題意可知：不適合用于計數(shù)的為10－5倍數(shù)的稀釋液。用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進行計數(shù)，得到的細菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10－3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果。(3)倒平板時應使錐形瓶的瓶口通過火焰，其目的是滅菌，防止微生物污染。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此這個平板不能用來培養(yǎng)大腸桿菌。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，為使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線。(4)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。〖〖答案〗〗(1)PET增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌(2)10－5稀釋倍數(shù)為10－3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果(3)滅菌，防止微生物污染空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落(4)甘油管藏4．我國飲用水衛(wèi)生標準規(guī)定每毫升水樣中細菌總數(shù)不得大于100個，大腸桿菌不得檢出。某興趣小組為測定本地自來水中的細菌總數(shù)和是否有大腸桿菌，進行了如下實驗：①分別配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、H2O)和伊紅美藍培養(yǎng)基(成分：蛋白胨、NaCl、瓊脂、乳糖、伊紅、美藍、H2O)，滅菌。②取水樣。③先測定甲項指標：用滅菌吸管吸取1mL水樣，涂布到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中；置于37℃培養(yǎng)24h后進行菌落計數(shù)。另設(shè)一個不加水樣的空白對照組。④用濾膜法測定乙項指標，裝置和操作如圖?；卮鹣铝袉栴}：(1)步驟②取水樣前應先將自來水龍頭用火焰灼燒3min，目的是________________。(2)步驟③測定的指標甲是________。水樣涂布前無需稀釋，理由是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)步驟④測定乙項指標，主要觀察濾膜上是否會出現(xiàn)________色菌落。配制伊紅美藍培養(yǎng)基時，先用蛋白胨、NaCl、瓊脂配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基，在100kPa、121℃條件下滅菌后，冷卻至60℃左右，再加入經(jīng)70kPa、115℃條件下滅菌的乳糖、伊紅、美藍水溶液，后者滅菌條件不同的原因是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)興趣小組認為合格的自來水中細菌數(shù)量很少，擔心檢測不到，因而將取得的水樣先加入無瓊脂的營養(yǎng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，再稀釋涂布平板計數(shù)。這樣操作獲得的數(shù)據(jù)________(填“可信”或“不可信”)，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________?！肌冀馕觥健?1)實驗過程要進行嚴格的滅菌，水龍頭用火焰灼燒3min，目的是滅菌。(2)實驗過程首先要測定細菌的總數(shù)，再測定大腸桿菌數(shù)，因為自來水中細菌數(shù)量很少，所以水樣涂布前無需稀釋。(3)指標乙是大腸桿菌，大腸桿菌在伊紅美藍培養(yǎng)基上會呈現(xiàn)紫黑色并帶有金屬光澤的菌落。后者滅菌條件比前者所需要的溫度及壓強都低，是因為后者操作過程加入了乳糖，溶液中的乳糖高溫下會被破壞。(4)若將水樣先加入無瓊脂的營養(yǎng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，則原有水樣中的細菌就會在培養(yǎng)液中繁殖，稀釋涂布平板計數(shù)得到的數(shù)量不能真實反映水樣中原有的數(shù)量，因此這樣操作獲得的數(shù)據(jù)是不可信的?！肌即鸢浮健?1)滅菌(2)細菌總數(shù)自來水中細菌數(shù)量很少(3)紫黑溶液中的乳糖在高溫下會被破壞(4)不可信細菌會在營養(yǎng)培養(yǎng)液中大量繁殖，實驗中獲得的細菌數(shù)量不能真實地反映水樣中原有的數(shù)量5．(2020·湖北省高三調(diào)研)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。(1)化合物A為“目的菌”生長提供________。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的呼吸作用類型是________。篩選該目的菌所用培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上劃分屬于______________________。(2)若培養(yǎng)基需要調(diào)節(jié)pH，則應在滅菌之________(填“前”或“后”)調(diào)節(jié)。(3)該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是____________________________________________。(4)若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，可用____________________法統(tǒng)計活菌數(shù)目。(5)將獲得的3種待選微生物菌種甲、乙、丙分別接種在1L含20mg有機化合物A的相同培養(yǎng)液中培養(yǎng)(培養(yǎng)液中其他營養(yǎng)物質(zhì)充裕、條件適宜)，觀察從實驗開始到微生物停止生長所用的時間，甲、乙、丙分別為32小時、45小時、16小時，則應選擇微生物________(填“甲”“乙”或“丙”)作為菌種進行后續(xù)培養(yǎng)，理由是__________________________________________。〖〖解析〗〗(1)培養(yǎng)基的基本成分是水、碳源、氮源、無機鹽，因此用有機化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，有機化合物A為“目的菌”生長提供碳源、氮源。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的呼吸作用類型是有氧呼吸。篩選該目的菌所用培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上劃分屬于固體培養(yǎng)基。(2)制備培養(yǎng)基時應該先調(diào)節(jié)pH再滅菌。(3)該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。(4)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于統(tǒng)計活菌數(shù)目。(5)從實驗開始到微生物停止生長所用的時間，丙用時最少，說明微生物丙分解有機磷農(nóng)藥的能力比甲、乙強，因此應選擇微生物丙作為菌種進行后續(xù)培養(yǎng)。〖〖答案〗〗(1)碳源、氮源有氧呼吸固體培養(yǎng)基(2)前(3)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格(4)稀釋涂布平板(5)丙微生物丙分解有機化合物A的能力比甲、乙強6．(2020·湖北省高三期末)酸牛奶酒是在牛奶中加入乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵而成的一種乳飲料?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：(1)發(fā)酵所用牛奶在加入菌種前應進行________(填“消毒”或“滅菌”)。(2)已知“改良MC瓊脂培養(yǎng)基”中含有碳酸鈣，遇酸溶解而使培養(yǎng)基變得透明；“孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基”含氯霉素，可抑制絕大多數(shù)細菌的生長。對乳酸菌進行計數(shù)時應選擇上述________培養(yǎng)基，用________法接種，挑選出________的菌落進行計數(shù)。(3)對乳酸菌、酵母菌雙菌混合培養(yǎng)和各自單獨培養(yǎng)過程中的活菌數(shù)進行定時檢測，結(jié)果如圖。由圖可知，雙菌培養(yǎng)時兩種菌的最大活菌數(shù)均高于其單獨培養(yǎng)時，從代謝產(chǎn)物角度分析，其原因可能是______________________________________________________。共同培養(yǎng)過程中兩種生物的種間關(guān)系是________、________。圖甲發(fā)酵液中乳酸菌的數(shù)量變化圖乙發(fā)酵液中酵母菌的數(shù)量變化〖〖解析〗〗(1)牛奶在發(fā)酵前應先進行消毒處理，除去其他微生物，再加入菌種進行發(fā)酵。(2)乳酸菌進行無氧呼吸可以產(chǎn)生乳酸，遇碳酸鈣可以使培養(yǎng)基變得透明，故應該選擇改良MC瓊脂培養(yǎng)基對乳酸菌進行計數(shù)，要對乳酸菌進行計數(shù)應該選擇稀釋涂布平板法進行接種，乳酸菌可以使MC瓊脂培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈，故可以挑選出具有透明圈的菌落進行計數(shù)。(3)根據(jù)圖中曲線可以推測，酵母菌和乳酸菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物，從而相互促進生長，故雙菌培養(yǎng)時兩種菌的最大活菌數(shù)均高于其單獨培養(yǎng)時。共同培養(yǎng)過程中，乳酸菌和酵母菌既競爭資源空間又可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物，故同時存在競爭和共生關(guān)系?！肌即鸢浮健?1)消毒(2)改良MC瓊脂稀釋涂布平板具有透明圈(3)酵母菌和乳酸菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物，從而相互促進生長共生競爭7．(2020·青島市黃島區(qū)高三期末)污水的有效處理是人民群眾健康生活的保障。請回答相關(guān)問題：(1)微生物絮凝劑具有絮凝沉降廢水的作用?？蒲腥藛T通過生物技術(shù)篩選穩(wěn)定、高效的絮凝劑產(chǎn)生菌。取少量活性污泥，向其中加入________制成菌液，將菌液接種到培養(yǎng)基中進行富集培養(yǎng)，再接種到________(填物理性質(zhì))培養(yǎng)基，數(shù)天后，挑選出生長較好、表面光滑帶黏性的____________。(2)初選菌在培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)后，測定其對高嶺土懸液的絮凝效果，并與天然有機高分子絮凝劑作比較。實驗組加入含有初選菌的培養(yǎng)液，對照組應該設(shè)置兩組，它們是_____________________________________________________。(3)為研究微生物絮凝劑的加入劑量對生活污水中有機物去除效果的影響(有機物污染程度用生化需氧量COD表示)，科研小組又進行了如下實驗：將生活污水均分為多組，分別加入同濃度不同劑量的微生物絮凝劑，培養(yǎng)后取樣測定COD去除率。結(jié)果如圖，得出相應結(jié)論。請指出該實驗設(shè)計中的不嚴謹之處：____________________________________________________。投加量對COD的去除效果的影響(4)反硝化細菌能將硝態(tài)氮(如NOeq\o\al(－,3))轉(zhuǎn)化為氮氣(2NOeq\o\al(－,3)＋10e－＋12H＋→N2＋6H2O)，廣泛用于污水處理。研究人員將1g活性污泥稀釋成不同濃度的溶液，各取50μL稀釋液均勻涂布到含有溴麝香草酚藍(BTB)的初篩培養(yǎng)基上(BTB是一種酸堿指示劑，在弱酸性溶液中呈黃色，弱堿性溶液中呈藍色，中性溶液中呈綠色，初篩培養(yǎng)基呈綠色)，在適宜條件下培養(yǎng)純化，已獲得反硝化細菌。在該步驟中，初篩培養(yǎng)基中的氮源應是________。在細菌培養(yǎng)過程中，需要放置未接種的培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，其目的是________________________________。初培結(jié)束時