微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座

微生物試驗(yàn)室培養(yǎng)（知識點(diǎn)總結(jié)）1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第1頁復(fù)習(xí)題1、甲、乙、丙是三種微生物，下表①、②、③是用來培養(yǎng)微生物三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在③中正常生長繁殖；甲能在①中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在②中正常生長繁殖，甲、丙都不能。以下說法正確是：粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCI20.5g①++++-+++②+++-++++③++++++++A、甲乙丙都是異養(yǎng)微生物B、甲乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物2微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第2頁復(fù)習(xí)題2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、試驗(yàn)操作者雙手、空氣、牛奶所采取滅菌、消毒方法依次是：①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤3微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第3頁三、純化大腸桿菌試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)：接種大腸桿菌于培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)使其形成由單個(gè)細(xì)胞繁殖形成子細(xì)胞群體，即菌落。試驗(yàn)過程：(知識網(wǎng)絡(luò)）配制培養(yǎng)基接種大腸桿菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（12—24h）結(jié)果分析與評價(jià)計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板調(diào)PH→分裝→包扎菌種保藏平板劃線稀釋涂布平板未接種培養(yǎng)（對照組）接種培養(yǎng)（試驗(yàn)組）培養(yǎng)基配制成功是否？接種操作成功是否？4微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第4頁配制培養(yǎng)基①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿錐形瓶，使錐形瓶瓶口快速經(jīng)過火焰；③左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。④待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置。倒平板過程總結(jié)：5微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第5頁Q1.培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后，需冷卻到____℃左右時(shí)，才能倒平板。用什么方法來預(yù)計(jì)培養(yǎng)基溫度？_____________________________________________________________Q2.操作時(shí)錐形瓶口經(jīng)過酒精燈火焰目標(biāo)是：_____________________________________________Q3.將平板倒置目標(biāo)是：_________________________________________________________________________________________________________________________Q4.在倒平板過程中，將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為何？_____________________________________________________________50感覺錐形瓶溫度剛才不燙手，就能夠倒平板了預(yù)防瓶口微生物污染培養(yǎng)基既能夠使培養(yǎng)基表面冷凝水分更加好揮發(fā)，又能夠預(yù)防皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基，造成污染不能，因?yàn)榭諝庵形⑸锟赡茉诿笊w和皿底之間培養(yǎng)基上滋生。配制培養(yǎng)基6微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第6頁平板劃線接種原理：經(jīng)過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作，將聚集菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。7微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第7頁平板劃線接種灼燒接種環(huán)冷卻劃線（第一區(qū)域）蘸取菌液灼燒接種環(huán)冷卻劃線（第二區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第三區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第四區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第五區(qū)域）灼燒接種環(huán)平板倒置放置培養(yǎng)8微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第8頁平板劃線接種第一區(qū)域第二區(qū)域第三區(qū)域第四區(qū)域第五區(qū)域9微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第9頁Q2：每次劃線前灼燒接種環(huán)目標(biāo)：Q3：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)目標(biāo)：平板劃線接種答案：防止接種環(huán)上可能存在微生物污染培養(yǎng)基答案：殺死上次劃線結(jié)束后殘留菌種答案：及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留菌種，防止污染環(huán)境和操作者。Q1：第一步灼燒接種環(huán)目標(biāo)：10微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第10頁稀釋涂布平板接種原理：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不一樣稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可取得單個(gè)細(xì)菌形成標(biāo)準(zhǔn)菌落。11微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第11頁1、梯度稀釋2、涂布平板稀釋涂布平板接種12微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第12頁結(jié)果分析與評價(jià)1、培養(yǎng)基制備成功標(biāo)準(zhǔn)2、接種操作成功標(biāo)準(zhǔn)假如未接種培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基配制是成功，不然試驗(yàn)失敗，需重新配制。假如培養(yǎng)基上生長菌落顏色、性狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落特點(diǎn)，則說明操作是符合要求。假如培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其它菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未到達(dá)要求，試驗(yàn)失敗，需分析原因，再次試驗(yàn)。13微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題知識講座第13頁菌種保藏（了解）1、暫時(shí)保藏：適合用于頻繁使用菌種。將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基，在適宜溫度下培