中國藥典微生物檢驗專家講座

版中國藥典微生物檢驗中國藥典微生物檢驗第1頁版微生物檢驗實現(xiàn)了三部藥典標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一形成了一個比較完備藥品微生物檢驗標(biāo)準(zhǔn)體系，含有以下兩個顯著特征①全方面與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌；②推進了藥品微生物控制由終產(chǎn)品檢驗向過程控制轉(zhuǎn)變。中國藥典微生物檢驗第2頁版微生物檢驗微生物基礎(chǔ)知識非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法(通則1105)解析非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：控制菌檢驗法(通則1106)解析非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)(通則1107)解析培養(yǎng)基質(zhì)量管理工藝用水檢驗無菌檢驗法

(通則1101)解析中國藥典微生物檢驗第3頁微生物基本知識定義：微生物（microorganism）是對全部形體微小，單細胞或結(jié)構(gòu)較為簡單多細

胞甚至無細胞結(jié)構(gòu)低等生物統(tǒng)稱。中國藥典微生物檢驗第4頁

微生物分類

原核微生物：細菌、放線菌、立克次氏體支原體、衣原體、藍細菌和古細菌真核微生物：酵母菌、霉菌、粘菌、原生動物和藻類非細胞型生物：病毒、噬菌體、類病毒、擬病毒和朊病毒

中國藥典微生物檢驗第5頁微生物特點體積小，比表面積大吸收多，轉(zhuǎn)化快

生長旺，繁殖快適應(yīng)強，易變異種類多，分布廣

中國藥典微生物檢驗第6頁球菌中國藥典微生物檢驗第7頁桿菌桿菌中國藥典微生物檢驗第8頁螺旋菌中國藥典微生物檢驗第9頁革蘭氏陽性細菌與陰性細菌細胞壁結(jié)構(gòu)圖中國藥典微生物檢驗第10頁菌落菌落(colony)：將單一微生物細胞或一小堆同種微生物細胞接種到固體培養(yǎng)基表面，當(dāng)它占有一定空間并給予適宜培養(yǎng)條件，該細胞就會快速生長繁殖。結(jié)果形成以母細胞為中心，肉眼可見并有一定形態(tài)構(gòu)造子細胞集團。中國藥典微生物檢驗第11頁真核微生物形態(tài)真核微生物：是細胞核含有核膜、核仁，能進行有絲分裂，細胞質(zhì)中存在線粒體或同時存在葉綠體等各種細胞器一類微生物。中國藥典微生物檢驗第12頁

酵母菌特征

①個體普通以單細胞狀態(tài)存在

②多數(shù)為出芽繁殖，也有裂殖；

③能發(fā)酵糖類產(chǎn)能；

④細胞壁常含甘露聚糖；

⑤喜在含糖量較高、偏酸性環(huán)境生長。中國藥典微生物檢驗第13頁酵母菌菌落特征與細菌相同，較細菌大而厚，圓形，光滑濕潤，粘性，易用針挑起，顏色單調(diào)，多為乳白色、少數(shù)紅色、常有酒香味中國藥典微生物檢驗第14頁霉菌特征絲狀真菌一個通俗名稱，意即“發(fā)霉真菌”。霉菌營養(yǎng)體由菌絲組成，菌絲無限生長并產(chǎn)生分枝，分枝菌絲相互交織在一起，形成菌絲體。中國藥典微生物檢驗第15頁

霉菌菌落特征

霉菌細胞呈絲狀，在固體培養(yǎng)基上形成營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲。霉菌菌落較酵母菌大質(zhì)地疏松，外觀干燥，不透明，展現(xiàn)或蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀。菌落與培養(yǎng)基連接緊密，不易挑取，常有霉味。中國藥典微生物檢驗第16頁非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法(通則1105)解析

格式改變內(nèi)容改變通用要求改變

—適用范圍

—檢測環(huán)境改變

—培養(yǎng)基

—計數(shù)方法

—菌種及菌液制備

—培養(yǎng)基適用性檢驗

—計數(shù)方法適用性試驗

—供試品檢驗中國藥典微生物檢驗第17頁格式改變版附錄ⅩⅢC/附錄XIJ：微生物程度檢驗法版非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法（通則1105）非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：控制菌檢驗法（通則1106）非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（通則1107）中國藥典微生物檢驗第18頁中國藥典微生物計數(shù)法編排方式中國藥典微生物計數(shù)法編排方式格式改變中國藥典微生物檢驗第19頁內(nèi)容改變中國藥典微生物檢驗第20頁適用范圍微生物計數(shù)法系用于能在有氧條件下生長嗜溫細菌和真菌計數(shù)。明確要求本法不適合用于活菌制劑檢驗。增加了檢測產(chǎn)品范圍。：系檢驗非要求滅菌制劑及其原料輔料受微生物污染程度方法中國藥典微生物檢驗第21頁檢測環(huán)境改變微生物計數(shù)試驗環(huán)境要求微生物計數(shù)試驗環(huán)境應(yīng)符合微生物程度檢驗要求。檢驗全過程必須嚴(yán)格恪守?zé)o菌操作，預(yù)防再污染，防治污染辦法不得影響供試品中微生物檢出。單向流區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定時進行監(jiān)測。9203：藥品微生物試驗室質(zhì)量管理指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)“微生物程度檢驗應(yīng)在不低于D級背景下B級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行”。中國藥典微生物檢驗第22頁

試劑和試藥

中和劑、滅活劑和表面活性劑均應(yīng)對微生物無毒性其相互間含有相容性，有利于樣品中微生物均勻分散。稀釋液

1、pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；2、pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液、pH7.2無菌磷酸鹽緩沖液、pH7.6無菌磷酸鹽緩沖液；如需要，可在上述稀釋液滅菌前或滅菌后加入表面活性劑或中和劑等。3、0.9%無菌氯化鈉溶液。中國藥典微生物檢驗第23頁培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基

按標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理，由中檢院負責(zé)研制分發(fā)。計數(shù)用培養(yǎng)基a.需氧菌總數(shù)：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）b.霉菌和酵母菌總數(shù)：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或含抗生素SDA。中國藥典微生物檢驗第24頁

計數(shù)方法

1.平皿法：包含傾注法和涂布法。該項下明確可使用直徑較大平皿，且培養(yǎng)基用量應(yīng)對應(yīng)增加。2.薄膜過濾法。3.最可能數(shù)法(Most-Probable-NumberMethod，簡稱

MPN。MPN法用于微生物計數(shù)時準(zhǔn)確度較差，但對于一些微生物污染量很小供試品，MPN法可能是更適合方法。注：方法選擇標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)供試品理化特征和微生物程度標(biāo)準(zhǔn)等原因選擇。中國藥典微生物檢驗第25頁

培養(yǎng)基適用性檢驗

胰酪大豆胨瓊脂：金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、黑曲霉胰酪大豆胨肉湯：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌沙氏葡萄糖瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂、白色念珠菌、黑曲霉。中國藥典微生物檢驗第26頁

計數(shù)方法適用性試驗

1.術(shù)語改變：計數(shù)方法適用性試驗2.需氧菌總數(shù)測定用五種菌株試驗3.菌液加入方式：菌液加入供試液中，使每1mL供試液或每張濾膜所濾過供試液中含菌量小于100cfu，且所加菌液體積不超出供試液體積1％。中國藥典微生物檢驗第27頁供試品分類及供試液制備1.水溶性供試品

2.水不溶性非油脂類供試品

3.油脂類供試品試品：4.需用特殊方法制備供試液供試品：①膜劑、②腸溶及結(jié)腸溶制劑、③氣霧劑噴霧劑、④貼膏劑中國藥典微生物檢驗第28頁檢驗量普通隨機抽取不少于2個最小包裝供試品，混合，取要求量供試品進行檢驗。除另有要求外，普通供試品檢驗量為10g或10ml；膜劑為100cm2；珍貴或微量包裝藥品檢驗量能夠酌減。檢驗時，應(yīng)從2個以上最小包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，膜劑還不得少于4片。中國藥典微生物檢驗第29頁培養(yǎng)條件描述方式：按計數(shù)方法適用性試驗確認計數(shù)方法進行供試品中需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)測定。培養(yǎng)條件：胰酪大豆胨瓊脂平板在30～35℃培養(yǎng)3-5天，沙氏葡萄糖瓊脂平板在20～25℃培養(yǎng)5~7天；MPN法和供試品接種，全部試驗管在30～35℃培養(yǎng)3～5天。中國藥典微生物檢驗第30頁菌數(shù)匯報規(guī)則1、平皿法：需氧菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于300cfu稀釋級、霉菌和酵母菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu稀釋級，作為菌數(shù)匯報依據(jù)。取最高平均菌落數(shù)，計算1g、1ml或10cm

供試品中所含微生物數(shù)。取兩位有效數(shù)字匯報。如各稀釋級平皿均無菌落生長，或僅最低稀釋級平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于1時，以﹤1乘以最低稀釋倍數(shù)值匯報菌數(shù)。中國藥典微生物檢驗第31頁菌數(shù)匯報規(guī)則2、薄膜過濾法：計數(shù)方法同平皿計數(shù)法，每張濾膜上菌落數(shù)應(yīng)不超出100cfu。菌數(shù)匯報規(guī)則以相當(dāng)于1g、1ml或10cm供試品菌落數(shù)匯報菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以﹤1匯報菌數(shù)（每張濾膜過濾1g、1ml或10cm供試品），或﹤1乘以最低稀釋倍數(shù)值匯報菌數(shù)。3、MPN法：統(tǒng)計每一稀釋級微生物生長管數(shù)，從表3查對每1g或1ml供試品中需氧菌總數(shù)最可能數(shù)。中國藥典微生物檢驗第32頁計數(shù)要求

需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長總菌落數(shù)(包含真菌菌落數(shù))；霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長總菌落數(shù)(包含細菌菌落數(shù))。若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長細菌使霉菌和酵母菌計數(shù)結(jié)果不符合微生物程度要求，可使用含抗生素(如氯霉素、慶大霉素)沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或選擇性培養(yǎng)基(如玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基)進行霉菌和酵母菌總數(shù)測定。使用選擇性培養(yǎng)基時，應(yīng)進行培養(yǎng)基適用性檢驗。若采取MPN法，測定結(jié)果為需氧菌總數(shù)。中國藥典微生物檢驗第33頁計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)參考歐、美藥典，增加菌落計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)要求結(jié)果以10ncfu表示時，程度標(biāo)準(zhǔn)解釋以下：

“101CFU：最大可接收限值=20；

102CFU：最大可接收限值=200；

103CFU：最大可接收限值=。若供試品需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)檢驗結(jié)果均符合各品種項下要求，判供試品符合要求；若其中任何一項不符合各品種項下要求，判供試品不符合要求。中國藥典微生物檢驗第34頁計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)比如，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)為101cfu，不一樣于以往10cfu要求。以

10指數(shù)要求標(biāo)準(zhǔn)，考慮了微生物計數(shù)結(jié)果可變性，即計數(shù)結(jié)果非類似化學(xué)檢驗結(jié)果。故要求我們需要在結(jié)果判斷時或制訂內(nèi)控標(biāo)按時，對于結(jié)果判斷或歷史數(shù)據(jù)分析需要用風(fēng)險分析伎倆進行評定。制訂標(biāo)按時需要依據(jù)歷史數(shù)據(jù)、工藝過程、用藥人群等進行對應(yīng)分析，制訂合理內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，即總標(biāo)準(zhǔn)為在內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)控制下產(chǎn)品無任何質(zhì)量風(fēng)險。

中國藥典微生物檢驗第35頁總結(jié)：檢驗程序1、培養(yǎng)基適用性檢驗；2、方法適用試驗前評定；3、經(jīng)過評定，采取要求稀釋液制備樣品4、試驗組、菌液對照組、供試品對照組、中和劑或滅活劑對照組（需要話）制備；培養(yǎng)、觀察、計數(shù)；計算回收率；5、判斷回收率結(jié)果是否滿足要求：⑴是，方法適用性試驗經(jīng)過，進行確認；⑵否，重新選擇方法進行適用性試驗。6、按經(jīng)過方法進行樣品檢驗。中國藥典微生物檢驗第36頁控制菌檢驗主要改變—培養(yǎng)體系增菌培養(yǎng)基（廣譜增菌培養(yǎng)基替換選擇性增菌培養(yǎng)基）、預(yù)增菌、選擇性增菌、分離用培養(yǎng)基種類改變；培養(yǎng)時間與溫度改變。培養(yǎng)基適用性發(fā)生改變。方法適用性發(fā)生改變（方法適用性）。強抑菌性樣品處理方式發(fā)生改變。中國藥典微生物檢驗第37頁耐膽鹽革蘭陰性菌耐膽鹽革蘭陰性菌(Bile-TolerantGram-NegativeBacteria)替換年版大腸菌群Coliform）耐膽鹽革蘭陰性菌為一群無嚴(yán)格定義微生物，通常它們被定義為能夠在紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長微生物。它們包含無乳糖發(fā)酵但能夠利用葡萄糖，能夠在膽鹽中生長革蘭陰性菌，比如，腸桿菌科、假單胞菌和氣單胞菌屬一些膽鹽耐受革蘭陰性菌。中國藥典微生物檢驗第38頁控制菌檢驗方法適用性

結(jié)果判斷方式Ch.P：假如經(jīng)過試驗確證供試品對試驗菌抗菌作用無法消除，可認為受抑制微生物不易存在于該供試品中，選擇抑菌成份消除相對徹底方法進行供試品檢驗。（陽性對照能夠不生長）中國藥典微生物檢驗第39頁非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)

(通則1107)解析

修訂思緒（1）將《中國藥典》版一、二、三部微生物程度標(biāo)準(zhǔn)項目進行對比、整合。采取一部程度標(biāo)準(zhǔn)項目作為合并后程度標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)。參考EP7.0、USP35、JPⅩⅤ標(biāo)準(zhǔn)，修訂中國藥典微生物程度標(biāo)準(zhǔn)。采取清楚直觀表格形式，按給藥路徑、分液體、固體性狀、列出各類藥品程度標(biāo)準(zhǔn)。中國藥典微生物檢驗第40頁

與歐洲藥典8.0、美國藥典36版和日本藥局方

ⅩⅤ比較，修訂中國藥典微生物程度標(biāo)準(zhǔn)。

修訂菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)表述方式：指數(shù)形式10n，最大可接收程度值恪守2倍規(guī)則：

101CFU：最大可接收程度為20；

102CFU：最大可接收程度為200；依這類推。修訂檢驗項目：

“需氧菌總數(shù)（TAMC）”替換“細菌數(shù)”

“耐膽鹽革蘭陰性菌”替換“大腸菌群”中國藥典微生物檢驗第41頁版程度標(biāo)準(zhǔn)制訂特點

及總體結(jié)構(gòu)增訂檢驗制劑類型：基于藥品給藥路徑及對患者潛在危害劃分風(fēng)險等級來制訂標(biāo)準(zhǔn)。

齒齦、皮膚制劑、呼吸道制劑；增加原輔料、中藥提取物、中藥飲片控制兼顧國產(chǎn)藥品特點，保留中國藥典對中藥制劑分類特點：

是否含藥材原粉，是否含豆豉、神曲；是否接觸完整皮膚黏膜。中國藥典微生物檢驗第42頁

非無菌化學(xué)藥品制劑、生物制品

制劑、不含藥材原粉中藥制劑

1.口服給藥制劑（固體、液體）2.口腔黏膜給藥制劑、齒齦給藥制劑、鼻用制劑3.耳用、皮膚給藥制劑4.呼吸道吸入給藥制劑5.陰道、尿道給藥制劑6.直腸給藥制劑（固體、液體）7.其它局部給藥制劑中國藥典微生物檢驗第43頁

非無菌含藥材原粉中藥制劑

1.固體口服給藥制劑（含/不含豆豉、神曲等發(fā)酵原粉）2.液體口服給藥制劑（含/不含豆豉、神曲

等發(fā)酵原粉）3.固體局部給藥制劑（用于表皮或粘膜完整/不完整）4.固體局部給藥制劑（用于表皮或粘膜完整/不完整）中國藥典微生物檢驗第44頁各項標(biāo)準(zhǔn)詳細要求中國藥典微生物檢驗第45頁非無菌含藥材原粉中藥制劑中國藥典微生物檢驗第46頁非無菌藥用原料及輔料中藥提取物及中藥飲片中國藥典微生物檢驗第47頁

菌數(shù)結(jié)果匯報

1、當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)時，按實有數(shù)據(jù)匯報。2、菌落數(shù)大于100時，取兩位有效數(shù)字匯報(1105非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法中平皿法菌數(shù)匯報規(guī)則中提及)。3、當(dāng)菌數(shù)匯報數(shù)表示為“…×10n”時，是實際數(shù)值，與標(biāo)準(zhǔn)要求項下指數(shù)形式表述、2倍因子控制不一樣。

中國藥典微生物檢驗第48頁

執(zhí)行及制訂藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)

注意事項

執(zhí)行范圍：--生產(chǎn)、貯存、銷售過程中藥品--藥用原料、輔料--中藥提取物、中藥飲片--新藥標(biāo)準(zhǔn)--進口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核--藥品質(zhì)量考查及仲裁執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)中注意事項：--品種正文項下（微生物程度）要求，--附錄制劑通則下（微生物程度）要求，--附錄微生物程度檢驗法中標(biāo)準(zhǔn)要求。中國藥典微生物檢驗第49頁執(zhí)行及制訂藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)

注意事項沙門菌檢驗：--檢驗對象：口服制劑

--特點1：含臟器提取物（不區(qū)分是否為中藥制劑）

--特點2：含藥材原粉（之前為含動物藥材原粉，不再界定是否為動物藥材）

--表1要求化學(xué)藥品制劑和生物制品制劑若含有未經(jīng)提取動物起源成份及礦物質(zhì)還不得檢出沙門菌（10g或10ml）中國藥典微生物檢驗第50頁

制訂產(chǎn)品微生物程度標(biāo)按時應(yīng)注意事項

制訂新藥微生物程度標(biāo)按時

--102cfu≠100cfu，最大可接收程度為200；基于數(shù)據(jù)分析和風(fēng)險評定制訂標(biāo)準(zhǔn)。

--原輔料、給藥路徑及對患者潛在危害綜合考慮到控制菌標(biāo)準(zhǔn)；

產(chǎn)品特征：是否適合微生物生長？是否有抑制微生物生長能力？用藥對象：新生兒、嬰兒、體弱者、病患傷殘…

原輔料、中藥提取物及中藥飲片參考制劑要求及生產(chǎn)工藝特點設(shè)置控制菌檢驗要求。中國藥典微生物檢驗第51頁年版純化水微生物程度檢驗純化水檢測方法比較《中國藥典》年版（Ch.P)是將營養(yǎng)瓊脂(nutrientagarmedium，NA)培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂(rosebengalagarmedium，RA)培養(yǎng)基上培養(yǎng)結(jié)果進行合并計數(shù)作為最終匯報值。國外藥典（EP7.0版、USP35版）是采取一個培養(yǎng)基上培養(yǎng)結(jié)果進行計數(shù)。在培養(yǎng)體系選擇上，歐洲藥典與美國藥典也存在差異。歐洲藥典明確要求了一個培養(yǎng)基為R2A瓊脂培養(yǎng)基，而美國藥典首先對所采取方法不做強制性要求，即便是在推薦方法中也不明確要求某一個培養(yǎng)基。中國藥典微生物檢驗第52頁

制藥用水檢測方法修訂

純化水微生物程度檢驗方法【微生物程度】取本品不少于1ml，經(jīng)薄膜過濾法處理，采?。?A瓊脂培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)不少于5天，依法檢驗（通則1105），1ml供試品中需氧菌總數(shù)不得過100cfu。Ｒ2A瓊脂培養(yǎng)基適用性檢驗試驗

照非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法（通則1105）中“計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢驗”胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基適用性檢驗方法進行，試驗菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌，應(yīng)符合要求。中國藥典微生物檢驗第53頁培養(yǎng)基培養(yǎng)基質(zhì)量確?！囵B(yǎng)基購置與接收培養(yǎng)基由專員負責(zé)購置和接收。在收到培養(yǎng)基后，應(yīng)檢驗以下內(nèi)容：培養(yǎng)基名稱、批號、效期、COA、必要安全和（或）危害數(shù)據(jù)等文件證實。試驗室應(yīng)建立相關(guān)文件和臺帳，在臺帳上包含以下信息：接收日期，名稱、貨號、批號、外觀密封性、使用期、儲存條件等檢驗內(nèi)容。中國藥典微生物檢驗第54頁培養(yǎng)基購置與接收證實文件中國藥典微生物檢驗第55頁

培養(yǎng)基質(zhì)量確?！A存

普通要求：應(yīng)嚴(yán)格按照供給商提供貯存條件、使用期和使用方法進行培養(yǎng)基保留和使用.脫水合成培養(yǎng)基：脫水合成培養(yǎng)基普通為粉狀或顆粒狀形式包裝于密閉容器中。用于微生物選擇或判定添加成份通常為凍干物或液體。培養(yǎng)基購置應(yīng)有計劃，以利于存貨周轉(zhuǎn)（即掌握先購先用標(biāo)準(zhǔn)）。試驗室應(yīng)保留有效培養(yǎng)基目錄清單，清單應(yīng)包含以下內(nèi)容：

——容器密閉性檢驗；

——統(tǒng)計首次開封日期；

——內(nèi)容物感官檢驗。開封后脫水合成培養(yǎng)基，其質(zhì)量取決于貯存條件。經(jīng)過觀察粉末流動性、均勻性、結(jié)塊情況和色澤改變等判斷脫水培養(yǎng)基質(zhì)量改變。若發(fā)覺培養(yǎng)基受潮或物理性狀發(fā)生顯著改變則不應(yīng)再使用。中國藥典微生物檢驗第56頁

培養(yǎng)基質(zhì)量確?！A存

商品化即用型培養(yǎng)基

應(yīng)嚴(yán)格按照供給商提供貯存條件、使用期和使用方法進行保留和使用。試驗室自制培養(yǎng)基避光、干燥保留，必要時在5℃±3℃冰箱中保留，通常提議平板不超出2周～4周，瓶裝及試管裝培養(yǎng)基不超出3個月～6個月，除非一些標(biāo)準(zhǔn)或試驗結(jié)果表明保質(zhì)期比上述更長。提議需在培養(yǎng)基中添加不穩(wěn)定添加劑應(yīng)即配即用，除非一些標(biāo)準(zhǔn)或試驗結(jié)果表明保質(zhì)期更長；含有活性化學(xué)物質(zhì)或不穩(wěn)定性成份固體培養(yǎng)基也應(yīng)即配即用，不可二次融化。培養(yǎng)基貯存應(yīng)建立經(jīng)驗證使用期。觀察培養(yǎng)基是否有顏色改變、蒸發(fā)（脫水）或微生物生長情況，當(dāng)培養(yǎng)基發(fā)生這類改變時，應(yīng)禁止使用。培養(yǎng)基使用或再次加熱前，應(yīng)先取出平衡至室溫中國藥典微生物檢驗第57頁培養(yǎng)基配制普通要求：嚴(yán)格恪守良好試驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供說明。嚴(yán)格按照廠商提供使用說明配制。如重量（體積）pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。

試驗室使用各種基礎(chǔ)成份制備培養(yǎng)基時，應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制，并統(tǒng)計相關(guān)信息，如：培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成份物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積（分裝體積）、無菌辦法（包含實施方式、溫度及時間）、配置日期、人員等，方便溯源。以上需要有詳細SOP，并嚴(yán)格按照SOP執(zhí)行。中國藥典微生物檢驗第58頁

培養(yǎng)基質(zhì)量確?！渲平y(tǒng)計

培養(yǎng)基配制統(tǒng)計。滅菌統(tǒng)計。

培養(yǎng)基質(zhì)量控制統(tǒng)計。

準(zhǔn)確、及時、完整。

給予一個可追蹤性，含有唯一性批號。比如：培養(yǎng)基配制批號有培養(yǎng)基配制日期和配制序號組成。150614A表示該培養(yǎng)基是年6月14日配制，配制序號為A。培養(yǎng)基滅菌指示條標(biāo)識。

培養(yǎng)基標(biāo)簽：培養(yǎng)基名稱、培養(yǎng)基裝量、培養(yǎng)基配制批號、配制人、配制日期、失效日期等。中國藥典微生物檢驗第59頁

培養(yǎng)基質(zhì)量確?！囵B(yǎng)基使用

配制好培養(yǎng)基于室溫或冰箱內(nèi)保留。有效時間依據(jù)驗證結(jié)果或廠家說明來定平板制備和儲存

制備：融化培養(yǎng)基傾注平皿，最少3mm;置于水平面冷卻凝固；儲存：冷卻凝固平皿放于密封袋子中，置于暗處或5±3℃冰箱保留；使用：表面接種固體培養(yǎng)基，先對表面進行干燥；注意不要過分干燥）中國藥典微生物檢驗第60頁

培養(yǎng)基質(zhì)量要求—微生物學(xué)要求

生長率按要求用適當(dāng)方法將適量測試菌株工作培養(yǎng)物接種至固體、半固體和液體培養(yǎng)基中。每種培養(yǎng)基上菌株生長率應(yīng)到達所要求最低限值。選擇性為定量評定培養(yǎng)基選擇性，應(yīng)按照要求以適當(dāng)方法將適量測試菌株工作培養(yǎng)物接種至選擇性培養(yǎng)基和參考培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基選擇性應(yīng)到達要求值。生理生化特征（特異性）確定培養(yǎng)基菌落形態(tài)學(xué)、判別特征和選擇性，或試劑判別特征，以取得培養(yǎng)基或試劑基本特征。性能評價和結(jié)果解釋若按照要求全部測試菌株性能測試到達標(biāo)準(zhǔn)，則該批培養(yǎng)基或試劑性能測試結(jié)果符合要求。若基本要求和微生物學(xué)要求均符合要求，則該批培養(yǎng)基或試劑可被接收。中國藥典微生物檢驗第61頁

《中國藥典》年版相關(guān)培養(yǎng)基改變

無菌檢驗法（通則1101）

Ch.P

Ch.P硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基適用性檢驗靈敏度檢驗無菌性檢驗

中國藥典微生物檢驗第62頁

《中國藥典》年版相關(guān)培養(yǎng)基改變

無菌檢驗法（通則1101）

Ch.P

Ch.P硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基適用性檢驗靈敏度檢驗無菌性檢驗

中國藥典微生物檢驗第63頁

非無菌產(chǎn)品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法（通則1105）

相關(guān)培養(yǎng)基改變

Ch.P

Ch.P營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基

營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）改良馬丁培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）培養(yǎng)基適用性檢驗固體：對照培養(yǎng)基，比值0.5-2液體：對照培養(yǎng)基，試驗菌生長良好中國藥典微生物檢驗第64頁

控制菌檢驗法相關(guān)培養(yǎng)基改變

Ch.P

Ch.P

大腸菌群耐膽鹽革蘭陰性桿菌乳