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考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)[易錯(cuò)提示]滅活病毒誘導(dǎo)法是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法。2.單克隆抗體及其應(yīng)用(1)制備原理:一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,B淋巴細(xì)胞在體外無(wú)限增殖;骨髓瘤細(xì)胞能在體外;B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的細(xì)胞,既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。[易錯(cuò)提示]血清抗體與單克隆抗體的比較名稱(chēng)產(chǎn)生特點(diǎn)血清抗體由漿細(xì)胞分泌一般從血清中分別,產(chǎn)量低、純度低、特異性差單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌特異性強(qiáng)、靈敏度高、能大量制備(2)制備過(guò)程。(3)優(yōu)點(diǎn)。①能精確地識(shí)別的微小差異。②與特定發(fā)生特異性結(jié)合。③可以大量制備。(4)用途。①作為診斷試劑,如利用同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。②用于治療疾病和,如抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)。[答案自填]1.一個(gè)滅活病毒細(xì)胞膜的流淌性雜交細(xì)胞單克隆抗體2.(1)不能無(wú)限增殖雜交瘤(2)雜交瘤細(xì)胞能分泌所需抗體(3)①抗原②抗原(4)②運(yùn)載藥物[模型命題點(diǎn)思索]為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為試驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下試驗(yàn)流程?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)上述試驗(yàn)前必需給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是_____________________________________________________。(2)寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要試驗(yàn)步驟:_____________________________________________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,須要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所接受的培育基屬于,運(yùn)用該培育基進(jìn)行細(xì)胞培育的結(jié)果是__________________________________________________。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是_____________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可接受的方法有________________________________(答出2點(diǎn)即可)。提示:(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲的脾臟用機(jī)械法或用胰蛋白酶處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培育液制成單細(xì)胞懸液(3)選擇培育基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培育1.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較2.單克隆抗體制備過(guò)程中兩次篩選的緣由、方法及目的項(xiàng)目第一次篩選其次次篩選篩選緣由誘導(dǎo)融合后會(huì)得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇性培育獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞篩選方法用特定的選擇培育基篩選:未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“B—B”細(xì)胞、“瘤—瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有雜交瘤細(xì)胞(“B—瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)用多孔培育皿培育,在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的狀況下起先克隆化培育和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞考向1動(dòng)物細(xì)胞融合1.(2024·江蘇選擇考改編)下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程,在人—鼠雜交細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失,通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位。現(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性,只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性,只有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人—人、人—鼠、鼠—鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色體上D.胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上解析:選B。動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中,可以利用滅活的仙臺(tái)病毒促進(jìn)細(xì)胞融合,A項(xiàng)正確。細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體,故不會(huì)是鼠—鼠融合細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤。分析題圖可知,Ⅰ保留X、11號(hào)染色體,Ⅱ保留2、11號(hào)染色體,具有芳烴羥化酶活性,Ⅲ保留X、11、17號(hào)染色體,具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性,所以限制芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上,限制胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上,限制磷酸甘油酸激酶合成的基因位于X號(hào)染色體上,限制乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上,C項(xiàng)、D項(xiàng)正確??枷?單克隆抗體的制備及應(yīng)用2.人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下面是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A.體外培育單個(gè)B淋巴細(xì)胞也可以獲得大量抗HCG的抗體B.過(guò)程③培育后的細(xì)胞均能產(chǎn)生特定抗體C.圖中細(xì)胞集落a可用于大規(guī)模培育,生產(chǎn)抗HCG單克隆抗體D.圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培育過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象解析:選A。體外培育的單個(gè)B淋巴細(xì)胞無(wú)法無(wú)限增殖,故不能獲得大量抗HCG的抗體,A項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程③培育后的細(xì)胞是經(jīng)過(guò)多孔玻璃板篩選得到的雜交瘤細(xì)胞,均能產(chǎn)生特定抗體,B項(xiàng)正確;據(jù)題圖可知,題圖中細(xì)胞集落a能夠產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng),故可用于大規(guī)模培育,生產(chǎn)抗HCG單克隆抗體,C項(xiàng)正確;由于雜交瘤細(xì)胞既保留了鼠瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特點(diǎn),又有B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的作用,所以題圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培育過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象,D項(xiàng)正確。3.(2024·廣州一模)雙特異性抗體(BsAb)是一種能夠同時(shí)結(jié)合兩種抗原的抗體。CD19和CD47是淋巴瘤細(xì)胞廣泛表達(dá)的表面標(biāo)記物(CD19在B細(xì)胞表面普遍存在,CD47在正常組織細(xì)胞上普遍存在)。探討人員將兩種產(chǎn)生不同抗體的雜交瘤細(xì)胞融合成雙雜交瘤細(xì)胞,最終得到了能同時(shí)結(jié)合CD19和CD47的BsAb,它可以結(jié)合同一靶細(xì)胞上兩種不同的抗原,通過(guò)這種“雙靶向”模式增加對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性,在體內(nèi)、體外試驗(yàn)中均可顯著殺傷淋巴瘤細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.同時(shí)注射2種抗原后提取B細(xì)胞,易得大量同時(shí)分泌兩種抗體的漿細(xì)胞B.獲得BsAb的過(guò)程中,篩選雙雜交瘤細(xì)胞的依據(jù)是抗原—抗體的特異性結(jié)合C.運(yùn)用BsAb治療對(duì)正常細(xì)胞的損傷小于聯(lián)合運(yùn)用CD19單抗和CD47單抗D.若BsAb的部分結(jié)構(gòu)發(fā)生變更,可能會(huì)出現(xiàn)治療效果降低的狀況解析:選A。一種漿細(xì)胞只能分泌一種相應(yīng)的抗體,不能同時(shí)分泌兩種抗體,A項(xiàng)錯(cuò)誤;雙雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生BsAb,依據(jù)抗原—抗體的特異性結(jié)合,可篩選出能產(chǎn)生抗CD19和CD47的BsAb的雙雜交瘤細(xì)胞,B項(xiàng)正確;依據(jù)題意可知,CD19在B細(xì)胞表面普遍存在,CD47在正常組織細(xì)胞上普遍存在,運(yùn)用BsAb治療,可識(shí)別同時(shí)具有
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