高考生物一輪復(fù)習(xí)高考題分類匯編 第10單元 現(xiàn)代生物科技專題 專題22克隆技術(shù)（選修3）-人教版高三選修3生物試題

專題22克隆技術(shù)考點六十五植物細胞工程高考試題1.(2013年重慶理綜,T5,6分,★★☆)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述,錯誤的是()A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對細胞的傷害B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細胞C.出芽是細胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達的調(diào)控D.生根時,培養(yǎng)基通常應(yīng)含α萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑點睛:本題考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識,涉及外植體的消毒、植物體細胞雜交、細胞分化及植物生長調(diào)節(jié)劑對組織培養(yǎng)的影響等內(nèi)容,意在考查考生的理解能力以及運用所學(xué)的知識分析問題和解決問題的能力。解析:消毒主要是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對細胞的傷害,A項正確;植物細胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質(zhì)體的融合,帶有細胞壁的愈傷組織細胞不能誘導(dǎo)融合形成染色體加倍的細胞,B項錯誤;出芽和生根都是細胞再分化的結(jié)果,其實質(zhì)是基因的選擇性表達,C項正確;α萘乙酸為生長素類似物,可誘導(dǎo)愈傷組織生根,D項正確。答案:B2.(年江蘇單科,T14,2分,★☆☆)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯誤的是()A.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B.體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D.動物細胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育點睛:本題考查了現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用。考查學(xué)生的綜合應(yīng)用能力。解析:體細胞雜交技術(shù)應(yīng)該屬于植物細胞工程,有兩步:先是植物細胞融合,再是植物組織培養(yǎng)。作為動物細胞融合技術(shù)可用于制備單克隆抗體,但不能用于克隆動物,故B錯誤。答案:B3.(2013年新課標全國理綜Ⅱ,T40,15分,★★☆)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物。回答下列問題:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用酶和酶去除細胞壁,獲得具有活力的,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成組織,然后經(jīng)過形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為。

(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指。假設(shè)甲和乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的原因是

。

(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖,經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。

點睛:本題考查了植物體細胞雜交技術(shù)的應(yīng)用,涉及植物體細胞的雜交、植物組織培養(yǎng)、染色體數(shù)目的變異等。意在考查考生對植物體細胞雜交技術(shù)過程的識記和對多倍體是否可育的理解分析能力。解析:(1)植物體細胞的雜交過程包括植物細胞融合和植物組織培養(yǎng),其過程為先用酶解法即纖維素酶和果膠酶除去植物細胞壁,再用人工誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,雜種細胞再生細胞壁,雜種細胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)(脫分化形成愈傷組織,再分化形成幼根和芽,進而形成完整植株)培育成完整的植株。(2)多倍體是指由受精卵發(fā)育而來,體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體。甲、乙都是二倍體植物,二者有性雜交的后代為異源二倍體,體細胞中無同源染色體,減數(shù)分裂時聯(lián)會紊亂,無法產(chǎn)生正常配子;而植物體細胞雜交產(chǎn)生的后代,細胞內(nèi)含有原物種體細胞內(nèi)的染色體,在減數(shù)第一次分裂過程能進行同源染色體聯(lián)會,產(chǎn)生可育配子。(3)經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等,用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案:(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化)植物體細胞雜交技術(shù)(2)體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體(其他合理答案也可)在減數(shù)分裂過程中,前者染色體聯(lián)會異常,而后者染色體聯(lián)會正常(其他合理答案也可)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(答對其中一個即可)4.(2013年天津理綜,T9,15分,★★☆)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如圖。據(jù)圖回答下列問題:(1)過程①所需的酶是。

(2)過程②后,在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的存在,這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。

(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是。原生質(zhì)體經(jīng)過再生,進而分裂和脫分化形成愈傷組織。

(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和植株的根尖,通過、、染色和制片等過程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

(5)采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。如圖是用該引物對雙親及再生植株1~4進行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷,再生植株1~4中一定是雜種植株的有。

(6)對雜種植株進行接種實驗,可篩選出具有高抗性的雜種植株。

點睛:本題以抗黑腐病花椰菜的培育為信息載體,綜合考查了植物體細胞雜交、植物組織培養(yǎng)、細胞分裂裝片的制作觀察、PCR圖譜的識別等相關(guān)內(nèi)容,意在考查考生識圖獲取信息、對知識的理解和綜合運用能力。解析:(1)過程①表示原生質(zhì)體的制備,用酶解法即纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁。(2)用于融合的兩個細胞,一個是黑芥苗的葉肉細胞,一個是花椰菜的根部細胞,其中供體使用的葉肉細胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體,可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志。(3)原生質(zhì)體沒有細胞壁的保護,需要加入適宜濃度的甘露醇以保證一定的滲透壓,以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性;原生質(zhì)體通過細胞壁再生形成雜種細胞,再經(jīng)過脫分化形成愈傷組織。(4)若要分析再生植株染色體變異類型,需要將再生植株細胞中染色體和黑芥苗與花椰菜細胞中的染色體制片觀察進行比較,裝片制作的基本程序是解離、漂洗、染色、制片。(5)根據(jù)圖譜,花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段,黑芥含有堿基對為1000、1300和1500的片段,再生植株3,只含有長度為300和600的片段,與花椰菜一致,1、2、4既含有花椰菜DNA片段,又含有黑芥DNA片段,為雜種植株。(6)對雜種植株接種黑腐病菌,若不患黑腐病即為具有高抗性的雜種植株。答案:(1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質(zhì)體完整性細胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌5.(年江蘇單科,T31,8分,★★☆)某研究組對秈稻開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究,請回答下列問題:(1)2,4D常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo),對形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進愈傷組織再分化,在配制分化培養(yǎng)基時需(填“升高”、“保持”或“降低”)2,4D的濃度。

(2)當秈稻愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時,出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點,但不能繼續(xù)出芽,通常在培養(yǎng)基中添加,以促進幼苗形成。

(3)研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是(填下列序號)。

①綠色芽點細胞排列松散②剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細胞發(fā)生質(zhì)壁分離③胚狀體細胞中有葉綠體④分化的愈傷組織內(nèi)各細胞的形態(tài)大小一致(4)經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體,其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對照,葉綠素總量不變。某同學(xué)用(填序號:①綠色;②紅色色;③藍紫色色;④黃色)光照射突變體和對照葉片,檢測到兩者光合放氧速率差異不大。若取等量色素提取液進行層析,會發(fā)現(xiàn)突變體第條色素帶(自上而下)窄于對照組。

(5)胚乳(3n)由一個精子與兩個極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織,培育三倍體,需適時剔除胚,以免胚的存在影響愈傷組織細胞的,還可避免再生苗中混有。

點睛:本題是對植物組織培養(yǎng)知識的考查,目的是考查學(xué)生的實踐應(yīng)用能力。解析:(1)2,4D是生長素類似物,其含量高時,有利于細胞脫分化,含量降低時,有利于促進愈傷組織再分化。(2)在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中細胞分裂素多時,有利于誘導(dǎo)愈傷組織生芽,生長素含量較多時,有利于誘導(dǎo)愈傷組織生根,促進幼苗形成。(3)用顯微鏡可以看到細胞內(nèi)的葉綠體,而胚狀體細胞內(nèi)含有葉綠體,故③正確。(4)葉綠素主要吸收紅光和藍紫光,故在綠光和黃光的照射下,突變體和對照組的葉片光合作用無明顯差異。突變體的葉綠素a與葉綠素b的比值大于對照組,而葉綠素的總量不變,則葉綠素a的含量增多、葉綠素b的含量減少,故色素分離的結(jié)果是濾紙條自上而下的第4條色素帶窄于對照組。(5)剔除胚是防止影響愈傷組織細胞增殖分化,還可避免出現(xiàn)二倍體幼苗。答案:(1)降低(2)適量生長素(3)③(4)①④4(5)增殖與分化二倍體幼苗6.(年天津理綜,T8,14分,★★☆)絮凝性細菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能與石油污水中的懸浮顆粒和有機物等形成絮狀沉淀,起到凈化污水的作用。為進一步提高對石油污水的凈化效果,將絮凝性細菌和石油降解菌融合,構(gòu)建目的菌株。其流程圖如下。據(jù)圖回答:(1)溶菌酶的作用是。

(2)PEG的作用是。

(3)經(jīng)處理后,在再生培養(yǎng)基上,未融合的A、B難以生長。圖中AB融合菌能生長和繁殖的原因是

。

(4)目的菌株的篩選:篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有的培養(yǎng)基上生長的AB融合菌,選擇效果最好的作為目的菌株。

(5)為探究目的菌株不同發(fā)酵時間發(fā)酵液的絮凝效果,將目的菌株進行發(fā)酵培養(yǎng),定時取發(fā)酵液,加入石油污水中;同時設(shè)置為對照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后,分別測定上層水樣的石油濃度和COD值(COD值越高表示有機物污染程度越高),計算石油去除率和COD去除率,結(jié)果如下圖。

(6)目的菌的種群增長曲線呈型。在40~44小時,發(fā)酵液對石油污水的凈化效果最好,其原因是

。

點睛:本題以細菌的融合為背景,考查植物原生質(zhì)體雜交的過程、操作及應(yīng)用,是對知識遷移、應(yīng)用能力的考查。解析:(1)絮凝性細菌與石油降解菌融合時,首先需要溶菌酶分解細胞壁獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體融合時,常用PEG誘導(dǎo)融合。(3)兩種原生質(zhì)體A、B分別經(jīng)過熱處理和紫外線處理失活難以生長,但兩者失活部位不同,A、B融合后活性部位互補,故仍可在再生培養(yǎng)基上生長。(4)我們需要的目的菌株是既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有石油的培養(yǎng)基上生長。(5)設(shè)計實驗探究目的菌株不同發(fā)酵時間發(fā)酵液的絮凝效果時,實驗變量是發(fā)酵液的有無,對照組是不加發(fā)酵液的石油污水,實驗組是添加發(fā)酵液的石油污水。(6)據(jù)圖知,目的菌株呈“S”型增長。40~44小時,目的菌株及其產(chǎn)生的絮凝性高分子化合物的含量較高,發(fā)酵液對石油污水的凈化效果最好。答案:(1)分解細胞壁(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合(3)兩親本失活部位不同,融合后活性部位互補(4)石油(5)不加發(fā)酵液的石油污水(6)S此期間,目的菌及其產(chǎn)生的絮凝活性高分子化合物的含量高模擬試題1.(2013寧波模擬)下列有關(guān)植物克隆技術(shù)的敘述中,錯誤的是()A.誘導(dǎo)某些植物的愈傷組織能使其直接發(fā)育成花芽B.植物組織培養(yǎng)中通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)的配比可以實現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成C.植物愈傷組織通過液體懸浮培養(yǎng)能分散成單細胞,這種單細胞能發(fā)育成胚狀體D.通過大量培養(yǎng)特定細胞系,可以克隆出大量能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細胞解析:植物組織培養(yǎng)中通過調(diào)節(jié)植物激素的配比可以實現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成,A正確、B錯誤。幾乎所有的植物細胞都有全能性,可培養(yǎng)為胚狀體,進而發(fā)育為完整植株,C正確。在一定的植物激素配比條件下,愈傷組織可只增殖不分化,從而克隆出大量能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細胞,如紫草素的提取,D正確。答案:B2.(2013江蘇南京、鹽城一模)如圖為某二倍體植株花藥中未成熟花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關(guān)敘述正確的是()A.過程①②表示脫分化,過程③表示再分化B.過程①②需要避光,過程③需要照光C.過程①②③說明花粉細胞具有全能性D.過程③獲得的完整植株自交后代不會發(fā)生性狀分離解析:過程①表示脫分化,過程②表示再分化,過程③表示叢芽的發(fā)育過程;其中,過程①需要避光,過程②③需要照光,A、B錯誤。過程①②③獲得了完整植株,說明花粉細胞具有全能性,C正確。該過程獲得的植株為單倍體,高度不育,D錯誤。答案:C3.(2013金華十校模擬)如圖表示利用植物細胞工程對棉花進行改良的過程,據(jù)圖分析錯誤的是()A.①過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶處理B.②過程定向改變原生質(zhì)體的遺傳特性C.③過程需要通過液體懸浮培養(yǎng)D.④過程需用適宜濃度的生長調(diào)節(jié)劑處理解析:①過程需用纖維素酶和果膠酶處理去掉細胞壁,獲得原生質(zhì)體,A正確。②過程為轉(zhuǎn)基因技術(shù),能定向改變原生質(zhì)體的遺傳特性,B正確。③過程需要在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),C錯誤。④過程需用適宜濃度的生長調(diào)節(jié)劑處理,促進根、芽的發(fā)育,D正確。答案:C4.(徐州模擬)下列關(guān)于植物體細胞雜交技術(shù)的敘述,錯誤的是()A.獲得原生質(zhì)體的過程需要用到纖維素酶和果膠酶B.利用植物體細胞雜交可以獲得某種多倍體植株C.植物體細胞雜交過程就是原生質(zhì)體融合的過程D.可根據(jù)細胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來鑒定雜種細胞解析:利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,才能獲得原生質(zhì)體;通過植物體細胞雜交可獲得多倍體,并可根據(jù)細胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來鑒定是否是雜種細胞。植物體細胞雜交過程包括原生質(zhì)體融合和植物組織培養(yǎng)過程。答案:C5.(廣州模擬)紅豆杉是瀕危植物,其樹皮產(chǎn)生的紫杉醇對癌癥有一定的療效。如圖是紅豆杉植株組織培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)的流程圖。請據(jù)圖回答下列問題。(1)圖中②為愈傷組織,通過B過程可最終產(chǎn)生新的植株,通過C過程可產(chǎn)生大量細胞,則圖中A、B、C分別表示的過程為。其中B過程的實質(zhì)是。

(2)對⑤的培養(yǎng)一般要采用培養(yǎng)基,且要不斷通入無菌空氣并進行攪拌,其目的是

。

(3)對⑤的培養(yǎng)可獲得代謝產(chǎn)物——紫杉醇,但培養(yǎng)后期紫杉醇產(chǎn)量下降,其原因包括等。

(4)若①是紅豆杉(基因型為DdTt)的花藥,可選用(填編號)制成人工種子,該“種子”萌發(fā)的幼苗用處理,可快速獲得純種植株,該植株的基因型為。

解析:圖中①為紅豆杉離體的植物器官、組織或細胞(外植體),②為愈傷組織,③為試管苗(胚狀體),④為植物體,⑤為大量的紅豆杉細胞;再分化的實質(zhì)是細胞內(nèi)基因的選擇性表達。⑤的培養(yǎng)目的是使細胞快速增殖,一般采用液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中通入無菌空氣是為了保證細胞生長過程中氧氣的供應(yīng),不斷攪拌的目的是讓細胞和培養(yǎng)液充分接觸;液體培養(yǎng)的后期,由于細胞代謝產(chǎn)物的積累,以及營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,導(dǎo)致細胞數(shù)量減少,其代謝產(chǎn)物減少;紅豆杉的花藥經(jīng)培養(yǎng)可獲得單倍體,再經(jīng)秋水仙素處理,可使染色體加倍,快速獲得純種植株;如果親本的基因型為DdTt,則獲得的純種植株的基因型有DDTT、DDtt、ddTT、ddtt四種。答案:(1)脫分化、再分化、有絲分裂基因的選擇性表達(2)液體保證氧氣的供應(yīng)、使細胞和培養(yǎng)液充分接觸(3)活細胞數(shù)量減少,某些代謝產(chǎn)物的積累(4)③秋水仙素DDTT、DDtt、ddTT、ddtt考點六十六動物細胞工程高考試題1.(2013年重慶理綜,T2,6分,★☆☆)如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是()A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細胞B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C.③同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群點睛:本題聯(lián)系流程圖考查單克隆抗體制備過程,意在考查考生對單克隆抗體制備流程的識記能力和理解能力。解析:①是獲得的已經(jīng)免疫的效應(yīng)B細胞,即漿細胞,A項錯誤;②中使用胰蛋白酶使組織塊分散為單個細胞,B項錯誤;③同時具有效應(yīng)B細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性,C項錯誤;④是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細胞,D項正確。答案:D2.(2013年浙江理綜,T6,6分,★★☆)實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()實驗小鼠皮膚組織皮膚細胞培養(yǎng)細胞1培養(yǎng)細胞2A.甲過程需要對實驗小鼠進行消毒B.乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化C.丙過程得到的細胞大多具有異倍體核型D.丁過程得到的細胞具有異質(zhì)性點睛:本題考查動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識,意在考查考生對相關(guān)知識靈活運用的能力。解析:圖示甲過程是進行動物細胞培養(yǎng)的第一步——獲取動物組織,為了避免雜菌的污染,應(yīng)進行消毒處理,A項正確;乙過程表示將皮膚組織分散成單個細胞,可用胰蛋白酶消化,B項正確;丙過程表示由組織細胞培養(yǎng)到細胞系的過程,小鼠細胞是二倍體細胞,其細胞系大多數(shù)為有限細胞系,能繼續(xù)培養(yǎng)下去具有異倍體核型的連續(xù)細胞系很少,C項錯誤;丁過程表示通過選擇或純化從細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)的細胞株的過程,細胞株具有異質(zhì)性,D項正確。答案:C3.(2010年浙江理綜,T4,6分,★☆☆)下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D.惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)點睛:本題考查動物細胞培養(yǎng)的特點,是對識記能力和理解能力的考查。解析:動物細胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),原代培養(yǎng)到一定程度后要進行傳代,因為細胞有接觸抑制現(xiàn)象,當細胞接觸時就會停止分裂。在細胞培養(yǎng)過程中細胞進行有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細胞基因型相同。細胞在培養(yǎng)過程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會死亡,留下來的細胞就是發(fā)生了癌變的細胞,具有不死性,可進行傳代培養(yǎng)。答案:D4.(2009年浙江理綜,T1,6分,★☆☆)用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng),下列敘述正確的是()A.都需要用CO2培養(yǎng)箱B.都需要用液體培養(yǎng)基C.都要在無菌條件下進行D.都可體現(xiàn)細胞的全能性點睛:本題考查動植物細胞培養(yǎng)的條件及比較,是對識記能力和比較、判斷能力的考查。解析:動物細胞培養(yǎng)需用CO2培養(yǎng)箱;動物成體的體細胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基,不能體現(xiàn)細胞的全能性;植物成體的體細胞離體培養(yǎng)一般用固體培養(yǎng)基,能體現(xiàn)細胞的全能性;動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)都要在無菌條件下進行。答案:C5.(2013年福建理綜,T33,10分,★☆☆)克隆豬成功率較低,與早期胚胎細胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl2基因是細胞凋亡抑制基因,用PCR技術(shù)可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平,進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如下圖。請回答:(1)圖中重組細胞的細胞核來自細胞,早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育,經(jīng)桑椹胚、囊胚和胚最終發(fā)育為克隆豬。

(2)在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl2cDNA的分子數(shù),進而計算總mRNA中Bcl2mRNA的分子數(shù),從而反映出Bcl2基因的轉(zhuǎn)錄水平。①圖中X表示過程。

②從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl2mRNA的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列設(shè)計合成用于PCR擴增,PCR過程第一輪循環(huán)的模板是。

點睛:本題綜合考查PCR技術(shù)、細胞工程和早期胚胎發(fā)育等相關(guān)知識,意在考查考生從材料中獲取信息并進行分析的能力及結(jié)合已有知識解決相關(guān)問題的能力。解析:(1)重組細胞的細胞核來自具有優(yōu)良性狀的親本,據(jù)圖知,應(yīng)由良種豬提供細胞核,所以細胞核來自良種豬的體細胞;早期胚胎發(fā)育經(jīng)過桑椹胚、囊胚和原腸胚等階段,最終發(fā)育為個體。(2)①圖中X過程是由mRNA得到cDNA,屬于反轉(zhuǎn)錄。②利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物,用于PCR擴增。模板是目的基因,即Bcl2cDNA。答案:(1)體原腸(2)①反轉(zhuǎn)錄②引物Bcl2cDNA6.(2009年山東理綜,T35,8分,★☆☆)人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中,經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒,該病毒表面的A蛋白為主要抗原,且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖:請回答:(1)過程①代表的是。

(2)過程②構(gòu)建A基因表達載體時,必須使用和兩種工具酶。

(3)過程③采用的實驗技術(shù)是,獲得的X是。

(4)對健康人進行該傳染病免疫預(yù)防時,可選用圖中基因工程生產(chǎn)的所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時,可從疑似患者體內(nèi)分離病毒,與已知病毒進行比較;或用圖中的進行特異性結(jié)合檢測。

點睛:本題以流程圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過程,考查了基因工程、動物細胞工程等現(xiàn)代生物科技及其應(yīng)用,是對識記能力和識圖、分析能力的考查。解析:(1)圖中過程①表示以RNA為模板合成DNA的過程,代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過程。(2)構(gòu)建基因表達載體中需要限制酶來切割以獲取目的基因,同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端,再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體。(3)過程③是將骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的過程,獲得的是雜交瘤細胞,其具備了骨髓瘤細胞的無限增殖的特性和B淋巴細胞的產(chǎn)生抗體的特性,從而制備單克隆抗體。(4)本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原,故而可選用通過基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗;確診時為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒,可以進行核酸序列的比對;也可以利用單克隆抗體具備特異性,利用抗A蛋白單克隆抗體進行特異性結(jié)合檢測,判斷病毒表面是否有A蛋白的存在,進一步進行檢測是否為目的RNA病毒。答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶、限制性內(nèi)切酶)DNA連接酶(兩空可以互換)(3)細胞融合雜交瘤細胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體模擬試題1.(2013杭州一檢)以下有關(guān)動物細胞、組織培養(yǎng)的表述中正確的是()A.動物細胞培養(yǎng)中,含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱用來調(diào)控pH和溫度B.動物組織培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)組織分化C.傳代培養(yǎng)的細胞因最接近于體內(nèi)細胞的生長特性,常用于藥物測試研究D.動物細胞培養(yǎng)過程中,首先要用胃蛋白酶處理部分組織使細胞分散獲得單個細胞解析:在適宜的條件下,培養(yǎng)的動物細胞可發(fā)生分化,也可能只增殖不分化,B錯誤。傳代培養(yǎng)的細胞中遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生變化,因此與體內(nèi)細胞不接近,C錯誤。胃蛋白酶作用的最適pH為2.0左右,而動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,所以不能用胃蛋白酶處理動物組織,D錯誤。答案:A2.(2013揚州質(zhì)檢)下列方案中不能制備出抗H1N1流感病毒單克隆抗體的是()A.將H1N1流感病毒抗原的基因?qū)牍撬枇黾毎?并使該基因表達B.將抗H1N1流感病毒抗體的基因?qū)牍撬枇黾毎?并使該基因表達C.將產(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,篩選出雜交瘤細胞并進行體外大規(guī)模培養(yǎng)D.將骨髓瘤細胞中的癌基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的B淋巴細胞中,并使癌基因表達解析:抗體是由抗體基因編碼的,而非抗原基因編碼的,因此A錯誤、B正確。將骨髓瘤細胞中的癌基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的B淋巴細胞中,并使癌基因表達,可使B淋巴細胞獲得無限增殖能力,相當于雜交瘤細胞,可用于制備抗H1N1流感病毒單克隆抗體,C、D正確。答案:A3.(北京東城區(qū)模擬)下列與細胞工程技術(shù)相關(guān)的表述中,不正確的是()A.植物體細胞雜交技術(shù)可以克服常規(guī)的遠緣雜交不親和障礙B.動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分基本相同C.動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同D.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細胞的全能性解析:植物體細胞雜交可以把來自不同植物細胞融合在一起,克服了自然狀態(tài)下植物間遠緣雜交不親和障礙,A正確。植物細胞培養(yǎng)基除基本成分外還需要植物激素,而動物細胞培養(yǎng)液需加動物血清,B錯誤。細胞融合原理是膜的流動性,C正確。融合后的細胞能培育成一個植物個體,體現(xiàn)了植物細胞全能性,D正確。答案:B4.(2013唐山一模)某實驗室做了下圖所示的實驗研究,請據(jù)圖回答:(1)與纖維母細胞相比,過程①形成的誘導(dǎo)干細胞的全能性較。

(2)過程②是誘導(dǎo)干細胞中基因的結(jié)果。

(3)過程③需要用