中藥化學(xué)成分的一般研究方法

中藥化學(xué)成分的一般研究方法化學(xué)結(jié)構(gòu)分類法：主要依據(jù)分子的骨架結(jié)構(gòu)進(jìn)行分類。包括開鏈脂肪族化合物類（如脂肪酸、糖類及絕大多數(shù)氨基酸等）、脂環(huán)化合物類（如萜類、甾體及某些生物堿等）、芳環(huán)化合物類（如酚類、醌類等）、雜環(huán)化合物（如生物堿、黃酮類、核酸等）。只關(guān)注化合物的結(jié)構(gòu)，不能反映內(nèi)在聯(lián)系。

生理活性分類法：依據(jù)化合物所具有的生理活性進(jìn)行分類，是一種常用的分類方法。每類化合物中結(jié)構(gòu)種類繁多、生源關(guān)系復(fù)雜。來源分類法：依據(jù)植物分類法將化合物按其植物來源進(jìn)行分類。動(dòng)物和部分微生物通常將其最終代謝產(chǎn)物排出體外，而植物多將其儲(chǔ)存于體內(nèi)。許多類別的植物化學(xué)成分常存在于特定的植物種、屬、族或科中，而每個(gè)植物中也常含有許多結(jié)構(gòu)類似的成分。激素、維生素、強(qiáng)心苷從罌粟未成熟蒴果中獲得的鴉片含有４０多種生物堿，這些生物堿幾乎來源于同一前體化合物。因此該類化合物成為罌粟屬植物的特征成分，被統(tǒng)稱為鴉片生物堿。

按其生物合成來源進(jìn)行分類：植物體經(jīng)光合作用產(chǎn)生的糖類是所有植物成分的生物合成的根本，由此可直接產(chǎn)生核酸、多糖、苷類糖基部分等。由桂皮酸和乙酸-丙二酸途徑產(chǎn)生黃酮、鞣質(zhì)等酚類，由氨基酸途徑產(chǎn)生肽類、蛋白質(zhì)和生物堿等，由乙酸-丙二酸途徑產(chǎn)生脂肪酸和聚酮類，由甲戊二羥酸途徑產(chǎn)生萜類和甾體成分等?；谏吹姆诸惒粌H簡便實(shí)用，而且成功地簡化了對復(fù)雜結(jié)構(gòu)的理解。

生源結(jié)合化學(xué)分類法：是將生源分類法和化學(xué)結(jié)構(gòu)分類法相結(jié)合的分類方法。優(yōu)點(diǎn)：能夠更好地反映天然化合物的生源和化學(xué)本質(zhì)及其相互關(guān)系。中藥化學(xué)成分類型分類糖類苷類醌類苯丙素類黃酮類萜類和揮發(fā)油生物堿甾體類三萜類鞣質(zhì)1糖類：為中藥中普遍存在的成分類型，包括單糖、低聚糖、多糖。單糖是糖的基本單位；低聚糖是由2~9個(gè)單糖脫水縮合而成的化合物。多糖是由10個(gè)以上至上千個(gè)單糖脫水縮合而成的高聚物。

D-葡萄糖D-甘露糖D-半乳糖2.苷類

為一類經(jīng)水解后可產(chǎn)生糖和非糖兩部分的化合物。非糖部分叫苷元。苷具親水性，苷元具親脂性。熊果苷天麻苷丹皮苷3.醌類化合物是一類分子中具有醌式結(jié)構(gòu)的化合物。分子中多具有酚羥基，有一定的酸性。游離醌類多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有機(jī)溶劑，微溶或難溶于水。結(jié)合成苷后，極性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在熱水中也可溶解。4.苯丙素類化合物是一類分子中以苯丙基為基本骨架單位(C6-C3)構(gòu)成的化合物。其中香豆素和木脂素為其典型化合物。丁香酚茴香醚α-細(xì)辛醚β-細(xì)辛醚

5.黃酮類化合物泛指具有兩個(gè)苯環(huán)通過中間三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一類化學(xué)成分。多具有酚羥基，顯酸性。6.萜類和揮發(fā)油凡由甲戊二羥酸衍生、且其基本母核的分子式符合(C5H8)n通式的衍生物為萜類化合物。揮發(fā)油又稱精油，是一類可隨水蒸氣蒸餾、與水不相混溶的油狀液體物質(zhì)。為無色或淡黃色的透明油狀液體，具芳香味，常溫下能揮發(fā)，有較強(qiáng)的折光性和旋光性甲戊二羥酸

萜類化合物的分類及分布分類碳原子數(shù)通式（Ｃ５Ｈ８）n

分布半萜５n＝１植物葉單萜１０n＝２揮發(fā)油倍半萜１５n＝３揮發(fā)油二萜２０n＝４樹脂、苦味素、植物醇二倍半萜２５n＝５海綿、植物病菌，昆蟲代謝物三萜３０n＝６皂苷、樹脂、植物、乳汁四萜４０n＝８植物胡蘿卜素多聚萜7.5×103_3×105n＞８橡膠、硬橡膠二、萜視窗：化學(xué)家盧齊卡盧齊卡（ＬｅｏｐｏｌｄＲｕｚｉｃｋａ），瑞士化學(xué)家，從１９１６年開始研究天然香味化合物，發(fā)現(xiàn)對香料業(yè)有重要意義的麝香酮（ｍｕｓｃｏｎｅ）和香貓酮（ｃｉｖｅｔｏｎｅ），其分子中分別具有15和17碳環(huán)。此前，人們認(rèn)為碳原子數(shù)大于8的環(huán)太大不穩(wěn)定，不可能存在。盧齊卡的發(fā)現(xiàn)促進(jìn)了對這些化合物的研究。２０世紀(jì)３０年代盧齊卡確定了睪丸激素等幾種雄性激素的分子結(jié)構(gòu)并進(jìn)行了合成制備。１９３９年盧齊卡因研究環(huán)狀分子和萜烯（多種植物油中的一類烴，聚亞甲基和高級萜烯）獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。

視窗：罌粟幾千年前人類就發(fā)現(xiàn)罌粟果有鎮(zhèn)痛和迷幻作用。蘇美爾人早在公元前4000年就把鴉片（罌粟果的汁烘干制成）用作麻醉藥。到公元前3400年，在兩河流域的古巴比倫，這種植物已經(jīng)被廣泛種植了，而且被冠以“joyplant”的美名。公元前兩世紀(jì)，鴉片被古希臘名醫(yī)蓋侖描述為包治百病的良藥。在《圣經(jīng)》與荷馬的《奧德賽》里，鴉片被稱之為“忘憂藥”，上帝也使用它。有關(guān)鴉片的使用和上癮在羅馬時(shí)代就已經(jīng)很普遍了。１６世紀(jì)的瑞士醫(yī)生和煉金師帕拉塞爾蘇斯發(fā)明了鴉片的酒精制劑———鴉片酊，從而鴉片開始在歐洲廣泛使用。

鴉片，俗稱大煙，醫(yī)學(xué)上作為麻醉性鎮(zhèn)痛藥，長期或過量使用有依賴性；吸食鴉片后，可以初致欣快感，產(chǎn)生夢幻現(xiàn)象，出現(xiàn)高度心理及生理依賴性，長期使用后停止則會(huì)發(fā)生渴求藥物、不安、流淚、易怒、發(fā)抖、冷顫、厭食、便秘、腹瀉、身體蜷曲、抽筋等戒斷癥狀；過量使用造成急性中毒，癥狀包括昏迷、呼吸抑制、低血壓、瞳孔變小等，嚴(yán)重的引起呼吸抑止致人死亡。7.生物堿：為一類存在于生物體內(nèi)分子中含有氮原子的有機(jī)化合物四氫吡咯水蘇堿紅古豆堿莨菪堿8.甾體類化合物:具有環(huán)戊烷駢多氫菲甾核的化合物。發(fā)泡性、溶血性、魚毒性9.三萜類化合物:是一類基本骨架由30個(gè)碳原子組成的萜類化合物。10.鞣質(zhì)：又稱單寧或鞣酸，為一類分子較大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多元酚類化合物的總稱。可與蛋白質(zhì)結(jié)合成難溶于水的鞣酸蛋白。為親水性物質(zhì)。其水溶液遇重金屬鹽如醋酸鉛、醋酸銅等能產(chǎn)生沉淀，還能與多種生物堿鹽類形成沉淀。齊墩果烷

兒茶素

酸性成分黃酮、蒽醌、香豆素、有機(jī)酸、鞣質(zhì)

中性成分強(qiáng)心苷、皂苷（甾體）堿性成分生物堿兩性成分兩性生物堿（含COOH、OH等）分類

脂溶性成分：苷元、生物堿水溶性成分：苷、生物堿鹽按溶解性分類生物合成途徑生物合成一次代謝產(chǎn)物葉綠素、糖、蛋白質(zhì)、脂類、核酸二次代謝產(chǎn)物生物堿、黃酮、萜等乙酸——丙二酸途徑：AA-MA乙酰輔酶Ａ莽草酸葡萄糖代謝甲戊二羥酸途徑：MVA桂皮酸途徑氨基酸途徑飽和脂肪酸酚類蒽醌萘醌甲戊二羥酸焦磷酸二甲烯丙酯萜類甾體苯丙氨酸（酪氨酸）生物堿香豆素黃酮木脂素綠色植物含有葉綠素，光合作用將乙酸-丙二酸途徑(acetate-malonatepathway，AA-MA途徑)(Cn+2，n為偶數(shù))脂肪酸、酚類、醌類甲戊二羥酸途徑(mevalonicacidpathway，MVA途徑)單萜

倍半萜類二萜類甲戊二羥酸MVA三萜類甾體類胡蘿卜素反式角鯊烯萜類、甾類(四)氨基酸途徑(aminoacidpathway)

大多數(shù)生物堿類成分由此途徑生成。有些氨基酸，如鳥氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸等，經(jīng)脫羧成為胺類,再經(jīng)過一系列化學(xué)反應(yīng)(甲基化、氧化、還原、重排等)生成各種生物堿(三)莽草酸途徑(shikimicacidpathway)

此途徑由莽草酸通過苯丙氨酸，生成桂皮酸，再由桂皮酸生成各種苯丙素類化合物?，F(xiàn)也被稱為桂皮酸途徑。----香豆素黃酮木脂素(五)復(fù)合途徑

許多二級代謝產(chǎn)物由上述生物合成的復(fù)合途徑生成。即分子中各個(gè)部分由不同的生物合成途徑產(chǎn)生。如查耳酮類、二氫黃酮類化合物的A環(huán)和B環(huán)分別由乙酸-丙二酸途徑和莽草酸途徑生成。一些萜類生物堿分別來自甲戊二羥酸途徑及莽草酸途徑或乙酸-丙二酸途徑。案例紫杉醇的提取分離紫杉醇是來源于植物的最引人矚目的抗癌藥物。盡管紫杉醇抗癌活性顯著并廣泛應(yīng)用于臨床，其生產(chǎn)仍嚴(yán)重受制于紅豆杉屬植物資源匱乏、原料中含量極低且含量不穩(wěn)定等問題。紫杉醇在水中的溶解度很小，溶于氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇和甲醇。紫杉醇的提取方法一般采用乙醇或甲醇回流提取，然后用溶劑去除酯類，這種方法浸膏雜質(zhì)多、生產(chǎn)成本高。也有人采用２０％～５０％乙醇-水回流提取，再采用活性碳處理，可減少提取液中雜質(zhì)的含量?；厥杖軇┖蟮慕嗖捎茫茫龋玻茫欤?Ｈ２Ｏ、ＣＨＣｌ３-Ｈ２Ｏ或ＥｔＯＡｃ-Ｍｅ２ＣＯ（１∶１）進(jìn)行溶劑萃取，萃取后的浸膏紫杉醇含量提高。進(jìn)一步的分離可以采用硅膠、反相硅膠或凝膠柱色譜分離得到包括紫杉醇在內(nèi)的各種紫杉烷類化合物。但使用上述分離材料無論采用常壓、低壓或高壓液相色譜技術(shù)均只能得到紫杉醇（１）與ｃｅｐｈａｌｏ-ｍａｎｎｉｎｅ（２）和７-epi-１０-ｄｅａｃｅｔｙｌｔａｘｏｌ（３）的混合物。最后分離純化需要使用氰基、苯基或其他特殊色譜柱，采用高效液相色譜制備技術(shù)才能得到高純度紫杉醇。第二節(jié)中藥有效成分的提取分離方法溶劑提取法水蒸氣蒸餾法超臨界流體萃取法其他方法對溶劑的要求1、溶解度2、不能發(fā)生化學(xué)反應(yīng)3、安全無毒經(jīng)濟(jì)易得4、沸點(diǎn)易適中，便于回收，反復(fù)使用水：生物堿鹽、苷類、有機(jī)酸鹽、糖冷水：發(fā)生酶解反應(yīng)，雜質(zhì)多熱水：效率高，揮發(fā)性成分損失，熱敏性成分易破壞親水性有機(jī)溶劑：MeOH、EtOH、Me2CO等

親脂性有機(jī)溶劑：CHCl3、Et2O、Ben、Et2OAc

常用溶劑：溶劑提取法常用溶劑極性親水性極性小水甲醇、乙醇正丁醇乙酸乙酯氯仿乙醚苯不溶于水丙酮二氯甲烷四氯化碳石油醚化學(xué)成分的極性：被提取成分的極性是選擇提取溶劑最重要的依據(jù)。

1影響化合物極性的因素：

(1)化合物分子母核大小（碳數(shù)多少）：分子大、碳數(shù)多，極性??；分子小、碳數(shù)少，極性大。

(2)取代基極性大?。涸诨衔锬负讼嗤蛳嘟闆r下，化合物極性大小主要取決于取代基極性大小。常見基團(tuán)極性；酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷舉例：判斷下列各組化合物極性大小。ABC提取方法冷提法：浸漬法滲漉法熱提法：煎煮法回流提取法連續(xù)回流提取法（索氏提取法）浸漬法

水類或稀醇為溶劑。適于成分遇熱易破壞或含多糖較多的中藥的提取。缺點(diǎn)為浸出效果較差，水提取液易發(fā)霉，提取液體積大，浸出時(shí)間長。粉碎好的藥材放入提取用的容器中，加入溶劑使沒過藥面，浸泡12小時(shí)。濾出溶劑，加入新的溶劑繼續(xù)提取加入溶劑浸泡12小時(shí)后浸漬法滲漉法

各類溶劑均可。此法由于溶液濃度差大，浸出效果好，且不破壞成分。缺點(diǎn)為溶液體積大，時(shí)間長。煎煮法

為中藥水提取最常用的方法。煎煮法必須以水為溶劑。此法提取效率高，但遇熱破壞成分要注意。且含多糖多的成分過濾困難。儀器加熱回流裝置加快溶出速度，省時(shí)適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜較難溶出的組分特點(diǎn)通過更換溶劑，使提取更完全回流提取法

儀器索氏提取器節(jié)省溶劑，回收方便適宜受熱穩(wěn)定的藥物費(fèi)時(shí)無需過濾特點(diǎn)連續(xù)回流提取法水蒸汽蒸餾揮發(fā)性CO2超臨界流體萃取法特點(diǎn)超臨界流體密度＝液體超臨界流體粘度＝氣體

優(yōu)點(diǎn)1、萃取能力強(qiáng)，大大提高效率2、溫度低，熱敏性、易氧化分解的物質(zhì)不易破壞3、時(shí)間短，2~4小時(shí)可完成4、提取物無溶劑殘留物5、提取物質(zhì)量穩(wěn)定，標(biāo)準(zhǔn)易控制其它方法升華法組織破碎提取法壓榨法超聲提取法超聲提取法將樣品容器置超聲波振蕩器中振蕩提取簡便、省時(shí)、提取率高有時(shí)會(huì)發(fā)生降解、解聚、轉(zhuǎn)化或催化氧化還原反應(yīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分離精制方法1.溶劑法酸堿溶劑法溶劑分配法系統(tǒng)溶劑萃取法逆流分溶法（CCD）液滴逆流色譜（DCCC）破壞乳化的方法有：（1）加熱敷；（2）將乳化層抽濾；（3）長時(shí)間放置（24小時(shí)以上）。逆流分溶法（CCD）液滴逆流色譜（DCCC）沉淀法1．專屬試劑沉淀法生物堿類雷氏銨鹽甾體皂苷、三萜皂苷膽甾醇甾體皂苷2.分級沉淀法水/醇法（除去糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)）醇/水法

（除去樹脂、葉綠素水不溶性雜質(zhì)）醇/醚法

（沉淀皂苷成分與脂溶性雜質(zhì)分離）3．鹽析法分餾法（沸點(diǎn)）膜分離法（外加壓力或化學(xué)位差分子大?。┓礉B透、超濾、微濾、電滲析升華法影響結(jié)晶的因素：結(jié)晶用溶劑的選擇（1）要對被結(jié)晶成分熱時(shí)溶解度大、冷時(shí)溶解度?。粚﹄s質(zhì)或冷熱時(shí)都溶解，或冷熱時(shí)都不溶解。（2）與被結(jié)晶成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。（3）沸點(diǎn)不宜太高。結(jié)晶法

提取或分離物↓溶于選擇的溶劑，加熱成飽和溶液，過濾溶液↓放置（冷藏）析晶，過濾粗結(jié)晶↓重復(fù)上述操作（重結(jié)晶）結(jié)晶吸附色譜凝膠過濾色譜離子交換色譜大孔樹脂色譜分配色譜色譜分離法

視窗：色譜的發(fā)現(xiàn)１９０３年俄國植物學(xué)家茨維特（Ｔｓｗｅｔｔ）將碳酸鈣粉末裝到玻璃管中，將植物葉子的石油醚提取液作為樣品倒入管內(nèi)，然后再用石油醚自上而下洗脫。隨著洗脫進(jìn)行，植物葉子中的各種色素向下移動(dòng)逐漸形成了一圈圈的色帶，茨維特將這種色帶分離過程稱為色譜（ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ），色譜法由此而得名。此法中所使用的玻璃管被稱為色譜柱，管內(nèi)的碳酸鈣作為填充物被稱為固定相，洗脫液稱為流動(dòng)相或洗脫劑。后來，采用該法分離了許多無色物質(zhì)，雖然分離過程中看不到色帶存在，但色譜法這個(gè)名稱一直沿用至今。在現(xiàn)代色譜技術(shù)發(fā)展過程中有許多科學(xué)家做出了出色貢獻(xiàn)，其中最杰出的當(dāng)推Ａ.Ｊ.Ｐ.Ｍａｒｔｉｎ。Ｍａｒｔｉｎ于1952年因發(fā)明了分配色譜技術(shù)而獲得了諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)，同年又與Ａ.Ｔ.Ｊａｍｅｓ合作發(fā)展出氣-液色譜技術(shù)。２０世紀(jì)５０年代氣-液色譜法的創(chuàng)立和發(fā)展是劃時(shí)代的里程碑，它不僅引領(lǐng)分離進(jìn)入儀器方法時(shí)代，而且催生了我們目前使用的許多現(xiàn)代色譜方法。吸附色譜硅膠:廣泛

氧化鋁：堿性或中性親脂性（生物堿、甾、萜）活性炭：水溶性（氨基酸、糖、苷）聚酰胺：氫鍵吸附（酚類、醌類）(酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰胺鍵上的游離胺基與醌類、脂肪羧酸上的羰基)操作方法：TLC：點(diǎn)樣、展開、顯色、Rf值計(jì)算柱色譜：裝柱、上樣、洗脫、檢測

聚酰胺屬于氫鍵吸附例:吸附力大小基本操作：

1.薄層板制備:(干法,濕法)2.點(diǎn)樣

3.展開薄層色譜1.swf方法TLCabRf=ab原點(diǎn)起始線溶劑前沿1基本操作：

4.定位紫外燈下觀察噴霧顯色

5.計(jì)算Rf值TLC紫外下觀察熒色TLC定位空白

黃連

復(fù)方(三次)

標(biāo)準(zhǔn)品顯色空白三七復(fù)方紙色譜

紙層色譜.swf基本操作：

1.色譜柱制備

(干法,濕法)

2.上樣

(干法,濕法)

3.洗脫柱色譜硅膠吸附柱色譜的原理與技術(shù)1、原理：SiO2·

H2O物理作用和化學(xué)作用2、色譜柱：玻璃1：10~1：20、篩板、活塞3、硅膠：國產(chǎn)即可分布直徑窄，最好是單分散的國產(chǎn)：200~300目進(jìn)口：250~400目活性：與含水量有關(guān)硅膠含水量硅膠活性硅膠含水量硅膠活性01012ⅠⅡ√Ⅲ√1520ⅣⅤ硅膠活性的標(biāo)定偶氮苯、對甲氧基偶氮苯、蘇丹黃、蘇丹紅、對氨基偶氮苯溶于苯滴于待測硅膠板苯展開測Rf，文獻(xiàn)確定活度級別溶劑的選擇關(guān)鍵：分離效果、成本、后處理得難易、污染預(yù)選擇：薄層色譜柱層析硅膠干法制板ΔRf>0.4因素：極性溶劑-微量圓環(huán)技術(shù)、文獻(xiàn)經(jīng)驗(yàn)（見圖）己烷、石油醚＜環(huán)己烷＜四氯化碳二硫化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜丙醇＜乙醇＜甲醇＜水氯仿：損害肝甲醇：損害眼睛苯：導(dǎo)致白血病沖洗、蒸發(fā)濃縮沖洗：保持流動(dòng)相液面高于硅膠面方法：見圖蒸發(fā)濃縮旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：國產(chǎn)、進(jìn)口重結(jié)晶重結(jié)晶干燥處理：真空干燥器有五氧化二磷的真空加熱裝置操作步驟硅膠的準(zhǔn)備：易分離1：30

難分離1：50~100（ΔRf>0.4）

較難分離1：2000.4g/mL裝柱上樣沖柱檢測：初步檢測——薄層板——方格——毛細(xì)管正式檢測：點(diǎn)樣、展開、顯色、合并如有未分離，進(jìn)行第二次柱色譜凝膠過濾色譜（分子篩色譜、排阻色譜）原理：分子篩作用葡聚糖凝膠（sephadexG）

羥丙基葡聚糖凝膠(sephadexLH-20)離子交換色譜（一）原理陽離子交換樹脂

RSO3-H++Na+Cl-RSO3-Na++H+Cl-陰離子交換樹脂RN+OH-+Na+Cl-RN+Cl-+Na+OH-（離子交換樹脂、離子交換纖維素、離子交換凝膠）原理：吸附性和分子篩性原理相結(jié)合吸附性：范德華引力或氫鍵的分子篩：多孔性應(yīng)用：糖與苷的分離、生物堿的精制(水-濃度由低到高的含水甲醇或乙醇）大孔吸附樹脂（沒有可解離基團(tuán)、具有多孔結(jié)構(gòu)，不溶于水固體高分子物質(zhì)）分配色譜原理：被分離成分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同正相分配色譜：流動(dòng)相極性<

固定相極性（極性或中等極性）反相分配色譜：流動(dòng)相極性>固定相極性（非極性或中等極性）HPLC、MPLC、LPLC一、純度鑒定1）物理常數(shù)：mp，[α]D2）TLC（PC）：正相色譜、反相色譜。3）GC，HPLC第四節(jié)結(jié)構(gòu)研究方法

視窗：伍德沃德（ＲｏｂｅｒｔＢＷｏｏｄｗａｒｄ）的杰出貢獻(xiàn)伍德沃德是２０世紀(jì)杰出的有機(jī)化學(xué)家。在波譜學(xué)、合成、結(jié)構(gòu)測定、生源理論以及有機(jī)化學(xué)理論方面都取得了里程碑式的成就。其最重要的貢獻(xiàn)包括：Ｗｏｏｄｗａｒｄ規(guī)則（１９４０～１９４２），即估測共軛烯和烯酮最大紫外吸收的經(jīng)驗(yàn)規(guī)律，將紫外光譜應(yīng)用于結(jié)構(gòu)分析，證實(shí)了利用物理方法比化學(xué)方法更有利于揭示物質(zhì)結(jié)構(gòu)；解決了許多重要天然有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)問題，如青霉素、番木鱉堿（士的寧)、河豚毒素等；合成了膽固醇和可的松、羊毛甾醇、士的寧和麥角酸、維生素Ｂ１２等２０余種復(fù)雜有機(jī)化合物并應(yīng)用于生產(chǎn)，具有現(xiàn)代合成化學(xué)的最高水平；總結(jié)出甾體類和大環(huán)內(nèi)酯類的生源途徑；總結(jié)了環(huán)化反應(yīng)與分子對稱性間的規(guī)律，提出分子軌道對稱性守恒原理，即伍德沃德-霍夫曼（Ｗｏｏｄｗａｒｄ-Ｈｏｆｆｍａｎｎ）規(guī)則。1965年由于他在天然有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)和合成方面的卓越成就，而獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。二、化合物類型：1、文獻(xiàn)調(diào)研：同科、同屬及相近屬植物的成分2、鑒別反應(yīng)：3、色譜行為：酸堿性、溶解性等三、化合物結(jié)構(gòu)：1、光譜方法：UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS2、化學(xué)溝通：化學(xué)降解、衍生物制備、人工合成3、立體結(jié)構(gòu)：CD、ORD、2D-NMR、X-射線衍射IR、UV、MSIR:

確定取代基(OH,C=O)，紅外.swf

（25s與25r型螺災(zāi)烷型皂苷元）UV:

共軛雙鍵多化合物(黃酮)

紫外.swf

MS:

(分子式,分子量)EI-MS:分子量，極性小,可揮發(fā)性化合物

FD-MS,FAB-MS,ESI-MS,TOF-MS:

極性大化合物(苷等)2.紅外光譜

甾體皂苷元含有螺縮酮結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈，在IR中有四個(gè)特征吸收譜帶：

A—980B—920C—900D—860cm-1最強(qiáng)

區(qū)別C25的兩種立體異構(gòu)體的構(gòu)型①C25——Me-取代吸收強(qiáng)度：C25-SB帶>C帶（螺甾烷）

C25-RC帶>B帶（異螺甾烷）17OO3HO10132025FABCDE螺甾烷醇OOHO25異螺甾烷醇R/S構(gòu)型按次序規(guī)則(原子序數(shù)）OH>COOH>CH3>H反時(shí)針排列，S型反時(shí)針排列，S型Br>C2H5>CH3>H順時(shí)針排列，R型OOAB（一）、黃酮化合物在MeOH中的基本光譜ⅡⅠ300200400A環(huán)：苯甲酰

BandⅡ：λmax=240-280nmB環(huán)：桂皮酰

BandⅠ：λmax=300-400nm紫外光譜（1）甲醇鈉：①Ⅰ紅移40～65nm，強(qiáng)度不變或增加，則示有4′-OH。②帶Ⅰ紅移50～60nm，強(qiáng)度減弱，則示有3-OH，但無4′-OH。③7-OH游離，在320～330nm處有吸收。如果7-OH結(jié)合成苷，則該吸收即消失。410-359=51271-259=12387-359=28262-259=3

1H-NMR：提供信息：①化學(xué)位移；②積分曲線（氫個(gè)數(shù)）；③偶合常數(shù)J化學(xué)位移δ峰面積-氫數(shù)溶劑峰羥基峰BA(