常規(guī)體外受精中國(guó)專家共識(shí)（2024年）

常規(guī)體外受精中國(guó)專家共識(shí)(2024年)常規(guī)體外受精(conventionalinvitrofertilization輔助生殖技術(shù)(assistedrep異常及宮頸因素等)、部分男性因素(如輕、中度少弱畸形精子癥)及不明原因不孕不育(卵巢功能評(píng)估、輸卵管通暢度評(píng)估及男性精液分析均正常)患者所采取的治療方案。相較于卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射(intracytoplasmicsperminject期發(fā)生受精率低下(lowfertilizationrate,LFR,<25%)及5%~15%的取卵缺乏cIVF的操作標(biāo)準(zhǔn)或共識(shí)，尤其對(duì)于精液參數(shù)處于臨界值的病例，授精方式術(shù)授精，無形中導(dǎo)致了ICSI技術(shù)的過度應(yīng)用。本共識(shí)根據(jù)國(guó)內(nèi)testing,PGT)與無創(chuàng)胚胎染色體篩查(non-invasivechromosomescreening,NICS)的應(yīng)用、質(zhì)量控制及胚胎實(shí)驗(yàn)六版)提出的正常男性精液質(zhì)量下限參考標(biāo)準(zhǔn)(第五百分位值):精子總量為3 [2],但該下限標(biāo)準(zhǔn)對(duì)ART治療中是否可以選擇c-IVF缺乏指導(dǎo)意義。因此，手冊(cè)第四版[3])授精方式選擇的一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究中，將106個(gè)取卵周期的1518枚卵母細(xì)胞進(jìn)行隨機(jī)分配，行c-IVF(669枚)或ICSI(849枚),結(jié)果表明ICSI組受精率(50%)高于c-IVF組(41%),且c-IVF組發(fā)生TFF的風(fēng)險(xiǎn)要明顯高于ICSI組[4];另一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究分別對(duì)少精子癥組[精子濃度(5~20)×10°/mL,WHO手冊(cè)第四版]與少弱精子癥組[精子濃度(5~20)×10°/mL且前向運(yùn)動(dòng)精子10%~32%,WHO手冊(cè)第四版]的卵母細(xì)胞行c-IVF或ICSI,結(jié)果表明兩組不同授精方式間的受精率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[5]。但目前鑒于ART治療所使用的精子通常是經(jīng)密度梯度離心或上游后所獲得的活力spermcellcount,TPMC)<1.1×10°時(shí)發(fā)生TFF的風(fēng)險(xiǎn)>25%[6]。另一項(xiàng)對(duì)112個(gè)同時(shí)行c-IVF和ICSI周期的回顧性研究顯示，ICSI受精而c-IVF未受精周期的處理后活動(dòng)精子總數(shù)[(1.06±0.9)×10°]顯著低于c-IVF與ICSI均受精周期的處理后活動(dòng)精子總數(shù)[(4.4±3.4)×10°],表明優(yōu)化處理后的活動(dòng)精子總數(shù)為較好的預(yù)測(cè)受精失敗的指標(biāo)；該研究將處理后活動(dòng)精子總數(shù)<1.5×10°作為臨界指標(biāo)，結(jié)果顯示其對(duì)c-IVF受精失敗的預(yù)測(cè)靈敏度為80%[7]。聶玉林等[8]的一項(xiàng)回顧性研究表明，上游后前向運(yùn)動(dòng)精子回收然單純畸形精子癥行c-IVF可能影響受精率，但與其行ICSI或與正常精子形態(tài)行c-IVF的妊娠結(jié)局相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[9]。近期的一項(xiàng)回顧性研究對(duì)畸形精子癥做了進(jìn)一步區(qū)分，結(jié)果表明，當(dāng)96%<精子畸形率≤98%時(shí)，c-IVF組與ICSI組的受精率、卵裂率、人絨毛膜促性腺激素(humanchorionicgonadotropin,hCG)陽性率、臨床妊娠率和活產(chǎn)率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；當(dāng)精子畸形率>98%時(shí)，c-IVF組卵裂率、hCG陽性率、臨床妊娠率和活產(chǎn)率顯著低于ICSI組[10]。但對(duì)于特殊類型的畸形精子癥，如圓頭精子癥、無頭精子癥、大頭精子癥、精子鞭毛多發(fā)形態(tài)異常等，采用c-IVF不能實(shí)現(xiàn)正常受精。該類精子畸形可能具有遺傳性，需根據(jù)精子缺陷類型選擇個(gè)體化的ART助孕[11]。推薦意見1:①對(duì)于精子濃度、活力均正常的樣本可以采用短時(shí)或過夜c-IVF的方式。②對(duì)于精子濃度、活力處于臨界值的樣本，尤其精液優(yōu)化處理后TPMC<1.5×10°,建議采用短時(shí)受精結(jié)合早期脫顆粒的方式。③當(dāng)精液優(yōu)化處理后TPMC<1.0×10°,尤其獲卵數(shù)較多時(shí)，可在簽署知情同意的情況下對(duì)部分或全部卵母細(xì)胞行ICSI技術(shù)以保障正常受精。④目前尚無有力證據(jù)表明單純畸形精子癥對(duì)c-IVF的受精率及妊娠結(jié)局產(chǎn)生不利影響，但對(duì)于特殊類型的畸形精子癥患者 (如圓頭精子癥、無頭精子癥、大頭精子癥、精子鞭毛多發(fā)形態(tài)異常等),則需要根據(jù)精子缺陷的種類及其致病基因，選擇ICSI或供精治療[11]。精液質(zhì)量參數(shù)與推薦授精方式詳見表1。表1精液質(zhì)量參數(shù)與推薦授精方式前向運(yùn)動(dòng)精子率(%)部分ICSI或ICSI二、精液優(yōu)化處理ART治療中精液優(yōu)化處理的主要目的是最大限度地提高優(yōu)質(zhì)精子濃度，減少非前向運(yùn)動(dòng)精子、不動(dòng)精子、形態(tài)異常精子、未成熟的生精細(xì)胞和白細(xì)胞，以及(如活性氧、微生物或?qū)е伦訉m收縮的化合物等)[12],但目前尚無一種方法臨床上常用的精子制備技術(shù)有上游法(swimup,SU)和密度梯度離心法(densitygradientcentrifugat一致的結(jié)論[13]。多項(xiàng)研究表明，DGC法較SU法具有更高的精子回收率(分別為>20%和<20%),而SU法可以獲得更高的前向運(yùn)動(dòng)精子比例[2,14-15]。一項(xiàng)回顧性研究分析了719個(gè)經(jīng)DGC處理和719個(gè)經(jīng)SU處理的c-IVF/ICSI周期結(jié)果差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[16]。也有學(xué)者認(rèn)為，DGC聯(lián)合SU應(yīng)用效果較優(yōu)，與單獨(dú)SU相比，聯(lián)合應(yīng)用可提高正常形態(tài)精子獲得率；與單獨(dú)DGC相比，聯(lián)合7]。另外，值得注意的是DGC相對(duì)SU更容易做到標(biāo)準(zhǔn)化[2],相對(duì)便于胚胎生殖道中經(jīng)過生理性篩選的過程，具有分選高效、操作簡(jiǎn)便快捷、對(duì)精子DNA損傷少等優(yōu)勢(shì)[18-20]。與傳統(tǒng)精液優(yōu)化處理方法相比較，微流控技術(shù)是否能推薦意見2:①鑒于目前尚無充分證據(jù)證實(shí)DGC和SU對(duì)c-IVF治療結(jié)局有法進(jìn)行精液的優(yōu)化處理[2,21-22]。每個(gè)ART胚胎實(shí)驗(yàn)室均有符合本實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范的授精操皿，目前尚無統(tǒng)一的要求或規(guī)范。常用受精皿包括：圓形皿(微滴法)、中央孔皿(雙井皿)、四孔板等。不同受精皿對(duì)應(yīng)的受精液體積也有所不同，中央孔皿或四孔板通常為0.5~1.0mL,微滴法通常為30~100μL。加精的方式常見以下3再加入COCs,此法多用于微滴法受精；③用預(yù)平衡的受精液將精子稀釋至合適盡管受精過程中精子的濃度范圍較寬，但所獲得的總受精率卻相近[23]。漸下降[24]。因此，在保障穩(wěn)定受精率的前提下，精子濃度應(yīng)盡量控制在較低推薦意見3:①目前尚無有力證據(jù)表明不同的受精皿、受精液體積及加精方時(shí)受精方式，靈活調(diào)整精子添加濃度，形成符合自身?xiàng)l件的標(biāo)準(zhǔn)操作流程。促排卵周期中卵母細(xì)胞會(huì)存在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)發(fā)育不同步的情況，因此理論上對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行短時(shí)間的體外孵育有利于細(xì)胞質(zhì)的進(jìn)一步成熟，從而提高受精率和臨床妊娠率[25]。幾十年來關(guān)于卵母細(xì)胞授精前孵育時(shí)間的相關(guān)研究較多，但最佳孵育時(shí)間卻較為寬泛且觀點(diǎn)并不一致[26-40],詳見表2。作者(發(fā)表年份)周期數(shù)受精方式有利的孵育時(shí)間不利的孵育時(shí)間主要影響指標(biāo)VandenbergheL,etal.(2021)”///2.5h(ICSI)細(xì)胞比例(ICSI)/////注：e-IVF示常規(guī)體外受精；ICSI示卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射；hCG示人絨毛膜促性腺激素；“/廣示近期一項(xiàng)納入了9575個(gè)周期的大型回顧性研究顯示，不同的孵育時(shí)間對(duì)c-IVF卵母細(xì)胞受精能力的影響不同(<1.5h受精率顯著降低，而受精率提高可能增加累積妊娠率),而胚胎發(fā)育及妊娠結(jié)局卻無明顯差異[39]。因此該研究認(rèn)為，體外孵育時(shí)間對(duì)卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能無顯著影響，可根據(jù)胚胎實(shí)驗(yàn)室的工作流程在一定時(shí)間范圍內(nèi)(孵育1.5~6.5h)安排授精時(shí)機(jī)。的進(jìn)一步成熟(體內(nèi)成熟),從而改善臨床結(jié)局[41],因此授精時(shí)機(jī)的選擇應(yīng)發(fā)現(xiàn)可以促進(jìn)胞質(zhì)的成熟并提高囊胚形成率[42]。推薦意見4:鑒于各中心促排卵方案、扳機(jī)時(shí)間、取卵時(shí)機(jī)及患者個(gè)體間的差異，導(dǎo)致成熟卵母細(xì)胞(MⅡ)比OCs的狀態(tài)選擇個(gè)體化的孵育時(shí)間，正常情況下建議在扳機(jī)后38~40h內(nèi)完成授短時(shí)受精是將精卵共孵育的時(shí)間由過夜受精的16~24h縮短至1~6h的一種c-IVF衍生技術(shù)[43]。有研究顯示，精子產(chǎn)生的活性氧可促進(jìn)卵丘細(xì)胞的凋亡 [44],且卵母細(xì)胞長(zhǎng)期暴露在高濃度的精子中可能會(huì)對(duì)早期胚胎發(fā)育產(chǎn)生負(fù)面影響[45]。另外Li等[46]的研究顯示，過夜受精組受精液中的銨離子濃度縮短精卵共孵育的時(shí)間會(huì)增加臨床妊娠率、持續(xù)妊娠率及種植率[43]。但也有面具有優(yōu)勢(shì)，但受精率有所降低，且活產(chǎn)率和臨床妊娠率并未提高[47]。Cs移出受精液后對(duì)其進(jìn)行脫顆粒，去除卵丘細(xì)胞及放射冠，使卵母細(xì)胞透明帶現(xiàn)有研究尚不能證實(shí)短時(shí)受精可顯著改善ART治療結(jié)局。對(duì)于LFR或TFF授精失敗等),可選擇脫顆粒后進(jìn)行早期受精預(yù)判。但需注意的是，受精早期顆粒細(xì)胞較為致密，脫顆粒過程中的機(jī)械應(yīng)力可能對(duì)受精卵產(chǎn)生不利影響[48];另外，早期脫顆?；蚺c多精受精相關(guān)[47,49-51]。對(duì)于繼發(fā)不孕且精液質(zhì)量較好或既往cIVF受精正常的病例，可采用過夜受精或不進(jìn)行脫顆粒操作的短時(shí)推薦意見5:①鑒于尚無更充分的證據(jù)表明過夜受精與短時(shí)受精在活產(chǎn)率方面存在差異，因此兩者均可作為c-IVF的常規(guī)授精方式。多次人工授精(≥3次)失敗、原發(fā)性不孕、繼發(fā)不孕年限≥5年且無其他明顯器質(zhì)性疾病(如雙側(cè)輸卵管阻塞、宮腔粘連等)和/或精液質(zhì)量處于臨界值的周情況進(jìn)行早期預(yù)判。③對(duì)于繼發(fā)不孕<5年且精液質(zhì)量較好的周期，若采用短時(shí)在行c-IVF周期中，當(dāng)?shù)?天(授精后18~24h)發(fā)生TFF時(shí)，可以對(duì)未出現(xiàn)原核的卵母細(xì)胞(僅明確見第一極體)進(jìn)行ICSI,即晚期補(bǔ)救ICSI(laterescueICSI,L-RICSI)。雖然通過L-RICSI可以對(duì)部分病例進(jìn)行挽救，但效果并不理想[52]。2003年早期補(bǔ)救ICSI(earlyrescueICSI,E-RICSI)被首次提出，即通過觀察授精后6h的卵母細(xì)胞是否排出第二極體來判斷受精情況，并對(duì)明確未受精的卵母細(xì)胞(未見第二極體排出)實(shí)施補(bǔ)救ICSI[53]。ERICSI相較于L-RICSI,可以減少卵子老化對(duì)胚胎發(fā)育的影響，并且胚胎發(fā)育與子宮4-55]。目前尚無證據(jù)表明L-RICSI/ERICSI(相較于c-IVF/ICSI)會(huì)對(duì)子代安全產(chǎn)生負(fù)面影響，但相關(guān)研究有限，亟需更多的長(zhǎng)期隨訪數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估[52,5推遲，則容易造成誤判進(jìn)而出現(xiàn)醫(yī)源性多精受精[48,53]。尤其部分卵母細(xì)胞受精失敗的周期，行早期補(bǔ)救ICSI會(huì)增加多精受精的風(fēng)險(xiǎn)[58]。對(duì)于獲卵數(shù)現(xiàn)正常受精[59];但對(duì)于PLCζ、ACTL7A、ACTL9、IQCN等基因突變導(dǎo)致的受精失敗則需要利用ICSI結(jié)合人工卵母細(xì)胞激活才可能實(shí)現(xiàn)正常受精[60]。因推薦意見6:①E-RICSI的效果明顯優(yōu)于LRICSI[52],對(duì)于已實(shí)施L-RICSI的周期，可以考慮將胚胎培養(yǎng)至囊胚階段，再行復(fù)蘇周期移植[56,61]。行輔助判斷。③建議短時(shí)受精時(shí)精卵共孵育4~5h后再行脫顆粒，當(dāng)含有第二極體的卵母細(xì)胞比例<30%~50%時(shí)(分母為成熟卵母細(xì)胞),應(yīng)延遲至授精后6h再行觀察，若含有第二極體的卵母細(xì)胞比例仍<50%,可行補(bǔ)救ICSI;鑒于臨床結(jié)局與補(bǔ)救推遲的時(shí)間呈負(fù)相關(guān)[62],建議授精后7h之內(nèi)完成補(bǔ)救ICSI[63]。對(duì)于透明帶異常卵母細(xì)胞(如蠟樣透明帶),發(fā)現(xiàn)無第二極體排出時(shí)即直接行補(bǔ)c-IVF的原核觀察時(shí)間點(diǎn)通常為授精后(17±1)h[64],即出現(xiàn)2個(gè)原核(twopronuclei,2PN)及2個(gè)極體為正常受精[65];出現(xiàn)1個(gè)原核(monopronuclear,1PN)或>2個(gè)原核為異常受精；未見原核(nonpronuclear,OPN)多數(shù)情況為未受精，也有少部分是原核出現(xiàn)的時(shí)間不在觀察時(shí)間點(diǎn)內(nèi)[66]。因推薦意見7:①不建議將c-IVF的1PN于高齡或卵巢儲(chǔ)備低下的患者。由于囊胚培養(yǎng)有利于篩選正常胚胎[67-69],整倍體胚胎的同時(shí)還需進(jìn)一步排除單親二倍體及多倍體胚胎[70-72]。由于安全性尚需進(jìn)一步的研究和評(píng)估，故臨床移植OPN或1PN來源的胚胎仍需謹(jǐn)慎[73]。②對(duì)于有條件的中心，也可以考慮將短時(shí)受精并脫顆粒后的卵母細(xì)胞放入2020年歐洲人類生殖與胚胎學(xué)會(huì)發(fā)布的PGT指南依然推薦將ICSI作為PGT周期的首選授精方式[74]。選擇ICSI的主要目的是避免精子攜帶的父源性遺期中應(yīng)用cIVF同樣可以獲得與ICSI相似的胚胎發(fā)育結(jié)局和遺傳診斷結(jié)果[75-78]。因此，對(duì)于非男性因素不育行PGT的病例，ICSI是否仍然作為首選授精方式產(chǎn)生了爭(zhēng)議。2020年美國(guó)生殖醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)和輔助生殖技術(shù)學(xué)會(huì)發(fā)布的非男性僅限在精子DNA可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性造成影響的情況下應(yīng)用[79]。這歸因于率可忽略不計(jì)[77,80]。但多重置換擴(kuò)增技術(shù)(multipledisplacementamp的擴(kuò)增，因此基于MDA的PGT周期不能選擇c-IVF作為授精方式[78]。2023代測(cè)序(next-generationsequencing,NGS)技術(shù)的VF作為授精方式，但應(yīng)盡量避免附著在胚胎上的精子或顆粒細(xì)胞的污染[81]。推薦意見8:①本共識(shí)建議ICSI作為PGT周期的首選授精方式。對(duì)于胚胎植入前非整倍性檢測(cè)(preimplantationgenetPGT-A)周期也可考慮選擇c-IVF作為授精方式，但應(yīng)嚴(yán)格限制使用條件并簽署1.c-IVF的質(zhì)量控制指標(biāo)及參考標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)2017年維也納共識(shí)[65]及《胚胎實(shí)驗(yàn)室關(guān)鍵指標(biāo)質(zhì)控專家共識(shí)》[83]中的指導(dǎo)意見，將c-IVF實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控指標(biāo)的計(jì)算方式及參考標(biāo)準(zhǔn)歸納如下，詳見表3。表3c-IVF實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控指標(biāo)及參考標(biāo)準(zhǔn)2PN及2PB的卵母細(xì)胞數(shù)/行授精(最低標(biāo)準(zhǔn))(理想標(biāo)準(zhǔn))的COCs總數(shù)×100%受精失敗率=受精失敗周期數(shù)/行授精多PN率=大于2PN卵母細(xì)胞數(shù)/行授1PN率=1PN卵母細(xì)胞數(shù)/行授精的2.輔助生殖實(shí)驗(yàn)室新員工培訓(xùn)與考核：c-IVF的技術(shù)操作相對(duì)簡(jiǎn)單，應(yīng)從精子動(dòng)靜態(tài)分析、精液的優(yōu)化處理、撿卵、顆粒細(xì)胞去除以及早期受精的判斷(短時(shí)受精)等方面進(jìn)行重點(diǎn)培訓(xùn)。并且培訓(xùn)完成后需通過相應(yīng)的考核方能上崗，當(dāng)考核指標(biāo)和同期同條件下的質(zhì)控指標(biāo)與帶教老師偏差較大時(shí)，應(yīng)積極幫助新員工尋找原因并及時(shí)給予糾正。推薦意見9:①輔助生殖實(shí)驗(yàn)室新員工在進(jìn)行崗前培訓(xùn)期間，要求充分掌握《世界衛(wèi)生組織人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(第六版)》[2]中ART相關(guān)理論及操作技能，充分了解精子動(dòng)靜態(tài)分析技術(shù)及相關(guān)指標(biāo)臨床意義，并能夠熟練掌握精子濃度、形態(tài)及活動(dòng)率計(jì)數(shù)。②對(duì)不同質(zhì)量精液進(jìn)行優(yōu)化處理時(shí)，當(dāng)處理后TPMC和前向運(yùn)動(dòng)精子百分率與帶教老師差異小于10%后(n=10),方可開始嘗試進(jìn)行臨床操作。③新員工須在經(jīng)驗(yàn)豐富的帶教老師指導(dǎo)下完成至少50例撿卵操作并有能力對(duì)COCs進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。④卵母細(xì)胞脫顆粒的前期培訓(xùn)包括巴制等。操作熟練后，可在帶教老師指導(dǎo)下對(duì)1~2枚卵母細(xì)胞(應(yīng)選擇獲卵數(shù)>15枚的病例)進(jìn)行脫顆粒操作，建議累計(jì)操作至少100枚卵母細(xì)胞，且后續(xù)胚胎發(fā)察時(shí)限的情況下判斷結(jié)果與帶教老師差異小于10%后(n=100),方可開始嘗試(1)DGC法：①在15mL離心管中制備非連續(xù)密度梯度離心液，分別取40%~45%上層梯度液和等體積的80%~90%下層梯度液1.0~2.0mL;②將液化后的精液樣本(≤2mL)緩慢沿管壁注入低濃度的梯度離心液上方，(300~500)×g離心液中，(200~300)×g離心5~10min,此步驟可進(jìn)行1~2次。最后棄去上清液，依據(jù)沉淀量將精子重懸于0.5~1.0mL培養(yǎng)基(受精液)中備用，以上方法僅作為(2)SU法：①首先將精液(≤2mL)置于圓底試管中(建議使用容量較大的試管),隨后將1.5~2.0mL培養(yǎng)基輕輕鋪在精液上方，或者將精液(≤2mL)斜45°置于通氣培養(yǎng)箱內(nèi)上游30~60min。③將孵育后的上清液(中上層呈云霧后棄去上清液，依據(jù)沉淀量將精子重懸于0.5~1.0mL培養(yǎng)基(受精液)中備用。(3)DGC聯(lián)合SU法：①首先進(jìn)行DGC法(同上),最終保留0.5~1.0mL的部；③將試管傾斜45°置于培養(yǎng)箱中上游5~30min,隨后吸取上清液備用。(4)其他新方法：除了上述經(jīng)典方法外，胚胎實(shí)驗(yàn)室宜結(jié)合自身?xiàng)l件與特點(diǎn)進(jìn)行具體方法改良，也可以參照其他相關(guān)新方法進(jìn)行嘗試(如微流控技術(shù)),(5)特殊情況處理：①精液不液化或液化不良的樣本，建議在離心前用巴氏吸管反復(fù)吹打混勻，或加等體積的培養(yǎng)液反復(fù)吹打(盡量避免產(chǎn)釋，再行優(yōu)化處理；③精液里有團(tuán)塊或者膠液利用Eppendorf的ShortSpin功能瞬時(shí)離心3~5s。2.前向運(yùn)動(dòng)精子濃度的調(diào)節(jié)方法：吸取制備后的精子混懸液10μL,滴入Makler計(jì)數(shù)板，雙人分別計(jì)數(shù)橫豎各10個(gè)小方格后取平均值，計(jì)數(shù)所得前向運(yùn)動(dòng)精子個(gè)數(shù)×10°/mL即為前向運(yùn)動(dòng)精子濃度。例如：計(jì)舉例1:預(yù)期受精體系前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)為舉例2:預(yù)期受精體系前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)為1萬條(例100μL微滴法),計(jì)數(shù)濃度為(2)紡錘體觀測(cè)儀輔助判斷方法：通過極體結(jié)合紡錘體觀察(授精后5~6h),可以進(jìn)一步提高卵母細(xì)胞受精情況判斷的準(zhǔn)確度[62,84]。具體判定方法：①出現(xiàn)雙極體或碎裂極體，未見紡錘體(圖2A)或紡錘體位于胞膜并與極體形成交聯(lián)(圖2B),則為完成受精的卵母細(xì)胞，無需早補(bǔ)救；②出現(xiàn)單極體或碎裂極體，紡錘體位于胞質(zhì)內(nèi)(圖2C),則為未完成受精的卵母細(xì)胞，可行早補(bǔ)救；③出現(xiàn)單極體卻未見紡錘體(圖2D)或紡錘體位于胞膜并與極體交聯(lián)(圖2E),為剛排出第一極體或質(zhì)量較差的卵母細(xì)胞，可根據(jù)具體情況考慮延遲行補(bǔ)救ICSI或不進(jìn)行補(bǔ)救。zation[J].FertilSteril,2005,83(3):612-6iversityPress,2021.ambridge,England:CambridgeUniversityPress,1999.[4]vanderWesterlakenL,NaaktgeborenN,VerburgH,etal.Conveonalinvitrofertilizationversusnpatientswithborderlinesemen:arandomizedstudyusingsiblcytes[J].FertilSteril,2006,85(2):395-400.DOI:10[5]XieBG,HuangYH,ZhuWJ,etal.Comparisonoftheoutcomeofventionalinvitrof[6]RhemrevJP,LensJW,McDonnel1J,etnorintracytoplasmicsperminjection[J].Andrologia,2012,44(2):73-77.DOI:10.1111/j.1439-0272.2010[8]聶玉林，廖宏慶，周靜，等.體外受精受精率與男方精子參數(shù)的關(guān)系[J].中國(guó)男科學(xué)雜志，2014,28(3):28-32.DOI:10.3969/j.issn.1008-0848.20creviewandmeta-analysis[J].FertilSteril,2011,9[10]ZhuY,Zhangrtilization(IVF)orintracytoplasmicsperminjection(ICSI)[J].AsianJAndrol,2022,24(1):62-66.DOI:10.4103/aja.aja_45_21.[11]中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)生殖男科學(xué)組畸形精子癥診療中國(guó)專家共識(shí)編寫組.畸形精子癥診療中國(guó)專家共識(shí)[J].中華生殖與避孕雜志，2021,41(7):600-609.DOI:10.3760/101441-20210520-00229.51(3):102321.DOI:10.1016/j.jogoh.2022.102321.[13]BalliM,CeccheleA,PisaturoV,etal.OpportunitiesofconventionalIVFversusICSI:itistimetocomeoffthefence[J].JClinMed,2022,11(19):5722.DOI:10.3390/jcm11195722.iscontinuousPercollgradientandswim-upforspermpr0):698-703.DOI:10.1007/BF02212896.ntechnique[J].FertilSteril,2009,91(2):632-63nvs.swim-up:aretrospectivestudyusingapropensityscore-matchinganalysis[J].ReprodBiolEndocrinol,2022,20(1):60.DOI:10.1186/[17]YamanakaM,TomitaDOI:10.1262/jrd.2016-112.[18]李芳芳，王小英，周樹民.微流控技術(shù)在精子優(yōu)選及體外受精中的應(yīng)用[J].中華男科學(xué)雜志，2014,20(5):452-459.DOI:10.13263/ki.nja.28.DOI:10.1093/molehr/gaw076.ration[J].MolHumReprod,2017,23(4):227-234.DOI:10.1093/mwim-upforIVFcycles[HumReprodOpen,2021,2021(4):hoab037.DOI:10.1093/hropen/hoab032012:168.[25]RubinoP,ViganòP,Luddtofuture:asystematicreviewofthemoHumReprodUpdate,2016,22(2):194-227.DOI:10.1093/humupd/dmv050.[26]TrounsonA0,MohrLR,WoodC,etal.Effectofdelayeiononin-vitrofertiliza[J].JReprodFertil,1982,64(2):285-294[27]HarrisonKL,WilsonLM,BreenTM,etal.Fertilizationofh[28]FischB,Kaplan-KraicerR,AmitS,etal.Theeffectinationintervaluponfertiliza[29]RienziL,UbaldiF,AnniballoR,etal.PreincubationjectiontimeontheresultsofIVFandICSI[J].HumReprod,2001,16ofoocytesonnuclearmaturity,fertilizatandpregnancyoutcomein20(9):358-364.DOI:10.1023/a:1025476910771.[32]IsiklarA,MercanR,BalabanB,etal.Impactofoocyte682-686.DOI:10.1016/s1472-6483(10)61649-5.injection[J].GynecolEndocrinol,2008,24(6):295-299.DOI:10.1080/[34]BárcenaP,RodriguezM,ObradorsA,etal.Shouldwew1(6):1182-1191.DOI:10.1093/h8,33(5):797-806.DOI:10.1093/humrep/dey067.injectiontimingintherepightsintotheriskofinvitrooocyteageing[J].HumReprod,2020,35(10):2226-2236.DOI:10.1093/humrep/deaa211.[37]VandenbergheL,Santos-RibeiroS,DeMunck2021,36(3):614-623.DOI:10.1093/humrep/deaa338.ofintracytoplasmicsperminjection(ICSI)afterEGGredomizedcontrolledtrial[J].JAssistReprodGen[40]SinghN,MalhotraN,MaheyR,etal.Two-sixh[41]GanR,HuangX,ZhaoJ,etal.Timeintervalbreviewandmeta-analysis[J].ReprodBiolEndocrinol,2023,21(1):61.pment,andclinicaloutcomesfolloMed,2022,6(3):162-168.DOI:10.1097/rd9.0000000000000029.[43]ZhangXD,LiuJX,LiuW,etal.Timeofinsemin[44]Diaz-FontdevilaM,PommerR,SmithR.Cumulusteexposureandhighspermconcentrationafyandpregnancyrate[J].HumReprod,1996,11(11):2507-2511.DOI:10.1093/oxfordjournals.[46]LiR,OuS,OuyangN,etal.Briefco-incubationofgfitstheoutcomesofnewborns[J].JAssistReprod[47]FanY,WuZ,PengF,etal.Briefandlongco-incubationofspermandoocytesforinvitrofertilization:ameta-analysisofrandomiz[48]LiuW,LiuJ,ZhangX,etizationfailureafterIVF[J].HumFertil(Camb),2014,17(1):50-55.incubationofgametewithdifferentfertilizingcapabilities[J].ReprodBiome6,32(6):591-596.DOI:10.1016/j.rbmo.2016.02.010.[50]KongP,YinM,TangC,etal.Effectsofearlycumuon:aretrospectivecohortstudy[J].FrontEndocri1,12:669507.DOI:10.3389/fendnfailure[J].ReprodBiomedOnline,2023,47(2):10[52]Beck-FruchterR,LaveeM,WeissA,etal.RescueintracytoplasmiHumReprod,2003,18(10):2118-2121.DOI:10.1093/humrep/deg325.249-258.DOI:10.1007/s0040youtcomesofearlyrescueintracytoplasmicudy[J].JClinMed,2023,12(5):1993.DOI:10.3390/jcm12051993.[56]ZhuX,TianT,JiesisibiekeD,etal.Clinicaloutco[57]JiangY,Jinanalysis[J].HumReprodOpropen/hoad046.aconventionalIVFcycle[J].Andrologia,2016,48(10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