講課脂蛋白相關(guān)性磷脂酶

講課脂蛋白相關(guān)性磷脂酶傳統(tǒng)的血小板活化標(biāo)志物第一類是血小板顆粒膜上的糖蛋白。血小板被激活時(shí)，其顆粒膜與質(zhì)膜發(fā)生融合，顆粒膜蛋白，如CD62（P選擇素，GMP-140

）、CD63（溶酶體膜相關(guān)糖蛋白3，lysosomal-membrane-associatedglycoprotein3

）在質(zhì)膜上表達(dá)，成為活化血小板的分子標(biāo)志。第二類是血小板質(zhì)膜表面變化的糖蛋白表位。如GPⅡb/Ⅲa(CD41/61)的PAC1表位（activatedα2b-β3，PAC-1），它僅在血小板活化時(shí)才因構(gòu)象變化而顯露出來。第三類是顆粒釋放物如α顆粒釋放的CD40L、血小板第4因子（PF4）、血小板β球蛋白（β-TG）、纖維蛋白原、假血友病因子（vonWillebrandfactor，

vWF）、纖維連接蛋白、血小板衍生生長因子（PDGF）等。

第2頁,共70頁，2024年2月25日，星期天血小板膜糖蛋白（GP）血小板膜糖蛋白分為質(zhì)膜糖蛋白和顆粒膜糖蛋白，前者包括GPⅠb-Ⅸ-Ⅴ、GPⅡb-Ⅲa、GPⅠa-Ⅱa等，后者包括CD62P和CD63。CD62P又稱P-選擇素、GMPl40，在未活化的血小板上，CD62P分子僅表達(dá)于顆粒膜上?；罨?，CD62P分子在質(zhì)膜呈高表達(dá)。CD63在靜態(tài)血小板僅分布于溶酶體膜，血小板活化后隨脫顆粒而表達(dá)在血小板質(zhì)膜表面。因此CD62P和CD63在質(zhì)膜上高表達(dá)被視為血小板活化的分子標(biāo)志物。目前多采用熒光素標(biāo)記的抗血小板GP的特異性單克隆抗體作為探針，流式細(xì)胞術(shù)測定血小板GP。第3頁,共70頁，2024年2月25日，星期天傳統(tǒng)的血小板活化標(biāo)志物ADP和花生四烯酸（AA）誘導(dǎo)的最大血小板聚集率（MPAR）用于評價(jià)阿司匹林抵抗，反映血小板活化程度。血栓烷素A2（TXA2）產(chǎn)生于血小板，能收縮血管，促進(jìn)血小板聚集。內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的前列腺素I2（PGI2）可擴(kuò)張血管，抑制血小板聚集。TXB2和6酮前列腺素F1a（6-k-PGF1a）分別是TXA2和PGI2具有代表性的代謝產(chǎn)物，用于評價(jià)血小板功能。

TXB2/6-k-PGF1a（TP比值）能反映兩種物質(zhì)的代謝狀態(tài)。第4頁,共70頁，2024年2月25日，星期天傳統(tǒng)的血小板活化標(biāo)志物L(fēng)DL-C與血小板活化呈正相關(guān)（LDLox-LDL)。血小板分布寬度（Plateletdistributionwidth，PDW）及血小板平均體積（Meanplateletvolume，MPV）血小板衍生微顆粒（platelet-derivedmicroparticles）血小板-單核細(xì)胞聚合物（platelet-monocyteaggregates）GP-VI二聚體反映膠原對血小板的活化（dimersofGPVIrepresentsanimportanteventsleadingtoplateletactivationbycollagen.GPVIdimerscouldrepresentanewmarkertoanalyzeplateletreactivity）第5頁,共70頁，2024年2月25日，星期天第6頁,共70頁，2024年2月25日，星期天傳統(tǒng)標(biāo)記物的局限性Commonlyusedbloodmarkersdonotreflecttheearlierpathophysiologicprocessesof

massplateletactivation，plaquerupture,andthrombusformation.第7頁,共70頁，2024年2月25日，星期天以往血栓形成前預(yù)警方法的局限性

以往臨床上已經(jīng)采用以預(yù)警為目的檢測方法（“血栓預(yù)報(bào)”）。主要分為物理化學(xué)、生物物理、血液生化等幾個(gè)方面。物理化學(xué)方法的代表是70年代末期開展的以血液流變學(xué)為主要指標(biāo)的“中風(fēng)預(yù)報(bào)儀”，即測定離體血液的一系列物化性質(zhì)，如各種粘度等；生物物理方法如測定血小板的聚集率等；血液生化如測定血脂、膽固醇、各種脂蛋白、同型半胱氨酸、hs-CRP等。上述方法的共同特點(diǎn)是：它們反映的是靜態(tài)血液性質(zhì)的（物理的、化學(xué)的）一些改變。其中血粘度、血小板的聚集率等是在體外條件下測得的，而血液在體外和體內(nèi)的物化性質(zhì)受環(huán)境影響差別很大，難以控制。第8頁,共70頁，2024年2月25日，星期天以往血栓形成前預(yù)警方法的局限性在體內(nèi)，正常情況下血液不會(huì)凝固，而在體外，無論操作多么小心，很難使血液完全不凝固。另外，現(xiàn)行作為預(yù)警的很多生化物質(zhì)本身并不直接與血栓形成的過程有關(guān)，它們可能在某些方面對血栓形成的過程有影響，都不能反映血栓形成過程是否已經(jīng)啟動(dòng)。以上方法在理論上不能作為預(yù)警的基礎(chǔ)，更不能稱為預(yù)報(bào)，多數(shù)只是危險(xiǎn)因素而已。在實(shí)踐上，它們與臨床表現(xiàn)符合程度較差，不足以指導(dǎo)診斷，對臨床預(yù)防治療的指導(dǎo)意義也有限。第9頁,共70頁，2024年2月25日，星期天尋求卒中預(yù)警方法的新思路血栓形成是多步驟的系列過程，如果在這一過程起始階段的某一環(huán)節(jié)能夠找到一種指示，例如特異性較強(qiáng)的標(biāo)記物，就可以根據(jù)它的出現(xiàn)、增高來判斷血栓形成過程是否已經(jīng)啟動(dòng)，從而進(jìn)行預(yù)警。優(yōu)點(diǎn)：首先它確切反應(yīng)體內(nèi)血栓形成的過程開始啟動(dòng)，是一種“臨近指示”。同時(shí)不能象血液流變學(xué)、聚集率等那樣，受諸多體外因素的影響。LPA、LP-PLA2是代表性標(biāo)記物。第10頁,共70頁，2024年2月25日，星期天溶血磷脂酸：血小板活化新標(biāo)記物近年來對溶血磷脂酸（Lysophosphatidicacid,LPA）的研究發(fā)現(xiàn)，它就是一個(gè)較好的血栓形成前釋放的分子標(biāo)記物。LPA在血小板被激活時(shí)大量釋放到血液中，釋放的LPA又能反過來促進(jìn)更多的血小板聚集，這一正反饋特點(diǎn)，構(gòu)成了LPA作為血栓形成早期預(yù)警分子的基礎(chǔ)。此外，在LDL-C輕度氧化過程中產(chǎn)生LPA。研究結(jié)果證實(shí)：缺血性卒中高危人群、TIA患者、未抗栓的心房纖顫患者、分水嶺梗死患者、不穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊患者等血漿LPA含量均顯著升高。第11頁,共70頁，2024年2月25日，星期天溶血磷脂酸的結(jié)構(gòu)溶血磷脂酸（1-脂酰-2-sn-甘油-3-磷酸）是目前已知結(jié)構(gòu)最簡單的甘油磷脂，其基本分子結(jié)構(gòu)為一甘油骨架，其sn-1位為一脂酰鏈，sn-2位為一羥基（溶血），sn-3位為一磷酸基團(tuán)。脂酰鏈長度差異，LPA是一個(gè)家族。LPA是血清中的正常組分之一，細(xì)胞內(nèi)及體液中產(chǎn)生的LPA與血清白蛋白及脂蛋白結(jié)合，并保持其生物活性。新鮮全血、血漿及腦脊液中LPA含量很低或不能檢測到。體內(nèi)的LPA主要由活化的血小板及低密度脂蛋白（LDL）在輕度氧化的過程中產(chǎn)生。除活化的血小板外，成纖維細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、某些炎癥細(xì)胞及癌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等也可產(chǎn)生LPA?；罨难“迨茄逯蠰PA的主要來源。第12頁,共70頁，2024年2月25日，星期天溶血磷脂酸受體目前在人類基因組中已克隆了8個(gè)Edg基因（內(nèi)皮分化基因），其中三個(gè)（Edg-2，Edg-4，Edg-7）編碼LPA受體，分別稱為LPA1（與肺、腎臟纖維化有關(guān)）、LPA2（對抗放射線損傷、結(jié)腸癌進(jìn)展、SMC遷移）、LPA3（胚胎種植）；余下五個(gè)（Edg-1，Edg-3，Edg-5，Edg-6，Edg-8）編碼神經(jīng)鞘氨醇1-磷酸（sphingosine-1-phosphate，S1P）受體（芬戈莫德，F(xiàn)ingolimod，S1P受體調(diào)節(jié)劑用于治療多發(fā)性硬化）。LPA與跨膜G蛋白（Gi、Gq、G12/13）耦聯(lián)受體結(jié)合，活化相應(yīng)的信號傳導(dǎo)通路，對血管內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)、單核/巨噬細(xì)胞等發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。生物學(xué)效應(yīng)包括：刺激細(xì)胞增殖與生存、促進(jìn)血小板聚集、增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性、血管平滑肌細(xì)胞遷移增值、腫瘤細(xì)胞侵潤等。

第13頁,共70頁，2024年2月25日，星期天自毒素第14頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LPA對血管壁細(xì)胞及血小板的作用

LPA對血管壁細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞）及血小板具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，通過不同的G蛋白耦連受體（GPCRs）介導(dǎo)的信號通路，從多方面促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成。LPA在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展、冠心病及卒中的發(fā)生等方面有極重要的作用，由于它與血小板活化、oxLDL的產(chǎn)生、內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙、炎癥細(xì)胞的活化與浸潤、炎性細(xì)胞因子與黏附分子的表達(dá)、氧化應(yīng)激、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）的表達(dá)與活化、細(xì)胞的增殖與凋亡調(diào)節(jié)、斑塊破裂與栓子形成等事件密切相關(guān)，決定了它在動(dòng)脈粥樣硬化與心腦梗死病理生理學(xué)中的關(guān)鍵和紐帶作用。第15頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LPA的合成體內(nèi)LPA的合成主要源于下列途徑：1）血小板活化后，在磷脂酶A2、磷脂酶D等作用下，水解膜磷脂產(chǎn)生。2）低密度脂蛋白（LDL）在輕度氧化的過程中產(chǎn)生，且產(chǎn)生的LPA位于輕度氧化低密度脂蛋白（moxLDL）分子的表面。3）溶血磷脂酰膽堿（LPC）在溶血磷脂酶D（lysoPLD，autotaxin，自分泌運(yùn)動(dòng)因子，自毒素ATX

）作用下產(chǎn)生LPA。這是血漿中LPA的最主要來源。4）除活化的血小板外，成纖維細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、某些炎癥細(xì)胞及癌細(xì)胞等也可產(chǎn)生LPA。

第16頁,共70頁，2024年2月25日，星期天（膜）磷脂二脂酰甘油溶血磷脂磷脂酸3-磷酸甘油單脂酰甘油第17頁,共70頁，2024年2月25日，星期天2、LPA是LDL致血管內(nèi)皮改變的活性成份氧化低密度脂蛋白（oxLDL）在動(dòng)脈粥樣硬化及并發(fā)癥的發(fā)生中起關(guān)鍵作用，oxLDL可活化內(nèi)皮細(xì)胞和血小板。SiessW等研究發(fā)現(xiàn)，LPA在LDL輕度氧化過程中產(chǎn)生，它是輕度氧化低密度脂蛋白（moxLDL）中的活性部分，可啟動(dòng)血小板的活化、刺激內(nèi)皮細(xì)胞應(yīng)激纖維和細(xì)胞間縫隙的形成?；铙w研究發(fā)現(xiàn)LPA聚集在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)，是基本的活化血小板的脂類分子，在人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的脂質(zhì)核心區(qū)含有最高濃度的LPA，當(dāng)斑塊破裂時(shí)暴露的LPA促進(jìn)血栓形成。第18頁,共70頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂，暴露LPA，活化血小板，促進(jìn)血栓形。第19頁,共70頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)脈粥樣硬化斑塊及纖維帽形成，LPA位于脂質(zhì)核心第20頁,共70頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂，暴露LPA，活化血小板，形成血栓第21頁,共70頁，2024年2月25日，星期天1、溶血磷脂酸促進(jìn)內(nèi)皮素(ET-1)的釋放，因此溶血磷脂酸在腦血管痙攣中也起重要作用。2、LPA與紅細(xì)胞作用，啟動(dòng)紅細(xì)胞的血栓前狀態(tài)。3、LPA啟動(dòng)并活化纖維蛋白原與血小板受體的連接，有利于血栓形成。4、LPA啟動(dòng)溶血磷脂酰膽堿乙?；?。5、LPA比血栓素A2（TXA2）對于血小板聚集的作用更強(qiáng)。LPA促動(dòng)脈硬化和血栓形成的其它機(jī)制第22頁,共70頁，2024年2月25日，星期天W.Siess/BiochimicaetBiophysicaActa1582(2002)204–215

血管平滑肌細(xì)胞增殖遷移血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加輕氧化低密度脂蛋白動(dòng)脈粥樣硬化冠心病、卒中輕氧化低密度脂蛋白促動(dòng)脈硬化效應(yīng)實(shí)際上是LPA的作用第23頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2

Lipoprotein-associatedphospholipaseA2，Lp-PLA2第24頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂蛋白脂蛋白是血脂在血液中存在、轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝的形式；分為乳糜微粒、極低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白；脂質(zhì)不溶于水，必須與蛋白質(zhì)結(jié)合以脂蛋白形式存在，才能在血液循環(huán)中運(yùn)轉(zhuǎn)，因此，高脂血癥常為高脂蛋白血癥(hyperlipoproteinemia)

的反映。高密度脂蛋白降低也是一種血脂代謝紊亂，因而稱之為脂蛋白異常癥更為全面、準(zhǔn)確地反映血脂代謝紊亂狀態(tài)。成熟脂蛋白呈球形，中間是甘油三酯和膽固醇酯，表面組分為載脂蛋白、游離膽固醇和磷脂。脂蛋白的氧化修飾是動(dòng)脈粥樣硬化的基礎(chǔ)。第25頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂蛋白（LDL）結(jié)構(gòu)模式圖（磷脂酰膽堿）第26頁,共70頁，2024年2月25日，星期天磷脂酶(phospholipase,PL)概述根據(jù)磷脂酶對磷脂水解部位的不同可將磷脂酶分為4類：磷脂酶A1（PLA1）磷脂酶A2（PLA2）：選擇性作用于甘油磷脂sn-2位的酯鍵（-COO-基團(tuán)，由羧基“-COOH”與羥基“-OH”脫水而成）

。磷脂酶C（PLC）磷脂酶D（PLD）；溶血磷脂酶D（Lyso-PLD,ATX）第27頁,共70頁，2024年2月25日，星期天甘油磷脂磷脂是一類含有磷酸的脂類，機(jī)體中主要含有兩大類磷脂，由甘油構(gòu)成的磷脂稱為甘油磷脂；由神經(jīng)鞘氨醇構(gòu)成的磷脂，稱為鞘磷脂。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是：具有由磷酸相連的取代基團(tuán)(含氨堿或醇類)構(gòu)成的親水頭和由脂肪酸鏈構(gòu)成的疏水頭。在生物膜中磷脂的親水頭位于膜表面，而疏水尾位于膜內(nèi)側(cè)。第28頁,共70頁，2024年2月25日，星期天酯鍵Sn-2PLA2取代基團(tuán)第29頁,共70頁，2024年2月25日，星期天HPLA2溶血磷脂酰膽堿膽堿第30頁,共70頁，2024年2月25日，星期天PA與LPAPLA2作用位點(diǎn)，加氫變成OH，溶血磷脂第31頁,共70頁，2024年2月25日，星期天甘油甘油三酯磷脂酰膽堿（卵磷脂）甘油骨架第32頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂肪酸第33頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂肪酸第34頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Sn-1Sn-3Sn-2Lyso-PLD,ATX甘油磷脂N末端Sn-1第35頁,共70頁，2024年2月25日，星期天磷脂酶A2超家族磷脂酶A2（PhospholipaseA2，PLA2），即磷脂-2-?；饷福菍Ｒ淮呋视土字琒n-2位酯鍵，酶解產(chǎn)物為溶血磷脂和脂肪酸。廣泛參與人體細(xì)胞內(nèi)外信號的傳遞及炎癥、多種相關(guān)性疾病病理反應(yīng)。其生理功能包括細(xì)胞信號傳遞及產(chǎn)生20多種類脂質(zhì)介質(zhì)，改造磷脂結(jié)構(gòu)，促進(jìn)機(jī)體壞死組織自動(dòng)消失，肺泡表面活性物質(zhì)代謝等。第36頁,共70頁，2024年2月25日，星期天磷脂酶A2超家族所有的PLA2都有一個(gè)最基本的作用，就是水解甘油磷脂Sn-2位脂肪酸，釋放兩種代謝物：自由脂肪酸（非酯化脂肪酸，如花生四烯酸）和溶血磷脂?；ㄉ南┧幔?jīng)環(huán)氧物酶和脂氧化物酶代謝，主要形成前列腺素(PGE)、白三烯和脂毒素類，直接或間接作用于靶細(xì)胞參與炎癥反應(yīng)。因此，長期以來都認(rèn)為，PLA2在炎癥中扮演的角色是破壞細(xì)胞膜穩(wěn)定性，起損傷作用。1995年以后發(fā)現(xiàn)PLA2具有抗菌活性。PLA2除了上述作用外，蛇毒中的PLA2常具有其他一些藥理活性，如肌肉毒性、突觸后神經(jīng)毒性、心臟毒性、溶血毒性等。第37頁,共70頁，2024年2月25日，星期天PhospholipaseA2structure/function

Thesuperfamilyincludes15groupscomprisingfourmaintypesincluding；四種主要的磷脂酶A2

SecretedsPLA2：分泌型磷脂酶A2，與二十烷類產(chǎn)生、炎癥及抗菌作用有關(guān)。CytosoliccPLA2：胞漿型磷脂酶A2，花生四烯酸(AA)代謝具有優(yōu)先選擇性。

Calcium-independentiPLA2：鈣離子不依賴磷脂酶A2，作為看家酶參與膜的重建

Plateletactivatingfactor(PAF)acetylhydrolase/oxidizedlipidlipoproteinassociated（Lp-PLA2）：血小板活化因子乙酰水解酶（氧化脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2），以PAF和氧化磷脂為底物。第38頁,共70頁，2024年2月25日，星期天第39頁,共70頁，2024年2月25日，星期天磷脂酶A2,PLA2PLA2hydrolyzesthefattyacidfromthesn-2positionofmembranephospholipids.Invivo,thesn-2positionofphospholipidsfrequentlycontainspolyunsaturatedfattyacids,andwhenreleased,thesecanbemetabolizedtoformvariouseicosanoids（二十烷類）

andrelatedbioactivelipidmediators.PLA2不僅在維持膜磷脂的穩(wěn)定性方面非常重要，而且在調(diào)節(jié)花生四烯酸（AA）的釋放與代謝方面起關(guān)鍵作用。它在調(diào)節(jié)促炎性脂類調(diào)質(zhì)如前列腺素（PGs）、白三烯（LT）的產(chǎn)生，以及脂質(zhì)代謝與信號傳導(dǎo)方面同樣具有重要作用。第40頁,共70頁，2024年2月25日，星期天磷脂酰膽堿羥基廿碳四烯酸

第41頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2

脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2（Lipoprotein-associatedphospholipaseA2，Lp-PLA2）又稱血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH），以PAF和氧化磷脂為底物。是近年來發(fā)現(xiàn)的一種與動(dòng)脈粥樣硬化和缺血性心腦血管病相關(guān)的磷脂酶A2超家族（新的炎性標(biāo)記物）。Lp-PLA2主要由炎癥細(xì)胞（單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T細(xì)胞、活化的血小板等）產(chǎn)生，其催化產(chǎn)生的促炎產(chǎn)物溶血磷脂酰膽堿（LysoPC）和氧化非酯化脂肪酸（OxFA），具有促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化作用。第42頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2Lp-PLA2屬于擴(kuò)大的磷脂酶A2超家族，其編碼基因（PLA2G7）于1995年首次被克隆，它具有12個(gè)外顯子，定位于6號染色體p21.2~12。Lp-PLA2為50kDa具有441個(gè)氨基酸殘基的絲氨酸脂酶，其生物學(xué)活性不依賴于Ca2+，最初由于發(fā)現(xiàn)其可以降解血小板活化因子（PAF），因此它又被稱為血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）。血漿中，約80%的Lp-PLA2與低密度脂蛋白（LDL）結(jié)合。其余20%的Lp-PLA2與高密度脂蛋白（HDL）或極低密度脂蛋白（VLDL）結(jié)合。聯(lián)合應(yīng)用原位雜交和免疫組化技術(shù)發(fā)現(xiàn)兔及人類動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的巨噬細(xì)胞可表達(dá)高水平的Lp-PLA2mRNA和蛋白。第43頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LPALysoPLD磷脂酰膽堿氧化修飾磷脂酰膽堿溶血磷脂酰膽堿氧化脂肪酸oxFA內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞或平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧或自由基團(tuán)使低密度脂蛋白氧化修飾而形成氧化修飾的低密度脂蛋白第44頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LDL在氧化過程中，與LDL結(jié)合的Lp-PLA2作用于LDL表面的甘油磷脂，產(chǎn)生具有促炎作用的LysoPC和OxFA

甘油磷脂LysoPCOxFALp-PLA2第45頁,共70頁，2024年2月25日，星期天

Lp-PLA2促動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制1、促進(jìn)LDL的氧化修飾；2、作用于oxLDL，產(chǎn)生溶血磷脂酰膽堿（LysoPC）和自由脂肪酸（OxFA）；后者活化炎癥細(xì)胞，產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子；3、促進(jìn)吞噬細(xì)胞捕獲oxLDL，形成泡沫細(xì)胞；4、Lp-PLA2在斑塊壞死核心區(qū)顯著表達(dá)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞凋亡，加快易損斑塊破裂；5、LysoPC抑制凋亡細(xì)胞清除，因而加劇血管壁的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)壞死核心的擴(kuò)大；第46頁,共70頁，2024年2月25日，星期天脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2“脂蛋白”：主要指LDL。

“相關(guān)性”：（1）約80%的Lp-PLA2與LDL結(jié)合；（2）LDL在氧化過程中，與LDL結(jié)合的Lp-PLA2作用于LDL表面的甘油磷脂，產(chǎn)生具有促炎作用的產(chǎn)物L(fēng)ysoPC和OxFA；“磷脂酶A2”：作用于LDL表面的甘油磷脂sn-2位的酯鍵，產(chǎn)生溶血磷脂酰膽堿和自由脂肪酸。溶血磷脂酰膽堿和自由脂肪酸：具有促炎作用，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化，加快易損斑塊破裂；對冠心病、卒中有預(yù)警作用。第47頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LPALysoPLD內(nèi)含磷脂酰膽堿溶血磷脂酰膽堿Lp-PLA2第48頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Lp-PLA2：心血管病預(yù)警分子Lp-PLA2的兩個(gè)主要來源，一是循環(huán)中與LDL結(jié)合的Lp-PLA2經(jīng)動(dòng)脈內(nèi)膜直接進(jìn)入內(nèi)膜下動(dòng)脈粥樣硬化病灶中，二是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的炎性細(xì)胞的新合成。測定血漿中Lp-PLA2的含量或活性可作為獨(dú)立危險(xiǎn)因子，預(yù)警發(fā)生冠心病及缺血性卒中的危險(xiǎn)性（FDA批準(zhǔn)）。Lp-PLA2抑制劑（他汀類、Darapladib）對降低高危心腦血管病患者的發(fā)病率具有重要意義。第49頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LP-PLA2聯(lián)合LPA檢測的預(yù)警價(jià)值臨床流行病學(xué)研究及Meta分析結(jié)果表明,LP-PLA2是評價(jià)冠心病和卒中風(fēng)險(xiǎn)的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)預(yù)測因子。局限性：LP-PLA2既具有抗炎活性，又具有促炎活性；其確切作用機(jī)制有爭議。其主要代謝產(chǎn)物L(fēng)ysoPC是溶血磷脂酸的主要底物來源。LP-PLA2是LPA的上游催化酶之一。

LP-PLA2聯(lián)合LPA檢測在動(dòng)脈粥樣硬化及冠心病、卒中的預(yù)警價(jià)值正在研究中。第50頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Lp-PLA2isamarkerofinflammationCirculatingLp-PLA2isamarkerofinflammationthatplaysacriticalroleinatherogenesis;itsinhibitionmayhaveantiatherogeniceffects.StudiesfromtheWestofScotlandCoronaryPreventionStudy(WOSCOPS),MonitoringTrendsandDeterminantsinCardiovascularDiseases(MONICA)andRotterdamcohortshaveshownthatLp-PLA2isanindependentpredictorofcoronaryheartdisease(CHD),andtheassociationisnotattenuateduponmultivariateanalysiswithtraditionalriskfactorsandotherinflammatorymarkers.Studiesinsubjectswithcoronaryarterydisease(CAD)havealsoshownassociationsbetweenLp-PLA2andcardiovascularrisk.AtleasttworecentstudieshaveshownthatLp-PLA2isariskpredictorforstroke.Overall,epidemiologicalstudiessuggestthatmeasurementofLp-PLA2inplasmamaybeausefulinidentifyingindividualsathighriskforcardiovascularevents.VascHealthRiskManag.2006June;2(2):153–156.

第51頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Lp-PLA2：含量與活性Lp-PLA2mass含量ismeasuredbyanenzymeimmunoassayinhumanplasma(thePLAC?test)(Dadaetal2002).Inaddition,Lp-PLA2activity活性canalsobemeasuredinhumanplasma(Tselepisetal2002).第52頁,共70頁，2024年2月25日，星期天LP-PLA2是評價(jià)冠心病和卒中風(fēng)險(xiǎn)的一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)預(yù)測因子大量研究表明,LP-PLA2是評價(jià)冠心病和卒中風(fēng)險(xiǎn)的一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)預(yù)測因子。Ballantyne等通過對Lp-PLA2和C反應(yīng)蛋白（C-reactiveprotein,CRP）水平與傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素進(jìn)行評價(jià)以探討其與缺血性卒中的關(guān)系。應(yīng)用比例風(fēng)險(xiǎn)模型，對社區(qū)動(dòng)脈硬化風(fēng)險(xiǎn)（ARIC）研究中包括12762例健康受試者的前瞻性病例隊(duì)列進(jìn)行分析，觀察6年。結(jié)果顯示，在校正性別、種族和年齡后，194例卒中患者的平均LP-PLA2水平和CRP水平顯著高于812例非卒中病例，而低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平卻無顯著差異。在校正所有傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素以及CRP、體重指數(shù)及甘油三酯后，升高的Lp-PLA2水平與卒中呈獨(dú)立相關(guān)性，經(jīng)6~8年的隨訪發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2水平升高者，卒中的發(fā)生率約是非升高者的2倍。Lp-PLA2水平和CRP水平均升高者，較兩者均正常者卒中的發(fā)生率增加10倍。第53頁,共70頁，2024年2月25日，星期天部分研究結(jié)果第54頁,共70頁，2024年2月25日，星期天WOSCOPS研究在蘇格蘭西部冠心病預(yù)防研究（WOSCOPS）中，采用病例對照研究方法，580例發(fā)生心臟缺血事件的患者與年齡、吸煙史匹配的1160例對照組進(jìn)行比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨Lp-PLA2水平升高，冠狀動(dòng)脈缺血事件也隨之增加，與較低Lp-PLA2水平的患者相比，Lp-PLA2水平較高者發(fā)生冠心病的危險(xiǎn)增加2倍。多變量分析表明，Lp-PLA2不依賴于傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素和CRP、血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、纖維蛋白原等炎癥性標(biāo)記物，可作為預(yù)測冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。第55頁,共70頁，2024年2月25日，星期天MONICA研究在德國南部開展的MONICA研究進(jìn)一步證實(shí)了Lp-PLA2與CHD之間的聯(lián)系。1984~1998年14年間對934例年齡在45~64歲的健康人群進(jìn)行追蹤隨訪，期間有97人發(fā)生了冠脈缺血事件，發(fā)生冠脈缺血事件者其Lp-PLA2基線水平顯著高于未發(fā)生者（295±11μg/L比263±79μg/L，P=0.01）。Lp-PLA2每增加一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差（SD），則冠脈缺血事件增加37%。當(dāng)校正所有傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素和CRP后，Lp-PLA2每增加一個(gè)SD，冠脈缺血事件增加23%。本研究還發(fā)現(xiàn)Lp-PLA2和CRP聯(lián)合檢測在預(yù)測CHD風(fēng)險(xiǎn)方面可作為互補(bǔ)共同提高風(fēng)險(xiǎn)評估的準(zhǔn)確性。第56頁,共70頁，2024年2月25日，星期天AdditiveeffectofCRPandLp-PLA2incoronaryriskprediction:MONICAAugsburgCohortStudy1984to1998.KoenigWetal.Circulation2004;110:1903-1908第57頁,共70頁，2024年2月25日，星期天WHS研究在婦女健康研究（WHS）中發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)Lp-PLA2水平較高者，以后發(fā)生心血管事件（包括74例心肌梗死和49例卒中）的比例較基礎(chǔ)Lp-PLA2水平較低者顯著升高（1.20mg/L比1.05mg/L，P=0.016）。在鹿特丹研究（TheRotterdamStudy）中，Oei等對7983名年齡在55歲以上的居民進(jìn)行了病例隊(duì)列研究，包括308例CHD患者及1822例隨機(jī)對照標(biāo)本，結(jié)果CHD組患者Lp-PLA2水平顯著高于對照組（調(diào)整后HR：1.96，95%CI：1.25~3.09;P=0.02），提示Lp-PLA2水平與CHD之間具有顯著的相關(guān)性。本研究還發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2水平增高與缺血性卒中密切相關(guān)，且不依賴于其它心血管病危險(xiǎn)因素，本研究發(fā)現(xiàn)Lp-PLA2水平最高的四分之一者較最低四分之一者缺血性卒中的危險(xiǎn)增加77%。第58頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Lp-PLA2與冠心病Caslake等研究148例男性患者，48例經(jīng)血管造影證實(shí)為冠狀動(dòng)脈?。–AD），其中46例至少在1年內(nèi)患過心肌梗死，54例年齡匹配的正常者作為對照組，結(jié)果CAD組血漿Lp-PLA2水平顯著升高，多因素回歸分析表明CAD患者Lp-PLA2水平升高不依賴于LDL、吸煙、收縮壓等傳統(tǒng)危險(xiǎn)因子。Khuseyenova等測定了經(jīng)血管造影證實(shí)的CAD患者血漿Lp-PLA2水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，CAD組Lp-PLA2水平顯著升高（296.1μg/L比266.0μg/L,P<0.0001），多變量logistic回歸分析比值比（OR）為1.61。Blankenberg等測定了496例CAD患者血漿Lp-PLA2水平，包括220例急性冠脈綜合征（ACS）和276例穩(wěn)定性心絞痛，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與477例對照組相比，ACS組患者血漿Lp-PLA2水平顯著高于對照組。第59頁,共70頁，2024年2月25日，星期天第60頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Lp-PLA2含量與青年人冠狀動(dòng)脈鈣化有關(guān)TheassociationbetweenLp-PLA2(massandactivity),andcoronaryarterycalcification(CAC)inyoungadultswasexaminedinanestedcase-controlstudyusingdatafromtheCoronaryArteryRiskDevelopmentinYoungAdults(CARDIA)study(Iribarrenetal2005).Lp-PLA2massandactivityweresignificantlyhigherincasesthanincontrols.TheORofcalcifiedcoronaryplaqueper1SDincrementwas1.40(1.17to1.67)and1.39(1.14to1.70)forLp-PLA2massandactivity,respectively;therelationshipwasindependentofLDL-cholesterol.Afteradjustingformultiplecovariates,astatisticallysignificantassociationremainedforLp-PLA2mass(1.28;95%CI,1.03–1.60)butnotforactivity.Thus,Lp-PLA2(measuredasmass)appearstobeinvolvedinearlyCAC.Lp-PLA2含量與青年人冠狀動(dòng)脈鈣化有關(guān)。第61頁,共70頁，2024年2月25日，星期天Lp-PLA2作為卒中危險(xiǎn)的預(yù)測因子Recently,Oeietal(2005)compared110ischemicstrokecaseswitharandomsampleof1820subjectsinacase-cohortanalysisintheRotterdamstudy,andalsoreportedasignificantassociationbetweenLp-PLA2activityandischemicstroke.ComparedwiththefirstquartileofLp-PLA2activity,multivariate-adjustedHRsforischemicstrokewere1.08(95%CI,0.55to2.11),1.58(95%CI,0.82to3.04),and1.97(95%CI,