版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
關(guān)于固定化酶總結(jié)2超聲對(duì)酶促反應(yīng)的影響(一)Stephen等研究了超聲對(duì)α-淀粉酶,淀粉葡萄糖苷酶,蔗糖轉(zhuǎn)化酶酶促作用的影響。將底物和相應(yīng)的酶置于超聲水浴中反應(yīng)一定時(shí)間后,用DNS試劑與生成的還原糖反應(yīng),測(cè)定其吸光值。考察不同底物濃度與反應(yīng)速率之間的關(guān)系。以非超聲條件下的酶促反應(yīng)速率作為對(duì)照。第2頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天3第3頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天4第4頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天5超聲增加α-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶的酶促反應(yīng)速率。原因很可能是超聲提高了反應(yīng)溫度,使酶與底物分子更充分的混合,從而利于酶促反應(yīng)的發(fā)生。蔗糖轉(zhuǎn)化酶在水解蔗糖的過(guò)程中有底物抑制作用,超聲能夠有效降低這種作用的影響。原因是超聲可能影響其底物分子和溶劑水分子的分子間作用。第5頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天6超聲對(duì)酶促反應(yīng)的影響(二)Kawasaki使用特定頻率的超聲波,通過(guò)調(diào)節(jié)多肽的動(dòng)力學(xué)控制酶促反應(yīng)。其研究考察了嗜熱菌蛋白酶和DNA聚合酶的酶促反應(yīng)。對(duì)于嗜熱菌蛋白酶,幾百kHz的超聲強(qiáng)度能夠促進(jìn)其酶促反應(yīng)。研究DNA聚合酶的反應(yīng)時(shí)使用了石英晶體微天平技術(shù)(它是一種非常靈敏的質(zhì)量檢測(cè)儀器,其測(cè)量精度可達(dá)納克級(jí),比靈敏度在微克級(jí)的電子微天平高100倍,理論上可以測(cè)到的質(zhì)量變化相當(dāng)于單分子層或原子層的幾分之一。)監(jiān)測(cè)Klenow片段連接到DNA模板后,模板質(zhì)量的變化,從而研究酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)。第6頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天7研究固定化酶的酶促反應(yīng)Ghiaci等分別用鈉基膨潤(rùn)土和改性膨潤(rùn)土對(duì)堿性磷酸酯酶固定化,研究不同實(shí)驗(yàn)條件下固定化酶的反應(yīng)活性。研究充分考慮到酶濃度,pH,溫度,攪拌和變化的熱力學(xué)參數(shù)對(duì)酶促反應(yīng)的影響。酶促反應(yīng)在0.1M磷酸鹽緩沖液,pH7.0條件下最強(qiáng)。pH=10時(shí)達(dá)到最佳反應(yīng)狀態(tài)。4℃下磁力攪拌的最佳時(shí)間周期為2小時(shí)。第7頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天8實(shí)驗(yàn)過(guò)程1分別使用鈉基膨潤(rùn)土和改性膨潤(rùn)土固定化堿性磷酸酯酶。2測(cè)定磷酸酯酶活性APhA
磷酸酯酶催化pNPP磷酸對(duì)硝基苯酯生成pNP對(duì)硝基酚,37℃下反應(yīng)1h后加入NaOH終止反應(yīng)。410nm下測(cè)定吸光值。3測(cè)定動(dòng)力學(xué)參數(shù)。KmVmax第8頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天9實(shí)驗(yàn)過(guò)程4檢測(cè)穩(wěn)定性儲(chǔ)藏穩(wěn)定性:4℃,50天;30℃,70天熱穩(wěn)定性:25-80℃水解穩(wěn)定性:鏈酶蛋白酶37℃0-6天5研究pH值對(duì)酶促反應(yīng)的影響6測(cè)定總蛋白含量:BSA法第9頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天10結(jié)果與討論X射線衍射SEM投射電鏡觀察結(jié)構(gòu),孔徑比表面積,孔容量,孔徑——后兩者影響酶促反應(yīng)。孔容量和孔徑越大,越利于酶的融入與固定化。孔容量和孔徑小,會(huì)限制傳質(zhì)和酶的透過(guò),發(fā)生邊界吸收作用。Langmuir吸附等溫線:量化堿性磷酸酯酶與膨潤(rùn)土之間的作用。膨潤(rùn)土的固定化能力:APhA;Protein計(jì)算反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程米氏方程第10頁(yè),共12頁(yè),2024年2月25日,星期天11結(jié)果與討論pH值對(duì)酶促反應(yīng)的影響磁力攪拌對(duì)酶促反應(yīng)的影響固定化酶與游離酶的穩(wěn)定性儲(chǔ)藏穩(wěn)定性熱穩(wěn)定性水解穩(wěn)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2024年現(xiàn)代農(nóng)業(yè)園土地流轉(zhuǎn)承包合同3篇
- 藝術(shù)活動(dòng)特色課程設(shè)計(jì)
- 汽車租賃管理課程設(shè)計(jì)
- 湘繡美術(shù)課程設(shè)計(jì)
- 藝術(shù)課創(chuàng)意游戲課程設(shè)計(jì)
- 草藥烘焙課程設(shè)計(jì)
- 紙箱印刷工藝課程設(shè)計(jì)
- 職業(yè)主題運(yùn)動(dòng)課程設(shè)計(jì)
- 育子課程設(shè)計(jì)
- 糕點(diǎn)烘焙培訓(xùn)課程設(shè)計(jì)
- 活動(dòng)房結(jié)構(gòu)計(jì)算書
- 醫(yī)療器械經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理體系文件(全套)
- 富氫水項(xiàng)目經(jīng)濟(jì)效益及投資價(jià)值分析(模板參考)
- 小流域水土保持綜合治理工程初步設(shè)計(jì)
- 增強(qiáng)熱塑性塑料復(fù)合管在我國(guó)的發(fā)展現(xiàn)狀
- 機(jī)械設(shè)計(jì)外文文獻(xiàn)翻譯、中英文翻譯、外文翻譯
- 美標(biāo)漸開(kāi)線花鍵計(jì)算程序2014.8
- 英格索蘭空壓機(jī)操作規(guī)程
- 風(fēng)動(dòng)送樣手冊(cè)
- 績(jī)效考核評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
- 電力建設(shè)施工技術(shù)管理
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論