微生物學實驗一

第第頁微生物學實驗一微生物學試驗

試驗室須知

1.應保持試驗室寧靜，切勿高聲喧嘩和任意走動。2.試驗室內禁止飲食、吸煙、及用嘴潮濕鉛筆和標簽等物。3.運用顯微鏡和其它珍貴儀器時，應在老師同意后方可運用，切勿擅自拆卸，否那么因此而損壞儀器，應予以賠償。4.遇意外發(fā)生，應馬上報告老師，不可自己任意處理。

試驗室考前須知：1.每次試驗前需要仔細預習，課堂上留意傾聽老師對試驗內容的講解，留意觀測老師的示范操作。2.試驗時應認真仔細，嚴格按操作規(guī)程進行，留意轉變生活中的習慣動作，以掌控微生物學試驗的科學操作方法。3.運用珍貴儀器應先事先熟知操作規(guī)程，遇儀器故障時請老師援助解決。4.試驗中如遇菌液外溢、皮膚劃傷或菌液吸入等意外，應馬上報告老師實時進行處理，不得隱瞞，以免釀成后患。5.留意安全，易燃物品如二甲苯、吸水紙等應遠離火源。打火機只能用于點燃酒精燈，酒精燈用完應實時蓋上燈帽。6.試驗完畢，需要將儀器放到指定地點，帶菌工具應先進行消毒。

試驗室考前須知：7.試驗需進行培育的材料，要標明姓名、組別、日期后，放于老師指定的培育箱中進行培育。8.未經(jīng)老師同意，試驗室中的任何菌種和物品不得攜帶出室外。9.試驗時應仔細進行觀測和操作，做好試驗記錄；有疑難問題向老師求教。10.勵行節(jié)省，對水、電、染色液、鏡油、擦鏡紙、吸水紙及其它藥品等均應節(jié)省運用。11.試驗后應對試驗室整理清掃，洗手后方可離開試驗室，關窗鎖門。

微生物學試驗室常用的器皿1.試管2.吸管3.培育皿4.三角燒瓶5.載玻片與凹玻片–一般載玻片用于微生物涂片、染色，作形態(tài)觀察等–凹玻片是在一塊厚玻片的當中有一圓形凹窩，作懸滴觀測活細菌以及微室培育用。6.滴瓶：用來裝各種染料、生理鹽水等7.接種工具：接種環(huán)、接種針等

常用器材酒精燈接種環(huán)試管夾吸耳球計數(shù)器鑷子香柏油擦鏡紙1/人1/人1/人1/2人1/2人1/2人1/2人1/2人

試驗報告格式基本信息的填寫(不能留空)。題目目的原理材料和器皿試驗報告需要以實事求是、嚴厲認真的科學立場，根據(jù)指導書的要求按時完成。試驗報告應當言簡意賅、表達精確、數(shù)據(jù)完整、繪圖清楚且寫實，應有爭論、有分析，結論明確。

方法和步驟試驗結果–畫圖–文字描述分析和爭論思索題

清潔與衛(wèi)生保持試驗臺的清潔與試劑架的整齊干凈。廢紙、培育基等廢棄物一律丟入垃圾桶內，嚴禁放入水槽！培育皿、玻片、試管等玻璃儀

器清洗后一律擱置涼在不朽鋼網(wǎng)框里。玻片上的染液需要徹底清洗潔凈(用洗衣粉洗)。培育皿、試管等玻璃儀器上做的標記需要徹底洗凈。最終垃圾由值日生倒入衛(wèi)生間籮框里，濕拖把掛在水槽水龍頭架上滴水涼干。每次值日生4人。

實

驗

內

容

試驗一顯微鏡油鏡的運用及細菌的簡約染色法試驗二細菌的革蘭氏染色及芽孢染色法試驗三鞭毛染色法及活細菌運動性的觀測試驗四四大類微生物菌落及個體形態(tài)觀測試驗五微生物大小測定及血球計數(shù)板計數(shù)試驗六培育基配制及滅菌試驗七微生物的分別純化與平板菌落計數(shù)試驗八微生物的生理生化反應(一)試驗九微生物的生理生化反應(二)

試驗一顯微鏡油鏡的運用及細菌的簡約染色法教學目標或要求：※掌控顯微鏡油鏡的工作原理及運用方法；※學習細菌制片和簡約染色技術；※觀測細菌的三種基本形態(tài)；※初步建立無菌操作的概念；

一般光學顯微鏡

一般光學顯微鏡依據(jù)物鏡與被檢物體之間的介質不同，可分為：①干燥系物鏡。以空氣為介質，包括低倍物鏡(4*、10*)和高倍物鏡(40*)。②油浸系物鏡。常以香柏油為介質，此物鏡又叫油鏡頭(100*),其上?？逃小癏I”(homogeneousimmersion)或“OI”(oilimmersion)字樣，有的還刻有一圈紅線或黑線標記。

油鏡運用的原理油鏡的透鏡很小，光線通過玻

片與油鏡頭之間的空氣時，因介質密度不同，發(fā)生折射或全反射，使射入透鏡的光線減削，

物象顯現(xiàn)不清。假設在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),那么使進入透鏡的光線增多，視野亮度加強，使物象明朗清楚。

瞳距調整

粗調松緊調整旋鈕

聚光鏡中心調整②10*物鏡①標本

④聚光鏡升降旋鈕

油鏡觀測操作方法在高倍鏡或低倍鏡下找到要觀測的樣品區(qū)域后，然后將油鏡轉到工作位置。在待觀測的樣品區(qū)域滴加香柏油，從側面凝視，用粗調整器使油鏡浸在鏡油中并幾乎與標本相接。然后用細調整器調整，在目鏡下找到

最合適的觀測點。油鏡運用畢后：上升鏡筒，取下載玻片，用擦鏡紙拭去鏡頭上的鏡油，然后用擦鏡紙蘸少許二甲苯(香柏

油溶于二甲苯)擦去鏡頭上殘留的油跡，最末用潔凈的擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。

一般光學顯微鏡考前須知1.觀測標本時，兩眼宜同時睜開。減削眼睛疲憊。最好用左眼觀測，右眼協(xié)作繪圖和記錄。2.運用油鏡需要按先用低倍鏡和高倍鏡觀測，再用油鏡觀測。3.下降鏡頭時，肯定要從側面凝視，切忌用眼睛對著目鏡，邊觀測邊下降鏡頭的錯誤操作，

以免壓碎玻片而損壞鏡頭。4.運用二甲苯擦鏡頭時，留意二甲苯不能過多，以防溶解固定透鏡的樹脂。5.留意保持顯微鏡的干凈，對金屬部分要用軟布擦拭，擦鏡頭需要用擦鏡紙，切勿用手或用一般布、紙等，以免損壞鏡頭。

顯微結構圖的繪制(1)繪圖要用黑色硬鉛筆，不要用軟鉛筆或有色鉛筆，一般用2H鉛筆為宜。(2)畫圖時先用輕淡小點或輕線條