臨床免疫學和免疫檢驗

臨床免疫學和免疫檢驗《臨床免疫學和免疫檢驗》理論教學大綱(供五年制檢驗本科用)醫(yī)學檢驗系《臨床免疫學和免疫檢驗》教學組2007-01-01目錄前言………………1大綱說明…………………………1課程基本信息……………………2課程有基本內容及要求…………2第一章概論…………2第二章抗原抗體反應………………2第三章免疫原和抗血清的制備……………………2第四章單克隆抗體與基因工程抗體的制備技術…………………3第五章凝集反應……………………3第六章沉淀反應……………………3第七章免疫電泳技術………………4第八章放射免疫技術………………4第九章熒光免疫技術………………4第十章酶免疫技術…………………5第十一章生物素—親和素免疫放大技術……………5第十二章免疫組織化學技術…………5第十三章免疫細胞分離及檢測技術…………………6第十四章吞噬細胞檢測及應用………6第十五章細胞因子測定及應用………6第十六章細胞粘附分子測定及應用…………………7第十七章免疫球蛋白檢測及應用……………………7第十八章循環(huán)免疫復合物檢測及應用………………7第十九章補體檢測及應用……………7第二十章自身抗體檢測及應用………8第二十一章MHC與HLA檢測及應用……………………8第二十二章流式細胞儀分析技術及應用………………8第二十三章免疫自動化儀器分析………9第二十四章免疫檢驗的質量控制………9第二十五章超敏反應性疾病及其免疫檢測……………9第二十六章自身免疫性疾病及其免疫檢測……………10第二十七章免疫增殖性疾病及其免疫檢測……………10第二十八章免疫缺陷性疾病及其免疫檢測……………10第二十九章腫瘤免疫及其免疫檢測……………………11第三十章移植免疫及其免疫檢驗……………………11參考書目…………………………11課程學時分配……………………12川北醫(yī)學院檢驗系《臨床檢驗免疫學》教學大綱第1頁前言《臨床免疫學和免疫檢驗》是醫(yī)學檢驗專業(yè)的一門重要專業(yè)課程。本課程主要講述臨床免疫學的基本技術、基本理論和常用的免疫學診斷方法，以及常見免疫相關性疾病的免疫學特征及免疫學診斷的意義。通過本課程的學習，要求學生能熟練應用常用的免疫學檢驗技術，掌握臨床免疫相關疾病的免疫學特征，并能針對不同的臨床病例開展相關免疫學項目的診斷，能對診斷結果進行合理的臨床解釋和分析。免疫學是當今生命科學中前沿的學科之一，發(fā)展極為迅速，新知識、新理論、新技術不斷涌現，在以上所提基本要求的基礎上，還要求學生了解免疫學的新知識、新理論及新技術，以使學生既能適應臨床免疫檢驗工作，又要具有一定的創(chuàng)新能力。教師在教學活動中可根據課程要求適當補充新知識新理論，可引導學生課外學習，了解相關領域發(fā)展前沿，拓展學生視野。大綱說明1．本大綱選用教材：《臨床免疫學和免疫學檢驗》，王蘭蘭，人民衛(wèi)生出版社，2005年7月，第三版。2．先修課程：醫(yī)學免疫學、生物化學、醫(yī)學微生物學、醫(yī)學遺傳學、生理學、組織胚胎學、內科學等。3．適用專業(yè)：醫(yī)學檢驗（五年制本科）4．本課程的實驗要求見《臨床檢驗免疫學實驗大綱》。5．教學方法：采用多媒體講授、影像、自修等多形式教學，教師可根據相應課程需要自行選擇教學方法。6．本課程未包含醫(yī)學免疫學內容，為了講授的連續(xù)性和系統(tǒng)性保證教學效果，在教學活動中可根據需要適當安排回顧復習醫(yī)學免疫學的相關內容。同時在教學過程中也可根據需要適當布置一些思考題和臨床病案分析，以幫助學生正確理解和掌握教學內容。7．本大綱對教學內容作了三個層次的界定：1）熟練掌握：要求教師對相關內容作細致講授，在可能的情況下適當作深度上的延伸，以求學生能透徹理解和運用。2）掌握：要求生學能深入理解相關基本概念、基本原理，能熟悉相關基本技術和方法。教師講授重點是引導學生對基本知識點的正確理解3）了解：要求學生對基本概念、基本原理、基本方法有一初步認識，明確相關知識點的適用范圍，教師可在教學活動中點明其知識要點，具體內容可引導學生自修。8．關于重點難點的理解：本綱對重點、難點并未嚴格區(qū)分，部分了解內容較難理解，教師應適當安排時間對相關內容作較詳細闡述。9．本綱內容的考核：本大綱內容的考核重點放在熟練掌握、掌握內容上，其主要考核學生對知識點的理解應用能力和課程內容的熟悉程度，對于了解內容主要考核基本概念、基本原理、基本技術的正確理解情況，具體所占比例教師根據授課情況調整把握。課程基本信息課程名稱：臨床免疫學和免疫檢驗課程類別：必修課學時分配：總學時為75學時，其中理論授課40學時，實驗課35學時考試方式：考試學分：4課程的基本內容及要求第一章概論目的要求了解本課程的性質、研究范圍、方法、目的及其任務。回顧并熟練掌握醫(yī)學免疫學中基礎免疫學的相關概念及免疫學機理。教學內容1．免疫學簡介2．臨床免疫學3．免疫檢驗重點、難點本課程的性質學時：1學時第二章抗原抗體反應目的要求熟練掌握抗原抗體反應的原理。熟練掌握抗原抗體反應的特點。掌握抗原抗體反應的影響因素及反應類型。教學內容抗原抗體反應原理（抗原抗體結合力、抗原抗體的親和性和親和力、親水膠體轉化為疏水膠體）抗原抗體反應特點（反應的特異性、比例性、可逆性）抗原抗體反應的影響因素（抗原、抗體及反應環(huán)境）抗原抗體反應的類型重點、難點抗原抗體反應特點、抗原抗體反應的影響因素學時：1學時第三章免疫原和抗血清的制備目的要求熟練掌握多克隆抗體的制備流程；了解常見免疫原的制備、動物的選擇和接種方法；熟練掌握免疫佐劑的概念，了解其種類和作用；掌握抗血清的鑒定和保存方法，并了解其純化方法。教學內容多克隆抗體概念、特點。免疫原的制備、免疫佐劑、動物的免疫接種、抗血清的鑒定和保存及抗血清的純化。重點難點免疫佐劑的概念及作用學時：1.5學時第四章單克隆抗體與基因工程抗體的制備技術目的要求熟練掌握雜交瘤技術制備單克隆抗體的原理和流程了解單克隆抗體的特點和應用熟練掌握基因工程抗體中相關抗體種類、特點，掌握其制備方法和應用了解抗體庫技術的制備原理。教學內容雜交瘤技術的基本原理（雜交瘤細胞制備原理、選擇性培養(yǎng)基的篩選及應用、克隆化培養(yǎng)）單克隆抗體的制備技術（純化和鑒定）基因工程抗體的概念和特點基因工程抗體人源化抗體、小分子抗體、抗體融合蛋白、雙特異性抗體抗體庫技術的原理、特點及應用重點難點雜交瘤技術學時：1.5學時第五章凝集反應目的要求熟練掌握凝集反應的原理、特點和常見的直接凝集反應、間接凝集反應和抗球蛋白試驗。了解自身紅細胞凝集試驗，掌握抗球蛋白參與的血凝試驗。教學內容凝集反應的特點常用的凝集反應類型（直接凝集反應、間接凝集反應、自身紅細胞凝集試驗、抗球蛋白試驗）重點難點凝集反應的原理、方法學時：1學時第六章沉淀反應目的要求熟練掌握沉淀反應的特點和液體內沉淀試驗、單向擴散試驗和雙向擴散試驗的方法；掌握免疫濁度測定影響因素。教學內容沉淀反應的特點液體內沉淀試驗（絮狀沉淀、免疫濁度）凝膠內沉淀試驗（單/雙向擴散試驗）沉淀反應的應用重點難點沉淀反應的特點、應用、免疫濁度測定影響因素學時：1學時第七章免疫電泳技術目的要求熟練掌握免疫電泳的基本原理和常見免疫電泳類型的反應原理（對流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳）。掌握各種類型免疫電泳的特性和應用。教學內容免疫電泳的基本原理：反應原理、電解質和蛋白質的兩性電離特性、電滲作用、電泳載體。電泳的類型：對流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳。重點難點免疫電泳的基本原理學時：1學時第八章放射免疫技術目的要求熟練掌握放射免疫技術的特點及放射免疫分析、免疫放射分析的基本原理了解放射免疫分析和免疫放射分析的異同教學內容放射免疫技術的特點放射免疫分析免疫放射分析放射免疫分析技術的應用重點難點放射免疫技術的特點、放射免疫分析及免疫放射分析的基本原理學時：1學時第九章熒光免疫技術目的要求熟練掌握熒光技術中的相關概念和常用的熒光物質了解熒光顯微鏡、熒光分光光度計的基本結構和使用熟練掌握熒光標記抗體的制備和免疫熒光顯微技術了解免疫熒光技術在醫(yī)學檢驗中的應用。教學內容熒光的基本知識：熒光現象、熒光技術中有關概念、常用熒光物質和設備。熒光抗體的制備：抗體的熒光素標記、標記抗體的純化和鑒定。免疫熒光顯微技術：標本的制作、熒光抗體染色、熒光顯微鏡檢查。免疫熒光技術在醫(yī)學檢驗中的應用：病原學和自身抗體檢測。重點難點熒光的基本知識、免疫熒光顯微技術學時：1學時第十章酶免疫技術要求目的熟練掌握酶免疫技術中常用的酶及相應底物，了解酶標抗體/抗原的制備方法。熟練掌握均相酶免疫測定和異相酶免疫測定的原理和應用。熟練掌握酶聯免疫吸附試驗的原理和方法。掌握膜載體的酶免疫測定中不同方法的實驗原理及應用。教學內容酶免疫技術的特點（酶和酶作用底物、酶標記抗體/抗原、固相載體及免疫吸附劑）。酶免疫技術的分類（均相酶免疫測定、異相酶免疫測定）。酶聯免疫吸附試驗膜載體的酶免疫測定（斑點酶免疫吸附試驗、免疫滲濾試驗、免疫層析試驗、免疫印跡技術）。重點難點酶聯免疫吸附試驗的原理、常用的酶及相應底物學時：2學時第十一章生物素-親和素免疫放大技術目的要求熟練掌握生物素-親和素系統(tǒng)的基本特點、基本類型及原理，了解生物素和親和素的標記方法，掌握該系統(tǒng)在酶免疫測定、熒光免疫測定、放射免疫測定及分子生物學中的應用。教學內容生物素-親和素系統(tǒng)的特點（靈敏度、特異性、穩(wěn)定性、適用性）。生物素的理化性質與標記（生物素的活化、蛋白質的生物素標記）。親和素、鏈霉親和素的理化性質與標記（親和素與鏈霉親和素的活性、親和素/鏈霉親和素的標記）。生物素-親和素系統(tǒng)的應用（生物素-親和素系統(tǒng)基本類型及原理，生物素-親和素系統(tǒng)在酶免疫測定、熒光免疫技術、放射免疫測定及分子生物學中的應用）。重點難點生物素-親和素系統(tǒng)的基本特點、生物素-親和素系統(tǒng)基本原理及在酶免疫測定中的應用學時：1學時第十二章免疫組織化學技術目的要求熟練掌握酶免疫組織化學、熒光免疫組織化學技術原理。了解免疫組織化學的技術要點、免疫金（銀）組織化學、免疫標記電鏡技術及激光掃描共聚焦顯微鏡技術。教學內容免疫組織化學技術的概念及技術要點（標本的處理、抗體的處理與保存、免疫染色及結果的判斷）。酶免疫組織化學技術（酶標抗體免疫組化染色法、非標記抗體免疫酶組化染色法、酶標記親和素-生物素技術）。熒光免疫組織化學技術。免疫金（銀）組織化學技術。免疫標記電鏡技術。激光掃描共聚焦顯微鏡技術。免疫組織化學技術的應用重點難點熒光免疫組織化學技術原理學時：3學時第十三章免疫細胞分離及檢測技術目的要求熟練掌握免疫細胞的分離技術、細胞表面標志的檢測和T細胞的功能測定。了解B細胞、NK細胞的功能檢測。教學內容免疫細胞的分離（外周血單個核細胞分離、淋巴細胞的分離、T/B細胞的分離、T細胞亞群的分離、分離細胞的保存及活力測定）淋巴細胞表面標志的檢測及亞群分類（T細胞、B細胞、NK細胞）淋巴細胞功能檢測技術（T細胞及其亞群、B細胞、NK細胞）免疫細胞檢測的臨床意義重點難點免疫細胞的分離技術學時：1.5學時第十四章吞噬細胞檢測及應用目的要求掌握中性粒細胞、巨噬細胞的吞噬功能測定。了解其功能測定的臨床意義。教學內容中性粒細胞功能的檢測：細胞運動功能的檢測、吞噬和殺菌功能的檢測。巨噬細胞功能的檢測：炭粒廓清試驗、吞噬功能檢測、溶酶體酶的測定。重點難點中性粒細胞吞噬和殺菌功能的檢測學時：0.5學時第十五章細胞因子測定及應用目的要求熟練掌握細胞因子常見的檢測方法。了解不同檢測方法的優(yōu)缺點及細胞因子檢測的臨床應用。教學內容細胞因子測定方法(生物學測定法、免疫測定法、分子生物學測定法)。細胞因子測定的臨床診斷、治療中的應用。重點難點細胞因子測定方法學時：1.5學時第十六章細胞粘附分子測定及應用目的要求掌握細胞粘附分子常見的檢測方法了解細胞粘附分子檢測的臨床意義。教學內容細胞粘附分子的檢測（細胞表面粘附分子的測定、可溶性粘附分子的測定、細胞粘附分子基因及基因表達的測定）細胞粘附分子測定的臨床應用。重點難點細胞粘附分子的檢測學時：0.5學時第十七章免疫球蛋白檢測及應用目的要求（參考第二十七章）熟練掌握血清中IgG、IgA、IgM、M蛋白的檢測方法和臨床意義。了解IgE、IgD和冷球蛋白的測定方法和臨床意義。教學內容IgG、IgA、IgM、IgE、IgD的測定及其臨床意義。異常免疫球蛋白的檢測（M蛋白檢測與鑒定、冷球蛋白檢測與鑒定）重點難點IgG、IgA、IgM、IgE、M蛋白定量的臨床意義、M蛋白檢測與鑒定學時：0.5學時第十八章循環(huán)免疫復合物檢測及應用目的要求了解不同類型循環(huán)免疫復合物的測定方法和臨床應用教學內容 抗原特異性循環(huán)免疫復合物非抗原特異性循環(huán)免疫復合物的測定非抗原特異性循環(huán)免疫復合物的測定技術的應用重點難點抗原特異性循環(huán)免疫復合物學時：0.5學時第十九章補體檢測及應用目的要求熟練掌握補體的性質、三條活化途徑的特點。掌握總補體和單個補體成份的測定原理和方法，掌握補體結合試驗的原理了解補體測定的臨床應用價值。教學內容補體系統(tǒng)及活化途徑。補體的測定（總補體的測定、單個補體成份的測定、補體結合試驗）。重點難點補體的性質及時性三條活化途徑、補體成份的測定原理學時：1學時第二十章自身抗體檢測及應用目的要求（參照第二十六章）熟練掌握自身免疫疾病的發(fā)生機理和特點。掌握常見自身抗體的檢測方法，掌握常見自身抗體檢測的臨床意義。了解抗組織抗體檢測。教學內容自身免疫與自身抗體常見自身抗體的檢測（類風濕因子、抗核抗體、抗ENA抗體譜、抗中性粒細胞胞漿抗體、抗心磷脂抗體）抗組織抗體檢測（抗平滑肌抗體、抗角蛋白抗體、抗乙酰膽堿受體抗體、抗骨骼肌抗體、抗胰島細胞抗體）自身抗體檢測的臨床應用重點難點自身抗體的臨床應用（類風濕因子、抗核抗體、抗ENA抗體譜、抗中性粒細胞胞漿抗體、抗心磷脂抗體）、抗核抗體的檢測方法學時：1學時第二十一章MHC與HLA檢測及應用目的要求熟練掌握MHC的基礎知識、HLA的傳統(tǒng)分型方法及HLA的分子生物學分型方法。了解HLA分型的應用。教學內容MHC的一般特性（概念、MHC基因、MHC分子）HLA分型方法（血清學分型、細胞學分型、分子生物學分型）。HLA分型的實際應用（器官移植、自身免疫性疾病、輸血反應、法醫(yī)學鑒定）。重點難點MHC的一般特性、HLA的分子生物學分型方法學時：2學時第二十二章流式細胞儀分析技術及應用目的要求掌握流式細胞儀的分析與分選原理及其參數與數據顯示方式。了解其樣品制備及質量控制。掌握其最常用的熒光標記物和標記方法。熟練掌握流式細胞術在免疫學檢查中的應用。教學內容流式細胞儀的分析及分選原理（工作原理、散射光的測定、熒光測量、分選原理）。數據的顯示與分析（參數、數據顯示方式）。流式細胞儀免疫分析的技術要求（樣品制備、熒光標記染色、質量控制）。流式細胞術在免疫學檢查中的應用。重點難點流式細胞儀的分析及分選原理、流式細胞術在免疫學檢查中的應用學時：2學時第二十三章免疫自動化儀器分析目的要求掌握自動化免疫比濁分析技術的原理并了解其實驗注意事項。熟練掌握化學發(fā)光、熒光免疫自動免疫分析的原理、常用標記物和分析類型，及各自的應用。教學內容自動化免疫比濁分析技術（散射免疫比濁分析、定時散射比濁分析、速率散射比濁分析、免疫透射比濁分析）?；瘜W發(fā)光自動免疫分析（分析原理、常用標記物、化學發(fā)光免疫分析的類型）。熒光免疫自動化分析（時間分辨熒光免疫測定、熒光偏振免疫測定、熒光酶免疫分析）。重點難點化學發(fā)光、熒光免疫自動免疫分析的原理、速率散射比濁分析學時：4學時第二十四章免疫檢驗的質量控制目的要求掌握質控的相關基本概念。熟練掌握免疫檢驗質量控制原則和室內質量控制的數據處理。了解室間質量評價及實驗室信息系統(tǒng)的質控應用。教學內容質控的相關基本概念（室內質控、室間質控、準確度、偏倚、精密度等）。免疫檢驗質量控制原則及常用免疫檢驗的質量控制（標準化操作、標準品與質控品、定性檢驗、定量檢驗等）。室內質量控制的數據處理與室間質量評價、實驗室信息系統(tǒng)在質控中的應用、免疫質控的意義。重點難點室內質量控制的數據處理、ROC曲線應用學時：3學時第二十五章超敏反應性疾病及其免疫檢測目的要求（參考第十七章、第十八章）熟練掌握各型超敏反應的發(fā)生機理與常見疾病，同時了解針對不同類型超敏反應的檢測方法。教學內容四型超敏反應的發(fā)生機理、常見疾病。超敏反應的免疫學檢測（皮膚試驗、IgE檢測、抗血細胞抗體檢測和循環(huán)免疫復合物的檢測）。重點難點血清IgE檢測學時：1學時第二十六章自身免疫性疾病及其免疫檢測目的要求（參考第二十章）掌握自身免疫性疾病的分類和共同特征。熟練掌握自身免疫性疾病的發(fā)病機制和免疫損傷機制。掌握常見的自身免疫性疾病及其免疫檢測。教學內容自身免疫性疾病概述（疾病的分類、自身免疫性疾病的共同特征）。自身免疫性疾病的發(fā)病機制（自身抗原、免疫調節(jié)異常、遺傳因素、Fas/FasL表達異常）自身免疫性疾病的免疫損傷機制常見的自身免疫性疾病自身免疫性疾病的主要實驗檢測。重點難點自身免疫性疾病的發(fā)病機制、主要實驗檢測學時：2學時第二十七章免疫增殖性疾病及其免疫檢測目的要求（參考第十七章、第七章）了解免疫增生性疾病的概念與分類，掌握其免疫損傷機制。掌握常見的免疫球蛋白增殖病。熟練掌握免疫球蛋白異常增生常用的免疫檢測。教學內容免疫增生性疾病的概念與分類。免疫增生性疾病的免疫損傷機制（漿細胞異常增殖、正常體液免疫抑制、異常免疫球蛋白增生、溶骨性病變）。常見免疫球蛋白增殖病及常用的免疫檢測。重點難點免疫球蛋白異常增生常用的免疫檢測學時：0.5學時第二十八章免疫缺陷性疾病及其免疫檢測目的要求掌握免疫缺陷性疾病的病因、分類和特點，了解臨床常見的原發(fā)性和繼發(fā)性免疫缺陷病。熟練掌握獲得性免疫缺陷綜合征。了解免疫缺陷病的發(fā)病機理及不同免疫缺陷病的實驗診斷項目。教學內容免疫缺陷性疾病的常見發(fā)病原因、分類、特點。原發(fā)性和繼發(fā)性免疫缺陷病（B細胞免疫缺陷、T細胞免疫缺陷、聯合免疫缺陷、吞噬細胞功能缺陷、補體缺陷）。獲得性免疫缺陷