分解纖維素的微生物的分離

第第頁分解纖維素的微生物的分離專題課題3

二微生的培物養(yǎng)與應(yīng)用分解纖維素的生物的分微離

.基一礎(chǔ)識(shí)㈠知.維纖素與纖維酶1素.纖素維纖維素是種由葡一糖萄尾首連相成而的分子化合物高是，含最量豐的多糖類富質(zhì)物。

考思纖維素：是球上含地最豐量的富多類物質(zhì)糖，植每物產(chǎn)年生的維纖素超過70億噸但卻不會(huì)在地球，大量上積的，為累什？

么纖維能素土壤被某些中微物生分解利用這，由于是它們能產(chǎn)生纖維夠素。酶人可應(yīng)類分用解維纖的微素生將秸物稈等棄物轉(zhuǎn)變成酒廢，用纖維精素處酶理服面料裝。

棉花等是自界中然纖維含量素高的最然產(chǎn)天。物

一

.礎(chǔ)知識(shí)基.㈠維素與纖維素纖酶2.維素纖酶纖維素酶是一復(fù)種合，一酶般認(rèn)它為少至包三種括分組，C即酶1(外酶)切、C酶(內(nèi)切*)酶和葡萄糖苷酶前，種酶兩纖使素分維成纖解二糖維第，種酶將三維纖二分解成糖萄葡糖

纖。維素

1酶、C*酶

纖C維糖

二葡糖苷酶

葡萄萄

糖一.

基知礎(chǔ)識(shí)㈠.纖素維與纖維素酶.纖維3的分解：素分解纖維的微素物生，各種細(xì)有、菌真菌少和放線菌數(shù)。

實(shí):纖驗(yàn)維素酶解分維纖的實(shí)素驗(yàn)①取支二02mL的試管各②入一加張濾紙條③加各pH4.入，物質(zhì)8為量.01om/lL醋的酸-醋酸緩沖液1鈉1ml1和m0l④乙在試管中入加1Lm纖素酶維⑤兩支管固定在錐形瓶試，中放在10r/m4ni搖的床振蕩1h⑥結(jié)上果乙：試的濾紙管消逝條甲乙

討：乙論試管的濾紙為條么什消逝會(huì)？試管的作用甲是什么?

一基礎(chǔ)知.識(shí)㈡.維纖分解細(xì)菌的素選：1.方法：篩剛果染紅法。色.2原：理剛果紅可以與纖素維形成紅色復(fù)物合當(dāng)，維素被纖維纖素分酶后解紅，復(fù)色合無法形物，涌現(xiàn)成纖維以分解素菌為中的心透圈明，們可我以過是否通生透產(chǎn)明來篩圈選纖素分維解菌。3.優(yōu)點(diǎn)該方：法以通可顏色反應(yīng)過徑直選。篩

操作

步

驟1、土壤樣取：富纖維素的環(huán)含中境分布環(huán)①境②緣由由于生物適一應(yīng)定環(huán)的境環(huán)，境生對(duì)有選物擇用作在，富纖維含素環(huán)的境，纖中素分解菌維的量含相對(duì)高，提此因從種這土樣中獲目得微的物的幾生率要于一般高境。環(huán)③實(shí)：例樹中多林年葉落成的形殖腐，土多年累積的枯枝敗等。葉④

論:討果找如不到適合的境環(huán)可以將，濾紙?jiān)诼袢乐型?，將紙埋濾在壤中土有么作用？你認(rèn)什為紙應(yīng)當(dāng)埋在土壤中濾深多

答？將濾：埋在土壤紙中能纖使素維分解菌相集對(duì)中事實(shí)上，是人工置設(shè)纖維素分解菌生的相宜環(huán)境存。一應(yīng)般將紙濾埋于約1深cm0右的左土中壤

。.實(shí)二驗(yàn)設(shè)與操作計(jì).試驗(yàn)㈠設(shè)計(jì)土：取樣壤擇選養(yǎng)培度稀釋

將樣品涂梯布鑒別到纖維素解菌的培分養(yǎng)基上

選擇生產(chǎn)明圈的菌透落

2選、擇培①養(yǎng)目的：加纖維素分增解菌濃的度，確保以能夠從品樣分別所中要的微需生。

物

、選2培擇②制養(yǎng)選備培擇養(yǎng)：閱讀書基P29本纖維素解菌的分擇選培育基方配回，問題。

答A、旁欄的中方是配液培育基還體是體固培育基？為什？B么這、培個(gè)基養(yǎng)微生物對(duì)是具否有擇選用？如作果有具，是如何進(jìn)行擇選的？C你能否、設(shè)一計(jì)個(gè)照試驗(yàn)對(duì)說，明擇選養(yǎng)培的基用

答作有：擇選作用，配方本以纖維中作為答：素是體液養(yǎng)培基，原是配因中方無凝固劑答：牛肉用蛋膏白胨養(yǎng)基與培之照對(duì)或。唯一源，只有能分解碳維纖素的微生可以物(瓊脂)者纖維將素改為葡萄。大量繁糖殖

。2、

選培育③操擇作：稱取樣土20g在，無條菌件加入裝下30m有L培育基的瓶搖中將。搖置瓶搖于床上，3在℃0振下蕩培1~2養(yǎng)，至培d基變混濁養(yǎng)吸取一。的培養(yǎng)定(約液m5L)轉(zhuǎn)，至另移瓶新鮮一的擇選培基中，養(yǎng)同樣以方法培的養(yǎng)到培育液變濁。渾也可重復(fù)選擇培。養(yǎng)

〖旁思欄考題〗什為么選培育能夠“擇縮濃所”的需生物微

在選擇？養(yǎng)的培條件下，以可使些能那適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的夠微物生得到快速繁殖，而那不些適這種應(yīng)養(yǎng)條營(yíng)的件微物的生繁殖被抑，制因可此起到以濃“縮”的作。用

二.試驗(yàn)

計(jì)與設(shè)操㈠作試驗(yàn)設(shè).計(jì)：土壤取樣選擇培育梯稀釋度將樣品涂布到別鑒纖維素解分的菌培養(yǎng)基上選產(chǎn)生挑明圈透菌落

3的梯度稀釋.照課按題1稀的操作釋方法將選擇培育，后培育的進(jìn)基行比稀釋等11010~7倍

。101

120

103

14015

100

6

.4將品涂布到鑒別纖樣維分素解菌的養(yǎng)培基上鑒別培基養(yǎng)—在培育—基中入某種指示加或化劑學(xué)品藥用,以⑴備制鑒別培基養(yǎng):別不鑒同類的種微物。生配方見書本92頁操。作過見課題1程(2涂)平布：板將稀度為釋104106的菌~懸液各取.01m涂l布到平板養(yǎng)基上培，30倒置培育?！?/p>

5剛果紅.色法染

法一方先：養(yǎng)培生微物再，加入果剛進(jìn)行顏紅色應(yīng)。反法二：在方倒平板就加時(shí)入剛果。紅〖欄思旁題〗考兩這方種各有法哪優(yōu)些點(diǎn)與足？染色法不優(yōu)點(diǎn)色反應(yīng)顏基本方法一是上維素纖分菌的作用解操作簡(jiǎn)不便存在菌落混雜問題缺點(diǎn)作操繁瑣剛果紅會(huì)使菌落之間生混發(fā)雜產(chǎn)淀粉生的酶生物也產(chǎn)生微模透糊圈，明有些微物生降能色素解，成形明的顯透亮圈。方二

法思索：

方一法中NCla溶的液作？用漂洗作用，洗去與纖素結(jié)合維不的牢剛果紅，以免涌現(xiàn)的透亮圈夠清不晰用。這方可以法判斷酶力的大活小，實(shí)上剛際紅是結(jié)果合培育基到多糖的底物，但分解纖素維的細(xì)菌以產(chǎn)生纖可維酶素能分，這解個(gè)多糖物成為單底糖，樣這果紅剛就能不結(jié)合上了，去化氯鈉液溶就以使結(jié)合可牢的剛不紅果洗去這樣，留下大大