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文檔簡介
二、試驗原理血液中所含葡萄糖,稱為血糖。它是糖在體內運輸形式。本試驗采取鄰甲苯胺法測定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介質中加熱脫水反應生成5-羥甲基-2-呋喃甲醛,分子中醛基與鄰甲苯胺縮合成青色薛夫氏堿,經(jīng)過比色能夠定量。血糖含量的測定第1頁三、試劑和器材試劑鄰甲苯胺試劑:稱取硫脲1.5g溶于750mL冰醋酸中,加鄰甲苯胺150mL及飽和硼酸40mL,混勻后加冰醋酸至1000mL,置棕色瓶中,冰箱保留。葡萄糖標準溶液:0.1mg/mL。血糖含量的測定第2頁材料動物血清器材具塞試管1.5×15cm(×8);分光光度計。血糖含量的測定第3頁四、操作方法1.制作標準曲線取6支試管編號后,按下表次序加入試劑:加畢,溫和混勻,于沸水浴中煮沸4min取下,冷卻,放置30min,用1cm比色杯,試劑空白為參比,測定630nm處吸光值,繪制標準曲線。血糖含量的測定第4頁管號012345標準葡萄糖液(mL)0.00.20.40.60.81.0蒸餾水(mL)1.00.80.60.40.20.0鄰甲苯胺試劑(mL)5.05.05.05.05.05.0A630血糖含量的測定第5頁2、樣品測定取3支試管編號后,分別加入試劑,與標準曲線同時作比色測定:管號對照樣品①樣品②稀釋未知血清樣品(mL)0.000.100.10蒸餾水(mL)0.100.000.00鄰甲苯胺試劑(mL)5.05.05.0A630血糖含量的測定第6頁
加畢,溫和混勻,于沸水浴中煮沸4min取下,冷卻,放置30min,用1cm比色杯,試劑空白為參比,測定630nm處吸光值,從標準曲線中可查出樣品中血糖含量。血糖含量的測定第7頁五、注意事項
該
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