山東省臨沂市沂水縣2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中生物試題（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1山東省臨沂市沂水縣2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中試題一、選擇題1.泡菜的制作有記載為“作鹽水，令極咸，于鹽水中洗菜，即內(nèi)（納）甕中。其洗菜鹽水，澄取清者，瀉著甕中，令沒(méi)菜把即止”，意思是制作極咸的鹽水，用鹽水洗過(guò)的菜放入菜壇中，再把洗過(guò)菜的澄清鹽水倒入菜壇中，直至淹沒(méi)菜為止。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.泡菜壇蓋邊注水并在發(fā)酵的過(guò)程中不斷補(bǔ)充，可以提供無(wú)氧發(fā)酵環(huán)境B.發(fā)酵過(guò)程中加入一些已經(jīng)腌制過(guò)的泡菜汁可以縮短發(fā)酵時(shí)間C.應(yīng)用細(xì)菌計(jì)數(shù)板對(duì)泡菜汁中乳酸菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)該先蓋蓋玻片再滴加樣液D.發(fā)酵過(guò)程中，亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)越積越多，應(yīng)盡量少食泡菜〖答案〗D〖祥解〗制作泡菜時(shí)要用到乳酸菌，乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，使得菜具有特殊的風(fēng)味，乳酸菌是厭氧菌，分解有機(jī)物是不需要氧氣的，因此泡菜壇要加蓋并用一圈水來(lái)封口，以避免外界空氣的進(jìn)入，否則如果有空氣進(jìn)入，就會(huì)抑制乳酸菌的活動(dòng)，影響泡菜的質(zhì)量。【詳析】A、泡菜發(fā)酵需要的菌種時(shí)乳酸菌，是厭氧性微生物，發(fā)酵過(guò)程中要向泡菜壇蓋邊注水并在發(fā)酵的過(guò)程中不斷補(bǔ)充，可以提供無(wú)氧發(fā)酵環(huán)境，利于乳酸菌發(fā)酵，A正確；B、已經(jīng)腌制過(guò)的泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過(guò)程中，加入一些已經(jīng)腌制過(guò)的泡菜汁可以縮短腌制時(shí)間，B正確；C、應(yīng)用細(xì)菌計(jì)數(shù)板對(duì)泡菜汁中乳酸菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)該先蓋蓋玻片再滴加樣液，如果先滴加菌液再加蓋玻片，容易使蓋玻片由于液滴的表面張力作用而不能?chē)?yán)密的蓋到計(jì)數(shù)板表面上，使計(jì)數(shù)室內(nèi)的體積增大，計(jì)數(shù)結(jié)果將偏高，C正確；D、泡菜中的亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵天數(shù)增多呈現(xiàn)的變化趨勢(shì)是先上升后下降，不是隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)越積越多，D錯(cuò)誤。故選D。2.啤酒發(fā)酵時(shí)具有活力的酵母需達(dá)到一定的數(shù)量；故在菌種活化的過(guò)程中，需定時(shí)取樣、檢測(cè)酵母的生長(zhǎng)狀況。若某次取樣品1mL加入到99mL無(wú)菌水中進(jìn)行稀釋后，經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色（體積忽略不計(jì)），在25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)為144個(gè)。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.糖化后的麥汁煮沸過(guò)程是嚴(yán)格的滅菌過(guò)程B.用赤霉素處理大麥種子不能省略制麥環(huán)節(jié)C.樣品中酵母細(xì)胞的密度為7．2×108個(gè)細(xì)胞/mLD.糖化采用的溫度越高，淀粉水解速度越快〖答案〗C〖祥解〗赤霉素的生理作用是可以促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)引起植株增高，還可以促進(jìn)種子萌發(fā)和果實(shí)發(fā)育。每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。【詳析】A、糖化后的麥汁煮沸過(guò)程是消毒過(guò)程，不屬于嚴(yán)格的滅菌，A錯(cuò)誤；B、赤霉素可誘導(dǎo)淀粉酶合成，以催化淀粉水解，從而促進(jìn)種子萌發(fā)，所以用赤霉素處理大麥種子可省略制麥環(huán)節(jié)，B錯(cuò)誤；C、若在25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)為144個(gè)，故樣品中酵母細(xì)胞的密度為144÷5×25÷0.1×103×102=7.2×108個(gè)細(xì)胞/mL，C正確；D、淀粉酶的催化需要適宜溫度，糖化采用的溫度過(guò)高，淀粉水解速度會(huì)變慢，D錯(cuò)誤。故選C。3.某興趣小組為研究“使用公筷對(duì)餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤(pán)，一盤(pán)取樣冷藏，一盤(pán)使用公筷，一盤(pán)不用公筷，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖。下列相關(guān)操作或敘述錯(cuò)誤的是（）A.配制培養(yǎng)基X并在121℃、100kPa條件下處理15~30minB.不食用組的培養(yǎng)基上也會(huì)有菌落出現(xiàn)C.在固體培養(yǎng)基X上用涂布器接種細(xì)菌D.固體培養(yǎng)基X對(duì)菜品中的細(xì)菌有選擇性〖答案〗D〖祥解〗培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌技術(shù)?！驹斘觥緼、配制培養(yǎng)基需要采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min，A正確；BD、固體培養(yǎng)基沒(méi)有做任何處理，所以對(duì)菜品中的細(xì)菌沒(méi)有選擇性，不食用組的培養(yǎng)基上也會(huì)有菌落出現(xiàn)，B正確，D錯(cuò)誤；C、據(jù)題意可知，在固體培養(yǎng)基X上接種后還需進(jìn)行計(jì)數(shù)，故只能用涂布法接種而不能用平板劃線法，用涂布器接種細(xì)菌，C正確。故選D。4.處理生活垃圾的有效方法之一是用微生物對(duì)其進(jìn)行降解，下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過(guò)程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，也常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目B.由于菌種對(duì)碘的分解能力不同，所以菌落①與菌落②產(chǎn)生透明圈的大小不同C.該實(shí)驗(yàn)中菌種溶液接種到培養(yǎng)基上，常用的接種工具是滅菌處理過(guò)的涂布器D.培養(yǎng)基中唯一的碳源是淀粉，在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的微生物一般為異養(yǎng)微生物〖答案〗B〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。【詳析】A、分離微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，也常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，A正確；B、由于菌種對(duì)淀粉的分解能力不同，所以菌落①與菌落②產(chǎn)生透明圈的大小不同，B錯(cuò)誤；C、該實(shí)驗(yàn)中菌液接種到培養(yǎng)基上所用的方法應(yīng)為稀釋涂布平板法，接種工具為涂布器，C正確；D、為篩選獲得高效降解淀粉菌種，培養(yǎng)基中唯一的碳源是淀粉，能在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的微生物一般為異養(yǎng)微生物，D正確。故選B。5.微生物蛋白又稱單細(xì)胞蛋白，它是利用工農(nóng)業(yè)廢料及石油廢料等人工發(fā)酵培養(yǎng)的微生物菌體，科學(xué)家們一直嘗試?yán)冒l(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的微生物蛋白來(lái)替代傳統(tǒng)肉類(lèi)，以期開(kāi)發(fā)一條環(huán)保、健康、可持續(xù)的肉類(lèi)生產(chǎn)途徑。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.微生物蛋白不僅含有豐富的蛋白質(zhì)，還含有糖類(lèi)、脂質(zhì)等物質(zhì)B.利用發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)微生物蛋白所用的菌種通常是單一菌種C.可采用過(guò)濾、沉淀等方法將微生物蛋白與發(fā)酵液分離D.發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)最大的區(qū)別是前者可利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)〖答案〗D〖祥解〗微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，以淀粉或纖維素的水解液，制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過(guò)發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體，即單細(xì)胞蛋白，用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，能使家禽、家畜增重快，產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高。【詳析】A、微生物蛋白是微生物菌體，不僅含有豐富的蛋白質(zhì)，還含有糖類(lèi)、脂質(zhì)等物質(zhì)，A正確；B、發(fā)酵過(guò)程中所用的菌種大多是單一菌種，一旦有雜菌污染，可能導(dǎo)致產(chǎn)量大大下降，例如，滅在青霉素生產(chǎn)過(guò)程中如果污染菌了雜菌，某些雜菌會(huì)分泌青霉素酶將青霉素分解掉，B正確；C、如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體從發(fā)酵液中分離出來(lái)，如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可采用蒸餾、萃取、離子交換等方法進(jìn)行提取，C正確；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久，遍布民間；發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過(guò)現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對(duì)人類(lèi)有用的產(chǎn)品，因此發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)都要利用微生物來(lái)進(jìn)行發(fā)酵，并不是兩者的區(qū)別，D錯(cuò)誤。故選D。6.滁菊為菊科多年生草本植物，長(zhǎng)期營(yíng)養(yǎng)繁殖易造成病毒積累，導(dǎo)致滁菊花色劣變。某科研小組比較了3種脫毒方法對(duì)滁菊體內(nèi)菊花B病毒（CVB）和菊花矮化類(lèi)病毒（CSVd）脫除的效果，結(jié)果見(jiàn)下表；圖是對(duì)不同試管苗進(jìn)行RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄PCR）后的電泳示意圖（引物根據(jù)CVB的基因序列設(shè)計(jì)）。（）脫毒方法樣本存活數(shù)脫除CSVd率脫除CVB率莖尖分生組織培養(yǎng)7720.7844.16熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)7136.6263.38病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)7146.4849.30下列相關(guān)敘述正確的是（）A.RT-PCR技術(shù)中用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶B.熱處理、病毒唑處理后，試管苗存活率下降C.試管苗2、5尚未脫毒成功，3、4已脫去CSVd和CVB病毒D.只脫除CSVd病毒時(shí)，可選擇熱處理結(jié)合莖尖分生組織培養(yǎng)〖答案〗B〖祥解〗本實(shí)驗(yàn)研究的是不同的脫毒方法對(duì)滁菊體內(nèi)菊花B病毒（CVB）和菊花矮化類(lèi)病毒（CSVd）脫除的效果，由表格數(shù)據(jù)可知，熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)和病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)的效果在脫毒率方面均優(yōu)于單獨(dú)的莖尖分生組織培養(yǎng)?！驹斘觥緼、逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶，PCR過(guò)程需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶，A錯(cuò)誤；B、熱處理和病毒唑處理后，相比于對(duì)照組，成活樣本數(shù)減少，成活率下降，B正確；C、2、5電泳結(jié)果顯示標(biāo)準(zhǔn)片段之外的陽(yáng)性結(jié)果，3，4則沒(méi)有，說(shuō)明3、4成功脫去CVB病毒，2、5未能脫去CVB病毒，本實(shí)驗(yàn)不能確定是否脫去CSVd，因?yàn)闆](méi)有設(shè)計(jì)CSVd的基因序列的引物，C錯(cuò)誤；D、觀察表格發(fā)現(xiàn)，病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)時(shí)，CSVd病毒脫除率最高，適用于只脫除CSVd病毒，D錯(cuò)誤。故選B。7.黑脛病對(duì)甘藍(lán)型油菜的危害十分嚴(yán)重，黑芥能抗黑脛病，兩者不能直接雜交。為解決該問(wèn)題，科研人員通過(guò)下圖所示過(guò)程獲得抗病品系。培育過(guò)程中通過(guò)紫外線照射使黑芥部分染色體結(jié)構(gòu)被破壞，據(jù)圖分析，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.最終獲得的抗病植株具有完整的甘藍(lán)型油菜和黑芥的遺傳信息B.過(guò)程①可使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁C.過(guò)程③獲得的愈傷組織細(xì)胞在顯微鏡下無(wú)法觀察到來(lái)自黑芥苗葉肉細(xì)胞的葉綠體D.可借助PCR技術(shù)、黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)對(duì)雜種植株進(jìn)行鑒定〖答案〗A〖祥解〗分析題圖：①表示去壁過(guò)程，常用酶解法；②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；③表示脫分化形成愈傷組織。【詳析】A、在培養(yǎng)過(guò)程中用紫外線照射黑芥，使染色體斷裂，最終獲得的抗病植株可能沒(méi)有具有完整的黑芥的遺傳信息，A錯(cuò)誤；B、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，過(guò)程①去除植物細(xì)胞壁，可使用纖維素酶和果膠酶，B正確；C、過(guò)程③是脫分化過(guò)程，故在顯微鏡下看不到葉綠體，C正確；D、可借助PCR技術(shù)鑒定是否含有抗黑脛病基因，黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)對(duì)雜種植株進(jìn)行鑒定，雜種植株應(yīng)表現(xiàn)為抗黑脛病，D正確。故選A。8.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可以通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得酚類(lèi)、萜類(lèi)等植物生長(zhǎng)非必需的次生代謝產(chǎn)物B.植物頂端分生組織附近的病毒很少，甚至無(wú)病毒，因此為了獲得脫毒苗常常利用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)C.細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件，提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量D.快速繁殖花卉的過(guò)程中，誘導(dǎo)愈傷組織期間一般不需要光照，此時(shí)細(xì)胞代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型〖答案〗C〖祥解〗植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，并且取得了顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用有以下幾方面：脫毒苗生產(chǎn)方面、經(jīng)濟(jì)植物快繁方面、新品種選育方面及利用植物細(xì)胞工程獲得生物產(chǎn)品?！驹斘觥緼、次生代謝產(chǎn)物是由次生代謝產(chǎn)生的一類(lèi)細(xì)胞生命活動(dòng)或植物生長(zhǎng)發(fā)育正常運(yùn)行的非必需的小分子有機(jī)化合物。因此可以通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得酚類(lèi)、萜類(lèi)等植物生長(zhǎng)非必需的次生代謝產(chǎn)物，A正確；B、莖尖等分裂旺盛部位無(wú)病毒感染，利用莖尖分生組織能培養(yǎng)出無(wú)病毒且保持優(yōu)良性狀的幼苗，即脫毒苗，B正確；C、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖，以從細(xì)胞中獲得次生代謝物，不是提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量，C錯(cuò)誤；D、快速繁殖花卉的過(guò)程中，誘導(dǎo)愈傷組織期間一般不需要光照，由于植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，故此時(shí)細(xì)胞代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型，D正確。故選C。9.T4溶菌酶來(lái)源于T4噬菌體，是重要的工業(yè)用酶。T4溶菌酶（A0）在溫度較高時(shí)易失去活性，科學(xué)家利用一定的技術(shù)使T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼帷Ｔ谠摪腚装彼崤c第97位的半胱氨酸之間形成了一個(gè)二硫鍵。獲得了耐熱性高的T4溶菌酶（A1）。下列敘述正確的是（）A.檢測(cè)A1活性時(shí)先將A1與底物混合，再置于高溫環(huán)境B.T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程，自然界中的酶都可通過(guò)蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造C.氨基酸替換和二硫鍵的形成需要通過(guò)改造基因?qū)崿F(xiàn)D.蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動(dòng)方向一致，即DNA→mRNA→蛋白質(zhì)〖答案〗C〖祥解〗分析題意可知，科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造，從而改造了T4溶菌酶的結(jié)構(gòu)，獲得了耐熱性高的T4溶菌酶?！驹斘觥緼、檢測(cè)A1活性時(shí)應(yīng)先將A1與底物分別置于高溫環(huán)境，保溫一段時(shí)間再混合，如果先混合后保溫不能保證酶與底物在最適溫度條件下進(jìn)行反應(yīng)，A錯(cuò)誤；B、T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程，酶大多是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA，蛋白質(zhì)工程只能用于改造蛋白質(zhì)類(lèi)，B錯(cuò)誤；C、據(jù)題意可知，科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造，從而實(shí)現(xiàn)氨基酸替換和二硫鍵的形成，C正確；D、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期蛋白質(zhì)的功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，蛋白質(zhì)工程與中心法則（DNA→mRNA→蛋白質(zhì)）的流動(dòng)方向相反，D錯(cuò)誤。故選C。10.“嵌合體”是指由兩個(gè)或兩個(gè)以上具有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞系形成的綜合體。某大學(xué)利用人類(lèi)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培育出類(lèi)腦組織，植入小鼠的大腦體感皮層中，成功培育出能進(jìn)行人類(lèi)某些活動(dòng)的“嵌合體小鼠”。這對(duì)于了解人腦發(fā)育過(guò)程，探究神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病有巨大突破。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.該實(shí)驗(yàn)成功的技術(shù)基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合B.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞可以由成體的成纖維細(xì)胞、B細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化而來(lái)C.嵌合體幼鼠的一個(gè)細(xì)胞中只含有人或小鼠的基因D.“嵌合體小鼠”的培育成功表明已分化的動(dòng)物細(xì)胞在某些情況下可以重新分化為其他細(xì)胞〖答案〗A〖祥解〗嵌合體在免疫學(xué)上的含義是指一個(gè)機(jī)體身上有兩種或兩種以上染色體組成不同的細(xì)胞系同時(shí)存在，彼此能夠耐受，不產(chǎn)生排斥反應(yīng)，相互間處于嵌合狀態(tài)?！驹斘觥緼、分析題意可知，本實(shí)驗(yàn)將培育出類(lèi)腦組織，植入小鼠的大腦體感皮層中，并未涉及動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞原理是細(xì)胞的增殖，所以可以利用成體的成纖維細(xì)胞、B細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，B正確；C、由題意可知，“嵌合體”是指由兩個(gè)或兩個(gè)以上具有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞系形成的綜合體，一嵌合體幼鼠細(xì)胞中染色體組成不同的人和鼠細(xì)胞系同時(shí)存在，彼此能夠耐受，不產(chǎn)生排斥反應(yīng)，相互間處于嵌合狀態(tài)，故一個(gè)細(xì)胞中只含有人或小鼠的基因，不會(huì)兩種基因同時(shí)存在，C正確；D、分析題意可知，“嵌合體小鼠”的培育過(guò)程中需要利用人類(lèi)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培育出類(lèi)腦組織，故“嵌合體小鼠”的培育成功表明已分化的動(dòng)物細(xì)胞在某些情況下可以重新分化為其他細(xì)胞，D正確。故選A。11.科學(xué)家將能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體與藥物結(jié)合，制成了抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC），實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，ADC的作用機(jī)理如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.ADC進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程依賴膜的選擇透過(guò)性B.制備ADC中的抗體應(yīng)用了體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)C.ADC中藥物的作用是通過(guò)誘發(fā)腫瘤細(xì)胞壞死而殺傷腫瘤細(xì)胞D.可以將ADC中的藥物換成放射性同位素，標(biāo)記單克隆抗體進(jìn)行靶向放療〖答案〗D〖祥解〗抗體上帶有藥物，抗體與腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合通過(guò)胞吞的方式把藥物一并帶進(jìn)靶細(xì)胞，引起靶細(xì)胞溶酶體膜的破裂，最后導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。【詳析】A、ADC進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程是胞吞過(guò)程，依賴膜的流動(dòng)性，A錯(cuò)誤；B、制備ADC中的抗體應(yīng)用了細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，沒(méi)有利用體細(xì)胞核移植技術(shù)，B錯(cuò)誤；C、ADC中藥物的作用是通過(guò)誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡而殺傷腫瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、特異性抗體能特異性識(shí)別腫瘤抗原，所以利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體，可用于定位診斷腫瘤，進(jìn)行靶向放療，D正確。故選D。12.普通番茄細(xì)胞中多聚半乳糖醛酸酶基因（PG基因）控制合成的多聚半乳糖醛酸酶，能使番茄細(xì)胞壁破壞而不耐貯藏?？茖W(xué)家將抗PG基因?qū)敕鸭?xì)胞，使抗PG基因合成的mRNA與PG基因合成的mRNA相結(jié)合，從而培育出抗軟化的轉(zhuǎn)基因番茄。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.PG基因與抗PG基因的區(qū)別是基因中的堿基序列不同B.抗PG基因能阻止PG基因表達(dá)的翻譯過(guò)程，使細(xì)胞不能合成PGC.常用顯微注射法將抗PG基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞D.為了避免轉(zhuǎn)基因植物花粉污染周?chē)参?，可將抗PG基因整合到葉綠體DNA上〖答案〗C〖祥解〗1、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的最常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。2、真核細(xì)胞基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，轉(zhuǎn)錄指的是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過(guò)程，翻譯指的是以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程?！驹斘觥緼、真核細(xì)胞中基因是有遺傳信息的DNA片段，其堿基對(duì)的排列順序決定了遺傳信息，故PG基因與抗PG基因的區(qū)別是基因中的堿基序列不同，A正確；B、翻譯是以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，抗PG基因合成的mRNA與PG基因合成的mRNA相結(jié)合，從而阻止了PG基因的mRNA和核糖體結(jié)合，不能進(jìn)行翻譯過(guò)程，使細(xì)胞不能合成PG，B正確；C、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的最常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，顯微注射法通常是將目的基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞（受精卵），C錯(cuò)誤；D、由于精子中幾乎不含有細(xì)胞質(zhì)，所以如果將抗PG基因整合到葉綠體DNA上，則花粉中不含有抗PG基因，避免基因污染，D正確。故選C。13.生物技術(shù)在給人帶來(lái)福音和便利的同時(shí)，對(duì)人類(lèi)社會(huì)的安全性也產(chǎn)生了一定的影響。下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性與倫理問(wèn)題敘述正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因技術(shù)是提高生物多樣性的一種重要手段B.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株可以減少農(nóng)藥的使用，因此對(duì)環(huán)境不會(huì)造成任何影響C.轉(zhuǎn)基因技術(shù)可用來(lái)減少酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期D.生殖性克隆和治療性克隆的結(jié)果本質(zhì)是相同的，都會(huì)面臨倫理問(wèn)題〖答案〗C〖祥解〗1、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全(滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)，對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。2、中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則(不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn))，不反對(duì)治療性克隆人。【詳析】A、轉(zhuǎn)基因技術(shù)是按照人們的意愿設(shè)計(jì)出的符合人類(lèi)要求的作物，轉(zhuǎn)入的目的基因是自然界已有的基因，沒(méi)有增加基因多樣性，也沒(méi)有產(chǎn)生新的物種，所以不能提高生物多樣性，A錯(cuò)誤；B、轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株可以減少農(nóng)藥的使用，但也會(huì)對(duì)環(huán)境造成一定的影響，B錯(cuò)誤；C、轉(zhuǎn)基因技術(shù)已被用來(lái)減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期，屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用，C正確；D、治療性克隆，運(yùn)用克隆技術(shù)獲得人體早期胚胎，但目的不是將胚胎培育成人，而是為了提取全能型的胚胎干細(xì)胞，然后在合適的條件下，使其發(fā)育成為人體的任何一個(gè)器官，這些器官組織將用于醫(yī)療；生殖性克?。菏侵赋鲇谏衬康氖褂每寺〖夹g(shù)在實(shí)驗(yàn)室制造人類(lèi)胚胎，然后將胚胎置入人類(lèi)子宮發(fā)育成胎兒或嬰兒的過(guò)程，生殖性克隆和治療性克隆的結(jié)果本質(zhì)是不相同的，生殖性克隆會(huì)面臨倫理問(wèn)題，D錯(cuò)誤。故選C。14.解偶聯(lián)蛋白1（UCP1）具有消除線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的H+濃度差，減少ATP合成、增加產(chǎn)熱的功能。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)將豬的UCP1基因置換成小鼠的UCP1基因，并使鼠UCP1基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達(dá)，獲得脂肪沉積少的“瘦肉豬”。下圖是“瘦肉豬”的主要培育過(guò)程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)育種的主要原理是基因重組B.過(guò)程b進(jìn)行有限稀釋培養(yǎng)的目的是獲得陽(yáng)性單克隆細(xì)胞系C.過(guò)程d的受體細(xì)胞最好是去核的豬卵母細(xì)胞D.過(guò)程e要對(duì)代孕豬進(jìn)行同期發(fā)情處理，并選擇發(fā)育正常的原腸胚植入代孕豬輸卵管〖答案〗D〖祥解〗分析題意和題圖：科學(xué)家應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)將豬的UCP1基因置換成小鼠的UCP1基因，并使鼠UCP1基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達(dá)，豬的體細(xì)胞獲得了鼠的UCP1基因，且該基因在豬細(xì)胞中正常表達(dá)?！驹斘觥緼、CRISPR/Cas9技術(shù)將豬的UCP1基因置換成小鼠的UCP1基因，應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)育種的主要原理是基因重組，使得小鼠的UCP1基因在豬的體細(xì)胞中正常表達(dá)，A正確；B、過(guò)程b進(jìn)行有限稀釋培養(yǎng)，保證加到每個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)的細(xì)胞數(shù)不超過(guò)1個(gè)，該操作的目的是獲得陽(yáng)性單克隆細(xì)胞系，B正確；C、卵母細(xì)胞含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)，還可為細(xì)胞的早期分裂提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，故過(guò)程d的受體細(xì)胞最好是去核的豬卵母細(xì)胞，C正確；D、過(guò)程e要對(duì)代孕豬進(jìn)行同期發(fā)情處理，使之處于相同生理狀態(tài)，并選擇發(fā)育正常的桑椹胚或囊胚植入代孕豬輸卵管，D錯(cuò)誤。故選D。15.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定及DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中，紅細(xì)胞漲破后將DNA釋放出來(lái)B.DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可利用這一原理初步分離DNA與蛋白質(zhì)C.將提取到的絲狀物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，在沸水浴條件下可用二苯胺試劑鑒定D.DNA分子構(gòu)象不影響DNA片段在瓊脂糖凝膠中的遷移速率〖答案〗D〖祥解〗DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度最低)，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的?！驹斘觥緼、利用滲透吸水的原理，可將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中，紅細(xì)胞漲破后將DNA釋放出來(lái)，A正確；B、DNA的溶解性與蛋白質(zhì)的溶解性不同，DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可利用這一原理初步分離DNA與蛋白質(zhì)，B正確；C、將絲狀物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，在沸水浴加熱條件下DNA與加入的二苯胺試劑反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色，C正確；D、PCR擴(kuò)增的DNA片段在瓊脂糖凝膠中遷移的速率與凝膠濃度、DNA分子大小、DNA分子構(gòu)象等有關(guān)，D錯(cuò)誤。故選D。二、選擇題16.某種野生型細(xì)菌能夠在基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，突變菌株A和突變菌株B由于不能自己合成某些代謝物，而不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)?？蒲腥藛T利用菌株A和菌株B在基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)進(jìn)行了如下兩個(gè)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)一結(jié)果如圖1；實(shí)驗(yàn)二：將菌株A和菌株B分別置于U型管的兩側(cè)，中間由過(guò)濾器隔開(kāi)。過(guò)濾器允許培養(yǎng)液自由流通，但細(xì)菌細(xì)胞不能通過(guò)。經(jīng)幾小時(shí)培養(yǎng)后，將菌液A、B分別涂布于基本培養(yǎng)基上，結(jié)果如圖2。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.各組實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基均需滅菌處理，滅菌后立即倒平板B.實(shí)驗(yàn)二證明菌株A、B相互為對(duì)方提供了必需的代謝物C.菌株A、B可能通過(guò)接觸發(fā)生了遺傳物質(zhì)的重新組合D.培養(yǎng)菌株A、B的培養(yǎng)基一般需將pH調(diào)至酸性〖答案〗ABD〖祥解〗題圖1分析，將菌株A和菌株B單獨(dú)涂布于基本培養(yǎng)基上時(shí)都沒(méi)有產(chǎn)生菌落，而將兩者混合后涂布于基本培養(yǎng)基上時(shí)產(chǎn)生了菌落。圖2中將菌株A和菌株B分別置于U形管的兩端，中間由過(guò)濾器隔開(kāi)。加壓力或吸力后，培養(yǎng)液可以自由流通，但細(xì)菌細(xì)胞不能通過(guò)。經(jīng)幾小時(shí)培養(yǎng)后，將菌液A，B分別涂布于基本培養(yǎng)基上，結(jié)果沒(méi)有產(chǎn)生菌落，說(shuō)明二者混合后能生長(zhǎng)菌落不是互相提供物質(zhì)的結(jié)果，可能是遺傳物質(zhì)改變導(dǎo)致的。【詳析】A、培養(yǎng)基配制好應(yīng)先滅菌，然后待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，A錯(cuò)誤；B、若菌株A、B相互為對(duì)方提供了必需的代謝物，那么實(shí)驗(yàn)二中培養(yǎng)液（其中包含兩種菌株的代謝物質(zhì)）可以通過(guò)過(guò)濾器自由流通，那么A、B菌株可以利用對(duì)方提供的必須代謝物繁殖，經(jīng)涂布在基本培養(yǎng)基上，應(yīng)該有菌落產(chǎn)生，與題圖不符，因此實(shí)驗(yàn)二證明菌株A、B混合培養(yǎng)有菌落出現(xiàn)的原因不是相互為對(duì)方提供了必需的代謝物的結(jié)果，B錯(cuò)誤；C、實(shí)驗(yàn)一中A、B菌株之間可以相互接觸，就產(chǎn)生了能在基本培養(yǎng)基上繁殖的菌株，實(shí)驗(yàn)二中培養(yǎng)液可以自由流通，但細(xì)菌細(xì)胞不能通過(guò)，無(wú)相應(yīng)菌株產(chǎn)生，說(shuō)明菌株A、B可能通過(guò)接觸發(fā)生了遺傳物質(zhì)的重新組合，導(dǎo)致產(chǎn)生了能在基本培養(yǎng)基上繁殖的新菌株，C正確；D、細(xì)菌需要在中性偏堿性的環(huán)境中生長(zhǎng)，因此，培養(yǎng)菌株A、B的培養(yǎng)基一般需將pH調(diào)至中性、微堿性，D錯(cuò)誤。故選ABD。17.第四代試管嬰兒技術(shù)——卵漿置換，其過(guò)程如圖所示。該技術(shù)首先要取得女性的卵細(xì)胞核，再將其移植入優(yōu)質(zhì)的去核卵細(xì)胞內(nèi)，使兩者重組成活力較強(qiáng)的卵細(xì)胞，此卵細(xì)胞經(jīng)體外受精形成胚胎后移植入母體子宮。下列相關(guān)敘述不合理的是（）A.該技術(shù)可以適用于卵子活力差、質(zhì)量不佳的不孕女性B.應(yīng)用該技術(shù)培育來(lái)的嬰兒，其染色體來(lái)自父親和母親C.該技術(shù)可能會(huì)引起社會(huì)倫理道德方面的質(zhì)疑和爭(zhēng)議D.應(yīng)用該技術(shù)能提高不孕女性的受孕率，平衡性別比例〖答案〗D〖祥解〗1、核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體，用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。2、試管嬰兒技術(shù)主要用到了胚胎工程和細(xì)胞工程中的體外受精、胚胎移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)?！驹斘觥緼、根據(jù)題干信息，“試管嬰兒卵漿置換技術(shù)首先取得女性的卵細(xì)胞核，并將其移植入優(yōu)質(zhì)的去核卵細(xì)胞內(nèi)”，說(shuō)明該技術(shù)主要適用于卵子質(zhì)量不佳的女性，A正確；B、由圖可知，嬰兒的染色體來(lái)自于母親卵細(xì)胞和父親的精子，B正確；C、該技術(shù)涉及到核移植技術(shù)，形成的試管嬰兒核遺傳物質(zhì)一半父親、一半母親，細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)源于去核卵細(xì)胞，涉及到三個(gè)親本，導(dǎo)致倫理道德方面的質(zhì)疑和爭(zhēng)議，C正確；D、應(yīng)用該技術(shù)可提高孕女性的受孕率，但不能平衡性別比例，D錯(cuò)誤。故選D。18.為探究Bcl-2相關(guān)抗凋亡蛋白3（BAG3）在細(xì)胞自噬中的作用，科研人員計(jì)劃從質(zhì)粒A中獲取BAG3基因，將其接入質(zhì)粒pGEX-4T1，然后在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)目標(biāo)蛋白，用于后續(xù)研究（如圖1所示），BAG3的基因序列如圖2所示。由于BAG3基因兩側(cè)沒(méi)有合適的酶切位點(diǎn)，并確定內(nèi)部不含有EcoRI，Xho1限制酶的識(shí)別序列。在設(shè)計(jì)引物時(shí)，需將引物與限制酶的識(shí)別序列相連，以便將目的基因與載體相連。設(shè)計(jì)出的引物是（）A.引物5'-TTGAATTCATGAGCGCCGCCACCCACTC-3'B引物5'-TTGAATTCTACTCGCGGCGGTGGGTGAG-3'C.引物5'-TAGAGCTCCGGTGCTGCTGGGTTACCAC-3'D.引物5'-TACTCGAGCGGTGCTGCTGGGTTACCAG-3'〖答案〗AD〖祥解〗PCR技術(shù)：1、原理：DNA復(fù)制。2、前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。3、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。4、過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。【詳析】目的基因BAC3基因兩側(cè)沒(méi)有合適的酶切位點(diǎn)，并確定內(nèi)部不含有EcoRI、XhoI限制酶的識(shí)別序列，為防止目的基因被限制酶切開(kāi)，故在設(shè)計(jì)引物時(shí)，應(yīng)選擇EcoRI、XhoI限制酶與引物的5'段進(jìn)行連接。PCR過(guò)程需要兩種引物，能分別與目的基因兩條鏈的3'端通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合。A選項(xiàng)中，GAATTC為EcoRⅠ限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，5'-ATGAGCGCCGCCACCCACTC-3'是以目的基因BAC3的互補(bǔ)鏈為模板合成的，A符合題意；D選項(xiàng)中，CTCGAG為XhoⅠ限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，5'-CGGTGCTGCTGGGTTACCAG-3'是以目的基因BAC3為模板合成的，D符合題意。故選AD。19.某研究團(tuán)隊(duì)利用甲基化酶、去甲基化酶以及基因編輯技術(shù)增加了兩個(gè)父系基因組印記控制區(qū)域的甲基化，以及母系控制區(qū)域的5個(gè)去甲基化，再將一個(gè)極體注入經(jīng)修飾的卵母細(xì)胞，然后經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)后進(jìn)行胚胎移植，成功培育出可育的孤雌小鼠，部分過(guò)程如下圖所示。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.甲基化會(huì)關(guān)閉基因的活性，對(duì)某些基因進(jìn)行去甲基化后該基因可正常表達(dá)B.“極體”注入“修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞”后，可通過(guò)電融合法使兩細(xì)胞融合C.胚胎移植前，需對(duì)供體和受體進(jìn)行免疫檢查，避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)D.“孤雌小鼠”的誕生過(guò)程沒(méi)有精子參與，其基因型與提供卵母細(xì)胞的雌鼠相同〖答案〗CD〖祥解〗分析圖示，從卵泡中取出卵母細(xì)胞，再將經(jīng)過(guò)甲基化處理的卵母細(xì)胞進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等獲得孤雌小鼠?！驹斘觥緼、DNA分子甲基化會(huì)影響基因的表達(dá)，從而關(guān)閉基因的活性，而對(duì)某些基因進(jìn)行去甲基化后該基因可正常表達(dá)，A正確；B、誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有三種：:生物方法-病毒、化學(xué)方法-聚乙二醇(PEG)、物理方法-離心、震動(dòng)、電刺激，因此“極體”注入“修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞”后，可通過(guò)電融合法使兩細(xì)胞融合，B正確；C、受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此胚胎移植前，不需要對(duì)供體和受體進(jìn)行免疫檢查，C錯(cuò)誤；D、孤雌小鼠是由次級(jí)卵母細(xì)胞發(fā)育而來(lái)，如果提供卵細(xì)胞的基因型是AaBb，經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成的次級(jí)卵母細(xì)胞基因型可以是AABB，所以二者基因型可能不同，D錯(cuò)誤。故選CD。20.常用不對(duì)稱PCR來(lái)制備單鏈DNA分子探針。不對(duì)稱PCR中使用的一對(duì)引物的量不相等，其中少的稱為限制性引物，多的稱為非限制性引物，開(kāi)始擴(kuò)增出的是雙鏈DNA，后來(lái)擴(kuò)增出了單鏈DNA。圖中，α鏈為所需的DNA分子探針，已知圖示DNA有m個(gè)，前10次循環(huán)的產(chǎn)物為雙鏈DNA，后10次循環(huán)的產(chǎn)物是單鏈DNA，下列有關(guān)此過(guò)程的說(shuō)法正確的是（）A.DNA聚合酶從引物的5'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸B.引物Ⅰ是非限制性引物，引物Ⅳ是限制性引物C.此過(guò)程需要非限制性引物個(gè)數(shù)為（11×210-1）mD.此過(guò)程最終獲得所需單鏈探針個(gè)數(shù)為10m×210〖答案〗CD〖祥解〗PCR反應(yīng)過(guò)程是：變性→復(fù)性→延伸。結(jié)果：上述三步反應(yīng)完成后，一個(gè)DNA分子就變成了兩個(gè)DNA分子，隨著重復(fù)次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加，PCR的反應(yīng)過(guò)程都是在PCR擴(kuò)增儀中完成的?！驹斘觥緼、PCR時(shí)，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的，A錯(cuò)誤；B、DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈，引物Ⅱ和Ⅲ無(wú)意義，若α鏈為所需的DNA分子探針，則非限制性引物應(yīng)選用引物Ⅳ，引物Ⅳ引導(dǎo)合成的序列和β互補(bǔ)和α相同，那么引物Ⅰ應(yīng)該是限制性引物，B錯(cuò)誤；CD、已知圖示DNA有m個(gè)，前10次循環(huán)的產(chǎn)物為雙鏈DNA，可得到m·210個(gè)雙鏈DNA，此過(guò)程需要引物Ⅰ和引物Ⅳ共（m·210×2-2m），兩種引物量是相等的，因此此過(guò)程需要引物Ⅳ為（m·210-m）；前10次循環(huán)的產(chǎn)物為雙鏈DNA，則β鏈就有m·210個(gè)，以β鏈為模板，利用引物IV進(jìn)行10次循環(huán)，每次循環(huán)生成的都是a鏈且不改變?chǔ)骆湹臄?shù)量，即鏈每次循環(huán)開(kāi)始時(shí)都是m·210個(gè)，而每次循環(huán)生成的a鏈也是m·210個(gè)，則后10次循環(huán)可獲得10m·210個(gè)所需的單鏈探針(a鏈)，需要引物IV也是10m·210個(gè)，因此整個(gè)過(guò)程需要非限制性引物IV個(gè)數(shù)為（m·210-m）+10m·210=（11×210-1）m，CD正確。故選CD。三、非選擇題21.土壤中的磷大部分以難被植物吸收利用的無(wú)效態(tài)（如磷酸鈣等難溶態(tài)，在水中呈白色沉淀）存在，溶磷菌能夠把無(wú)效態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被直接利用的可溶性磷?？蒲腥藛T開(kāi)展了相關(guān)研究，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）取10克土壤樣品，依次配備稀釋倍數(shù)為103、104、105的土壤稀釋液，分別取0.1ml涂布于含難溶磷的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)2d。待菌落長(zhǎng)出后挑取透明溶磷圈和菌落生長(zhǎng)直徑比值___________（填寫(xiě)“大”或“小”）的單菌落，于基礎(chǔ)培養(yǎng)基上采用___________法進(jìn)行多次分離純化。用稀釋涂布平板法對(duì)溶磷菌計(jì)數(shù)時(shí)，若每毫升菌液中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為1×1010個(gè)，每個(gè)平板上涂布0.2mL，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)約200個(gè)，則溶磷菌的菌液稀釋___________倍。（2）將分離獲得的溶磷菌分別配制成菌懸液，接入已滅菌的含難溶磷液體培養(yǎng)基中，對(duì)照組的培養(yǎng)基接種___________，每天取樣測(cè)定溶磷量和pH變化情況，實(shí)驗(yàn)組結(jié)果如圖。①結(jié)果表明目的菌分解難溶磷的能力呈現(xiàn)___________的趨勢(shì)。②根據(jù)培養(yǎng)液的pH變化情況，可對(duì)目的菌的解磷原理作出的推測(cè)是___________。（3）獲得目的菌后，還可以采取___________的育種措施，進(jìn)一步提高其耐寒、耐鹽的能力。請(qǐng)預(yù)期該溶磷菌在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面可能的應(yīng)用___________?！即鸢浮剑?）①.大②.平板劃線③.107（2）①.等量滅活的菌懸液（或等量無(wú)菌水）②.先升高后降低③.溶磷菌通過(guò)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物分解難溶性磷（3）①.誘變育種（或基因工程）②.將溶磷菌制成生物肥料促進(jìn)植物對(duì)磷元素的吸收〖祥解〗1、微生物接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。2、據(jù)圖可知，自變量為培養(yǎng)時(shí)間，因變量為溶磷量和pH。在1-4天內(nèi)溶磷量隨時(shí)間增加而增多，即分解能力升高，第4天后，溶磷量開(kāi)始減少；在加入溶磷菌后溶液pH迅速降低，溶磷量開(kāi)始增加，隨著pH回升，溶磷量就開(kāi)始降低，據(jù)此推測(cè)溶磷菌可能通過(guò)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物分解難溶性磷?！拘?wèn)1詳析】溶磷菌能夠把無(wú)效態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被直接利用的可溶性磷，土壤中的磷大部分以磷酸鈣等難溶態(tài)在水中呈白色沉淀，故加入含難溶磷的固體培養(yǎng)基渾濁不透明，經(jīng)過(guò)溶磷菌作用一段時(shí)間后，可挑選平板上形成透明溶磷圈的菌落，溶磷圈和菌落生長(zhǎng)直徑比值大說(shuō)明溶磷菌的分解能力強(qiáng)，則挑取溶磷圈和菌落生長(zhǎng)直徑比值大的單菌落；純化常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，如平板劃線法將挑選出的菌落于基礎(chǔ)培養(yǎng)基上采用連續(xù)劃線法進(jìn)行多次純化。假設(shè)至少將菌液稀釋X倍，才能保證稀釋后的0.2mL菌液中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)不超過(guò)200個(gè)，初步估測(cè)細(xì)胞數(shù)為1×1010個(gè)/mL，可得200÷0.2×X=1×1010，則X=107，因此溶磷菌的菌液至少稀釋107倍?！拘?wèn)2詳析】為了保證無(wú)關(guān)變量的一致，則對(duì)照組的培養(yǎng)基接種等量滅活的菌懸液（或等量無(wú)菌水）。①據(jù)圖可知，自變量為培養(yǎng)時(shí)間，因變量為溶磷量和pH。據(jù)圖可知，在1-4天內(nèi)溶磷量隨時(shí)間增加而增多，即分解能力升高，第4天后，溶磷量開(kāi)始減少，即分解能力降低，所以是先升高后降低。②據(jù)圖可知，在加入溶磷菌后溶液pH迅速降低，溶磷量開(kāi)始增加，隨著pH回升，溶磷量就開(kāi)始降低，據(jù)此推測(cè)溶磷菌可能通過(guò)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物分解難溶性磷?！拘?wèn)3詳析】獲得目的菌后，還可以采取人工誘變（轉(zhuǎn)基因、基因工程）的育種措施，進(jìn)一步提高其耐寒、耐鹽的能力。據(jù)題，土壤中磷大部分以難被植物吸收利用的無(wú)效狀態(tài)如磷酸鈣等難溶態(tài)存在，而溶磷菌可將難溶態(tài)磷分解為可被植物直接利用的可溶性磷，故可將其制成微生物菌肥促進(jìn)植物對(duì)土壤中磷元素的吸收（生產(chǎn)解磷菌肥料、生產(chǎn)酶制劑等）。22.紫草是一種重要的藥用植物，其根部富含紅色的萘醌類(lèi)次生代謝產(chǎn)物——紫草寧及其衍生物。它們具有抗菌、消炎、活血、誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡和抑制I型HIV等功效，同時(shí)也是一種天然染料?？蒲腥藛T利用紫草新生的營(yíng)養(yǎng)芽為外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，以獲得更多的紫草寧?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）選取新生的營(yíng)養(yǎng)芽作為外植體的原因是____________。誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)方法有_____________。（2）下圖表示在發(fā)酵培養(yǎng)中接種細(xì)胞密度與細(xì)胞收獲量、紫草寧含有率（培養(yǎng)14天）關(guān)系的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：注：紫草寧含有率是指紫草寧質(zhì)量/細(xì)胞收獲量根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可推測(cè)當(dāng)接種細(xì)胞密度超過(guò)6g．drywt．/L時(shí)，細(xì)胞內(nèi)紫草寧合成會(huì)____，從而導(dǎo)致紫草寧含有率的下降。根據(jù)圖中數(shù)據(jù)，在發(fā)酵培養(yǎng)中選擇接種細(xì)胞密度為6g．drywt．/L而不是接種細(xì)胞密度為4g．drywt．/L的原因是____________。在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基的成分組成、濃度，也會(huì)影響到紫草寧含有率。在培養(yǎng)過(guò)程中，需震蕩培養(yǎng)的目的是______________________。（3）研究者設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討激素誘導(dǎo)愈傷組織分化生芽的機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)在愈傷組織生芽過(guò)程中，細(xì)胞分裂素（CK）通過(guò)A基因和W基因起作用。為探討A基因與W基因的關(guān)系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型的愈傷組織分別置于CK與生長(zhǎng)素比例高的（高CK）培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生芽，在此過(guò)程中測(cè)定W基因的表達(dá)量如圖，分析圖中結(jié)果可得出的結(jié)論是：野生型的W基因表達(dá)量與高CK誘導(dǎo)時(shí)間的關(guān)系是隨著高CK誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)，______________________；在高CK誘導(dǎo)下A基因與W基因的關(guān)系是______________________?！即鸢浮剑?）①.細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織②.聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法（2）①.受到抑制或減慢②.兩種接種細(xì)胞密度下紫草寧的含有率相同，但接種細(xì)胞密度為6g．drywt．/L時(shí)，細(xì)胞收獲量多③.保證氧氣供應(yīng)充足，使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸（3）①.野生型的W基因表達(dá)量顯著升高②.在高CK誘導(dǎo)下A基因促進(jìn)W基因表達(dá)〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。其理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性，因?yàn)榧?xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過(guò)脫分化，即失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊，這稱為愈傷組織。愈傷組織能重新分化成芽、根等器官，該過(guò)程稱為再分化。2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)是指將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除這層細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。雜交過(guò)程中的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，是原生質(zhì)體間的融合，人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法基本可以分為兩大類(lèi)——物理法和化學(xué)法。物理法包括電融合法、離心法等；化學(xué)法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+高pH融合法等。融合后得到的雜種細(xì)胞再經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)可形成俞傷組織，并可進(jìn)一步發(fā)育成完整的雜種植株?！拘?wèn)1詳析】選作用于植物組織培養(yǎng)的材料一般要求分化程度低，無(wú)病毒感染，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。植物原生質(zhì)體融合過(guò)程，常用的化學(xué)法有高Ca2+-高pH融合法和聚乙二醇(PEG)融合法?！拘?wèn)2詳析】由圖可知，當(dāng)接種細(xì)胞密度超過(guò)6g.drywt./L時(shí)，紫草寧的合成速率下降，紫草寧含有率下降；6g.drywt./L和4g.drywt./L兩種接種細(xì)胞密度下紫草寧的含有率相同，但接種細(xì)胞密度為6g.drywt./L時(shí)，細(xì)胞收獲量多，因此選擇按種細(xì)胞密度為6g.drywt./L而不是接種細(xì)胞密度為4g.drywt./L;在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基的成分組成濃度、轉(zhuǎn)化效率，也會(huì)影響到紫草寧含有率，如轉(zhuǎn)化效率越高，紫草寧的含量越多，震蕩培養(yǎng)的目的是可以保證氧氣供應(yīng)充足，也可以使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，從而收獲更多的紫草寧?！拘?wèn)3詳析】據(jù)圖可知，野生型的W基因表達(dá)量與高CK誘導(dǎo)時(shí)間的關(guān)系是隨著高CK誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)，野生型的W基因表達(dá)量顯著升高。突變體的A基因功能缺失，其W基因的表達(dá)量變化不大，但是在野生型中W基因表達(dá)量顯著升高，由此可知，A基因?qū)基因的表達(dá)有促進(jìn)作用。在高CK誘導(dǎo)下A基因與W基因的關(guān)系是在高CK誘導(dǎo)下A基因促進(jìn)W基因表達(dá)。23.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。（一）長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。下圖甲是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。圖乙是某雙特異性抗體作用圖。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：（1）與植物體細(xì)胞雜交相比，圖甲中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是___________過(guò)程，過(guò)程②選用的骨髓瘤細(xì)胞沒(méi)有接觸抑制的現(xiàn)象，主要原因是___________，該瘤細(xì)胞___________（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除了提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需向培養(yǎng)基中添加___________，并將其置于___________的氣體環(huán)境的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。（2）為選出能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到710個(gè)細(xì)胞·mL-1，將細(xì)胞稀釋液滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中有___________個(gè)細(xì)胞，然后篩選出專(zhuān)一抗體檢測(cè)呈___________（選填“陽(yáng)性”或“陰性”）的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有的特點(diǎn)為_(kāi)__________。圖甲方框內(nèi)需要經(jīng)過(guò)___________次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。（二）CD28是T細(xì)胞表面受體，T細(xì)胞的有效激活依賴于CD28在癌細(xì)胞與T細(xì)胞結(jié)合部位的聚集。因此，科研人員嘗試構(gòu)建既能結(jié)合PSMA，還能結(jié)合CD28的雙特異性抗體PSMA×CD28，誘導(dǎo)T細(xì)胞定向殺傷癌細(xì)胞，如下圖2。（3）制備過(guò)程為：先將___________分別注射到小鼠體內(nèi)，分離出B淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)其與小鼠的___________細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞，再誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合。成功融合的細(xì)胞會(huì)表達(dá)兩種L鏈和兩種H鏈，由于___________而產(chǎn)生多種抗體，因此還需進(jìn)行篩選才能獲得所需的雙特異性抗體PSMA×CD28。〖答案〗（1）①.滅活的病毒誘導(dǎo)②.細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少③.不能④.動(dòng)物血清⑤.95%的空氣、5%的CO2（2）①.一（或者最多一個(gè)）②.陽(yáng)性③.既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體④.2（3）①.PSMA、CD28②.骨髓瘤③.L鏈和H鏈的隨機(jī)組合〖祥解〗單克隆抗體制備的基本步驟：對(duì)小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過(guò)篩選、克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體?！拘?wèn)1詳析】植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動(dòng)、電刺激）和化學(xué)法（聚乙二醇），誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電刺激）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒），因此，與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的融合方法是滅活的病毒。骨髓瘤細(xì)胞形成是由于原癌基因和抑癌基因發(fā)生了突變，導(dǎo)致細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少，從而具有在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖的能力，沒(méi)有接觸抑制現(xiàn)象。在HAT培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞能存活，故骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除了提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需向培養(yǎng)基中添加動(dòng)物血清等物質(zhì)，并將其置于95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！拘?wèn)2詳析】篩選出專(zhuān)一抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)，由于要使每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞不多于一個(gè)，從而達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。此后還要經(jīng)過(guò)專(zhuān)一抗體檢測(cè)，選出陽(yáng)性的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有的特點(diǎn)為既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體(或既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體)。為制備單克隆抗體，需將癌胚抗原注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取B淋巴細(xì)胞，為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細(xì)胞，至少需要2次篩選才能達(dá)到目的，第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。【小問(wèn)3詳析】科學(xué)家的目的是構(gòu)建既能結(jié)合PSMA，還能結(jié)合CD28的雙特異性抗體PSMA×CD28，所以PSMA和CD28相當(dāng)于抗原，需要先注入小鼠體內(nèi)，獲得B淋巴細(xì)胞，然后將B細(xì)胞和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，成功融合的細(xì)胞會(huì)表達(dá)兩種L鏈和兩種H鏈，但L鏈和H鏈可以隨機(jī)組合，所以能夠產(chǎn)生多種抗體，因此還需進(jìn)行篩選才能獲得所需的雙特異性抗體PSMA×CD28。24.PCR技術(shù)的實(shí)用性和極強(qiáng)的生命力其使成為生物科學(xué)研究的一種重要方法，極大地推動(dòng)了分子生物學(xué)以及生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。下面是兩個(gè)具體實(shí)驗(yàn)中的PCR技術(shù)應(yīng)用，請(qǐng)根據(jù)資料回答下列問(wèn)題：（1）重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過(guò)寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋、互為模板，通過(guò)多次PCR擴(kuò)增，從而獲得目的基因的方法。利用該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)基因的定點(diǎn)誘變。它在需要誘變的位置合成兩個(gè)帶有變異基因堿基的互補(bǔ)引物，然后分別與引物a和引物d做PCR，這樣得到的兩個(gè)PCR引物產(chǎn)物都帶有變異基因，并且彼此重疊，再將重疊部位進(jìn)行重組PCR就能得到誘變PCR產(chǎn)物，如圖所示：①PCR擴(kuò)增DNA的過(guò)程中，引物a、b、c、d中，PCRI應(yīng)選擇圖1中引物___________，大量擴(kuò)增突變產(chǎn)物AD則應(yīng)選擇引物_________________，重疊延伸時(shí)不需要引物的原因___________。②重疊延伸PCR通過(guò)___________實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)突變。PCR1和PCR2需要分別進(jìn)行的原因是___________。③若正?；蚩杀幌拗泼窪pnI識(shí)別并切割，特定位點(diǎn)突變后的基因不能被DpnI識(shí)別，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)思路鑒定上述過(guò)程獲得的突變產(chǎn)物AD是否為突變基因：___________。（2）反向PCR可用于擴(kuò)增未知序列，其原理如下圖所示。下圖鏈狀DNA分子內(nèi)側(cè)是已知序列，外側(cè)為未知序列。①不直接在圖2中DNA分子的兩端設(shè)計(jì)引物并進(jìn)行擴(kuò)增，原因是___________。②圖3中環(huán)狀DNA進(jìn)行PCR的過(guò)程中，沿引物A延伸子鏈的延伸方向是___________（填“順時(shí)針”或“逆時(shí)針”），PCR產(chǎn)物___________（填“含有”或“不含”）EcoRI的酶切位點(diǎn)?！即鸢浮剑?）①.a和b②.a和d③.可以分別以AB上鏈和CD下鏈為引物進(jìn)行延伸④.在引物b和c上引入突變⑤.引物b和引物c可以互補(bǔ)配對(duì)，導(dǎo)致引物失效⑥.用限制酶DpnI分別處理正?；蚝蜕鲜鲞^(guò)程獲得的突變產(chǎn)物AD，然后進(jìn)行電泳；若上述過(guò)程獲得的突變產(chǎn)物AD的電泳條帶只有一條且大于正常基因的電泳條帶，則為突變基因（2）①.DNA兩端序列未知，無(wú)法設(shè)計(jì)引物②.逆時(shí)針③.含有〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的?！拘?wèn)1詳析】①PCR擴(kuò)增DNA的過(guò)程中，新合成的兩條單鏈延伸方向相反，根據(jù)圖中引物的方向可知，PCR1應(yīng)選擇引物a和b，得到產(chǎn)物AB。PCR2應(yīng)選擇引物c和d，得到產(chǎn)物CD。突變產(chǎn)物AD擴(kuò)增選擇的引物是a和d。重疊延伸時(shí)，可以分別以AB上鏈和CD下鏈為引物進(jìn)行延伸，所以不需要引物。②重疊延伸PCR通過(guò)在引物b和c上引入突變實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)突變，引物b和c分別和第一代DNA的兩條單鏈的對(duì)應(yīng)堿基互補(bǔ)，則其上的突變位點(diǎn)的堿基應(yīng)互補(bǔ)配對(duì)。由于引物b和引物c可以互補(bǔ)配對(duì)，導(dǎo)致引物失效，所以PCR1和PCR2需要分別進(jìn)行。③據(jù)題意可知，若正?；蚩杀幌拗泼窪pnI識(shí)別并切割，特定位點(diǎn)突變后的基因不能被DpnI識(shí)別，因此要鑒定獲得的突變產(chǎn)物AD是否為突變基因，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路為：用限制酶DpnI分別處理正?；蚝蜕鲜鲞^(guò)程獲得的突變產(chǎn)物AD，然后進(jìn)行電泳；若上述過(guò)程獲得的突變產(chǎn)物AD的電泳條帶只有一條且大于正?；虻碾娪緱l帶，則為突變基因。【小問(wèn)2詳析】①利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列作為引物，由于該DNA分子兩端的脫氧核苷酸序列未知，故無(wú)法設(shè)計(jì)引物，所以不能直接在圖1中DNA分子的兩端設(shè)計(jì)引物并進(jìn)行擴(kuò)