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文檔簡介

中學生物選修一生物技術實踐學問點總結專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用課題一果酒和果醋的制作1、發(fā)酵:通過微生物技術的培育來生產大量代謝產物的過程。2、有氧發(fā)酵:醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵·無氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要)分裂生殖孢子生殖4、在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸,大量繁殖。C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量5、在無氧條件下,酵母菌能進行酒精發(fā)酵。C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量6、20℃左右最相宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時一般將溫度限制在187、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細胞細菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂9、當氧氣、糖源都足夠時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。C6H12O6+2O2→2CH3COOH+2CO2+2H2OC2H5OH+O2→CH3COOH+H2O10、限制發(fā)酵條件的作用①醋酸菌對氧氣的含量特殊敏感,當進行深層發(fā)酵時,即使只是短時間中斷通入氧氣,也會引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最適生長溫度為32℃,限制好發(fā)酵溫度,使發(fā)酵時間縮短,又削減雜菌污染的機會。③有兩條途徑生成醋酸:干脆氧化和以酒精為底物的氧化。11、試驗流程:選擇葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒(→醋酸發(fā)酵→果醋)12、酒精檢驗:果汁發(fā)酵后是否有酒精產生,可以用重鉻酸鉀來檢驗。在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質的量濃度為3mol/L的H2SO43滴,振蕩混勻,最終滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴,振蕩試管,視察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。運用該裝置制酒時,應當關閉充氣口;制醋時,應當充氣口連接氣泵,輸入氧氣。 疑難解答(1)你認為應當先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應當先沖洗,然后再除去枝梗,以避開除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。(2)你認為應當從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?如:要先沖洗葡萄,再除去枝梗;榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈,并進行酒精消毒;每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。(3)制葡萄酒時,為什么要將溫度限制在18~25℃?制葡萄醋時,為什么要將溫度限制在30~35℃?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20℃左右最適合酵母菌的繁殖。因此須要將溫度限制在其最適溫度范圍內。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為32℃,因此要將溫度限制在30~35℃。課題二腐乳的制作1、多種微生物參加了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理:毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、試驗流程:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制4、釀造腐乳的主要生產工序是將豆腐進行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用:1.創(chuàng)建條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參加生化反應的過程。通過各種輔料與酶的緩解作用,生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右,水分過多則腐乳不易成形。*水分測定方法如下:精確稱取經研缽研磨成糊狀的樣品5~10g(精確到0.02mg),置于已知重量的蒸發(fā)皿中,勻稱攤平后,在100~105℃樣品水分含量(%)計算公式如下:(烘干前容器和樣品質量-烘干后容器和樣品質量)/烘干前樣品質量·毛霉的生長:條件:將豆腐塊平放在籠屜內,將籠屜中的限制在15~18℃,并保持肯定的濕度。來源:1.來自空氣中的毛霉孢子,2.干脆接種優(yōu)良毛霉菌種時間:5天·加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中,同時逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右。·用鹽腌制時,留意限制鹽的用量:鹽的濃度過低,不足以抑制微生物的生長,可能導致豆腐腐敗變質;鹽的濃度過高會影響腐乳的口味·食鹽的作用:1.抑制微生物的生長,避開腐敗變質2.析出水分,使豆腐變硬,在后期制作過程中不易酥爛3.調味作用,給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶?!づ渲汽u湯:鹵湯干脆關系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒與各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般限制在12%左右?!ぞ频淖饔茫?.防止雜菌污染以防腐2.與有機酸結合形成酯,給予腐乳風味3.酒精含量的凹凸與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關系,酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊?!は阈亮系淖饔茫?.調味作用2.殺菌防腐作用3.參加并促進發(fā)酵過程·防止雜菌污染:①用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。②裝瓶時,操作要快速當心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時,最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。疑難解答(1)利用所學的生物學學問,說明豆腐長白毛是怎么一回事?豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。(2)為什么要撒很多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽能防止雜菌污染,避開豆腐腐敗。(3)我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳,不易成形。(4)吃腐乳時,你會發(fā)覺腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什么?“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),對人體無害。它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。課題三制作泡菜·制作泡菜所用微生物是乳酸菌,其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下,將糖分解為乳酸。分裂方式是二分裂。反應式為:C6H12O62C3H6O3+能量含抗生素牛奶不能生產酸奶的緣由是抗生素殺死乳酸菌。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產酸奶?!喯跛猁}為白色粉末,易溶于水,在食品生產中用作食品添加劑?!ど攀持械膩喯跛猁}一般不會危害人體健康,國家規(guī)定肉制品中不超過30mg/kg,醬腌菜中不超過20mg/kg,嬰兒奶粉中不超過2mg/kg。亞硝酸鹽被汲取后隨尿液排出體外,但在相宜pH、溫度和肯定微生物作用下形成致癌物質亞硝胺。亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間(d)·一般在腌制10天亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間(d)測定亞硝酸鹽含量的方法是:比色法原理是在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料,與已知濃度的標準顯色液目測比較,估算泡菜中亞硝酸鹽含量。專題三植物的組織培育技術課題一菊花的組織培育植物組織培育的基本過程細胞分化:在生物個體發(fā)育過程中,細胞在形態(tài)、結構和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。離體的植物組織或細胞,在培育了一段時間以后,會通過細胞分裂,形成愈傷組織,愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形態(tài)態(tài)的薄壁細胞。由高度分化的植物組織或細胞產生愈傷組織的過程,稱為植物細胞的脫分化,或者叫做去分化。脫分化產生的愈傷組織接著進行培育,又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發(fā)育成完整的植物體。植物細胞工程具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞,都具有發(fā)育成完整個體的實力,即每個生物細胞都具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來,這是因為在特定的時間和空間條件下,通過基因的選擇性表達,構成不同組織和器官。植物組織培育技術的應用有:實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖;培育脫毒作物;制作人工種子;培育作物新品種以與細胞產物的工廠化生產等?!ぜ毎只且环N長久性的變更,它有什么生理意義?使多細胞生物體中細胞結構和功能趨向特地化,有利于提高各種生理功能的效率。比較根尖分生組織和愈傷組織的異同組織類型組織類型細胞來源細胞形態(tài)細胞結構細胞排列細胞去向根尖分生組織受精卵正方形無液泡緊密分化成多種細胞組織愈傷組織高度分化細胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個體相同點都通過有絲分裂進行細胞增殖影響植物組織培育的條件1.材料:不同的植物組織,培育的難易程度差別很大。植物材料的選擇干脆關系到試驗的成敗。植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響試驗結果。菊花組織培育一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側枝作材料。一般來說,簡潔進行無性繁殖的植物簡潔進行組織培育。選取生長旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好,簡潔誘導脫分化和再分化。2.養(yǎng)分:離體的植物組織和細胞,對養(yǎng)分、環(huán)境等條件的要求相對特殊,須要配制相宜的培育基。常用的培育基是MS培育基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。3.激素:植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。在生長素存在的狀況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強趨勢。在培育基中須要添加生長素和細胞分裂素等植物激素,其濃度、運用的先后依次、用量的比例等都影響結果。運用依次試驗結果先生長素,后細胞分裂素有利于分裂但不分化先細胞分裂素,后生長素細胞既分裂也分化同時運用分化頻率提高生長素/細胞分裂素比值與結果比值高時促根分化,抑芽形成比值低時促芽分化,抑根形成比值適中促進愈傷組織生長4.環(huán)境條件:PH、溫度、光等環(huán)境條件。不同的植物對各種條件的要求往往不同。進行菊花的組織培育,一般將pH限制在5.8左右,溫度限制在18~22℃,并且每日用日光燈照耀12h.操作流程配制MS固體培育基:配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液(培育基母液)。·運用時依據(jù)母液的濃縮倍數(shù),計算用量,并加蒸餾水稀釋。·配制培育基:應加入的物質有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液,并用蒸餾水定容到1000毫升?!ぴ诰栈ńM織培育中,可以不添加植物激素緣由是菊花莖段組織培育比較簡潔。·滅菌:實行的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌?!S培育基中各種養(yǎng)分物質的作用是什么?與肉湯培育基相比,MS培育基有哪些特點?大量元素和微量元素供應植物細胞所必需的無機鹽;蔗糖供應碳源,維持細胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿意離體植物細胞在正常代謝途徑受到肯定影響后所產生的特殊養(yǎng)分需求。微生物培育基以有機養(yǎng)分為主,MS培育基則需供應大量無機養(yǎng)分。外植體的消毒外植體:用于離體培育的植物器官或組織片段。選取菊花莖段時,要取生長旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗后在流水下沖洗20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分數(shù)為70%的酒精中搖動2~3次,持續(xù)6~7s,馬上將外植體取出,在無菌水中清洗。取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分,放入質量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。取出后,在無菌水中至少清洗3次,漂洗消毒液。留意:對外植體進行表面消毒時,就要考慮藥劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受實力。接種:接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上,每個錐形瓶接種7~8個外植體。外植體接種與細菌接種相像,操作步驟相同,而且都要求無菌操作。培育:應當放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持相宜的溫度(18~22℃)和光照(12h)移栽:栽前應先打開培育瓶的封口膜,讓其在培育間生長幾日,然后用流水清洗根部培育基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍寶巖等環(huán)境中生活一段時間,進行壯苗。最終進行露天栽培。栽培外植體在培育過程中可能會被污染,緣由有外植體消毒不徹底;培育基滅菌不徹底;接種中被雜菌污染;錐形瓶密封性差等。專題二月季的花藥培育被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊通常包含花絲、花藥兩部分?;ㄋ帪槟覡罱Y構,內部含有很多花粉?;ǚ凼怯苫ǚ勰讣毎涍^減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞。被子植物花粉的發(fā)育要經驗小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時期,4個單倍體細胞連在一起,進入單核期時,四分體的4個單倍體細胞彼此分別,形成4個具有單細胞核的花粉粒。這時的細胞含深厚的原生質,核位于細胞的中心(單核居中期)。隨著細胞不斷長大,細胞核由中心移向細胞一側(單核靠邊期),并分裂成1個生殖細胞核和1個花粉管細胞核,進而形成兩個細胞,一個是生殖細胞,一個是養(yǎng)分細胞。生殖細胞將在分裂一次,形成兩個精子。留意:①成熟的花粉粒有兩類,一類是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管細胞核和生殖細胞核,二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的;另一類是三核花粉粒,花粉在成熟前,生殖細胞就進行一次有絲分裂,形成兩個精子,此花粉粒中含有兩個精子核和一個花粉管核(養(yǎng)分核)②花粉發(fā)育過程中的四分體和動物細胞減數(shù)分裂的四分體不同?;ǚ郯l(fā)育過程中的四分體是花粉母細胞經減數(shù)分裂形成的4個連在一起的單倍體細胞;而動物細胞減數(shù)分裂過程中的四分體是聯(lián)會配對后的一對同源染色體,由于含有四條染色單體而稱為四分體。③同一生殖細胞形成的兩個精子,其基因組成完全相同。產生花粉植株的兩種途徑通過花藥培育產生花粉植株(即單倍體植株)一般有兩種途徑,一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物,另一種是花粉在誘導培育基上先形成愈傷組織,再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間并沒有肯定的界限,主要取決于培育基中激素的種類與其濃度配比。留意:①無論哪種產生方式,都要先誘導生芽,再誘導生根②胚狀體:植物體細胞組織培育過程中,誘導產生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚特別類似的結構,其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似,有胚芽、胚根、胚軸等完整結構,就像一粒種子,又稱為細胞胚。影響花藥培育的因素誘導花粉能否勝利與誘導勝利率的凹凸,受多種因素影響,其中材料的選擇與培育基的組成是主要的影響因素·親本的生理狀況:花粉早期是的花藥比后期的更簡潔產生花粉植株,選擇月季的初花期。·合適的花粉發(fā)育時期:一般來說,在單核期,細胞核由中心移向細胞一側的時期,花藥培育勝利率最高·花蕾:選擇完全未開放的花蕾·親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以與接種密度等對誘導勝利率都有肯定影響·材料的選?。哼x擇花藥時,一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于相宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細胞核不易著色,需采納焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色·材料的消毒·接種和培育:滅菌后的花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣,并馬上將花藥接種到培育基上。在剝離花藥時,要盡量不損傷花藥(否則接種后簡潔從受傷部位長生愈傷組織),同時還要徹底去除花絲,因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成,通常每瓶接種花藥7~10個,培育溫度限制在25℃左右,不須要光照.幼小植株形成后才須要光照.一般經過20~30天培育后,會發(fā)覺花藥開裂,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織與時轉移到分化培育基上,以便進一步分化出再生植株。假如花藥開裂釋放出胚狀體,則一個花藥內就會產生大量幼小植株,必需在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培育基上,否則這些植株將很難分開。還須要對培育出來的植株做進一步的鑒定和篩選。植物組織培育技術與花藥培育技術的相同之處是:培育基配制方法、無菌技術與接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于:花藥培育的選材特別重要,需事先摸索時期相宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要與時更換培育基;花藥培育對培育基配方的要求更為嚴格。這些都使花藥培育的難度大為增加。專題4酶的探討與應用學問點課題1果膠酶在果汁生產中的作用由水果制作果汁要解決兩個主要問題:一是果肉的出汁率低,耗時長;二是榨取的果汁渾濁、黏度高,簡潔發(fā)生沉淀。1、植物細胞壁以與胞間層的主要組成成分有纖維素和_果膠_。并且兩者不溶于水,在果汁加工中,既影響出汁率,又使果汁渾濁。2、果膠是植物細胞壁以與胞間層的主要組成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物,不溶于水。在果汁加工中,果膠不僅會影響出汁率,還會使果汁渾濁。果膠酶的作用是能夠將果膠_分解成可溶性的_半乳醛酸,瓦解植物的細胞壁與胞間層,并且使果汁變得澄清。3、果膠酶是一類酶總稱,包括_果膠分解酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶_等。4、酶的活性是指酶催化肯定化學反應的的實力。酶活性的凹凸可以用在肯定條件下,酶所催化的某一化學反應的反應速度來表示。在科學探討與工業(yè)生產中,酶反應速度用單位時間內、單位體積中反應物的減小量或產物的增加量來表示。5、影響酶活性的因素包括:溫度、PH、酶的抑制劑等。(二).試驗設計〔設計一〕探究溫度對酶活性的影響當酶處于最適溫度或最適pH時,酶的活性最高;若溫度過高、過酸或過堿,則導致酶變性失活。在肯定范圍內,果肉的出汁率和果汁的澄清度與果膠酶的活性成正比。此試驗的自變量是溫度_;依據(jù)單一變量原則,你應確保各試驗組相同的變量有_PH底物濃度底物量試驗器材酶的用量等等_?!苍O計二〕探究PH對酶活性的影響探究pH對果膠酶活性的影響,只須將溫度梯度改成pH梯度,并選定一個相宜的溫度進行水浴加熱。反應液中的pH可以通過體積分數(shù)為0.1%的氫氧化鈉或鹽酸溶液進行調整?!苍O計三〕探究果膠酶的用量探究果膠酶的用量是建立在探究最適溫度和pH對果膠酶活性影響的基礎之上的。此時,探討的變量是果膠酶的用量,其他因素都應保持不變。試驗時可以配制不同濃度的果膠酶溶液,也可以只配制一種濃度的果膠酶溶液,然后運用不同的體積即可。須要留意的是,反應液的pH必需相同,否則將影響試驗結果的準旁欄思索題1.為什么在混合蘋果泥和果膠酶之前,要將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理?提示:將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理,可以保證底物和酶在混合時的溫度是相同的,避開了果泥和果膠酶混合時影響混合物的溫度,從而影響果膠酶活性的問題。2.在探究溫度或pH的影響時,是否須要設置比照?假如須要,又應當如何設置?為什么?提示:須要設置比照試驗,不同的溫度梯度之間或不同的pH梯度之間就可以作為比照,這種比照稱為相互比照。3.A同學將哪個因素作為變量,限制哪些因素不變?為什么要作這樣的處理?B同學呢?提示:A同學將溫度或pH作為變量,限制不變的量有蘋果泥的用量、果膠酶的用量、反應的時間和過濾的時間等。只有在試驗中保證一個自變量,試驗結果才能說明問題。B同學對于變量的處理應當與A同學相同,只是視察因變量的角度不同。4.想一想,為什么能夠通過測定濾出的蘋果汁的體積大小來推斷果膠酶活性的凹凸?提示:果膠酶將果膠分解為小分子物質,小分子物質可以通過濾紙,因此蘋果汁的體積大小反應了果膠酶的催化分解果膠的實力。在不同的溫度和pH下,果膠酶的活性越大,蘋果汁的體積就越大。5.當探究溫度對果膠酶活性的影響時,哪個因素是變量,哪些因素應當保持不變?提示:溫度是變量,應限制果泥量、果膠酶的濃度和用量、水浴時間和混合物的pH等全部其他條件不變。只有這樣才能保證只有溫度一個變量對果膠酶的活性產生影響。試驗變量與反應變量(如表)試驗變量(自變量)反應變量(因變量)含義試驗中試驗者所操縱的因素或條件由于試驗變量變更而引起的變更和結果實例溫度或pH果汁量聯(lián)系試驗變量為緣由,反應變量是結果,二者是因果關系課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果1、酶絕大多數(shù)是蛋白質,少數(shù)為RNA;酶具有生物催化作用;酶具有高效性、專一性特點,但易受溫度、PH、表面活性劑等因素的影響。(1)加酶洗衣粉是指含酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四類。一般洗衣粉中含磷,含磷的污水排放可能導致微生物和藻類大量繁殖,造成水體污染,加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉,使洗滌劑朝無磷的方向發(fā)展,削減對環(huán)境的污染。(2)脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸,蛋白酶可以將蛋白質分解成小分子肽和氨基酸,小分子肽可在肽酶作用下分解成氨基酸;淀粉酶可以將淀粉分解成可溶性麥芽糖,纖維素酶可以將纖維素分解成葡萄糖,以達到去污的目的,因此,蛋白類纖維織物(羊毛、蠶絲等)不能用加(蛋白)酶洗衣粉來洗滌。(3)應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有大分子蛋白質水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡簡潔從衣物上脫落。(4)衣物的洗滌,不僅要考慮到洗滌效果,還要考慮衣物的承受實力、洗滌成本等因素。(5)加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗衣粉朝低磷無磷的方向發(fā)展,削減對環(huán)境的污染。2、試驗設計遵循原則:是單一變量原則、比照原則和等量原則,比如探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果有何不同時,用限制運用不同種類洗衣粉為變量,其他條件完全一樣;同時一般洗衣粉處理污漬物與加酶洗衣粉處理污漬物形成比照試驗。3.不同種類的酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果(1)試驗原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有專一性,所以對不同污漬的洗滌效果不同。4、比較一般洗衣粉和加酶洗衣粉去污原理的異同一般洗衣粉加酶洗衣粉相同點表面活性劑可以產生泡沫,將油脂分子分散開,水軟化劑可以分散污垢,等不同點酶可以將大分子有機物分解為小分子有機物,小分子有機物易溶于水,從而與纖維分開專題五DNA和蛋白質技術課題一DNA的粗提取與鑒定·提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精?!NA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點?要使DNA溶解,須要運用什么濃度?要使DNA析出,又須要運用什么濃度?在0.14mol/L時溶解度最?。惠^高濃度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出?!ぴ谌芙饧毎械腄NA時,人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水,以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機溶劑,但DNA卻不能溶于酒精(特殊是95%冷卻酒精),但細胞中蛋白質可溶于酒精。從理論上分析,預冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點。一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子運動,易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,削減斷裂。·采納DNA不溶于酒精的原理,可以達到什么目的?將DNA和蛋白質進一步分別?!ぬ崛NA還可以利用DNA對酶、高溫柔洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時,應選用怎樣的酶和怎樣的溫度值?蛋白酶,因為酶具有專一性,蛋白酶只水解蛋白質而不會對DNA產生影響。溫度值為60~75℃,因為該溫度值蛋白質變性沉淀,而DNA不會變性。補充:DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋,其溫度在80℃以上,如在PCR技術中DNA變性溫度在95℃?!は礈靹┰谔崛NA中有何作用?洗滌劑瓦解細胞膜?!ぎ旇b定提取出的物質是否是DNA時,須要運用什么指示劑進行鑒定?在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍色。原理總結:通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細胞中提取和提純DNA;再利用酒精進一步將DNA與蛋白質分別開來,達到提純的目的;最終利用二苯胺試劑鑒定提取的物質是否是DNA。試驗材料的選取不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時,應本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。本試驗用雞血細胞做試驗材料有兩個緣由。一是因為雞血細胞核的DNA含量豐富,材料易得;二是雞血細胞極易吸水脹破,而用動物肝臟細胞作試驗材料經常須要勻漿和離心,對設備要求較高,操作繁瑣,歷時較長。雞血細胞裂開以后釋放出的DNA,簡潔被玻璃容器吸附,所以在提取過程中為了削減DNA的損失,最好運用塑料的燒杯和試管盛放雞血細胞液。裂開細胞,獲得含DNA的濾液·若選用雞血和洋蔥作試驗材料,則怎樣獲得含DNA的濾液?在雞血細胞液中加入肯定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過濾后收集濾液;切碎洋蔥,加入肯定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過濾后收集濾液。·為什么加入蒸餾水能使雞血細胞裂開?答:蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內,使血細胞脹裂,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的裂開(細胞膜和核膜的裂開),從而釋放出DNA。·在以上試驗中,加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?過濾時應當選用(濾紙、尼龍布)。血細胞在蒸餾水中大量吸水而張裂;洗滌劑瓦解細胞膜;食鹽溶解DNA物質;選用尼龍布進行過濾?!ぴ谔幚碇参锝M織時須要進行研磨,其目的是什么?研磨不充分產生什么結果?裂開細胞壁,使核物質簡潔溶解在NaCl溶液中;研磨不充分會使DNA的提取量削減,影響試驗結果,導致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。。詳細做法。10mL雞血+20mL蒸餾水→同方向攪拌→3層尼龍布過濾→濾液去除濾液中的雜質為什么反復地溶解與析出DNA,能夠去除雜質?用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質;用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質。因此,通過反復溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。最初獲得的DNA濾液含有蛋白質、脂質等雜質,須要進一步提純DNA。方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質,不分解DNA;方案三的原理是蛋白質和DNA的變性溫度不同。方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解雜質蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質分開;方案三利用的是DNA和蛋白質對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質變性,與DNA分別。析出與鑒定·在濾液中仍舊含有一些雜質,怎樣除去這些雜質呢?得到的DNA呈何顏色?濾液與等體積的冷卻酒精混合勻稱,靜置2~3分鐘,析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色?!ぴ鯓予b定析出的白色絲狀物就是DNA呢?詳細做法。試管2支,編號甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合勻稱→沸水浴5min→視察顏色變更試驗操作制備雞血細胞液…………加檸檬酸鈉,靜置或離心↓裂開細胞,釋放DNA…加蒸餾水,同一方向快速通方向攪拌↓→過濾,除去細胞壁、細胞膜等。溶解核內DNA…………加入NaCl至2mol/L,同一方向緩慢攪拌↓DNA析出………………加蒸餾水至0.14mol/L,過濾,在溶解到2mol/L溶液中↓→除去細胞質中的大部分物質。DNA初步純化…………與等體積95%冷卻酒精混合,析出白色絲狀物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鑒定………………二苯胺,沸水浴,呈現(xiàn)藍色留意事項:在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置或離心以提高細胞懸液濃度;運用塑料燒杯;運用尼龍布過濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢(細胞裂開快速攪拌);玻棒不要遇到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。*專題六植物有效成分的提取課題一植物芳香油的提取自然香料的來源:植物、動物不同植物的根、莖、葉、花、果實、種子都可以提取芳香油。芳香油的提取方法:蒸餾、壓榨、萃取等。芳香油的性質:揮發(fā)性強,成分困難,以萜類化合物與其衍生物為主。水蒸氣蒸餾法:原理:水蒸汽可將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來形成油水混合物,冷卻后水油分層。方法:水中蒸餾:原料放在沸水中加熱蒸餾。水上蒸餾:原料隔放在沸水上加熱蒸餾。水汽蒸餾:利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾。不足:有些原料不相宜于水中蒸餾,如柑橘、檸檬等易焦糊,有效成分簡潔水解。通常用壓榨法(通過機械壓縮力將液相物從液固兩相混合物中分別出來的一種簡潔操作)萃取法:原理:芳香油易溶于有機溶劑,溶劑揮發(fā)后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。方法:原料浸泡在溶劑中→得到浸泡液→有機溶劑揮發(fā)→芳香油。不足:有機溶劑中的雜質影響芳香油的品質蒸餾裝置包括:鐵架臺兩個、酒精燈、石棉網、蒸餾瓶、橡膠塞、蒸餾頭、溫度計、直型冷凝管、接液管、錐形瓶,以與連接進水口和出水口的橡皮管。全部儀器必需事先干燥,保證無水。整套蒸餾裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過加熱進行蒸餾,中部將蒸餾物冷凝,右邊的部分用來接收。安裝儀器一般都依據(jù)自下而上、從左到右的依次。拆卸儀器的依次與安裝時相反。詳細安裝依次和方法如下。(1)固定熱源──酒精燈。(2)固定蒸餾瓶,使其離熱源的距離如教科書中圖6-2所示,并且保持蒸餾瓶軸心與鐵架臺的水平面垂直。(3)安裝蒸餾頭,使蒸餾頭的橫截面與鐵架臺平行。(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上,通過橡皮管與水池相連;下端進水口向下,通過橡皮管與水龍頭相連。(5)連接接液管(或稱尾接管)。(6)將接收瓶瓶口對準尾接管的出口。常壓蒸餾一般用錐形瓶而不用燒杯作接受器,接收瓶應在試驗前稱重,并做好記錄。(7)將溫度計固定在蒸餾頭上,使溫度計水銀球的上限與蒸餾頭側管的下限處在同一水平線上。蒸餾裝置安裝完畢后,可以在蒸餾瓶中加幾粒沸石,防止液體過度沸騰。打開水龍頭,緩緩通入冷水,然后起先加熱。加熱時可以視察到,蒸餾瓶中的液體漸漸沸騰,蒸氣漸漸上升,溫度計讀數(shù)也略有上升。當蒸氣的頂端達到溫度計水銀球部位時,溫度計讀數(shù)急劇上升。在整個蒸餾過程中,應保證溫度計的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴。限制蒸餾的時間和速度,通常以每秒1~2滴為宜。分液漏斗的運用方法如下。(1)首先把活塞擦干,為活塞勻稱涂上一層潤滑脂,留意切勿將潤滑脂涂得太厚或使?jié)櫥M入活塞孔中,以免污染萃取液。(2)塞好活塞后,把活塞旋轉幾圈,使?jié)櫥植紕蚍Q。并用水檢查分液漏斗的頂塞與活塞處是否滲漏,確認不漏水后再運用。(3)將分液漏斗放置在大小合適的、并已固定在鐵架臺上的鐵圈中,關好活塞。將待分別的液體從上部開口處倒入漏斗中,塞緊頂塞,留意頂塞不能涂潤滑脂。(4)取下分液漏斗,用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸,左手握住漏斗活塞處,大拇指壓緊活塞,將分液漏斗略傾斜,前后振蕩(起先振蕩時要慢)。(5)振蕩后,使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài),左手仍握在漏斗活塞處,下部管口指向無人處,用拇指和食指旋開活塞,使其釋放出漏斗內的蒸氣或產生的氣體,以使內外壓力平衡,這一步操作也稱做“放氣”。(6)重復上述操作,直至分液漏斗中只放出很少的氣體時為止。再將分液漏斗猛烈振蕩2~3min,然后將漏斗放回鐵圈中,待液體靜置分層。蒸餾完畢,應先撤出熱源,然后停止通水,最終拆卸蒸餾裝置,拆卸的依次與安裝時相反。玫瑰精油的提取·0.1g/mL氯化鈉溶液:促使油水混合物(乳濁液)中油和水的分別。無水硫酸鈉:汲取油層中的水分。試驗步驟:①采集玫瑰花:采集盛花期(5月中上旬)的玫瑰花,清水清洗瀝干。②裝入蒸餾原料:稱取50g玫瑰花放入蒸餾瓶,添加200mL蒸餾水。③安裝蒸餾裝置:依據(jù)從左向右、自下到上次序安裝水蒸氣蒸餾裝置。④加熱蒸餾:限制蒸餾時間和速度(1~2滴/秒),獲得乳白色乳濁液;拆卸裝置。⑤分別油層:向乳濁液加入NaCl溶液后,利用分液漏斗分別出上面的油層。⑥除去水分:向油層中加入無水硫酸鈉,24h后過濾,得到玫瑰油。*留意事項:蒸餾時間不能過短,溫度不能過高。橘皮精油的提取橘皮精油的主要成分:檸檬烯,主要分布在橘皮中。石灰水:防止壓榨時滑脫,提高出油率,降低壓榨液黏稠度,過濾不堵塞篩眼。小蘇打、硫酸

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