2024屆山東省聊城市重點(diǎn)中學(xué)高三下學(xué)期第六次檢測生物試卷含解析

2024屆山東省聊城市重點(diǎn)中學(xué)高三下學(xué)期第六次檢測生物試卷注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號。回答非選擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．真核細(xì)胞內(nèi)某基因由5000對脫氧核苷酸組成，其中堿基A占20%。下列說法正確的是（）A．該基因中每個(gè)脫氧核糖上均連接著1個(gè)磷酸和1個(gè)含氮堿基B．該基因的一條脫氧核苷酸鏈中（C＋G）/（A＋T）為3∶2C．DNA解旋酶能催化該基因水解為多個(gè)脫氧核苷酸D．該基因由于某種原因丟失3對脫氧核苷酸，則發(fā)生的變異屬于染色體變異2．研究人員在相同且適宜溫度條件下分別測定了兩個(gè)作物品種S1、S2的光飽和點(diǎn)（光飽和點(diǎn)是達(dá)到最大光合速率所需的最小光照強(qiáng)度）。當(dāng)增加環(huán)境中C02濃度后，測得S1的光飽和點(diǎn)沒有顯著改變，S2的光飽和點(diǎn)顯著提高。下列敘述不正確的是A．S1的光飽和點(diǎn)不變，可能是原條件下光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP不足B．S1的光飽和點(diǎn)不變，可能是原條件下C02濃度未達(dá)到飽和C．S2的光飽和點(diǎn)提高，可能是原條件下光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP未達(dá)到飽和D．S2的光飽和點(diǎn)提高，可能是原條件下C02濃度不足3．下列有關(guān)孟德爾遺傳規(guī)律的說法錯(cuò)誤的是（）A．葉綠體基因控制的性狀遺傳不遵循孟德爾遺傳定律B．基因型為AaBb的個(gè)體自交，子代一定出現(xiàn)4種表現(xiàn)型和9種基因型C．受精時(shí)，雌雄配子的結(jié)合是隨機(jī)的，這是得出孟德爾遺傳定律的條件之一D．孟德爾發(fā)現(xiàn)分離定律與自由組合定律的過程運(yùn)用了假說-演繹法4．絲瓜是一年生攀援藤本，一棵植株上能結(jié)多個(gè)果實(shí)。它喜較強(qiáng)陽光，較高的溫度有利于莖葉生長和果實(shí)發(fā)育。在某塊絲瓜地中主要生活著兩種小型昆蟲（甲、乙）。如圖為在某年度絲瓜生長期間調(diào)查該瓜地甲、乙種群數(shù)量的變化情況。下列敘述正確的是（）A．兩種昆蟲是捕食關(guān)系，甲的營養(yǎng)級較高B．推測7～9月份應(yīng)該是一年中絲瓜大量結(jié)果的時(shí)期C．由絲瓜和這兩種昆蟲及生活環(huán)境構(gòu)成了生態(tài)系統(tǒng)D．統(tǒng)計(jì)該瓜地兩種昆蟲的種群密度需用標(biāo)志重捕法5．哺乳動(dòng)物受精卵的前幾次分裂異常可能導(dǎo)致子細(xì)胞出現(xiàn)多核現(xiàn)象。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，受精卵分裂時(shí)，首先形成兩個(gè)相對獨(dú)立的紡錘體，之后二者夾角逐漸減小，形成一個(gè)統(tǒng)一的紡錘體?？蒲腥藛T用藥物N處理部分小鼠（2n=40）受精卵，觀察受精卵第一次分裂，結(jié)果如圖所示。以下有關(guān)實(shí)驗(yàn)的分析中，合理的是（）A．兩個(gè)紡錘體可能分別牽引來自雙親的兩組染色體，最終合二為一B．細(xì)胞A最終可能將分裂成為1個(gè)雙核細(xì)胞，1個(gè)單核細(xì)胞C．細(xì)胞B最終形成的子細(xì)胞中每個(gè)核的染色體條數(shù)為40D．藥物N能抑制兩個(gè)紡錘體的相互作用，可能是秋水仙素6．利用人胰島B細(xì)胞構(gòu)建cDNA文庫，然后通過核酸分子雜交技術(shù)從中篩選目的基因，篩選過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．cDNA文庫的構(gòu)建需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶 B．圖中的菌落是通過稀釋涂布法獲得的C．核酸分子雜交的原理是堿基互補(bǔ)配對 D．從該文庫中可篩選到胰高血糖素基因7．貓叫綜合征是第5號染色體短臂上缺失一段染色體片段引起的變異。該變異屬于A．基因突變 B．基因重組 C．染色體結(jié)構(gòu)變異 D．染色體數(shù)目變異8．（10分）下列有關(guān)生物進(jìn)化的敘述，正確的是（）A．不同種群都向適應(yīng)無機(jī)環(huán)境的方向進(jìn)化就是共同進(jìn)化B．種群基因頻率的變化趨勢能反映變異的方向C．種群基因型頻率發(fā)生改變，說明生物在發(fā)生進(jìn)化D．精明捕食者是指捕食者對獵物不造成過度捕食，能保持其食物源二、非選擇題9．（10分）斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中選擇性表達(dá)，研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達(dá)載體，并導(dǎo)入到斑馬魚細(xì)胞中研究其作用，請回答：（1）為獲取HuC基因，研究人員從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過_________獲得大量的DNA，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點(diǎn)。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進(jìn)行切割，這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+處理大腸桿菌，大腸桿菌細(xì)胞即能夠______________。實(shí)驗(yàn)過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌。10．（14分）植物細(xì)胞壁中存在大量不能被豬消化的多聚糖類物質(zhì)，如半纖維素多聚糖、果膠質(zhì)（富含有半乳糖醛酸的多聚糖）等。研究人員通過基因工程、胚胎工程等技術(shù)培育出轉(zhuǎn)多聚糖酶基因（manA）豬，主要流程如下圖（neo為新霉素抗性基因）。（1）將該重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，經(jīng)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)約有50%的細(xì)胞能正常表達(dá)目的基因產(chǎn)物，原因是_____________________________________________________________。通過①過程獲得的重組質(zhì)粒含有4.9kb個(gè)堿基對，其中manA基因含有1.8kb個(gè)堿基對。若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯(lián)合酶切割其中一種重組質(zhì)粒，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段，若用上述聯(lián)合酶切割同等長度的另一種重組質(zhì)粒，則可獲得__________kb長度兩種的DNA片段。（2）圖2中，豬胎兒成纖維細(xì)胞一般選擇傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________________________________，豬的卵母細(xì)胞一般要培養(yǎng)到__________期。（3）在④過程的早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，通常需要定期更換培養(yǎng)液，目的是______________________________________________，一般培養(yǎng)到__________階段，可向受體移植。（4）⑤過程前，通常需對受體母豬注射孕激素，對其進(jìn)行__________處理。11．（14分）有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會(huì)污染環(huán)境?？蒲腥藛T通過人工篩選獲得高效的苯磺隆降解菌，將其擴(kuò)大培養(yǎng)后投入污染土壤中，可將土壤中的苯磺隆降解。請回答下列問題：（1）欲選擇性獲得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆污染的土壤中取樣，并在含有_______、________及水和無機(jī)鹽等的基本培養(yǎng)基上添加_______進(jìn)行選擇培養(yǎng)。（2）若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，也可選用________方法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。（3）將篩選的苯磺隆降解菌固定在一定的空間內(nèi)定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯橫隆降解菌的一般方法為包埋法，不使用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法的原因是__________。（4）研究人員從苯磺隆降解菌中分離出苯磺隆降解酶，分離該降解酶的常用方法有凝膠色譜法和__________。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)____________進(jìn)行分離。12．小鼠是研究哺乳動(dòng)物生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的常用材料。請回答：（1）正常小鼠對環(huán)境溫度變化敏感，將其從常溫（25℃左右）轉(zhuǎn)移至低溫（15℃左右）環(huán)境飼養(yǎng)，相同活動(dòng)程度時(shí)，個(gè)體的單位時(shí)間耗氧量會(huì)__________，體溫會(huì)__________。（2）機(jī)體缺乏甲狀腺激素的原因有：下丘腦病變、垂體病變、甲狀腺病變、缺碘。為探究某些患病小鼠的病因，科學(xué)家抽血檢測3種小鼠的激素濃度，結(jié)果如下表：促甲狀腺激素釋放激素促甲狀腺激素甲狀腺激素正常小鼠正常正常正?；疾小鼠偏高偏高偏低患病B小鼠？偏低偏低①A小鼠體溫比正常小鼠__________（填“偏高”或“偏低”），理由是__________。其患病的原因可能是__________。②若B小鼠的病因是垂體病變，則表中“？”應(yīng)為__________，原因是__________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

分析題文：該基因由5000對脫氧核苷酸組成，其中A占全部堿基的20%，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，T=A=20%，C=G=50%-20%=30%，則該基因中腺嘌呤脫氧核苷酸和胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)目為5000×2×20%=2000個(gè)，而胞嘧啶脫氧核苷酸和鳥嘌呤脫氧核苷酸的數(shù)目為3000個(gè)。【詳解】A、該基因中大多數(shù)脫氧核糖上均連接著2個(gè)磷酸和1個(gè)含氮堿基，A錯(cuò)誤；B、由以上分析可知，該基因中T=A=2000，C=G=3000，因此該基因的每條脫氧核苷酸鏈中（C+G）：（A+T）為3：2，B正確；C、解旋酶的作用是作用于堿基對之間的氫鍵，使DNA雙鏈結(jié)構(gòu)打開，形成單鏈，不是催化該基因水解為多個(gè)脫氧核苷酸，C錯(cuò)誤；D、基因突變是指基因結(jié)構(gòu)中堿基對的替換、增添和缺失而引起基因結(jié)構(gòu)的改變，所以該基因中丟失了3對脫氧核苷酸應(yīng)屬于基因突變，D錯(cuò)誤。故選B。2、B【解析】

增大二氧化碳濃度后，暗反應(yīng)速率提高，需要消耗光反應(yīng)剩余的還原氫和ATP，因此光的飽和點(diǎn)升高。當(dāng)增加環(huán)境中C02濃度后，S1的光飽和點(diǎn)沒有顯著改變，說明原條件下光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP不足。而S2的光飽和點(diǎn)顯著提高，說明原條件下光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP未達(dá)到飽和?！驹斀狻緼、光飽和點(diǎn)時(shí)，限制光合作用的主要環(huán)境因素是溫度或二氧化碳濃度，增加環(huán)境中二氧化碳濃度后，測得S1的光飽和點(diǎn)沒有顯著改變，可能原因是光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP不足，A正確；B、S1的光飽和點(diǎn)不變，可能是原條件下二氧化碳濃度已經(jīng)達(dá)到飽和，B錯(cuò)誤；C、增大二氧化碳濃度后，暗反應(yīng)速率提高，需要消耗光反應(yīng)剩余的[H]和ATP，因此，S2的光飽和點(diǎn)升高，C正確；D、S2的光飽和點(diǎn)提高，可能是原條件下二氧化碳濃度不足，還沒有達(dá)到二氧化碳飽和點(diǎn)，D正確。故選B?！径ㄎ弧抗夥磻?yīng)、暗反應(yīng)過程的能量變化和物質(zhì)變化3、B【解析】

孟德爾遺傳規(guī)律適用于真核生物有性生殖過程中核基因的遺傳，運(yùn)用假說——演繹法發(fā)現(xiàn)分離定律和自由組合定律。分離定律：在生物體細(xì)胞中，控制同一性狀的遺傳因子成對存在，不相融合；在形成配子時(shí)，成對的基因發(fā)生分離，分離后的遺傳因子分別進(jìn)入不同的配子中，隨配子遺傳給后代。自由組合定律：控制不同性狀的遺傳因子的分離和組合是互不干擾的；在形成配子時(shí)，決定同一性狀的成對遺傳因子彼此分離，決定不同性質(zhì)的遺傳因子自由組合?！驹斀狻緼、孟德爾遺傳定律只適合真核生物核基因，細(xì)胞質(zhì)基因不遵循，A正確；B、如果兩對基因共同控制一對性狀，則后代可能只有2種表現(xiàn)型，B錯(cuò)誤；C、受精時(shí)雌雄配子的結(jié)合是隨機(jī)的且機(jī)會(huì)均等，C正確；D、孟德爾研究分離定律與自由組合定律時(shí)用的方法是假說——演繹法，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】答題關(guān)鍵在于掌握孟德爾遺傳定律的有關(guān)知識(shí)，易錯(cuò)點(diǎn)是B選項(xiàng)，兩對基因可能存在連鎖反應(yīng)。4、B【解析】

本題主要考查種群的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對圖形的理解，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力?！驹斀狻績煞N昆蟲是捕食關(guān)系，乙捕食甲，甲的營養(yǎng)級較低，A項(xiàng)錯(cuò)誤；絲瓜喜較強(qiáng)陽光，較高的溫度有利于莖葉生長和果實(shí)發(fā)育，故推測7～9月份應(yīng)該是一年中絲瓜大量結(jié)果的時(shí)期，B項(xiàng)正確；該生態(tài)系統(tǒng)的組成成分應(yīng)包括生產(chǎn)者、消費(fèi)者、分解者及非生物的環(huán)境，C項(xiàng)錯(cuò)誤；統(tǒng)計(jì)該瓜地兩種昆蟲的種群密度需用樣方法，D項(xiàng)錯(cuò)誤。5、B【解析】

分析題圖：正常情況下，受精卵第一次分裂過程，開始形成兩個(gè)相對獨(dú)立的紡錘體，最后形成“雙紡錘體”，這樣形成的子細(xì)胞為單核細(xì)胞，而每個(gè)細(xì)胞核中含有40條染色體。而細(xì)胞A中紡錘體一端形成雙紡錘體，一端沒有形成雙紡錘體，這樣形成的兩個(gè)子細(xì)胞一個(gè)為單核，另一個(gè)為雙核，單核子細(xì)胞的染色體數(shù)為40條，雙核子細(xì)胞的每個(gè)核內(nèi)染色體數(shù)為20條?！驹斀狻緼、兩個(gè)紡錘體共同牽引來自雙親的兩組染色體，最終合二為一，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞A的兩個(gè)紡錘體一極靠近，形成的子細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)含40條染色體的單核，另一極分開，形成的子細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)各含20條染色體的雙核，B正確；C、細(xì)胞B的兩個(gè)紡錘體完全分開，形成的子細(xì)胞都會(huì)出現(xiàn)各含20條染色體的雙核，C錯(cuò)誤；D、秋水仙素能抑制紡錘體的形成，而藥物N抑制兩個(gè)紡錘體的相互作用，這一過程與秋水仙素作用無關(guān)，D錯(cuò)誤。故選B。6、D【解析】

1、基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，如cDNA文庫。2、以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA，并能繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫?！驹斀狻緼、cDNA是以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化形成的，故cDNA文庫的構(gòu)建需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶，A正確；B、由圖中菌落分布特點(diǎn)可知，圖中的菌落是通過稀釋涂布法獲得的，B正確；C、核酸分子雜交的原理是堿基互補(bǔ)配對，C正確；D、胰島B細(xì)胞內(nèi)的胰高血糖素基因不表達(dá)，所以從胰島B細(xì)胞內(nèi)提取不到胰高血糖素基因的mRNA，無法逆轉(zhuǎn)錄形成胰高血糖素基因的cDNA，故不能從利用人胰島B細(xì)胞構(gòu)建的cDNA文庫中篩選到胰高血糖素基因，D錯(cuò)誤。故選D。7、C【解析】

生物的變異包括可遺傳變異和不可遺傳的變異，可遺傳變異，遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，包括基因突變，基因重組和染色體變異，不可遺傳的變異是指生物的性狀發(fā)生改變，但是遺傳物質(zhì)并沒有發(fā)生改變?！驹斀狻炕蛲蛔兪侵富虻慕Y(jié)構(gòu)發(fā)生改變，染色體沒有變化，A錯(cuò)誤；基因重組是指控制不同性狀的基因重新組合，染色體結(jié)構(gòu)不變，B錯(cuò)誤；染色體結(jié)構(gòu)的變異包括染色體片段的增添、重復(fù)、易位和倒位，C正確；貓叫綜合征是第5號染色體短臂上缺失，染色體數(shù)目沒有改變，D錯(cuò)誤?！军c(diǎn)睛】染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)的變異和染色體數(shù)目的變異，結(jié)構(gòu)的變異包括染色體片段的缺失、重復(fù)、易位和倒位，染色體數(shù)目的變異包括個(gè)別染色體數(shù)目的增加或者減少，也包括染色體組成倍的增加和減少。8、D【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的內(nèi)容：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組，自然選擇及隔離是物種形成過程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成?！驹斀狻緼、共同進(jìn)化是指不同物種之間、生物與無機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，A錯(cuò)誤；B、種群基因頻率的變化趨勢能反映進(jìn)化的方向，不能反映變異的方向，變異是不定向的，B錯(cuò)誤；C、生物種群中基因頻率的改變可說明生物在發(fā)生進(jìn)化，C錯(cuò)誤；D、精明捕食者是指捕食者在進(jìn)化過程中能夠形成自我約束能力，對獵物不造成過度捕食，能保持其食物源，D正確。故選D。【點(diǎn)睛】本題考查現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容，要求考生識(shí)記現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)對選項(xiàng)作出正確的判斷。二、非選擇題9、逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)擴(kuò)增cDNA文庫EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接破壞標(biāo)記基因無法篩選（且沒有啟動(dòng)子）吸收周圍環(huán)境中的DNA分子表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落卡那霉素【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成目的基因，并通過PCR技術(shù)在體外擴(kuò)增可獲得大量的目的基因，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的cDNA文庫。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，不能破壞運(yùn)載體上的啟動(dòng)子、復(fù)制原點(diǎn)，以及運(yùn)載體上需要保留標(biāo)記基因，為了防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，結(jié)合圖示中各種限制酶的酶切位點(diǎn)可知，為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶進(jìn)行切割?？敲顾乜剐曰?yàn)闃?biāo)記基因，若用NotⅠ酶切割，將會(huì)導(dǎo)致卡那霉素抗性基因被破壞，且切割后的質(zhì)粒會(huì)失去啟動(dòng)子，使基因表達(dá)載體中缺少標(biāo)記基因無法選擇，且沒有啟動(dòng)子無法轉(zhuǎn)錄，所以不選擇NotⅠ酶切割質(zhì)粒。（3）用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。由于綠色熒光蛋白表達(dá)后會(huì)發(fā)綠光，所以實(shí)驗(yàn)過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落或者在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。10、目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時(shí)，存在正接和反接兩種重組質(zhì)粒3.5和1.4保持正常的二倍體核型減數(shù)第二次分裂中清除代謝廢物，補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)桑椹胚或囊胚同期發(fā)情【解析】

分析題圖：①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建、②為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、③為體細(xì)胞核移植、④為早期胚胎培養(yǎng)、⑤為胚胎移植。【詳解】（1）將該重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，經(jīng)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)約有50%的細(xì)胞能正常表達(dá)目的基因產(chǎn)物，原因是目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時(shí)，存在正接和反接兩種重組質(zhì)粒。上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段，說明右側(cè)BamHI和EcoRI之間的長度為1.7；用聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質(zhì)粒，則切割的是BamHI左側(cè)的位點(diǎn)，又因?yàn)閙anA基因含有1.8kb個(gè)堿基對，可獲得1.7+1.8=3.5kb和4.9-3.5=1.4kb兩種DNA片段。（2）豬胎兒成纖維細(xì)胞一般選擇傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是保持正常的二倍體核型。細(xì)胞在傳至10～50代時(shí)，增殖會(huì)逐漸緩慢，以至于完全停止，這時(shí)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。在核移植時(shí)采集的卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才進(jìn)行去核操作。（3）在早期胚胎培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，清除代謝廢物，補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)。胚胎一般培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可向受體移植。（4）胚胎移植前，通常需對受體母豬注射孕激素，使其能同期發(fā)情?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的相關(guān)知識(shí)、核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，并能夠分析和判斷圖中各個(gè)字母代表的過程的名稱，結(jié)合題目的提示分析答題。11、碳源氮源苯磺隆稀釋涂布平板體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合電泳法相對分子質(zhì)量大小【解析】

1、微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽四類營養(yǎng)；選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長，又要抑制或阻止其他種類微生物生長，因而篩選獲得高效的苯磺隆降解菌，必須以苯磺隆為唯一碳源，只讓目的菌株生存繁殖。2、微生物計(jì)數(shù)的方法有稀釋涂布平板法和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，前者統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，后者不能區(qū)分死菌和活菌。【詳解】（1）培養(yǎng)基的主要成分為水、碳源、氮源和無機(jī)鹽；為了獲得能降解有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆的微生物菌種，可用含有有