梅毒的實驗室診斷與臨床意義

關(guān)于梅毒的實驗室診斷與臨床意義

梅毒的歷史梅毒的起源地：美洲梅毒的傳播：1492年哥倫布第一次航行到美洲帶回歐洲，然后傳向全世界。進入中國時間：1505年葡萄牙商人進入廣州，將此病傳遍大江南北。中國舊稱此病為：霉瘡或楊梅瘡第2頁,共27頁，2024年2月25日，星期天

梅毒病原體梅毒病原體為：梅毒螺旋體(TP)由德國的霍夫曼和謝文定在1905年首先發(fā)現(xiàn).因透明不易染色，所以又稱為蒼白螺旋體。第3頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒流行病學(xué)統(tǒng)計梅毒是世界三大慢性傳染病之一（梅毒、麻風、結(jié)核）。1999年全國報告梅毒80406例。2009年全國報告梅毒327433例。2010年全國報告梅毒385678例.2012年全國報告梅毒448620例.2012年廣東全省報告新發(fā)梅毒病例數(shù)為53043例，是全國第一。2012年，在甲乙類傳染病上報病例中梅毒位居第三。（病毒性肝炎、結(jié)核、梅毒）第4頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒的疫情分析梅毒發(fā)病率呈逐年大幅上升趨勢，疫情形勢嚴竣。也說明實驗室的檢測范圍擴大和技術(shù)水平的提高，從而發(fā)現(xiàn)確診了更多梅毒病例。中國預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃2010—2020年，要把梅毒病例每年的增速控制在5%以下。第5頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒實驗室檢查示意圖梅毒實驗室檢查顯微鏡檢查法血清學(xué)檢查暗視野顯微鏡檢查法非梅毒螺旋體抗原血清試驗鍍銀染色檢查法梅毒螺旋體抗原血清試驗VDRLUSRRPRTRUSTFTA-ABSTPHATPPA

核酸DNA檢測-PCR第6頁,共27頁，2024年2月25日，星期天各期梅毒取材部位與檢查方法臨床表現(xiàn)取材部位檢查方法一期梅毒潰瘍、淋巴結(jié)顯微鏡檢查血液血清學(xué)檢查二期梅毒皮損、淋巴結(jié)顯微鏡檢查血液血清學(xué)檢查隱性梅毒血液血清學(xué)檢查三期梅毒血液、腦脊液血清學(xué)檢查神經(jīng)梅毒血液、腦脊液血清學(xué)檢查

第7頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒顯微鏡檢查法梅毒顯微鏡檢查法可分二類：1.暗視野顯微鏡檢查法2.鍍銀染色檢查法第8頁,共27頁，2024年2月25日，星期天暗視野顯微鏡檢查法潰瘍部位取材，查找蒼白螺旋體。取材方法：1.清洗干凈

2.取組織液或滲出液

3.刮取或壓片

4.加一滴生理鹽水

5.送實驗室檢查

注意：取材后需十分鐘內(nèi)立即送檢實驗室暗視野顯微鏡直接查找活動的蒼白螺旋體。第9頁,共27頁，2024年2月25日，星期天暗視野顯微鏡下的蒼白螺旋體第10頁,共27頁，2024年2月25日，星期天鍍銀染色檢查法潰瘍部位取材，鍍銀染色查找蒼白螺旋體。取材方法：1.清洗干凈

2.取組織液或滲出液

3.刮取或壓片

4.送實驗室鍍銀染色實驗室普通顯微鏡下查找染成棕褐色的梅毒螺旋體。第11頁,共27頁，2024年2月25日，星期天鍍銀染色梅毒螺旋體鏡下形態(tài)第12頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒顯微鏡檢查的臨床意義陽性：有診斷價值,可確認梅毒感染。陰性：無否定價值，無診斷價值。方法學(xué)優(yōu)點：1.取材方便

2.制作簡單

3.結(jié)果快速方法學(xué)缺點：1.陽性率僅30—60%，漏檢率高，且只適于一期、二期梅毒的篩查.2.受制于取材不當、制片不當?shù)纫蛩亍?/p>

3.需暗視野顯微鏡，基層醫(yī)院一般無此設(shè)備。

4.對檢驗技師技術(shù)經(jīng)驗水平要求較高。

第13頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒實驗室血清學(xué)檢查梅毒的實驗室血清學(xué)檢查方法有很多，可分為二類：1.非梅毒螺旋體抗原血清試驗2.梅毒螺旋體抗原血清試驗這二類試驗都是以檢測梅毒患者體內(nèi)產(chǎn)生的相應(yīng)梅毒抗體，從而推斷是否感染梅毒螺旋體。第14頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒螺旋體抗體的產(chǎn)生人感染梅毒螺旋體后，第14天產(chǎn)生第一次感染后的體液免疫應(yīng)答，特異性抗體lgM,四周左右達到高峰，以反應(yīng)素抗體為主，此抗體治療后可消失。第3周開始產(chǎn)生出現(xiàn)特異性抗體lgG,4—5周達到高峰，可保留終生。第30天開始產(chǎn)生出現(xiàn)非特異性抗體lgM，很快達到高峰，以反應(yīng)素抗體為主，治療后可消失。第40天開始產(chǎn)生出現(xiàn)非特異性抗體lgG,很快上升，1年后達到高峰，治療后可消失.第15頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒抗體的產(chǎn)生時間與波峰圖人感染梅毒后，各抗體出現(xiàn)的時間與波峰圖第16頁,共27頁，2024年2月25日，星期天非梅毒螺旋體抗原試驗非梅毒螺旋體抗原試驗包括以下幾種：VDRL性病研究實驗室（玻片試驗）USR血清不需加熱的反應(yīng)素（玻片試驗）RPR快速血漿反應(yīng)素（環(huán)狀卡片試驗）TRUST甲苯胺紅血清不需加熱試驗

原理：用一定比例的心磷脂、卵磷脂及膽固醇混合物作為非特異性梅毒螺旋體抗原，與患者血清中的抗體作抗原抗體結(jié)合反應(yīng)試驗，來檢測患者體內(nèi)的抗類脂類抗原的抗體（即非特異性梅毒螺旋體抗體）第17頁,共27頁，2024年2月25日，星期天非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義1.適用于梅毒篩查、療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染的檢查；

2.抗體水平與疾病嚴重程度成正比；

3.評價、監(jiān)測治療效果，此抗體治愈后可消失。

4.此抗體不具有特異性,全身性疾病的活動期如:紅斑狼瘡,風濕病,類風濕關(guān)節(jié)炎，病毒性肝炎,麻風病,自身免疫性疾病等，都有可能出現(xiàn)?，F(xiàn)在臨床醫(yī)學(xué)實驗室基本上都采用TRUST或RPR來做梅毒螺旋體的非特異性抗體檢測。第18頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒螺旋體抗原血清試驗

梅毒螺旋體抗原血清試驗包括以下幾種：FTA-ABS熒光螺旋體抗體吸收（試驗）TPHA梅毒螺旋體血凝試驗TPPA梅毒螺旋體顆粒凝集試驗原理：都是以梅毒螺旋體為抗原，與患者血清中的抗體作抗原抗體結(jié)合反應(yīng)試驗，來檢測患者體內(nèi)的特異性梅毒螺旋體抗體。以上各試驗只是抗原的制備方法和結(jié)果顯示方法上略有不同，基本原理都相同。第19頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義1.適用于梅毒篩查、及非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性的確證試驗。

2.特異性抗體可終生存在，故試驗陽性不能作為療效觀察的指標。3.試驗陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，需結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結(jié)果進行現(xiàn)癥確認診斷。現(xiàn)在絕大多數(shù)醫(yī)學(xué)實驗室采用TPPA來做梅毒螺旋體的特異性抗體檢測。第20頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒血清學(xué)檢驗結(jié)果判讀總結(jié)非梅毒抗原血清試驗梅毒抗原血清試驗臨床意義（非特異性抗體）（特異性抗體）陽性（+）

陽性（+）診斷確認現(xiàn)癥梅毒感染陽性（+）陰性（-）排除梅毒，提示其他疾病陰性（-）陽性（+）曾有感染，已治療或自愈陰性（-）陰性（-）健康人群第21頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒檢驗結(jié)果判讀示總結(jié)圖梅毒實驗室檢查顯微鏡檢查法血清學(xué)檢查陽性：確認診斷梅毒感染非梅毒螺旋體抗原血清試驗陰性：無否定價值梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性：提示有活動性疾病陽性：確認梅毒感染或曾經(jīng)感染陰性：有否定價值（早期1月內(nèi)感染除外）陰性：有否定價值，可排除梅毒感染第22頁,共27頁，2024年2月25日，星期天梅毒篩查策略梅毒篩查策略一:TRUST(陽性)→TPPA(陽性)→診斷確認梅毒TRUST(陰性)→終止檢查特點:傳統(tǒng)方法,簡便快速,漏檢率高,適合于健康人群批量篩查.梅毒篩查策略二:TPPA(陽性)→TRUST(陽性)→診斷確認梅毒TPPA(陰性)→否定梅毒特點:敏感性高,特異性強,操作煩瑣,不適宜大規(guī)模批量檢查.因此建議采取策略二做臨床病人的梅毒篩查.第23頁,共27頁，2024年2月25日，星期天（先天）胎傳梅毒（先天）胎傳梅毒：梅毒螺旋體通過母體胎盤傳染給胎兒。早期胎傳梅毒＜2歲；晚期胎傳梅毒﹥2歲；1997年我國共報告先天梅毒109例，發(fā)病率為0.53/10萬活產(chǎn)數(shù)；2009年我國共報告先天梅毒10757例，發(fā)病率為64.41/10萬活產(chǎn)數(shù)。每年發(fā)病率增長49.2%.對于疑似早期胎傳梅毒的，尤其是新生兒，實驗室檢查TRUST陽性和TPPA陽性者，不能過早下確認診斷結(jié)論，因為嬰兒體內(nèi)抗體有可能來自來母體，非胎兒自身產(chǎn)生。研究調(diào)查：對99例檢查TPPA為陽性的新生兒隨訪，6個月內(nèi)自動轉(zhuǎn)陰率為18.6%，2年內(nèi)轉(zhuǎn)陰率為74.4%.第24頁,共27頁，2024年2月25日，星期天區(qū)分梅毒抗體來源那么如何區(qū)分抗體是來自母體還是嬰兒自身感染產(chǎn)生呢？和所有的細菌及病毒感染一樣，在梅毒中特異性lgM抗體的合成是初次感染后的體液免疫應(yīng)答，最先產(chǎn)生，隨后才產(chǎn)生lgG抗體。lgM抗體分子量大（97萬道爾頓），其不能通過胎盤屏障進入嬰兒體內(nèi)，lgG抗體分子量?。?5萬道爾頓）能通過胎盤。所以只要在嬰兒體內(nèi)檢查到特異性梅毒l