組織學與胚胎學第一章緒論

組織學與胚胎學主講：趙培榮1可編輯版第一章緒論一、組織學與胚胎學的研究內容與意義1、組織學定義是用顯微鏡研究正常人體的微細結構及其與功能關系的科學。2、組織學研究內容細胞——組織——器官——系統(tǒng)3、胚胎學定義是研究出生前的個體發(fā)生和生長規(guī)律及其發(fā)育機制的科學。4、胚胎學研究內容受精——卵裂——胚泡——胚層——胎兒娩出2可編輯版5、意義組織學是基礎醫(yī)學的一門重要基礎學科，是臨床醫(yī)學的基礎。胚胎學是優(yōu)生優(yōu)育的理論基礎，對臨床診治起指導作用。3可編輯版二、組織學與胚胎學的研究方法（一）一般光學顯微鏡技術光鏡分辨率0.2μm放大倍數(shù)幾百倍至千倍。生物制片技術1、石蠟組織切片；2、冰凍切片；3、火棉膠切片；4、磨片；5、涂片；6、鋪片；石蠟組織切片的過程：取材——固定——脫水——透明——浸蠟——包埋——切片——染色——封片。4可編輯版HE染色蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質（本身酸性）染成藍色酸性染料將嗜酸性物質（本身堿性）染成紅色細胞核中的DNA、RNA細胞質中的RNA細胞質、膜性結構（線粒體、溶酶體、滑面內質網）5可編輯版光鏡6可編輯版HE圖片7可編輯版涂片8可編輯版9可編輯版（二）組織化學和細胞化學技術原理：是通過化學反應或物理反應的原理顯示組織細胞內某種化學成分，并可進行定位、定性、半定量研究。如：PAS反應（過碘酸—希夫反應）多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀10可編輯版PAS圖片11可編輯版（三）免疫組織化學技術原理：是應用抗原與抗體特異性結合的原理，檢測組織細胞內多肽、蛋白質或受體等大分子物質的技術。直接法：用標記的抗體與細胞的相應抗原特異性結合。間接法：標記二抗。靈敏度高于直接法。1.PAP法：其原理是一抗同抗原相結合，二抗既能同一抗相結合，又能同PAP復合物相結合，后者由過氧化物酶和抗過氧化物酶抗體組成，最后以DAB顯色。12可編輯版直接法和間接法圖13可編輯版PAP法14可編輯版2.ABC法：是用一抗同抗原結合，生物素化的二抗再與一抗結合，最后用親合素-生物素-過氧化物酶復合物處理，使復合物同生物素化的二抗結合，顯色部位即表明抗原存在的部位。該法比PAP法敏感20-40倍。15可編輯版ABC法16可編輯版（四）電子顯微鏡技術分辨率0.2nm，放大倍數(shù)幾千倍至幾百萬倍。1.透射電子顯微鏡技術觀察細胞內部的結構。2.掃描電子顯微鏡技術觀察細胞表面的結構。17可編輯版電鏡18可編輯版電鏡技術過程19可編輯版電鏡圖片20可編輯版21可編輯版(2)掃描電鏡觀察組織C的表面立體結構。掃描電鏡22可編輯版（五）冷凍蝕刻復型是用透射電鏡觀察組織或細胞斷裂面的金屬復制膜。組織經甘油處理后快速冷凍（-190℃），高真空下用鋼刀將組織劈開，升溫至-100℃使組織升華，出現(xiàn)自然的凸凹面。先噴一層鉑膜，再噴一層碳膜，以加固鉑膜。用次氯酸等將組織腐蝕掉，清理復型，電鏡觀察。其凸凹結構影像恰與實物相反。此法可以觀察細胞膜內部兩層脂質分子的結構。23可編輯版冷凍蝕刻24可編輯版（六）細胞培養(yǎng)技術將人或動物的活細胞在體外適宜的環(huán)境中（如溫度、PH值、營養(yǎng)等）培養(yǎng)成活，可以進行細胞增殖、分化、代謝、吞噬及癌變機理等多方面的研究，獲得體內實驗難以達到的目的。25可編輯版倒置相差顯微鏡26可編輯版細胞培養(yǎng)