細(xì)菌培養(yǎng)及報(bào)告單解讀

關(guān)于細(xì)菌培養(yǎng)及報(bào)告單解讀抗生素的概述、作用及要素抗生素的概述抗生素大家實(shí)際上不陌生了，嚴(yán)格意義上講，抗生素就是在非常低濃度下對(duì)所有的生命物質(zhì)有抑制和殺滅作用的藥物?？股氐淖饔脷绺腥疚覀兊奈⑸?，目的是把病原體殺滅，控制疾病，以最終治療疾病抗生素的3要素

1選藥2用量3用法

第2頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天2010年我院標(biāo)本的送檢率及陽(yáng)性率

2010年統(tǒng)計(jì)顯示，標(biāo)本送檢率20%，陽(yáng)性檢出率30%，

血培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率10%以上，呼吸道標(biāo)本苛養(yǎng)菌的分離率5%以上。標(biāo)本類型全年送檢量（人次）全年陽(yáng)性檢出量（人次）陽(yáng)性檢出百分比痰液10811375934.77%尿液136053739.48%各種分泌物及導(dǎo)管尖端139375238.50%靜脈血7452108714.58%腦脊液、骨髓135821615.90無(wú)菌體液51011322.15%第3頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天

正確采集標(biāo)本

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心微生物組在保證檢驗(yàn)質(zhì)量的工作中，堅(jiān)持不斷的持續(xù)改進(jìn)，優(yōu)化操作流程。從標(biāo)本接收到及時(shí)查對(duì)，選擇正確的培養(yǎng)基、按要求接種、培養(yǎng)、分純，儀器鑒定及藥敏試驗(yàn)。經(jīng)儀器鑒定到種的細(xì)菌結(jié)果經(jīng)組內(nèi)有經(jīng)驗(yàn)的人員判斷結(jié)果，發(fā)出最終報(bào)告（準(zhǔn)確率在90%以上）。因細(xì)菌生長(zhǎng)需要足夠時(shí)間，故微生物組培養(yǎng)加藥敏試驗(yàn)所需時(shí)間較長(zhǎng)，因此一份合格的標(biāo)本對(duì)微生物來(lái)說(shuō)顯得尤為重要，高質(zhì)量的標(biāo)本是質(zhì)量保證的前提，只有實(shí)驗(yàn)室收到符合要求的標(biāo)本，才能保證后續(xù)的培養(yǎng)鑒定及藥敏檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，時(shí)效性。如何正確采集各類標(biāo)本呢？第4頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天痰液用溫開水清洗或漱口去除口腔表面菌從肺深部咳出痰液，采集到無(wú)菌容器內(nèi)采集量：無(wú)菌容器＞1mL送檢要求：≤2h常溫對(duì)于不能自主留取標(biāo)本的患者，應(yīng)經(jīng)抽吸獲得一天中僅需送檢1次，無(wú)需多次重復(fù)送檢相同標(biāo)本用于檢查結(jié)核分枝桿菌時(shí)，為了提高陽(yáng)性率，應(yīng)收集24h痰液第5頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天尿液在未使用抗生素之前采集標(biāo)本，注意避免消毒劑污染標(biāo)本最好留取早晨清潔中端尿，采集量：無(wú)菌管≥3mL送檢要求:≤2h常溫需導(dǎo)尿的病人：采集前用70%異丙基乙醇消毒導(dǎo)管采集部位長(zhǎng)機(jī)采集無(wú)菌尿液5-10mL標(biāo)本不能直接從導(dǎo)尿袋放出，易孳生污染菌細(xì)菌一天中僅需送檢1次，無(wú)需多次重復(fù)送檢相同標(biāo)本結(jié)核分枝桿菌集菌檢查：留取24h尿液，取沉淀部分送檢。第6頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天糞便挑取膿血、粘液部分的糞便2～3g置大便于專用無(wú)菌培養(yǎng)容器內(nèi)，如為稀水便，可直接收集1～2mL于專用培養(yǎng)杯中，蓋好塞子，及時(shí)送檢。試管中不可混入尿液等異物及其它化學(xué)藥品。若做厭氧菌培養(yǎng)則領(lǐng)取專用厭氧拭子由肛門插入約6～7cm，輕輕旋動(dòng)取出大便少許，放回厭氧拭子培養(yǎng)試管中，蓋好塞子，滅菌封口送檢。標(biāo)本需1h內(nèi)送檢，操作中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌技術(shù)第7頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天靜脈血、腦脊液、骨髓培養(yǎng)瓶的消毒：用70%異丙基乙醇消毒橡膠塞30s靜脈穿刺消毒：嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作（酒精-碘酊-酒精）。血液培養(yǎng)須特別注意消毒，因許多微生物，尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表層處，易造成污染。天氣寒冷時(shí)要注意腦脊液標(biāo)本應(yīng)在保溫條件下送檢，以免病原菌死亡，送檢要求：≤1h常溫禁止冷藏血培養(yǎng)的采樣時(shí)間：在寒戰(zhàn)出現(xiàn)時(shí)或發(fā)熱初期采集血培養(yǎng)最佳建議從不同部位采2-3套（一套為1瓶需氧+1瓶厭氧血培養(yǎng)瓶）如不能立即送檢，應(yīng)置于室溫，禁止放入冰箱。血培養(yǎng)專用瓶成人：8-10mL/瓶；嬰幼兒：1-5mL/瓶第8頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天無(wú)菌體液（穿刺液、心包液、胸水、腹水、關(guān)節(jié)液等）注意徹底消毒，因許多微生物，尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表層處，易造成污染盡可能留取多量標(biāo)本采集時(shí)間應(yīng)在患者用抗菌藥物之前，或停止用藥1～2日后，或下次用藥前，或藥物濃度較低時(shí)抽取，胸水及腹水一般抽取5～10mL，心包液、關(guān)節(jié)液一般抽取1～5mL，2、疑為厭氧菌感染時(shí)，取材后立即將注射器內(nèi)空氣排空，無(wú)菌操作注入3～5mL穿刺液于厭氧血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，及時(shí)送檢第9頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天膿汁及病灶分泌物封閉性膿腫：先用碘酒或碘伏消毒患者病灶局部的皮膚或粘膜表面，再用75％的酒精脫碘，以無(wú)菌干燥注射器穿刺抽取，將采集的膿汁無(wú)菌操作注入5～10mL滅菌培養(yǎng)管中，如懷疑是厭氧菌應(yīng)領(lǐng)取專用厭氧拭子做厭氧培養(yǎng)并建議同時(shí)做一般細(xì)菌涂片鏡檢開放性膿腫和病灶分泌物：對(duì)采樣部位，應(yīng)先用滅菌生理鹽水洗凈病灶表面的污染物，對(duì)表皮、粘膜應(yīng)充分消毒，采集病灶部位膿性分泌物于滅菌培養(yǎng)管或滅菌棉拭子試管內(nèi)，立即送檢。第10頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天實(shí)驗(yàn)室選擇抗生素的依據(jù)選用藥物根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)定使用的標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)CLSI（美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)）標(biāo)準(zhǔn)來(lái)選擇。微生物組現(xiàn)采用兩種藥敏檢測(cè)方法：

MIC法（定量藥敏）KB法（定性藥敏）。住院病人采用上機(jī)MIC法，商品化的藥敏試卡，卡中所包含藥物的種類的是固定的，實(shí)驗(yàn)室會(huì)定期更換藥敏試卡，在選擇試卡的過(guò)程中充分與藥劑科共同溝通，盡可能選擇我院藥劑科能提供的抗生素?，F(xiàn)在臨床需要實(shí)驗(yàn)室提供臨床常用藥物敏感試驗(yàn)如“頭孢硫醚“等這類藥物但CLSI無(wú)判斷標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)內(nèi)也無(wú)相應(yīng)的藥敏紙片，雖臨床有需求，實(shí)驗(yàn)室無(wú)法提供藥敏實(shí)驗(yàn)。同時(shí)有些分離鑒定出的細(xì)菌，對(duì)某些類抗菌藥物是天然耐藥的（如腸球菌對(duì)頭孢類抗生素天然耐藥），實(shí)驗(yàn)室藥敏試驗(yàn)則不考慮這類藥物。第11頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天微生物組現(xiàn)提供給臨床的2組藥敏卡AST-GN04

革蘭氏陰性藥敏卡Amikacin 阿米卡星Ampicillin 氨芐西林Ampicillin/Sulbactam氨芐西林/舒巴坦Aztreonam 氨曲南Cefazolin 頭孢唑啉Cefepime 頭孢吡肟Cefotetan 頭孢替坦Ceftazidime 頭孢他啶Ceftriaxone 頭孢曲松Cefuroxime 頭孢呋辛Ciprofloxacin 環(huán)丙沙星Gentamicin 慶大霉素Imipenem 亞胺培南Levofloxacin 左氧氟沙星Nitrofurantoin 呋喃妥因Piperacillin 哌拉西林Piperacillin/Tazobactam哌拉西林+他唑巴坦Ticarcillin/ClavulanicAcid替卡西林/棒酸Tobramycin 妥布霉素Trimethoprin/Sulfa復(fù)方新諾明AST-P535(22067)葡萄球菌、腸球菌、B組鏈球菌Ampicillin 氨芐西林Ampicillin/Sulbactam氨芐西林/舒巴坦BenzyPenicillin青霉素GCiprofloxacin 環(huán)丙沙星Clindamycin 氯潔霉素Erythromycin 紅霉素Fosfomycin磷霉素FusidicAcid呋西地酸Gentamicin慶大霉素GentamicinHighlevel高濃度慶大霉素(協(xié)同)Imipenem 亞胺培南Linezolid(Zyvox)利奈唑烷Moxifloxacin莫西沙星OxacillinMICNCCLS苯唑西林OxacillinBreakpoint苯唑西林臨界點(diǎn)Quinupristin/Dalfoprsifin喹努普汀/達(dá)福普汀Rifampin利福平StreptomycinHighLevel高濃度鏈霉素(協(xié)同)Teicoplarin替考拉寧Tetracycline 四環(huán)素Trimethoprin/Sulfamethoxazole復(fù)方新諾明Vancomycin 萬(wàn)古霉素第12頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天藥敏卡的選擇依據(jù)含蓋各類抗生素以及抗生素的不同代數(shù)（包括青霉素類、頭孢類、碳青霉烯類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類、單環(huán)內(nèi)酰胺類及葉酸代謝途徑抑制劑等）大部分為臨床常用藥物滿足臨床約90%的用藥需求代表藥的耐藥性可預(yù)示同類抗生素的耐藥性第13頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天特殊細(xì)菌的藥敏選擇嗜麥芽窄食單胞菌其具有復(fù)雜的耐藥機(jī)制，外膜通透性低，對(duì)多種抗生素不易滲透，可產(chǎn)生多種B-內(nèi)酰胺酶，如青霉素酶，頭孢菌素L2酶以及金屬鋅酶，因此對(duì)B-內(nèi)酰胺類，氨基糖苷類，喹諾酮類抗生素耐藥，同時(shí)對(duì)碳青酶烯類抗生素也耐藥由于嗜麥芽窄食單胞菌的耐藥性較強(qiáng)，依據(jù)CLSI選擇K-B法藥敏實(shí)驗(yàn)，包括四環(huán)素類（米諾環(huán)素)、氟喹諾酮類（左氧氟沙星）、葉酸代謝途徑抑制劑（復(fù)方新諾明）這3種藥報(bào)告臨床第14頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天肺炎鏈球菌從腦脊液中分離的肺炎鏈球菌應(yīng)測(cè)試青霉素、頭孢噻肟或頭孢曲松、美羅培南及萬(wàn)古霉素的MIC值對(duì)于非膜炎分離株，青霉素MIC能預(yù)報(bào)菌株對(duì)其他β－內(nèi)酰胺酶類敏感性的藥物如：青霉素MICs<=0.06ug/ml（或苯唑西林抑菌圈直徑>=20mm）提示分離菌株對(duì)氨芐西林（口服或注射）、氨芐西林/舒巴坦、頭孢克洛、頭孢地尼、頭孢托侖、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢唑肟、頭孢呋辛、亞胺培南、氯碳頭孢和美羅培南敏感。青霉素MICs<=2ug/ml提示對(duì)一下藥物敏感：阿莫西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢吡肟、頭孢噻肟、頭孢曲松和厄他培南第15頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天鮑曼不動(dòng)桿菌鮑曼不動(dòng)桿菌為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，該菌是醫(yī)院感染的重要病原菌，對(duì)常用抗生素的耐藥率有逐年增加的趨勢(shì)，Ab約占臨床分離的不動(dòng)桿菌的70%以上。Ab對(duì)第三代和第四代頭孢菌素的耐藥率已達(dá)63.0%～89.9%。對(duì)三種氨基糖苷類（慶大酶素、奈替米星、妥布霉素）和環(huán)丙沙星的耐藥率菌達(dá)96.3%。我院目前的絕大多數(shù)菌株對(duì)亞胺培南、美羅培南等也產(chǎn)生了不同程度的耐藥實(shí)驗(yàn)室結(jié)合臨床目前治療措施，追加了頭孢派酮/舒巴坦、多黏菌素B、米諾環(huán)素及亞胺培南的K-B法藥敏對(duì)儀器報(bào)告結(jié)果進(jìn)行補(bǔ)充以滿足臨床需求由于CLSI中對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦及多粘菌素B無(wú)判斷指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)室只報(bào)告抑菌圈直徑未標(biāo)注敏感與耐藥。第16頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天靜脈血、腦脊液、骨髓標(biāo)本的

處理流程第17頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天陰性結(jié)果報(bào)告血培養(yǎng)如培養(yǎng)至第5天，未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)，方可發(fā)出陰性報(bào)告，“經(jīng)鑒定無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)”陽(yáng)性結(jié)果報(bào)告報(bào)告通常分為三級(jí)；一級(jí)報(bào)告陽(yáng)性報(bào)警血培養(yǎng)瓶應(yīng)進(jìn)行涂片革蘭染色，將涂片染色結(jié)果在實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIS）“預(yù)報(bào)告處理”欄處報(bào)告危急值。電話通知臨床聯(lián)系人，在“備注”欄記錄“XXX培養(yǎng)陽(yáng)性”，“革蘭XX菌”，與臨床聯(lián)系人姓名和檢驗(yàn)者姓名；二級(jí)報(bào)告在實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIS）“預(yù)報(bào)告處理”