《醫(yī)學微生物學》實驗教學大綱

《醫(yī)學微生物學》實驗教學大綱一、課程編號：14050041 適用專業(yè)：臨床醫(yī)學課程類別：學科專業(yè)基礎必修開課學期：3實驗學時：20二、開課實驗室：形態(tài)學實驗室三、實驗教材及參考書教材：黃慶紅主編，《形態(tài)實驗學》，第1版，世界圖書出版公司，2010.9參考書目：[1]鄔國軍，戴橄，譚宇蓉主編，《實驗醫(yī)學微生物學》，中南大學出版社，2006[2]任同明、付升旗主編，《人體解剖實驗學》，第一版，世界圖書出版公司，2006.6[3]倪語星主編，《微生物學和微生物學檢驗實驗指導》，人民衛(wèi)生出版社，1997[4]劉運德，樓永良主編，《微生物學檢驗》，人民衛(wèi)生出版社，1998四、實驗教學目的和要求醫(yī)學微生物學是研究與醫(yī)學有關的病原微生物的生物學性狀、感染與免疫機理、特異性診斷與防治的學科。醫(yī)學微生物學是臨床醫(yī)學專業(yè)的專業(yè)基礎課和橋梁學科，本課程的任務是通過對本課程的學習使學生初步掌握臨床常見的病原微生物的基本特征、致病特性，機體對病原微生物感染的免疫以及臨床的有效診斷方法和防治措施，為后續(xù)專業(yè)基礎課、臨床課打下理論和實踐基礎。實驗教學可以讓學生加深和鞏固對課堂內(nèi)容的理解和體會；在掌握系統(tǒng)理論知識的基礎上，理解并掌握醫(yī)學微生物學的基本操作技術，樹立無菌觀念。掌握實驗室常用的消毒滅菌方法，掌握常見病原微生物的生物學性狀、分離培養(yǎng)、鑒定及常用血清學檢查方法。樹立科學思維的意識，培養(yǎng)獨立思考、獨立操作和獨立解決問題的能力，為今后免疫性疾病、傳染性疾病的診治和研究打下堅實的基礎。具體要求：1.為提高實驗課教學效果，學生每次實驗前必須認真預習。了解實驗原理、材料與方法、注意事項以及預期的實驗結果。2.加強基礎訓練，每次實驗過程中應注意基本技術、基本操作的正確性。堅持實驗的嚴肅性、嚴格性和嚴謹性。3.示教實驗和錄像實驗要仔細觀察。4.自行操作項目要認真、仔細、準確。5.為提高科學思維和分析總結能力，每次實驗結束后必須認真、如實地記錄結果，進行分析，得出結論，完成實驗報告。6.聯(lián)系臨床應用，提高學習積極性，加強學生的動手能力，進一步提高實驗教學質量。五、考核形式要求《醫(yī)學微生物學》是一門實踐性較強的學科，實驗操作技能在本課程中十分重要。在期末進行實驗操作考試，按百分制記分，實驗成績按20%記入該課程總成績，實驗報告及平時成績按10%計入該課程總成績。六、實驗項目及要求（一）實驗項目名稱序號實驗項目名稱實驗類型實驗學時每組人數(shù)實驗要求1細菌形態(tài)學檢查綜合420必修2手指皮膚的細菌學檢查設計420必修3膿汁標本細菌學檢查綜合220必修4糞便標本細菌學檢查綜合220必修5弧菌屬、厭氧性細菌、白喉棒狀桿菌、螺旋體綜合420必修6分枝桿菌屬、病毒學、真菌學、實驗考核綜合420必修（二）目的要求及實驗內(nèi)容1.細菌形態(tài)學檢查目的要求：掌握顯微鏡油浸鏡的使用與保護法；掌握細菌的三種基本形態(tài)和四種特殊結構及與醫(yī)學的關系；掌握細菌片制片技術；革蘭氏染色法的原理、步驟、結果、臨床意義。實驗內(nèi)容：1.實驗室規(guī)則；2.油鏡的使用（1）原理（2）使用方法（3）保護法；3.用油鏡觀察細菌的基本形態(tài)、特殊結構(操作)；4.革蘭氏染色法(操作)2.手指皮膚的細菌學檢查目的要求：了解細菌的接種法，熟悉細菌培養(yǎng)基的種類及細菌的培養(yǎng)方法；掌握細菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象；熟悉微生物在自然界及人體的分布，進一步樹立無菌觀念；掌握常用的消毒滅菌法；掌握藥敏試驗及其臨床意義。實驗內(nèi)容：1.細菌培養(yǎng)基的種類、用途、制備程序(示教)；2.接種環(huán)、針的有關知識，接種程序，接種方法(示教)；3.細菌的培養(yǎng)方法(示教)；4.細菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象的觀察（操作）；5.空氣中細菌的檢查（操作）；6.咽喉部細菌的檢查（操作）；7.手指皮膚消毒前后的細菌的檢查（操作）；8.煮沸消毒試驗(示教)；9.紫外線殺菌試驗（示教）；10.藥敏試驗(示教)；11.常用消毒滅菌器的介紹(示教)3.膿汁標本細菌學檢查目的要求：掌握常見化膿性細菌的形態(tài)、染色特點和培養(yǎng)特征；熟悉葡萄球菌的色素，金葡菌、甲、乙型溶血性鏈球菌的溶血現(xiàn)象；掌握血漿凝固酶試驗、ASO試驗的臨床意義；熟悉膿汁標本中致病性葡萄球菌的分離與鑒定。實驗內(nèi)容：1.常見化膿性細菌形態(tài)的觀察(示教)；2.葡萄球菌、鏈球菌培養(yǎng)物的觀察(示教)；3.ASO試驗(膠乳法操作)；4.膿汁標本的細菌學檢驗程序及致病性葡萄球菌的分離與鑒定（含標本涂片、革蘭氏染色、血漿凝固酶試驗等)4.糞便標本細菌學檢查目的要求：熟悉腸道桿菌形態(tài)與常用的生化反應；熟悉肥達反應的方法、掌握其原理、結果判斷、臨床意義；掌握糞便中致病性腸道桿菌的分離與鑒定。實驗內(nèi)容：1.腸道桿菌形態(tài)觀察(示教)；2.腸道桿菌培養(yǎng)物與生化反應結果的觀察(示教)；3.肥達反應的方法、原理、結果判斷(示教)；4.糞便標本的細菌檢驗程序及致病性腸道桿菌的分離與鑒定（含SS培養(yǎng)基、EMB培養(yǎng)基生長現(xiàn)象；KIA中生長現(xiàn)象；玻片凝集等）5.弧菌屬、厭氧性細菌、白喉棒狀桿菌、螺旋體目的要求：掌握弧菌、厭氧菌、白喉桿菌、炭疽桿菌、螺旋體的形態(tài)、染色、培養(yǎng)等生物學特性；實驗內(nèi)容：1.弧菌、厭氧菌、白喉桿菌培養(yǎng)物的觀察（示教）；2.弧菌、厭氧菌、白喉桿菌、炭疽桿菌、梅毒螺旋體、鉤體的形態(tài)觀察(操作)；3.口腔中奮森氏螺旋體的檢查（革蘭氏染色法）(操作)6.分枝桿菌屬、病毒學、真菌學、實驗考核目的要求：掌握分枝桿菌的形態(tài)、染色、培養(yǎng)等生物學特性；掌握抗酸染色法的原理、操作方法及臨床意義；掌握病原性真菌的形態(tài)；熟悉病原性真菌的培養(yǎng)與觀察；掌握淺部真菌檢查法、墨汁負染色法技術；了解病毒的動物接種、雞胚接種、PCR技術在病毒性疾病診斷中的應用，實驗內(nèi)容：1.分枝桿菌培養(yǎng)物的觀察（示教）；2.抗酸染色法(Acid-faststain)(操作)；3.病原性真菌的培養(yǎng)與觀察（示教）；4.淺部真菌檢查法(操作)；5.深部真菌——新型隱球菌墨汁負染色法(操作)；6.病毒的動物接種（示教）；7.雞胚接種（示教）；8.PCR技術在病毒性疾病診斷中的應用（示教）七、基本設備與器材配置序號儀器名稱數(shù)量序號儀器名稱數(shù)量1LD4-2低速水平離心機12BCM-1000生物凈化工作臺13DNP-781電熱恒溫培養(yǎng)箱14海爾冰箱15DHW-600三用電熱恒溫水箱16DYY-4電泳儀17DG3022A酶聯(lián)免疫檢測儀18DNX-9620電腦洗板機19奧林巴斯熒光顯微鏡1101000W電爐111TX-27-3型臺式高壓蒸汽消毒器112CH-MO45-T生物顯微鏡313棉質擦鏡紙2張14無水酒精10ml15香柏油0.1ml16500ml/瓶生理鹽水10ml17500ml/瓶乙酸乙酯1ml1810ml一次性塑料試管1支19水弧菌1株20白色葡萄球菌1株21革蘭染色液結晶紫、95%酒精、盧戈碘液、稀釋復紅各0.2ml22250g/瓶營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基45g23無菌牙簽1根24250g/瓶來蘇消毒液5ml25細菌形態(tài)結構片球菌、桿菌、弧菌、鞭毛、芽孢、莢膜各1片26試管架1個27酒精燈1個28打火機1支29接種環(huán)1支3012mm載玻片1片31500ml/瓶絡合碘0.1ml32家兔1只33藥敏紙片1片34500ml/瓶巴士消毒液10ml35醫(yī)用棉簽1根36過濾器1只37一次性塑膠手套1雙3815ml/支玻璃試管1支39直徑6cm、4cm、9cm培養(yǎng)皿各1只40人血漿0.1ml41金色葡萄球菌1株42人血清0.1ml43ASO試劑盒1盒44沙門氏傷寒桿菌1株45250g/瓶克氏雙糖鐵培養(yǎng)基5g46志賀氏痢疾桿菌1株47250g/瓶乳糖5g48埃希氏大腸桿菌1株49250g/瓶葡萄糖5g5010ml/瓶甲型副傷寒“H”抗原10ml5110ml/瓶乙型副傷寒“H”抗原10ml52250g/瓶EMS培養(yǎng)基10g5310ml/瓶沙門氏菌“O”抗原10ml54250g/瓶SS培養(yǎng)基10g5510ml/瓶傷寒桿菌“H”抗原10ml56兔血清1ml57500ml/瓶對甲基氨基酚二甲苯50ml58厭氧培養(yǎng)箱1臺5915ml/支玻璃試管1支60牙簽1根61破傷風桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、肉毒桿菌、水弧桿菌、棒狀桿菌菌種各1株62破傷風桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、肉毒桿菌、棒狀桿菌染色形態(tài)片各1片631400g/包脫脂牛奶1包64250g/瓶凡士林165