深圳市預(yù)防和控制人感染高致病性禽流感應(yīng)急工作預(yù)案衛(wèi)樣本

深圳市防止和控制人感染高致病性禽流感應(yīng)急工作預(yù)案(衛(wèi)生某些)（修訂）目錄1．總則1．1目1．2編制根據(jù)1．3工作原則1．4合用范疇2．組織管理與職責(zé)2．1各機(jī)構(gòu)職責(zé)2．2醫(yī)學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)及各專(zhuān)家指引小組職責(zé)3．疫情分級(jí)和預(yù)警3．1普通疫情（=4\*ROMANIV級(jí)，藍(lán)色預(yù)警）3．2較大疫情（=3\*ROMANIII級(jí)，黃色預(yù)警）3．3重大疫情（=2\*ROMANII級(jí)，橙色預(yù)警）3．4特別重大疫情（=1\*ROMANI級(jí)，紅色預(yù)警）4．應(yīng)急響應(yīng)級(jí)別和啟動(dòng)4．1三級(jí)響應(yīng)4．2二級(jí)響應(yīng)4．3一級(jí)響應(yīng)4．4擴(kuò)大應(yīng)急4．5應(yīng)急結(jié)束5．后期處置5．1評(píng)估5．2善后解決5．3調(diào)查和總結(jié)5．4督導(dǎo)檢查6．附則6．1制定與解釋6．2實(shí)行時(shí)間

1．總則1．1目為防止和控制人感染高致病性禽流感在深圳市發(fā)生和流行，做好疫情監(jiān)測(cè)、預(yù)警，減低人類(lèi)受感染風(fēng)險(xiǎn)，加強(qiáng)應(yīng)對(duì)疫情各項(xiàng)準(zhǔn)備工作和應(yīng)變辦法，提高應(yīng)急反映能力，及時(shí)有效地控制和消除疫情，保障市民身心健康和生命安全，維護(hù)社會(huì)穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)發(fā)展，特制定本預(yù)案。1．2編制根據(jù)依照《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》、國(guó)務(wù)院《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》、《中華人民共和國(guó)傳染病防治法實(shí)行辦法》、《衛(wèi)生部應(yīng)對(duì)流感大流行準(zhǔn)備籌劃與應(yīng)急預(yù)案》、《深圳市人民政府突發(fā)公共事件總體應(yīng)急預(yù)案》和《深圳市突發(fā)重特大傳染?。ê幻饕蛩丶膊。┮咔閼?yīng)急預(yù)案》等法律法規(guī)及有關(guān)指引性文獻(xiàn)制定本預(yù)案。1．3工作原則1．3．1防止為主、防治結(jié)合堅(jiān)持防止為主工作方針，積極組織貫徹應(yīng)對(duì)疫情各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。充分運(yùn)用全市疫情監(jiān)測(cè)報(bào)告網(wǎng)絡(luò)作用，加強(qiáng)疫情尋常監(jiān)測(cè)和疫情報(bào)告工作，做到“早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早隔離、早治療”，認(rèn)真貫徹防止控制辦法。1．3．2統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)、屬地管理各級(jí)人民政府統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)本轄區(qū)人感染高致病性禽流感工作；按照屬地管理原則，實(shí)行市、區(qū)、街道辦事處、社區(qū)工作站（社區(qū)居委會(huì)）四級(jí)負(fù)責(zé)制，共同做好人感染高致病性禽流感防止控制工作。1．3．3常備不懈、迅速反映加強(qiáng)防治專(zhuān)業(yè)隊(duì)伍培訓(xùn)和應(yīng)急演習(xí)，儲(chǔ)備充分應(yīng)急物資，保證信息渠道暢通；發(fā)生人感染高致病性禽流感疫情后，可以迅速采用有效防止控制和醫(yī)療救治辦法，控制傳染源，切斷傳播途徑，保護(hù)易動(dòng)人群，及時(shí)救治病人和疑似病人，控制和隔離密切接觸者。1．3．4依法管理、依托科學(xué)嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)家關(guān)于法律法規(guī)，對(duì)人感染高致病性禽流感防止、疫情報(bào)告、控制和救治工作實(shí)行依法管理；對(duì)于違法行為，依法追究責(zé)任。貫徹依托科學(xué)技術(shù)戰(zhàn)勝人感染高致病性禽流感方針，實(shí)行科學(xué)防治。積極研制和科學(xué)應(yīng)用檢測(cè)試劑、疫苗、藥物等，切實(shí)加強(qiáng)臨床治療方案及流行病學(xué)研究，規(guī)范防控辦法與操作流程，實(shí)現(xiàn)防治工作科學(xué)化、規(guī)范化。1．4合用范疇本預(yù)案合用于應(yīng)對(duì)深圳市發(fā)生人感染高致病性禽流感疫情準(zhǔn)備工作及疫情發(fā)生和流行后應(yīng)急解決工作。2．組織管理與職責(zé)2．1各機(jī)構(gòu)職責(zé)2．1．1深圳市衛(wèi)生行政部門(mén)市衛(wèi)生局是市衛(wèi)生系統(tǒng)防止和控制人感染高致病性禽流感工作主管單位，下屬突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急解決辦公室是尋常辦事機(jī)構(gòu)，各區(qū)衛(wèi)生局在本轄區(qū)范疇內(nèi)負(fù)責(zé)主管有關(guān)工作。負(fù)責(zé)組織制定醫(yī)療救治、防止控制等應(yīng)急方案并組織實(shí)行；及時(shí)向上級(jí)部門(mén)報(bào)送疫情信息；向社會(huì)發(fā)布疫情信息；組織、協(xié)調(diào)、指揮衛(wèi)生技術(shù)專(zhuān)家或應(yīng)急隊(duì)伍及時(shí)評(píng)估臨床治療病人控制效果，檢查各種防止辦法，進(jìn)一步完善各項(xiàng)防治方案；開(kāi)展關(guān)于傳染病防治科普知識(shí)宣傳等工作。依照專(zhuān)家委員會(huì)發(fā)布預(yù)警和建議，市衛(wèi)生局?jǐn)M定啟動(dòng)相應(yīng)級(jí)別應(yīng)急響應(yīng)并上報(bào)市政府及省衛(wèi)生廳。2．1．2疾病防止控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)建立人感染高致病性禽流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，監(jiān)測(cè)、分析并報(bào)告疫情狀況；核算疫情，提出疫點(diǎn)和疫區(qū)劃定、啟動(dòng)、終結(jié)建議并參加實(shí)行消毒隔離等防治辦法；承擔(dān)病原體實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和技術(shù)支持；建立緊急疫情控制物資儲(chǔ)備庫(kù)，儲(chǔ)備消殺藥物、檢測(cè)試劑、器械、防護(hù)用品等；對(duì)疫情防止控制辦法效果進(jìn)行評(píng)估，提出改進(jìn)建議；建立心理應(yīng)激救援工作機(jī)制；做好防止控制人員技術(shù)培訓(xùn)；積極開(kāi)展衛(wèi)生宣傳和健康教誨。2．1．3醫(yī)療機(jī)構(gòu)成立醫(yī)院防病工作領(lǐng)導(dǎo)小組，制定院內(nèi)工作流程；協(xié)同市醫(yī)療救護(hù)專(zhuān)家指引小組開(kāi)展工作，負(fù)責(zé)病人診斷、報(bào)告、治療和收治管理工作，不斷完善治療方案；每日?qǐng)?bào)告收治病人動(dòng)態(tài)狀況；加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)消毒隔離工作和醫(yī)護(hù)人員個(gè)人防護(hù)，防止醫(yī)源性感染，防止疾病傳播；開(kāi)展關(guān)于業(yè)務(wù)培訓(xùn)和指引；做好關(guān)于衛(wèi)生宣傳和健康教誨工作。2．1．4衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督貫徹疫點(diǎn)、疫區(qū)防止控制辦法，收治病人醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒隔離和醫(yī)務(wù)人員個(gè)人防護(hù)等辦法；開(kāi)展對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)、食品生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)單位、學(xué)校、托幼機(jī)構(gòu)和公共場(chǎng)合等區(qū)域消毒隔離、傳染病報(bào)告工作監(jiān)督檢查；對(duì)違背《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》和《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》行為實(shí)行行政懲罰；會(huì)同疾病防止控制機(jī)構(gòu)做好衛(wèi)生宣教工作。2．1．5健康教誨機(jī)構(gòu)搞好健康教誨和健康增進(jìn)，普及人感染高致病性禽流感和其她有關(guān)傳染病防治知識(shí)，提高群眾衛(wèi)生防病意識(shí)和自我保健能力。2．1．6社區(qū)健康服務(wù)中心協(xié)助疾病控制機(jī)構(gòu)做好密切接觸者醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)及病人出院后隨訪(fǎng)工作；指引開(kāi)展環(huán)境消毒和社區(qū)居民個(gè)人防護(hù)；開(kāi)展居民健康教誨；發(fā)現(xiàn)可疑病人要及時(shí)報(bào)告。2．1．7市醫(yī)療急救中心準(zhǔn)備專(zhuān)用救護(hù)車(chē)和急救人員，負(fù)責(zé)病人轉(zhuǎn)運(yùn)。按市衛(wèi)生局規(guī)定責(zé)任區(qū)域調(diào)度指揮指定救護(hù)車(chē)運(yùn)送患者。2．2醫(yī)學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)及各專(zhuān)家指引小組職責(zé)2．2．1深圳市醫(yī)學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)深圳市醫(yī)學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)（如下簡(jiǎn)稱(chēng)專(zhuān)家委員會(huì)）依照疫情分級(jí)原則，并結(jié)合疫情發(fā)展趨勢(shì)、疫情波及范疇和影響大小等狀況進(jìn)行綜合性評(píng)估，發(fā)出疫情預(yù)警報(bào)告，并及時(shí)報(bào)告市衛(wèi)生局。2．2．2醫(yī)療救護(hù)專(zhuān)家指引小組負(fù)責(zé)全市人感染高致病性禽流感病例臨床確診、救治工作，指引各級(jí)醫(yī)療衛(wèi)生單位人感染高致病性禽流感可疑病人診斷工作。2．2．3流行病學(xué)調(diào)查技術(shù)指引小組負(fù)責(zé)全市人感染高致病性禽流感疫情報(bào)告、流行病學(xué)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和疫點(diǎn)調(diào)查技術(shù)支持。2．2．4消毒殺蟲(chóng)技術(shù)指引小組負(fù)責(zé)指引全市各級(jí)醫(yī)療衛(wèi)生單位消毒隔離技術(shù)支持和院內(nèi)消毒效果強(qiáng)化檢測(cè)，指引醫(yī)務(wù)人員做好自身防護(hù)工作；負(fù)責(zé)疫點(diǎn)隨時(shí)和終末消毒工作以及有關(guān)技術(shù)支持。2．2．5病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)指引小組負(fù)責(zé)病原學(xué)標(biāo)本采集、運(yùn)送、檢測(cè)工作，以及各級(jí)醫(yī)療衛(wèi)生、疾病控制機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作技術(shù)征詢(xún)和指引。3．疫情分級(jí)和預(yù)警按照人感染高致病性禽流感疫情發(fā)生和流行性質(zhì)、危害限度和波及范疇，將疫情劃分為普通（Ⅳ級(jí)）、較大（Ⅲ級(jí)）、重大（Ⅱ級(jí)）和特別重大（Ⅰ級(jí)），依次用藍(lán)色、黃色、橙色和紅色進(jìn)行預(yù)警。3．1普通疫情（=4\*ROMANIV級(jí)，藍(lán)色預(yù)警）我市周邊國(guó)家、省或地區(qū)發(fā)生禽類(lèi)高致病性禽流感疫情，我市范疇內(nèi)未發(fā)現(xiàn)疫情。3．2較大疫情（=3\*ROMANIII級(jí)，黃色預(yù)警）我市范疇內(nèi)浮現(xiàn)疑似或確認(rèn)禽類(lèi)高致病性禽流感疫情，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)人感染高致病性禽流感病例；或在我市周邊國(guó)家、省或地區(qū)證明浮現(xiàn)人感染高致病性禽流感病例，但無(wú)證據(jù)顯示病毒容易在人與人之間傳播。3．3重大疫情（=2\*ROMANII級(jí)，橙色預(yù)警）我市范疇內(nèi)浮現(xiàn)散在疑似或確診人感染高致病性禽流感病例，但無(wú)證據(jù)顯示病毒容易在人與人之間傳播；或有證據(jù)擬定我市周邊國(guó)家、省或地區(qū)人感染高致病性禽流感疫情病毒具備在人與人之間傳播能力。3．4特別重大疫情（=1\*ROMANI級(jí)，紅色預(yù)警）我市范疇內(nèi)證明人感染高致病性禽流感疫情病毒具備在人與人之間傳播能力，有也許浮現(xiàn)暴發(fā)或流行。4．應(yīng)急響應(yīng)級(jí)別和啟動(dòng)4．1三級(jí)響應(yīng)經(jīng)專(zhuān)家委員會(huì)評(píng)估，確認(rèn)發(fā)生=4\*ROMANIV、=3\*ROMANIII級(jí)疫情，并發(fā)出預(yù)警后，市衛(wèi)生局啟動(dòng)三級(jí)應(yīng)急響應(yīng)。4．1．1防控辦法在堅(jiān)持尋常防控辦法基本上，進(jìn)一步采用如下辦法：加強(qiáng)疫情信息收集和通報(bào)，與周邊國(guó)家、省或地區(qū)和農(nóng)業(yè)部門(mén)保持緊密聯(lián)系，密切關(guān)注高致病性禽流感和人感染高致病性禽流感疫情動(dòng)態(tài)。對(duì)動(dòng)物疫點(diǎn)內(nèi)人員進(jìn)行應(yīng)急監(jiān)測(cè)和應(yīng)急接種。實(shí)行必要隔離控制和醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)辦法，行分散隔離或集中隔離，由疫點(diǎn)所在地區(qū)疾控中心和附近社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心負(fù)責(zé)組織對(duì)實(shí)。市、區(qū)疾控中心開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查，追訪(fǎng)傳染源，對(duì)疫點(diǎn)進(jìn)行消毒。對(duì)密切接觸者、防控工作人員和準(zhǔn)備投入救治工作醫(yī)護(hù)人員提供應(yīng)急接種。衛(wèi)生監(jiān)督部門(mén)加大對(duì)門(mén)（急）診傳染病報(bào)告制度執(zhí)行狀況監(jiān)督檢查力度；會(huì)同關(guān)于部門(mén)對(duì)建筑工地和民工生活區(qū)、出租房屋、地下空間、賓館、飯店、商場(chǎng)、文化娛樂(lè)及人口密集場(chǎng)合、交通路口等公共場(chǎng)合進(jìn)行監(jiān)督檢查，加強(qiáng)通風(fēng)換氣，并采用必要消毒辦法。加強(qiáng)對(duì)民營(yíng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和個(gè)體門(mén)診部、診所傳染病報(bào)告、消毒隔離工作和個(gè)人防護(hù)辦法監(jiān)督檢查。全市保持正常工作、生產(chǎn)和生活秩序。4．1．1醫(yī)療救治各區(qū)以上衛(wèi)生行政部門(mén)指定具備收治傳染病病人能力醫(yī)院作為人感染高致病性禽流感疫情病人定點(diǎn)救治醫(yī)院。各醫(yī)院成立醫(yī)療救治專(zhuān)家小組，依照市醫(yī)療救護(hù)專(zhuān)家指引小組提出治療方案和工作指引，做好應(yīng)急各項(xiàng)準(zhǔn)備工作和演習(xí)。指定專(zhuān)職人員負(fù)責(zé)疫情報(bào)告工作，切實(shí)做好醫(yī)院感染控制工作；加強(qiáng)門(mén)（急）診空氣流通和消毒防護(hù)工作；加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員防護(hù)，防止醫(yī)院交叉感染發(fā)生。隨時(shí)準(zhǔn)備接受病人。儲(chǔ)備醫(yī)療救治、抗病毒和消毒藥物，儲(chǔ)備消毒器械和個(gè)人防護(hù)用品。4．2二級(jí)響應(yīng)經(jīng)專(zhuān)家委員會(huì)評(píng)估，確認(rèn)發(fā)生=2\*ROMANII級(jí)疫情，并發(fā)出預(yù)警后，市衛(wèi)生局啟動(dòng)二級(jí)應(yīng)急響應(yīng)。4．2．1防控辦法在堅(jiān)持三級(jí)響應(yīng)防控辦法基本上，進(jìn)一步采用如下辦法：對(duì)所有人感染高致病性禽流感疫情發(fā)生地點(diǎn)和密切接觸人群實(shí)行隔離控制辦法，對(duì)普通接觸者實(shí)行醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)。重點(diǎn)人群進(jìn)行應(yīng)急防止接種，優(yōu)先考慮保護(hù)為社會(huì)提供基本服務(wù)人群和老人、小朋友等高危人群。民航、公路、鐵路、長(zhǎng)途客車(chē)站、重要交通路口增長(zhǎng)檢疫站（點(diǎn)），對(duì)進(jìn)出深圳人員進(jìn)行全面防疫檢查。公共場(chǎng)合、公共交通工具和人員集中地區(qū)定期進(jìn)行消毒。賓館、飯店、各類(lèi)文化娛樂(lè)場(chǎng)合等一旦發(fā)生疫情，及時(shí)停業(yè)，并配合市或區(qū)CDC做好消毒、流調(diào)等工作。中小學(xué)、高等院校發(fā)生疫情，校方須配合疾病防止控制機(jī)構(gòu)開(kāi)展貫徹各項(xiàng)防控辦法，如需停課，報(bào)請(qǐng)上級(jí)教誨行政部門(mén)批準(zhǔn)。各街道、社區(qū)啟動(dòng)相應(yīng)二級(jí)應(yīng)急預(yù)案。有關(guān)疫區(qū)范疇內(nèi)啟動(dòng)各自工作網(wǎng)絡(luò)，防止疫情擴(kuò)散和蔓延。發(fā)生疫情街、社區(qū)采用分組包片辦法，擬定聯(lián)系對(duì)象，工作涵蓋轄區(qū)全體居民。市民外出應(yīng)采用必要個(gè)人防護(hù)辦法，并定期進(jìn)行居所消毒，搞好樓道衛(wèi)生；定期測(cè)量體溫，如有異常及時(shí)向工作單位以及居住地社區(qū)居委會(huì)報(bào)告，并到發(fā)熱門(mén)診就診，也可以撥打120急救電話(huà)求助。發(fā)生疫情單位和居住區(qū)居民要配合疾病控制部門(mén)做好隔離控制工作。市政府派出督導(dǎo)組，對(duì)各項(xiàng)防治工作進(jìn)行全面監(jiān)督檢查。市、區(qū)衛(wèi)生監(jiān)督所負(fù)責(zé)監(jiān)督貫徹疫點(diǎn)、疫區(qū)防止控制辦法，監(jiān)督關(guān)于醫(yī)療機(jī)構(gòu)貫徹消毒隔離和醫(yī)務(wù)人員防護(hù)辦法，檢查人口密集公共場(chǎng)合疫情防控工作。除實(shí)行隔離控制疫情地點(diǎn)及有關(guān)人群外，其她單位和居民均應(yīng)正常工作、生產(chǎn)和生活。4．2．2醫(yī)療救治接到收治人感染高致病性禽流感疫情病例指令，醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)迅速、有序地?cái)y帶必要醫(yī)療藥械及個(gè)人防護(hù)用品等趕赴現(xiàn)場(chǎng)開(kāi)展工作。醫(yī)院應(yīng)擬定救治方案，并將每天救治病例狀況向市醫(yī)療救護(hù)指引小組報(bào)告。及時(shí)補(bǔ)充醫(yī)療救治和消毒所需各種物資。4．3一級(jí)響應(yīng)經(jīng)專(zhuān)家委員會(huì)評(píng)估，確認(rèn)發(fā)生=1\*ROMANI級(jí)疫情，并發(fā)出預(yù)警后，市衛(wèi)生局經(jīng)市應(yīng)急指揮中心報(bào)請(qǐng)市處置突發(fā)事件委員會(huì)后，啟動(dòng)一級(jí)應(yīng)急響應(yīng)。4．3．1防控辦法在堅(jiān)持二級(jí)響應(yīng)防控辦法基本上，進(jìn)一步采用如下辦法：各關(guān)于部門(mén)和單位、街道、社區(qū)居委會(huì)配合各級(jí)疾病控制中心做好對(duì)疫情地點(diǎn)和場(chǎng)合隔離控制，做好后勤保障和群眾思想政治工作。市、區(qū)疾病控制中心按照關(guān)于規(guī)定，做好對(duì)人感染高致病性禽流感疫情確診及疑似病例、密切接觸者隔離控制工作。開(kāi)展大范疇?wèi)?yīng)急接種工作，免疫覆蓋率力求全市常住人口85%以上。在所有進(jìn)深圳交通路口設(shè)立檢疫檢查站（點(diǎn)）。在機(jī)場(chǎng)、火車(chē)站、省際長(zhǎng)途汽車(chē)站和公路檢查站設(shè)立聯(lián)合檢查組，實(shí)行防疫檢查；所有進(jìn)出深圳乘客填寫(xiě)《健康登記卡》，并接受體溫測(cè)量；發(fā)既有發(fā)熱癥狀乘客，要送留觀(guān)站；對(duì)疑似病人由衛(wèi)生部門(mén)及時(shí)送定點(diǎn)醫(yī)院；對(duì)與疑似病人同艙或同一車(chē)廂乘客由流行病學(xué)調(diào)查組進(jìn)行追訪(fǎng)、醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)并隔離。對(duì)拒不接受體溫測(cè)量或留觀(guān)診斷并經(jīng)勸阻無(wú)效者，由公安機(jī)關(guān)依法采用必要強(qiáng)制辦法。全市各賓館、飯店、旅館、招待所要嚴(yán)格執(zhí)行入住旅客填寫(xiě)《健康登記卡》制度，并對(duì)駐店客人每天測(cè)量體溫，發(fā)現(xiàn)可疑病人，及時(shí)向所在區(qū)疾病控制中心報(bào)告。各級(jí)各類(lèi)學(xué)校每天堅(jiān)持對(duì)學(xué)生測(cè)量體溫，定期對(duì)教室、實(shí)驗(yàn)室、食堂和學(xué)生宿舍等公共場(chǎng)合進(jìn)行消毒，取消一切人員過(guò)于集中大課和大活動(dòng)；實(shí)行停課中小學(xué)必要每天堅(jiān)持跟蹤理解學(xué)生身體狀況，教誨學(xué)生在家學(xué)習(xí)和休息。學(xué)生未經(jīng)批準(zhǔn)不得離校；健康狀況不佳學(xué)生，家在農(nóng)村地區(qū)、西部地區(qū)或疫區(qū)學(xué)生，不予批準(zhǔn)離校。對(duì)所有離校大學(xué)生，學(xué)校要跟蹤理解學(xué)生健康狀況，并納入學(xué)校疫情監(jiān)控和信息報(bào)告范疇；離校后又返校學(xué)生，必要進(jìn)行隔離觀(guān)測(cè)。建筑工地實(shí)行封閉式管理。對(duì)工地與住地分開(kāi)，要建立安全通道，上下班由班車(chē)接送。建立24小時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)，對(duì)施工現(xiàn)場(chǎng)和工棚進(jìn)行檢查，對(duì)民工宿舍、食堂、廁所逐個(gè)定期、定點(diǎn)消毒。各用人單位不得擅自停工停業(yè)和遣散民工。各單位停止組織全國(guó)性和跨省、跨地區(qū)大型會(huì)議和活動(dòng)，已安排大型活動(dòng)（涉及各類(lèi)表演等）原則上取消或推遲關(guān)閉網(wǎng)吧、電子游戲廳、錄像廳、劇場(chǎng)、影院、圖書(shū)館、博物館、文化館（站）、體育場(chǎng)（館）等公益性文化體育設(shè)施，必要逐個(gè)貫徹通風(fēng)、消毒等辦法，并建立來(lái)訪(fǎng)或參觀(guān)者登記制度。全市各區(qū)和各級(jí)各類(lèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)所擁有專(zhuān)用急救車(chē)輛，統(tǒng)一歸市120急救中心指揮，市應(yīng)急指揮部派出專(zhuān)人督導(dǎo)貫徹急救、轉(zhuǎn)運(yùn)工作，任何單位或個(gè)人不得以任何理由遲延或推諉。明確醫(yī)院院長(zhǎng)負(fù)總責(zé)制度，對(duì)于推諉、拒收、對(duì)病人不負(fù)責(zé)任醫(yī)院嚴(yán)肅追究責(zé)任。市和區(qū)120急救中心應(yīng)與各醫(yī)院密切配合，對(duì)于需要就診和轉(zhuǎn)診病人保證做到隨叫隨到，嚴(yán)防病人在自行求診中導(dǎo)致傳染。4．3．2醫(yī)療救治啟用市第三人民醫(yī)院。市第三人民醫(yī)院在接到市處置突發(fā)事件委員會(huì)命令后24小時(shí)內(nèi)人員所有到位，做完各項(xiàng)準(zhǔn)備工作，具備接受患者條件。增援醫(yī)院（深圳鐵路醫(yī)院或指揮部暫時(shí)決定其她增援醫(yī)院）在接到市處置突發(fā)事件委員會(huì)增援命令后24小時(shí)內(nèi)完畢各項(xiàng)準(zhǔn)備工作，按規(guī)定派出增援人員和設(shè)備，到達(dá)指定醫(yī)院。依照市應(yīng)急指揮中心統(tǒng)一調(diào)配，劃撥各項(xiàng)救治物資。4．4擴(kuò)大應(yīng)急當(dāng)突發(fā)疫情難以控制或有擴(kuò)大、發(fā)展趨勢(shì)時(shí)，衛(wèi)生系統(tǒng)應(yīng)做好進(jìn)一步應(yīng)對(duì)籌劃，重要有：擴(kuò)大后備定點(diǎn)收治隔離病人醫(yī)院名單擬定；衛(wèi)生系統(tǒng)各專(zhuān)業(yè)隊(duì)伍后備隊(duì)組織；物資儲(chǔ)備調(diào)運(yùn)與擴(kuò)充；全市醫(yī)務(wù)人員調(diào)遣、全市范疇內(nèi)既有醫(yī)院及裝備征用等，調(diào)節(jié)疫情控制工作方案。市處置突發(fā)事件委員會(huì)及時(shí)上報(bào)，祈求黨中央、國(guó)務(wù)院或省委、省政府增援和指揮。4．5應(yīng)急結(jié)束本次疫情末例治愈病人出院，通過(guò)一種最長(zhǎng)潛伏期仍無(wú)新病人發(fā)生，經(jīng)專(zhuān)家委員會(huì)討論，由深圳市衛(wèi)生局報(bào)請(qǐng)深圳市處置突發(fā)事件委員會(huì)批準(zhǔn)，解除封鎖。本次應(yīng)急響應(yīng)即可結(jié)束。5．后期處置5．1評(píng)估應(yīng)急響應(yīng)結(jié)束后，市、區(qū)衛(wèi)生行政部門(mén)組織對(duì)疫情解決狀況進(jìn)行初步評(píng)估。評(píng)估內(nèi)容涉及疫情危害、現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查解決狀況、疫苗和藥物使用狀況、病人救治狀況、辦法效果評(píng)價(jià)、應(yīng)急解決過(guò)程中存在問(wèn)題和獲得經(jīng)驗(yàn)及改進(jìn)建議。評(píng)估報(bào)告上報(bào)市人民政府和省衛(wèi)生廳。5．2調(diào)查和總結(jié)疾病控制機(jī)構(gòu)對(duì)傳染病疫情全過(guò)程進(jìn)行回顧性流行病學(xué)調(diào)查和分析，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，為指引此后傳染病防制工作提供指引根據(jù)。各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)自身工作進(jìn)行總結(jié)和檢討，堵塞漏洞，防患于未然。各級(jí)關(guān)于衛(wèi)生部門(mén)要作好關(guān)于總結(jié)工作，各區(qū)衛(wèi)生行政部門(mén)在結(jié)束響應(yīng)7日內(nèi)將書(shū)面總結(jié)報(bào)市衛(wèi)生行政部門(mén)。市衛(wèi)生局將疫情工作報(bào)告報(bào)市應(yīng)急指揮中心等關(guān)于部門(mén)。5．3督導(dǎo)檢查市、區(qū)衛(wèi)生行政部門(mén)定期派出督查組，對(duì)轄區(qū)傳染病防控工作進(jìn)行督導(dǎo)、檢查。衛(wèi)生專(zhuān)業(yè)執(zhí)法部門(mén)加強(qiáng)后期傳染病防疫和衛(wèi)生執(zhí)法監(jiān)督。對(duì)監(jiān)督檢查中發(fā)現(xiàn)防治辦法不力、浮現(xiàn)明顯疏漏，要按照關(guān)于規(guī)定作出嚴(yán)肅解決，并責(zé)令被檢查單位限期整治。6．附則6．1制定與解釋本預(yù)案有深圳市衛(wèi)生局負(fù)責(zé)制定、定期修訂和解釋。6．2實(shí)行時(shí)間本預(yù)案自發(fā)布之日起開(kāi)始實(shí)行，此前發(fā)布有關(guān)預(yù)案同步廢止。

附件：1、深圳市衛(wèi)生系統(tǒng)人感染高致病性禽流感防治領(lǐng)導(dǎo)小組及各技術(shù)指引小組2、深圳市人感染高致病性禽流感疫點(diǎn)、疫區(qū)劃分原則3、深圳市人感染高致病性禽流感臨床診斷原則4、深圳市人感染高致病性禽流感推薦治療方案5、深圳市人感染高致病性禽流感流行病學(xué)調(diào)查及疫情控制指引6、深圳市人感染高致病性禽流感消毒指引7、流感樣標(biāo)本采集、運(yùn)送、解決及流感病毒株運(yùn)送指引8、流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢查技術(shù)指引9、流感監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)定

附件1：深圳市衛(wèi)生系統(tǒng)人感染高致病性禽流感防治領(lǐng)導(dǎo)小組組長(zhǎng)：江捍平市衛(wèi)生局局長(zhǎng)副組長(zhǎng)：張丹市衛(wèi)生局副局長(zhǎng)許四虎市衛(wèi)生局副局長(zhǎng)成員：謝若斯市衛(wèi)生局醫(yī)政處處長(zhǎng)陳廣欽市衛(wèi)生局辦公室主任張英姬市衛(wèi)生局衛(wèi)生防疫處處長(zhǎng)劉堃市衛(wèi)生局應(yīng)急辦主任李林市衛(wèi)生局醫(yī)政處主任科員田永張市衛(wèi)生局應(yīng)急辦主任科員張欣市衛(wèi)生局應(yīng)急辦副主任科員連振輝羅湖區(qū)衛(wèi)生局局長(zhǎng)羅樂(lè)宣福田區(qū)衛(wèi)生局局長(zhǎng)楊志學(xué)南山區(qū)衛(wèi)生局局長(zhǎng)曾曉蓮鹽田區(qū)衛(wèi)生局局長(zhǎng)陳金喜寶安區(qū)衛(wèi)生局局長(zhǎng)段小貝龍崗區(qū)衛(wèi)生局局長(zhǎng)職責(zé)：負(fù)責(zé)指揮、協(xié)調(diào)和聯(lián)系。

深圳市醫(yī)學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)深圳市醫(yī)學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)由醫(yī)療救護(hù)專(zhuān)家指引小組、流行病學(xué)調(diào)查技術(shù)指引小組和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指引小組組長(zhǎng)、副組長(zhǎng)構(gòu)成。

深圳市人感染高致病性禽流感流行病學(xué)調(diào)查技術(shù)指引小組組長(zhǎng)：張英姬深圳市衛(wèi)生局防疫處處長(zhǎng)副組長(zhǎng)：張順祥深圳市疾控中心副主任成員：馬漢武深圳市疾控中心流行病科主任主任醫(yī)師謝旭深圳市疾控中心流行病科副主任主管醫(yī)師王昕深圳市疾控中心流行病科醫(yī)師陳戊申羅湖區(qū)疾控中心防疫科主任黃慈林福田區(qū)疾控中心疾控一科主任戴傳文南山區(qū)疾控中心疾控辦主任吳泰順寶安區(qū)疾控中心防疫科主任張啟文龍崗區(qū)疾控中心防疫科主任黎大林鹽田區(qū)疾控中心防疫科主任職責(zé)：1、負(fù)責(zé)全市人禽流感疫情報(bào)告和現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查及疫源地解決。2、負(fù)責(zé)人禽流感調(diào)查資料分析，提出防制對(duì)策并考核效果。3、負(fù)責(zé)全市人禽流感回顧性調(diào)查實(shí)行和資料分析。4、提供其他技術(shù)支持。

深圳市人感染高致病性禽流感病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)指引小組組長(zhǎng)：莊志雄深圳市疾控中心主任副組長(zhǎng)：劉小立深圳市疾控中心副主任成員：何建凡深圳市疾控中心微檢科副主任扈慶華深圳市疾控中心微檢科副主任技師何雅青深圳市疾控中心微檢科副主任技師程小雯深圳市疾控中心微檢科副主任技師李卓成市二醫(yī)院副主任技師蓋俊惠市二醫(yī)院副主任技師何林市人民醫(yī)院副主任技師羅貴有市人民醫(yī)院副主任技師劉小平北大深圳醫(yī)院副主任技師王德北大深圳醫(yī)院主管技師單萬(wàn)水市東湖醫(yī)院副主任技師職責(zé)：1、負(fù)責(zé)全市醫(yī)療衛(wèi)生單位人禽流感病例樣本檢測(cè)、病原體分離培養(yǎng)和鑒定。2、負(fù)責(zé)全市醫(yī)療衛(wèi)生單位人禽流感病例樣本檢測(cè)技術(shù)征詢(xún)指引。3、提供其他有關(guān)技術(shù)支持。

深圳市人感染高致病性禽流感消毒技術(shù)指引小組組長(zhǎng)：張順祥深圳市疾控中心副主任副組長(zhǎng)：張韶華深圳市疾控中心消殺科主任成員：朱子犁深圳市疾控中心消殺科主管技師梁焯南深圳市疾控中心消殺科副主任技師陳戊申羅湖區(qū)疾控中心防疫科主任黃慈林福田區(qū)疾控中心疾控一科主任戴傳文南山區(qū)疾控中心疾控辦主任吳泰順寶安區(qū)疾控中心防疫科主任張啟文龍崗區(qū)衛(wèi)生防疫站防疫科主任黎大林鹽田區(qū)衛(wèi)生防疫站防疫科主任職責(zé)：1、負(fù)責(zé)全市醫(yī)療衛(wèi)生單位醫(yī)院內(nèi)消毒效果強(qiáng)化監(jiān)測(cè)；2、負(fù)責(zé)人禽流感病例疫源地隨時(shí)和終末消毒；3、負(fù)責(zé)全市關(guān)于單位及人群消毒知識(shí)征詢(xún)服務(wù)；4、提供其他有關(guān)技術(shù)支持。

深圳市人感染高致病性禽流感醫(yī)療救護(hù)專(zhuān)家指引小組組長(zhǎng)：邱晨主任醫(yī)師市人民醫(yī)院副組長(zhǎng)：楊大國(guó)主任醫(yī)師市東湖醫(yī)院吳詩(shī)品主任醫(yī)師市人民醫(yī)院袁本通主任醫(yī)師市第二人民醫(yī)院宋衛(wèi)東副主任醫(yī)師北大深圳醫(yī)院高雪主任醫(yī)師市中醫(yī)院職責(zé)：負(fù)責(zé)醫(yī)療救護(hù)診斷、治療技術(shù)指引。聯(lián)系人：謝若斯：2562099026115082李林：25539720

通訊錄姓名辦公電話(huà)移動(dòng)電話(huà)江捍平25535987張丹25536965許四虎25618186陳廣欽25537663謝若斯2562099026115082張英姬25503219劉堃25601138李林25539720田永張25602198張欣2550689681055787連振輝25666788羅樂(lè)宣82918322楊志學(xué)26542213曾曉蓮25228511陳金喜27759245段小貝84802637莊志雄25531675劉小立25609549張順祥25637978馬漢武2563969581558865張韶華25632031何建凡25609534謝旭2563969527023019朱子犁25630445梁焯南25662031王昕2553612427023014扈慶華25623660何雅青25623660程小雯52627964陳戊申25611283黃慈林83339467戴傳文26646793吳泰順27757972張啟文28932771黎大林25559875邱晨25533018-3121楊大國(guó)25601390吳詩(shī)品25533018-2515袁本通83366388-8217宋衛(wèi)東83063849-6228高雪88359666-2436李卓成83252100蓋俊惠83252100何林25533018-2589羅貴有25533018-2726劉小平83063849-5237王德83063849-5237單萬(wàn)水25509800-8205

附件2：深圳市人感染高致病性禽流感疫點(diǎn)、疫區(qū)劃分原則一、疫點(diǎn)疫點(diǎn)是指發(fā)生人禽流感病人所在地點(diǎn)，普通是指患者生活、工作場(chǎng)合。二、疫區(qū)疫區(qū)是依照疫情也許涉及范疇、疫點(diǎn)地理位置、水系分布、交通狀況、自然村落等來(lái)劃定疫區(qū)，普通在農(nóng)村以一種村或幾種村、一種鎮(zhèn)或毗鄰鎮(zhèn)，在都市以一種或幾種居委或一種街道為范疇劃分為疫區(qū)。疫區(qū)由疫區(qū)所在轄區(qū)向市人民政府提出申請(qǐng)，經(jīng)市人民政府批準(zhǔn)后發(fā)布。

附件3：深圳市人感染高致病性禽流感臨床診斷原則（一）診斷

依照流行病學(xué)接觸史、臨床體現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查成果，可作出人禽流感診斷。流行病學(xué)接觸史在診斷中具備重要意義。

1.

流行病學(xué)接觸史

（1）

發(fā)病前1周內(nèi)曾到過(guò)疫點(diǎn)，有感染禽流感病毒也許。

（2）

與被感染家禽及其分泌物、排泄物等有密切接觸史者。

（3）

與禽流感患者有密切接觸史者有患病也許。

2.

診斷原則

（1）醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)病例

有流行病學(xué)接觸史，1周內(nèi)浮現(xiàn)流感樣臨床體現(xiàn)者。

與人禽流感患者有密切接觸史，在1周內(nèi)浮現(xiàn)流感樣臨床體現(xiàn)者。

對(duì)于被診斷為醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)病例者，醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)及時(shí)報(bào)告本地疾病防止控制機(jī)構(gòu)（按預(yù)警病例報(bào)告），并對(duì)其進(jìn)行7天醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)。

（2）疑似病例

有流行病學(xué)接觸史和臨床體現(xiàn)，患者呼吸道分泌物標(biāo)本甲型流感病毒H亞型抗原檢測(cè)陽(yáng)性或核酸檢測(cè)陽(yáng)性者。

（3）確診病例

有流行病學(xué)接觸史和臨床體現(xiàn)，從患者呼吸道分泌物標(biāo)本中分離出特定病毒或采用RT-PCR法檢測(cè)到禽流感H亞型病毒基因，且發(fā)病初期和恢復(fù)期雙份血清抗禽流感病毒抗體滴度4倍或以上升高者。

（二）鑒別診斷

臨床上應(yīng)注意與流感、普通感冒、細(xì)菌性肺炎、傳染性非典型肺炎（SARS）、傳染性單核細(xì)胞增多癥、巨細(xì)胞病毒感染、衣原體肺炎、支原體肺炎、肺炎型流行性出血熱等疾病進(jìn)行鑒別診斷。鑒別診斷重要依托病原學(xué)檢查。

附件4：深圳市人感染高致病性禽流感推薦治療方案（一）對(duì)疑似和確診患者應(yīng)進(jìn)行隔離治療。

（二）對(duì)癥治療

可應(yīng)用解熱藥、緩和鼻粘膜充血藥、止咳祛痰藥等。小朋友忌用阿司匹林或含阿司匹林以及其他水楊酸制劑藥物，避免引起小朋友Reye綜合征。

（三）抗病毒治療

應(yīng)在發(fā)病48小時(shí)內(nèi)試用抗流感病毒藥物。

1.

神經(jīng)氨酸酶抑制劑

奧司她韋（Oseltamivir

，達(dá)菲）為新型抗流感病毒藥物，實(shí)驗(yàn)室研究表白對(duì)禽流感病毒H5N1

和H9N2有抑制作用，成人劑量每日150mg,

小朋友劑量每日3mg/kg，分2次口服，療程5天。

2.

離子通道M2阻滯劑

金剛烷胺（Amantadine）和金剛乙胺（Rimantadine）

可抑制禽流感病毒株復(fù)制，初期應(yīng)用也許有助于制止病情發(fā)展、減輕病情、改進(jìn)預(yù)后，但某些毒株也許對(duì)金剛烷胺和金剛乙胺有耐藥性。金剛烷胺成人劑量每日100～200mg，小朋友每日5mg/kg，分2次口服，療程5天。腎功能受損者酌減劑量。治療過(guò)程中應(yīng)注意中樞神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道副作用。老年患者及孕婦應(yīng)慎用，哺乳期婦女、新生兒和1歲如下嬰兒禁用。金剛乙胺毒副作用相對(duì)較輕。

（四）中醫(yī)藥治療

1、辨證論治

（1）輕證

毒犯肺胃

癥狀：發(fā)熱，惡寒，咳嗽，少痰，咽痛，頭痛，肌肉關(guān)節(jié)酸痛，某些患者伴有惡心，嘔吐，腹瀉，舌苔白、白膩或黃膩，脈浮滑數(shù)。

病機(jī)：疫毒之邪襲于肺胃，致肺胃蘊(yùn)邪，肺失宣肅，胃腸失和，濕熱壅滯。

治法：清熱解毒，宣肺化濕，調(diào)和胃腸。

參照處方：

桑

葉

菊

花

炒杏仁

黃

連

連

翹

知

母

生石膏

藿

香

佩

蘭

蒼

術(shù)

姜半夏

蘆

根

加減：口干者加沙參；

咳嗽甚者加枇杷葉、浙貝母；

苔膩甚者加草果；

惡心嘔吐者加竹茹、蘇葉；

腹瀉者去知母，加馬齒莧。

（2）重證

疫毒壅肺，內(nèi)閉外脫

癥狀：高熱，寒戰(zhàn)，咳嗽，少痰難咯，胸痛，憋氣喘促，口唇紫暗，或心悸，四末不溫，冷汗淋漓，躁擾不安，甚則神昏譫語(yǔ)，舌暗紅苔黃膩或灰膩，脈細(xì)數(shù)或脈沉細(xì)欲絕。

病機(jī)：疫毒之邪壅肺，熱毒壅盛，故高熱，寒戰(zhàn)；肺失宣降，故喘息憋氣；痰瘀閉肺，肺氣欲絕，故呼吸極度困難，喘息氣促，陽(yáng)氣欲脫，可見(jiàn)心悸、心慌，四末發(fā)冷，冷汗淋漓等。

治法：清肺解毒，扶正固脫。

參照處方：

炙麻黃

生石膏

炒杏仁

知

母

川貝母

魚(yú)腥草

黃

芩

葶藶子

虎

杖

西洋參

山萸肉

炙甘草

加減：

高熱、神志恍惚，甚則神昏譫語(yǔ)者上方送服安宮牛黃丸（或膠囊），也可選用清開(kāi)靈、醒腦靜、魚(yú)腥草注射液。

肢冷、汗出淋漓者去川貝母，加桂枝、干姜、炮附子、煅龍骨、煅牡蠣，注射劑可選用生脈注射液、參麥注射液、參附注射液、黃芪注射液等。

口唇紫紺加三七、益母草、黃芪、當(dāng)歸尾；

苔黃膩甚者加藿香、佩蘭、黃連。

2、中成藥應(yīng)用

應(yīng)當(dāng)辨證使用口服中成藥或注射劑，可與中藥湯劑配合應(yīng)用。

（1）解表清熱類(lèi)：可選用柴銀口服液、銀黃顆粒等。

（2）清熱解毒類(lèi)：可選用雙黃連口服液、清熱解毒口服液（或顆粒）等。

（3）清熱開(kāi)竅類(lèi)：可選用安宮牛黃丸（或膠囊）、清開(kāi)靈口服液（或膠囊）等。

（4）清熱祛濕類(lèi)：可選用藿香正氣丸（或膠囊）、葛根芩連微丸等。

以上4類(lèi)均可選用清開(kāi)靈注射劑、醒腦凈注射液、魚(yú)腥草注射劑、雙黃連粉針劑等。

（5）扶正固脫類(lèi)：可選用生脈注射液、參麥注射液、參附注射液、黃芪注射液等；也可配合使用生脈飲口服液、百令膠囊、金水寶膠囊等。

（五）加強(qiáng)支持治療和防止并發(fā)癥

注意休息、多飲水、增長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)，給易于消化飲食。密切觀(guān)測(cè)，監(jiān)測(cè)并防止并發(fā)癥?？咕幬飸?yīng)在明確繼發(fā)細(xì)菌感染時(shí)或有充分證據(jù)提示繼發(fā)細(xì)菌感染時(shí)使用。

（六）重癥患者治療

重癥患者或發(fā)生肺炎患者應(yīng)入院治療，對(duì)浮現(xiàn)呼吸功能障礙者予以吸氧及其她相應(yīng)呼吸支持，發(fā)生其他并發(fā)癥患者應(yīng)積極采用相應(yīng)治療。

附件5深圳市人感染高致病性禽流感流行病學(xué)調(diào)查及疫情解決指引

一、目流行病學(xué)調(diào)查是傳染病防止控制核心辦法和重要工作環(huán)節(jié)。做好人禽流感流行病學(xué)調(diào)核對(duì)于指引疫情防止和控制至關(guān)重要，其重要目是：1．核算診斷，查找傳染源和傳播途徑；2．追蹤和管理病例密切接觸者，防止疾病進(jìn)一步傳播；3．掌握疫情動(dòng)態(tài)變化和影響因素，為疫情發(fā)展趨勢(shì)科學(xué)預(yù)測(cè)提供數(shù)據(jù)；4．監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)疫情防止和控制辦法貫徹狀況和效果，發(fā)現(xiàn)疫情控制工作薄弱環(huán)節(jié)，為疫情控制工作指揮、決策和實(shí)行提供信息支持，為制定和完善疫情控制方略和辦法提供科學(xué)根據(jù)；5．為最后闡明疾病自然史、流行病學(xué)特性及規(guī)律提供研究線(xiàn)索，為此后應(yīng)對(duì)類(lèi)似突發(fā)不明因素疾病積累經(jīng)驗(yàn)。二、工作內(nèi)容1．病例個(gè)案調(diào)查2．接觸者追蹤和管理3.疫情解決辦法4．資料管理和運(yùn)用三、工作程序和辦法（一）病例個(gè)案調(diào)查。1．病例報(bào)告。各級(jí)各類(lèi)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)要密切注意就診人員，嚴(yán)格按照人禽流感診斷原則規(guī)定，發(fā)現(xiàn)病人或疑似病人后，以最快方式向本地疾病防止控制機(jī)構(gòu)報(bào)告疫情，同步填寫(xiě)《深圳市甲乙丙類(lèi)傳染病報(bào)告卡》，在備注欄應(yīng)注明“人禽流感”。2．接到人禽流感病例（和疑似病例）報(bào)告后，報(bào)告病例醫(yī)療機(jī)構(gòu)所在地區(qū)級(jí)疾病防止控制機(jī)構(gòu)要在最短時(shí)間內(nèi)派出流行病學(xué)調(diào)查人員，對(duì)報(bào)告病例進(jìn)行流行病學(xué)個(gè)案調(diào)查。每個(gè)病例調(diào)查原則上要由兩人共同完畢。同步，派出消毒專(zhuān)業(yè)人員到病家和病人其他滯留地點(diǎn)進(jìn)行終末消毒。3．對(duì)病例進(jìn)行個(gè)案調(diào)查時(shí)，盡量由病人自己回答調(diào)查者所提問(wèn)題，收治病人醫(yī)療機(jī)構(gòu)和醫(yī)護(hù)人員要積極配合，并如實(shí)提供病人有關(guān)診斷資料。如病人因病情較重或已死亡，無(wú)法實(shí)行對(duì)病人直接調(diào)查時(shí)，應(yīng)通過(guò)其親友、同事或其她知情人理解狀況，完畢調(diào)查。4．個(gè)案調(diào)查采用統(tǒng)一調(diào)查表（詳見(jiàn)附件：深圳市流感病例個(gè)案調(diào)查表）。表格填寫(xiě)要完整，不得缺項(xiàng)。5．病例調(diào)查時(shí)，要認(rèn)真、詳細(xì)地理解和記錄患者發(fā)病后到過(guò)地方、乘坐過(guò)交通工具和與其有過(guò)密切接觸人員關(guān)于狀況。6．疑似病例確診、病人痊愈出院或死亡時(shí)，收治病人醫(yī)療機(jī)構(gòu)要將病人診斷、轉(zhuǎn)歸狀況報(bào)告所在地疾病防止控制機(jī)構(gòu)。必要時(shí)疾病防止控制機(jī)構(gòu)要進(jìn)行隨訪(fǎng)調(diào)查。7．調(diào)查時(shí)要注意。（1）對(duì)病人及其密切接觸者調(diào)查時(shí)，調(diào)查員要按照醫(yī)務(wù)人員接觸診斷人禽流感病人個(gè)人防護(hù)關(guān)于規(guī)定，做好個(gè)人防護(hù)。（2）調(diào)查時(shí)要盡量減少對(duì)臨床診斷活動(dòng)干擾。（二）對(duì)接觸者追蹤和管理。1．接觸者追蹤調(diào)查。疾病防止控制機(jī)構(gòu)依照個(gè)案調(diào)查獲得信息，及時(shí)開(kāi)展對(duì)病例接觸者追蹤和調(diào)查。2．接觸者醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)和隔離。（1）如發(fā)現(xiàn)密切接觸者已浮現(xiàn)人禽流感可疑癥狀時(shí)，應(yīng)及時(shí)告知指定醫(yī)療機(jī)構(gòu)派專(zhuān)用車(chē)輛將其接入指定醫(yī)院進(jìn)行隔離診治，并進(jìn)行病例個(gè)案調(diào)查。（2）疾病防止控制機(jī)構(gòu)要依照調(diào)查獲得與病例接觸方式、頻度、場(chǎng)合、場(chǎng)合等詳細(xì)狀況和已經(jīng)明確該疾病傳播方式和傳播特點(diǎn)關(guān)于知識(shí)，對(duì)接觸者受到感染危險(xiǎn)性進(jìn)行分析和判斷，對(duì)普通接觸者，要告知注意事項(xiàng)，如有不適，及時(shí)到醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診；對(duì)密切接觸者要隔離和醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)兩周（從接觸之日算起），隔離期間應(yīng)及時(shí)服用防止藥物。醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)期滿(mǎn)仍未發(fā)現(xiàn)續(xù)發(fā)病例者，應(yīng)對(duì)密切接觸者解除醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)。3．病例、接觸者信息通報(bào)。（1）如病例發(fā)病后有旅行史，要將病人乘坐過(guò)交通工具日期、航班、車(chē)次、車(chē)廂、船艙等詳細(xì)狀況報(bào)市級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)，由市級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)在媒體發(fā)布開(kāi)展對(duì)關(guān)于班次交通工具乘客醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)和追蹤調(diào)查信息公示，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情，迅速采用控制辦法。（2）與各地衛(wèi)生部門(mén)之間要加強(qiáng)信息溝通，市疾控中心及時(shí)將人禽流感和疑似病人患病期間乘坐交通工具詳細(xì)狀況通報(bào)路過(guò)和到達(dá)各省市衛(wèi)生行政部門(mén)，共同開(kāi)展疫情控制和追蹤調(diào)查工作，同步要將關(guān)于狀況報(bào)告市衛(wèi)生局。（3）如發(fā)現(xiàn)輸入病例，由疫情發(fā)現(xiàn)地區(qū)級(jí)疾病控制部門(mén)將其關(guān)于流行病學(xué)資料報(bào)告市疾控中心，由市疾控中心告知病例來(lái)源地相應(yīng)機(jī)構(gòu)，由來(lái)源地負(fù)責(zé)追蹤和調(diào)查其密切接觸者，并采用相應(yīng)辦法，發(fā)現(xiàn)符合診斷原則，由到達(dá)地按規(guī)定報(bào)告疫情，并進(jìn)行調(diào)查解決。（4）病例密切接觸者已離開(kāi)疫情發(fā)現(xiàn)地，由疫情發(fā)現(xiàn)地區(qū)級(jí)疾病控制部門(mén)報(bào)告市疾控中心，由市疾控中心直接告知其目地相應(yīng)機(jī)構(gòu)，由到達(dá)地負(fù)責(zé)追蹤調(diào)查，并采用相應(yīng)辦法，發(fā)現(xiàn)符合診斷原則，由到達(dá)地按規(guī)定報(bào)告疫情，并進(jìn)行調(diào)查解決。（三）疫情解決辦法1、隔離治療病人：將病人置于獨(dú)立病房中耳語(yǔ)觀(guān)測(cè)治療；疑似病例與臨床病例應(yīng)分別隔離。2、病區(qū)環(huán)境消毒：（1）空氣消毒；加強(qiáng)病房通氣換氣，可用紫外線(xiàn)照射，二氧化氯氣溶膠噴霧、過(guò)氧乙酸熏蒸或其他消毒辦法；（2）地面、物品表面：可用含氯消毒劑擦拭；（3）痰液等分泌物：用含氯消毒劑浸泡。3、醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)：對(duì)密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀(guān)測(cè)2周，有條件者可防止藥物進(jìn)行防止。4、個(gè)人防護(hù)：（1）考慮本病通過(guò)空氣飛沫傳播，凡與病人接觸者需戴N95口罩。醫(yī)護(hù)人員要注意及時(shí)更換新口罩（不超過(guò)4小時(shí)，最佳每次進(jìn)病房前更換新口罩）。（2）注意手清潔和消毒。（3）接觸病人后電位酸化水漱口。（4）醫(yī)務(wù)人員在工作及休息期間盡量減少在院內(nèi)匯集。（5）高危人群可考慮藥物防止：如服用金剛烷或金剛乙烷或達(dá)菲。5、醫(yī)療機(jī)構(gòu)要做好院內(nèi)感染綜合防止控制工作。（四）資料管理和運(yùn)用。各級(jí)疾病防止控制機(jī)構(gòu)要加強(qiáng)對(duì)流行病學(xué)資料分析，及時(shí)向同級(jí)政府和衛(wèi)生行政部門(mén)報(bào)告分析成果，以指引本地疫情控制工作。

附表：深圳市人感染高致病性禽流感個(gè)案調(diào)查表編號(hào)＿＿＿＿＿＿＿＿姓名：＿＿＿＿＿性別：＿＿年齡：＿＿＿門(mén)診號(hào)：＿＿＿＿住院號(hào)：＿＿＿＿＿家庭住址：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿電話(huà)：＿＿＿＿＿＿＿＿＿工作單位：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿職業(yè)：＿＿＿＿＿＿＿＿＿發(fā)病日期：＿＿＿＿就診日期：＿＿＿＿確診日期：＿＿＿＿報(bào)告日期：＿＿＿＿＿住院日期：＿＿＿＿出院日期：＿＿＿＿確診單位：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿臨床狀況：癥狀與體征：體溫＿＿＿℃、畏寒、頭痛、全身酸痛、乏力、胸痛、鼻塞、流鼻涕、流淚、咽喉痛、咳嗽、惡心、嘔吐、咽部充血、眼結(jié)膜充血、扁桃體腫大、其他合并癥＿＿＿＿＿＿＿＿＿就診前與否服用過(guò)搞病毒藥物：是、否臨床診斷：＿＿＿＿＿＿＿＿＿實(shí)驗(yàn)室檢查：白細(xì)胞總數(shù)：＿＿＿＿＿＿病毒分離成果：＿＿＿＿＿＿＿血清抗體：急性期＿＿＿＿＿＿＿，恢復(fù)期＿＿＿＿＿＿流行病學(xué)調(diào)查傳染源狀況病前三日內(nèi)去過(guò)何處：地點(diǎn)＿＿＿＿＿＿＿時(shí)間＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿本地流感（或疑似）病人：有、無(wú)；與病人關(guān)系：＿＿＿＿＿＿＿＿＿接觸限度：密切、普通；接觸日期：＿＿＿＿＿＿＿＿＿疫源地衛(wèi)生狀況住宅狀況：家庭、集體宿舍；其他：＿＿＿＿＿病人所住房間人數(shù)：＿＿＿床間距離：＿＿＿米、頭與頭距離：＿＿＿米、居住面積：＿＿＿＿m2/人，開(kāi)窗狀況：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，空調(diào)使用狀況＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿傳播途徑狀況空氣飛沫：是、否與病人接觸時(shí)面對(duì)面?zhèn)鞑ィ菏恰⒎衿渌梢梢蛩兀菏尘?、茶具、玩具，其他用品：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿防疫辦法隔離：有、無(wú)常通風(fēng)換氣：病人居室（是、否）；工作學(xué)習(xí)場(chǎng)合（是、否）防止接種：疫苗名稱(chēng)＿＿＿＿＿＿＿＿＿，接種日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿劑量與用法＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿消毒辦法：貫徹、未貫徹密切接觸者登記三日內(nèi)與可疑傳染源及密切接觸者來(lái)往登記姓名年齡與患者關(guān)系發(fā)病日期接觸日期地址（單位）診斷小結(jié)調(diào)查者：＿＿＿＿＿調(diào)查日期：＿＿＿年＿＿＿月＿＿＿日附件深圳市人感染高致病性禽流感病例報(bào)告表報(bào)告人：報(bào)告單位（蓋章）： 報(bào)告日期：序號(hào)轄區(qū)姓名年齡性別職業(yè)現(xiàn)地址單位或?qū)W校戶(hù)籍類(lèi)型戶(hù)口所在地發(fā)病日期住院日期發(fā)熱咳嗽胸片或CT實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)成果同類(lèi)病例接觸史確診日期收治單位診斷狀況出院狀況備注確診病例疑似病例治愈出院排除出院自行出院注：現(xiàn)住址詳細(xì)填到××區(qū)××鎮(zhèn)××村（街道）及詳細(xì)門(mén)牌號(hào)碼。學(xué)校要注明詳細(xì)班級(jí)。戶(hù)籍類(lèi)型填寫(xiě)：戶(hù)籍（常?。鹤』蛄鲃?dòng)。附件6：深圳市人感染高致病性禽流感消毒指引人禽流感是一種新型從禽到人傳播病毒性傳染病，并且有也許發(fā)生從人到人傳播。依照該病起病急，傳染性較強(qiáng)特點(diǎn)，為加強(qiáng)人禽流感防止控制工作，特制定如下消毒辦法。一、消毒藥械（一）空氣消毒藥械：二氧化氯、過(guò)氧乙酸、紫外線(xiàn)燈、循環(huán)風(fēng)紫外線(xiàn)消毒器、臭氧消毒機(jī)和靜電吸附式空氣消毒器以及超低容量噴霧器。（二）物體表面消毒藥械：噴霧型迅速消毒藥水、二氧化氯、碘伏、含氯消毒劑（漂精粉、強(qiáng)力消干凈、次氯酸鈉等）、戊二醛、普通噴霧器、抽真空床單位臭氧消毒器等。（三）手消毒藥劑：手消毒液、碘伏。二、消毒辦法（一）室內(nèi)空氣消毒1、保持工作環(huán)境與病房空氣流通，定期開(kāi)門(mén)窗，自然通風(fēng)換氣，保持空氣清新。2、做好空調(diào)送（排）氣管道清潔與消毒工作，勤清潔空氣過(guò)濾設(shè)施，安裝電子式空氣凈化機(jī)。3、二氧化氯超低容量噴霧消毒：二氧化氯經(jīng)加入活化劑后，靜置15分鐘，稀釋至1000mg/L，用超低容量噴霧器進(jìn)行噴霧消毒（用量：20-25ml/m3），消毒后，關(guān)閉門(mén)窗30分鐘以上；也可采用過(guò)氧乙酸薰蒸（用量：15%過(guò)氧乙酸20ml/m3）作用2小時(shí)后，再開(kāi)門(mén)窗通風(fēng)；或采用過(guò)氧乙酸氣溶膠（用量：2%過(guò)氧乙酸8ml/m3）噴霧消毒，作用1小時(shí)。注意消毒場(chǎng)合不得有人員停留。4、紫外線(xiàn)消毒：紫外線(xiàn)燈空氣消毒應(yīng)采用高強(qiáng)度低臭氧紫外線(xiàn)殺菌燈，室內(nèi)按每10m2裝30W紫外線(xiàn)燈一支，照射時(shí)間30分鐘以上，使用時(shí)關(guān)閉門(mén)窗。注意消毒場(chǎng)合不得有人員停留。5、臭氧消毒：規(guī)定臭氧濃度≥20mg/m3，在RH≥70%條件下消毒30分鐘以上，消毒時(shí)關(guān)閉門(mén)窗，人必要離開(kāi)房間，消毒后待房間內(nèi)聞不到臭氧氣味時(shí)方可進(jìn)入（大概在消毒后40分鐘左右）。6、在有人狀況下，可采用循環(huán)風(fēng)紫外線(xiàn)空氣消毒器或高壓靜電吸附式空氣消毒器對(duì)室內(nèi)空氣進(jìn)行消毒。（二）物體表面消毒可用二氧化氯、或噴霧型消毒劑、或含氯消毒劑對(duì)物體表面進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。如采用500mg/L二氧化氯均勻噴灑或擦拭消毒，作用30分鐘；用市售噴霧型迅速消毒劑則按闡明書(shū)操作使用。（三）地面和墻面消毒配制具有效氯為1000mg/L含氯消毒劑，或500mg/L二氧化氯濕拖，或噴灑墻面與地面。（四）餐具消毒病人餐具應(yīng)單獨(dú)解決，個(gè)人專(zhuān)用。餐具消毒可用煮沸30分鐘或用有效氯為500mg/L含氯消毒劑或二氧化氯濃度為200mg/L消毒劑溶液浸泡30分鐘消毒。（五）病人衣物消毒可煮沸消毒或用具有效氯500mg/L含氯消毒液浸泡30分鐘以上。（六）病人痰液等分泌物、污染物品消毒病人排泄物、分泌物等可用有效氯含量為30000mg/L含氯消毒液浸泡2-6小時(shí)；便器、浴盆消毒可用有效氯含量為5000mg/L含氯消毒液浸泡30-60分鐘。（七）病人用品消毒辦法病人用過(guò)枕頭、棉被、床墊等可用抽真空床單位臭氧消毒器進(jìn)行消毒。（八）運(yùn)送病人交通工具消毒運(yùn)載病人交通工具（救護(hù)車(chē)等）用二氧化氯氣溶膠噴霧，用品（擔(dān)架床等）用含氯消毒劑擦拭。運(yùn)送工具運(yùn)送病人時(shí)需加強(qiáng)通風(fēng)。司機(jī)和陪伴人員須作好個(gè)人防護(hù)，戴N95口罩，穿防護(hù)服，戴一次性乳膠手套。（九）疫源地消毒實(shí)行人員需戴N95口罩、一次性乳膠手套、穿防護(hù)服、防水鞋套。

附件7：流感樣標(biāo)本采集、運(yùn)送、解決及流感病毒株運(yùn)送指引第一某些采集人群流感大流行期間市、區(qū)疾病防止控制中心對(duì)不明因素匯集性發(fā)熱，職業(yè)人群及人禽流感疑似病例，必要及時(shí)采樣。第二某些采樣準(zhǔn)備采樣箱準(zhǔn)備：（1）用于采集咽拭子、鼻咽拭子、咽漱液基本耗材涉及：HanK’采樣液；壓舌板；無(wú)菌棉拭子；50ml螺口塑料管；一次性無(wú)菌塑料杯。（2）用于采集血液樣本基本耗材涉及：醫(yī)用（5ml和10ml）一次性注射器；10ml螺口塑料管；止血帶；無(wú)菌棉拭子；2ml螺口塑料管；碘伏。（3）尸檢組織凍存管：50ml螺口塑料管。（4）記號(hào)筆；簽字筆；乳膠手套；黃色塑料袋；標(biāo)本標(biāo)簽；可封性塑料袋；標(biāo)本采集表格；帶有冰袋冰盒；橡皮筋。采樣液配制：慣用采樣液有如下五種：普通肉湯、PH7.4～7.6Hank’s、Eagle’s、水解乳蛋白液或不加抗菌素生理鹽水（漱喉液）。為防止采樣液生長(zhǎng)細(xì)菌和真菌，在采樣液中需加入抗菌素，加入慶大霉素，其終濃度為0.1mg/ml，和抗真菌藥物，其終濃度為2ug/ml。加入抗菌素后來(lái)重新調(diào)節(jié)PH值為7.4，配制好后來(lái)，分裝每個(gè)采樣管4ml，-20℃凍存。（1）Hank’s液配制Nacl8gKcl0.4g水450mlNa2HPO40.06gKH2PO40.06g 葡萄糖1g水450ml1％酚紅1.6ml加水定容1000ml，加壓消毒30min，4Co保存。（2）Eagle’s溶液配制將Eagle’s粉末9.4克溶于1000ml去離子水中。高壓滅菌。廠(chǎng)家：GIBCO產(chǎn)品：MEM(Eagle’s)產(chǎn)品編號(hào)：11965－084（1000ml）液體（谷氨酰胺，NAHCO3等）（3）普通肉湯：小牛肉浸膏（牛肉粉）10克牛血清白蛋白2克蒸餾水加至400ml慶大霉素（100mg/ml）0.8ml多粘菌素B（250ug/ml）3.2ml配制：1）將牛肉粉（牛肉浸膏）溶解350ml蒸餾水后高壓滅菌2）將牛血清白蛋白溶解于50ml蒸餾水，無(wú)菌過(guò)濾。3）慶大霉素（100mg/ml）、多粘菌素B，無(wú)菌水溶解。4）將溶解后1、2、3、按量混合，分裝試管,調(diào)PH7.2。（4）雙抗溶液(1萬(wàn)單位/ml)配制：將青霉素鈉粉末(100萬(wàn)單位)4瓶、硫酸鏈霉素粉末(80萬(wàn)單位)5瓶溶于400ml無(wú)菌雙蒸水中。（5）3％谷氨酰胺溶液配制：將谷胺酰胺3克溶于100ml雙蒸水中。過(guò)濾除菌。分裝－20度保存。（6）1%酚紅溶液酚紅（苯酚紅）1克1NNaOH不多于7ml去離子水至100ml1）酚紅在乳缽內(nèi)家少量1NNaOH研磨時(shí)期完全溶解，NaOH加越少越好。2）用去離子水加至100ml3）8磅消毒30min，置4℃保存。第三某些采樣辦法(1)鼻拭子：將帶有聚丙烯纖維頭拭子平行于上顎插入鼻孔，保持?jǐn)?shù)秒，待拭子頭吸取分泌物后來(lái)，緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)推出。以另一拭子拭另側(cè)鼻孔。將拭子頭侵入采樣液中，尾部棄去。(2)咽拭子：用帶有聚丙烯纖維頭拭子適度用力擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，應(yīng)避免觸及舌部。同樣將拭子頭侵入采樣液中，尾部棄去。注：亦可將鼻、咽拭子收集于同一采樣管中，以提高分離率，減少工作量。(3)鼻咽抽取物：用與負(fù)壓泵相連收集器從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取粘液，并用采樣液5ml刷洗收集器3次。(4)漱口液：用10ml生理鹽水漱喉，漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動(dòng)5-10次。然后用平皿或燒杯收集洗液。(5)鼻洗液：患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同步發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過(guò)程洗兩側(cè)鼻孔。(6)血清：血清標(biāo)本采集多用于流感暴發(fā)時(shí)血清學(xué)核算診斷及人禽流感待查病例診斷。血清標(biāo)本采集應(yīng)當(dāng)涉及急性期和恢復(fù)期雙份血清。急性期血樣應(yīng)盡早采集，可在采集病毒分離標(biāo)本時(shí)同步采集，但不能晚于發(fā)病后7天?；謴?fù)期血樣則在發(fā)病后2-4周采集。普通采集空腹血。單份血清不能用作診斷。取一根至少能裝3ml以上，干凈和滅過(guò)菌血清采樣管做好標(biāo)記，并進(jìn)行登記，登記內(nèi)容涉及：醫(yī)院名稱(chēng)，患者姓名，性別，急性期或恢復(fù)期，采樣日期。1）從患者手臂靜脈血采2ml，放入準(zhǔn)備好上述血清采樣管中。2）然后置室溫?cái)?shù)小時(shí)待血完全凝固。3）1500～rpm離心10分鐘，收集血清于1.5ml無(wú)菌管中，做好標(biāo)記。血清可置4℃存儲(chǔ)一周，存儲(chǔ)超過(guò)一周需置-20℃或如下保存。（7）尸檢組織：病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖，采集肺、氣管、腎、脾、肝、心臟、腦、血凝塊和淋巴細(xì)胞等器官標(biāo)本；每一采集部位分別使用不同消毒器械，避免交叉污染；每種組織應(yīng)多部位取材，每部位應(yīng)取20-50g，淋巴結(jié)2個(gè)，分別置于50ml無(wú)菌螺口塑料管中，尸解標(biāo)本對(duì)于病原學(xué)研究非常重要，應(yīng)盡量多采集。及時(shí)置于-70℃如下保存或冷藏送至關(guān)于實(shí)驗(yàn)室。第四某些標(biāo)本運(yùn)送新鮮臨床采集標(biāo)本應(yīng)在4℃條件下24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至相應(yīng)流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)置-70℃或如下保存。標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置于-70℃或如下保存。臨床標(biāo)本采集管建議使用帶螺口塑料管。第五某些標(biāo)本解決臨床采集標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，須經(jīng)解決后再進(jìn)行病毒分離接種。含聚丙烯纖維拭子采集標(biāo)本，先將含聚丙烯纖維拭子在管壁重復(fù)擠壓后取出。鼻腔或咽部洗液標(biāo)本，充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存。注：如采樣液中尚未加抗菌素，應(yīng)在接種前補(bǔ)加，用量同上前，混勻后置4℃過(guò)夜或室溫作用數(shù)小時(shí)后可接種。臨床標(biāo)本解決后，將原始標(biāo)本分為3份，一份（40％）用于雞胚接種，一份（30％）用于MDCK細(xì)胞接種，一份（30％）保存待復(fù)核用。對(duì)于病毒分離陽(yáng)性標(biāo)本-70℃保存6個(gè)月，在收到國(guó)家流感中心或廣東省CDC復(fù)核鑒定報(bào)告后，按照生物安全關(guān)于規(guī)定解決；病毒分離陰性標(biāo)本按生物安全關(guān)于規(guī)定解決。第六某些流感病毒株運(yùn)送1.流感毒株送檢規(guī)定流感樣病例監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院采樣，所分離到流感病毒，HA≥1：8；暴發(fā)疫情采樣分離到所有毒株；認(rèn)真填寫(xiě)流感/人禽流感毒株送檢單各項(xiàng)內(nèi)容；所送檢毒株規(guī)定每份3ml，并且無(wú)細(xì)菌污染。2.寄送流感毒株標(biāo)本包裝、運(yùn)送（1）病毒標(biāo)本必要放在大小適合帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈塑料管里，擰緊。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)送流感病毒標(biāo)本；（2）將密閉后病毒標(biāo)本放入大小適合塑料袋內(nèi)密封；（3）直接在塑料管上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明病毒名稱(chēng)，同步也將病毒標(biāo)本關(guān)于信息填寫(xiě)在送檢單內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水袋子里；（4）將裝標(biāo)本密封袋放入專(zhuān)用運(yùn)送箱內(nèi)（或疫苗冷藏包），放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，內(nèi)襯具防水和緩沖能力材料；異地運(yùn)送可以采用郵寄或快遞辦法。第七某些標(biāo)本接受送檢標(biāo)本（毒株）送到實(shí)驗(yàn)室后，由專(zhuān)人在生物安全柜內(nèi)打開(kāi)標(biāo)本包裝。記錄收到日期、送檢實(shí)驗(yàn)室名稱(chēng)、核對(duì)并記錄送檢標(biāo)本（毒株）編號(hào)與否與送檢單相似。收到毒株后，及時(shí)反饋分型鑒定成果。

附件8流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢查技術(shù)指引第一某些：病毒分離MDCK細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（一）、生物安全級(jí)別和生物安全規(guī)定1．MDCK細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別：生物安全一級(jí)或以上。2．實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)定：（二）、細(xì)胞培養(yǎng)所需材料：生長(zhǎng)成片MDCK細(xì)胞2．T-75細(xì)胞培養(yǎng)瓶，頸口有傾角。3．D-MEM培養(yǎng)液4．青、鏈霉素母液(10,000U/ml青霉素G；10,000μg/ml硫酸鏈霉素)，分裝后保存于-20℃。5．HEPES緩沖液，1M母液。6．胎牛血清，40nm濾過(guò)。7．EDTA-胰酶(0.05%胰酶；0.53mMEDTA.4Na)，分裝后保存于-20℃8．牛血清白蛋白組分V，7.5%溶液。9．1ml、10ml無(wú)菌移液管10．70％～75％酒精建議：規(guī)定經(jīng)常檢查試劑使用有效期（三）、培養(yǎng)基和試劑準(zhǔn)備含L-谷氨酸完全型D-MEM培養(yǎng)液準(zhǔn)備（用于MDCK培養(yǎng)）500mlD-MEM液中加入：青、鏈霉素母液5ml(終濃度達(dá)：100U/ml青霉素and100μg/ml鏈霉素)；HEPES緩沖液12.5ml(終濃度：25mM)；7.5%牛血清白蛋白組分V12.5ml。細(xì)胞生長(zhǎng)液胎牛血清5ml或小牛血清10ml加到95ml或90ml完全型D-MEM液，使胎牛血清或小牛血清終濃度分別為5%和10％。細(xì)胞維持液胎牛血清1ml或小牛血清2ml加到99ml或98ml完全型D-MEM液，使胎牛血清或小牛血清終濃度分別為1%和2％。細(xì)胞接種液：含終濃度為5ug/ml胰酶L-谷氨酸完全型D-MEM培養(yǎng)液。MDCK細(xì)胞培養(yǎng)程序這里以T-75細(xì)胞瓶單層培養(yǎng)為例，論述MDCK細(xì)胞培養(yǎng)程序。如果細(xì)胞瓶規(guī)格有變，MDCK細(xì)胞懸液濃度必要做相應(yīng)調(diào)節(jié)。用于細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基、EDTA－胰酶等，37℃回溫后，用70％～75％酒精擦拭后放于生物安全柜內(nèi)。棄培養(yǎng)液，加5ml預(yù)先37℃溫浴EDTA-胰酶。溫和地?fù)u動(dòng)細(xì)胞瓶1分鐘，使EDTA-胰酶均勻分布在整個(gè)細(xì)胞薄層。然后用移液管吸去EDTA-胰酶。再重新加入5ml預(yù)先37℃溫浴EDTA-胰酶重復(fù)上述環(huán)節(jié)。加1mlEDTA-胰酶使其均勻分布在整個(gè)細(xì)胞薄層，37℃孵育細(xì)胞瓶直至細(xì)胞從塑料表面分離（約5～10分鐘）。必要時(shí)可以搖動(dòng)或吹打來(lái)分離細(xì)胞。加入1ml牛血清滅活殘存胰酶。加9ml完全型D-MEM，輕輕上下移動(dòng)移液管來(lái)分散細(xì)胞團(tuán)。取10ml混合物加到90ml細(xì)胞生長(zhǎng)液，該培養(yǎng)液含終濃度為5%胎牛血清。（細(xì)胞懸液濃度大概為每毫升含105細(xì)胞）每個(gè)T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶加6ml(600,000細(xì)胞)懸液，剩余細(xì)胞懸液可以加到T-75細(xì)胞瓶用于細(xì)胞傳代。普通6ml細(xì)胞懸液數(shù)日可長(zhǎng)成成片生長(zhǎng)細(xì)胞。于37℃培養(yǎng)箱里培養(yǎng)細(xì)胞，每天觀(guān)測(cè)細(xì)胞狀態(tài)。注：消化液除EDTA-胰酶外，也可以用0.25%胰酶與Versene按照1：7比例配成消化液使用。每批胎牛血清均應(yīng)進(jìn)行血清測(cè)試，通過(guò)測(cè)試擬定血清最佳使用濃度。此處提到血清使用濃度只是一種參照濃度。（四）、細(xì)胞凍存1．細(xì)胞凍存材料：1）成片MDCK細(xì)胞：細(xì)胞生長(zhǎng)良好存活率高，80％～90％成片。2）二甲基亞砜（DMSO）3)胎牛血清4）EDTA-胰酶(0.05%胰酶；0.53mMEDTA.4Na)，5）移液管：1ml,10ml2.細(xì)胞凍存環(huán)節(jié)凍存液配備配方一：胎牛血清9ml加二甲基亞砜1ml配方二：L-谷氨酸完全型D-MEM培養(yǎng)液8ml，胎牛血清1ml再加二甲基亞砜1ml。2)細(xì)胞消化,消化過(guò)程同細(xì)胞培養(yǎng)消化。3）細(xì)胞消化后，加入配備好細(xì)胞凍存液，混勻后分裝到細(xì)胞凍存管內(nèi)。細(xì)胞凍存濃度為1×1064）細(xì)胞凍存過(guò)程：4O℃2小時(shí)，-20℃2小時(shí)，-70℃2小時(shí)放入液氮長(zhǎng)期保存。（五）、細(xì)胞復(fù)蘇：凍存細(xì)胞復(fù)蘇原則為迅速解凍，以避免冰晶重新結(jié)晶對(duì)細(xì)胞導(dǎo)致傷害，而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。細(xì)胞活化后，需要數(shù)日或繼續(xù)傳代一至二代，其細(xì)胞生長(zhǎng)或細(xì)胞特性體現(xiàn)才會(huì)恢復(fù)正常。1．材料：37℃恒溫水浴箱細(xì)胞生長(zhǎng)液3）T-25培養(yǎng)瓶，無(wú)菌移液管4）70％～75％酒精2.細(xì)胞復(fù)蘇環(huán)節(jié)：1）將細(xì)胞生長(zhǎng)液放入37℃回溫，回溫后以70％～75％酒精擦拭，放入生物安全柜（無(wú)菌操作臺(tái)）內(nèi)。2）自液氮中取出細(xì)胞凍存管，檢查蓋子與否旋緊，由于熱脹冷縮過(guò)程蓋子容易松掉。3）及時(shí)放入37℃水浴中迅速解凍，輕輕搖動(dòng)使其在1分鐘內(nèi)所有融化，以70％～75％酒精擦拭保存管外部，移入生物安全柜（無(wú)菌操作臺(tái)）。4）取出1.0ml解凍細(xì)胞懸液，緩慢加入有生長(zhǎng)液T-25頸口有傾角細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。5）次日，更換細(xì)胞生長(zhǎng)液。（六）、質(zhì)量控制在過(guò)量傳代狀況下，MDCK細(xì)胞也許會(huì)失去其對(duì)呼吸道病毒敏感性。因而實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持低代次細(xì)胞株在液氮中。為了保持該分離系統(tǒng)敏感性，當(dāng)細(xì)胞復(fù)蘇后被持續(xù)傳15～20代，達(dá)到40代以上時(shí)，在間隔期可以用已知滴度陽(yáng)性質(zhì)控病毒來(lái)檢查MDCK細(xì)胞系敏感性。如果細(xì)胞敏感性已經(jīng)下降，即應(yīng)復(fù)蘇新細(xì)胞株。所用細(xì)胞系應(yīng)保證無(wú)支原體污染。（七）、MDCK細(xì)胞系敏感性檢測(cè)選取已知滴度陽(yáng)性質(zhì)控流感病毒，做10－1……10－5稀釋?zhuān)?.5ml分別感染早代細(xì)胞株和既有細(xì)胞株。3～5天后收獲病毒液，檢測(cè)早代細(xì)胞株與既有細(xì)胞株培養(yǎng)病毒液間與否由差別。如有明顯差別，表白既有細(xì)胞株敏感性已經(jīng)下降，應(yīng)重新復(fù)蘇新細(xì)胞株。流感病毒分離病毒分離是流感診斷金原則，也是流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)基本。當(dāng)前，慣用雞胚和MDCK（狗腎細(xì)胞）分離培養(yǎng)流感病毒。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)通過(guò)雞胚所分離流感病毒，其抗原性與原始標(biāo)本有所不同，而通過(guò)MDCK細(xì)胞所分離流感病毒，其抗原性與原始標(biāo)本相似。此外由于“O”相毒株重現(xiàn)，MDCK細(xì)胞對(duì)“O”相毒株敏感性遠(yuǎn)高于雞胚，因此MDCK細(xì)胞已成為流感病毒分離不可缺少一種宿主系統(tǒng)。由于MDCK細(xì)胞屬腫瘤細(xì)胞系，用該細(xì)胞分離病毒不能用于疫苗生產(chǎn)。因而各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)同步采用雞胚和MDCK兩種辦法分離病毒，而不應(yīng)放棄雞胚分離流感病毒辦法。（一）、實(shí)驗(yàn)室生物級(jí)別和生物安全規(guī)定1．流感病毒分離實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別：生物安全二級(jí)流感病毒分離操作必要在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全柜里進(jìn)行。2．實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)定應(yīng)當(dāng)遵守生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室關(guān)于生物安全規(guī)定（二）、流感病毒細(xì)胞分離原則操作規(guī)程1.實(shí)驗(yàn)材料和培養(yǎng)基T-25細(xì)胞瓶已經(jīng)75-90％成片MDCK細(xì)胞。TPCK解決胰酶（牛胰腺來(lái)源Ⅷ型）或0.25%胰酶HEPES緩沖液，1M母液青、鏈霉素母液(10,000U/ml青霉素G；10,000μg/ml硫酸鏈霉素)細(xì)胞生長(zhǎng)液細(xì)胞接種液解決好臨床樣品0.5ml（終濃度為千單位4℃4小時(shí)或過(guò)夜）T-25培養(yǎng)瓶用于病毒培養(yǎng)。1ml無(wú)菌移液管10ml無(wú)菌移液管2.流感病毒細(xì)胞分離程序：所有關(guān)于流感病毒分離操作都應(yīng)在生物安全Ⅱ?qū)嶒?yàn)室中生物安全柜里進(jìn)行，必要遵守生物安全規(guī)定，嚴(yán)格執(zhí)行原則操作規(guī)程和廢棄物管理規(guī)定。進(jìn)入生物安全Ⅱ?qū)嶒?yàn)室要遵循生物安全實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)規(guī)定。（1）75～90％成片細(xì)胞準(zhǔn)備：用40倍鏡觀(guān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。選取處在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期MDCK細(xì)胞用于病毒分離。輕輕倒出細(xì)胞生長(zhǎng)液，用6mlHank's液分別清洗細(xì)胞3遍。（2）細(xì)胞培養(yǎng)瓶接種用無(wú)菌移液管將清洗細(xì)胞Hank's液從細(xì)胞培養(yǎng)瓶中移出。用無(wú)菌移液管吸取200μl臨床樣品置于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。37℃吸附1～2小時(shí)。吸附后清洗細(xì)胞后，加入6ml接種液于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。放置于33～350C培養(yǎng)箱培養(yǎng)。每日觀(guān)測(cè)細(xì)胞病變狀況。（細(xì)胞病變特性是細(xì)胞腫脹圓化，細(xì)胞間隙增大。細(xì)胞核固縮或破裂。嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞某些或所有脫落）（3）細(xì)胞培養(yǎng)物收獲當(dāng)細(xì)胞病變?yōu)?+或4+時(shí)，即75～100%細(xì)胞浮現(xiàn)病變時(shí)進(jìn)行收獲，收獲之前將細(xì)胞凍融1～2次，以提高收獲標(biāo)本病毒滴度。雖然無(wú)細(xì)胞病變也應(yīng)當(dāng)于第7天收獲。進(jìn)行紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)(HA)，HA≥8進(jìn)行病毒鑒定（詳細(xì)辦法參見(jiàn)流感病毒鑒定技術(shù)中HA實(shí)驗(yàn)和HI實(shí)驗(yàn)?zāi)承?。如沒(méi)有紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，繼續(xù)傳代1～2次。HA實(shí)驗(yàn)仍為陰性者，以為MDCK細(xì)胞病毒分離陰性，標(biāo)本按生物安全關(guān)于規(guī)定進(jìn)行解決。對(duì)于HA≤8細(xì)胞分離物繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞傳代，直至HA≥8時(shí)再進(jìn)行病毒鑒定。經(jīng)持續(xù)傳代后HA<8，可以用RT-PCR辦法鑒定分型。3）HA≤8細(xì)胞分離物傳代辦法與標(biāo)本相似。HA≥8進(jìn)行細(xì)胞傳代時(shí)應(yīng)將病毒液進(jìn)行10-1…10-3稀釋后，再感染細(xì)胞。詳細(xì)稀釋濃度與HA滴度關(guān)于。普通滴度不大于32時(shí)選取10-1倍稀釋?zhuān)坏味炔徊淮笥?2以上時(shí)選取10-2或10-3稀釋。（三）、流感病毒雞胚分離原則操作規(guī)程1.實(shí)驗(yàn)材料：9～11日齡雞胚青、鏈霉素母液(10,000U/ml青霉素G；10,000μg/ml硫酸鏈霉素)70%～75％酒精一次性注射器器照卵燈雞蛋開(kāi)孔蠟或膠水10ml試管和試管架10ml移液管和3ml滴管無(wú)菌鑷子2.流感病毒雞胚分離程序所有關(guān)于病毒分離操作都應(yīng)在生物安全Ⅱ?qū)嶒?yàn)室生物安全柜中進(jìn)行，必要遵守生物安全規(guī)定，嚴(yán)格執(zhí)行原則操作規(guī)程和廢棄物管理規(guī)定。進(jìn)入生物安全Ⅱ?qū)嶒?yàn)室規(guī)定遵循生物安全實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)規(guī)定。（1）驗(yàn)卵用照卵燈檢測(cè)雞胚，標(biāo)記出雞胚氣室與尿囊界限、胚胎位置。如果雞胚是死胚、沒(méi)有受精、有裂痕、發(fā)育不全、或表面有好多滲水孔，應(yīng)棄掉。如何判斷雞胚狀態(tài)血管：活胚血管清晰；死胚模糊，成淤血帶或淤血塊胎動(dòng)：活胚有明顯自然運(yùn)動(dòng)，但是不不大于14天胎動(dòng)則不明顯；死胚無(wú)胎動(dòng)絨毛尿囊膜發(fā)育界限：密布血管絨毛尿囊膜與雞胚胎另一面形成明顯界限（2）雞胚接種將雞胚氣室朝上放置在蛋盤(pán)上，標(biāo)記每個(gè)雞胚,普通每個(gè)樣本接種2～3個(gè)雞胚。用70%～75％酒精消毒雞胚，在氣室端鉆孔，開(kāi)10x6mm裂口。用裝上7號(hào)針頭2.5ml注射器吸1.5ml解決過(guò)臨床標(biāo)本。從裂口中滴入無(wú)菌液體石蠟，然后輕輕晃動(dòng)雞胚，讓液體石蠟在雞胚殼膜內(nèi)層（臟層）鋪開(kāi)，此時(shí)在照卵燈下即可清晰看到雞胚胎位置。將注射針頭刺入胚胎鄂下胸前，用針頭輕輕撥動(dòng)下顎及腿，當(dāng)進(jìn)入羊膜腔時(shí)，能看到雞胚隨著針頭撥動(dòng)而動(dòng)，即可注射200μl臨床標(biāo)本。將針頭退出至?寸，將此外200μl臨床標(biāo)本注入雞胚尿囊腔。用同一注射器和針頭將同一標(biāo)本依上法接種此外兩枚雞胚。將針頭棄于適當(dāng)生物安全裝置中。用消毒過(guò)醫(yī)用膠布或透明膠紙封口。33～35℃溫箱培養(yǎng)雞胚2～3天。A型流感病毒培養(yǎng)2天，B型流感病毒培養(yǎng)3天，臨床采樣標(biāo)本普通培養(yǎng)3天。雞胚進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)時(shí)，每天檢查雞胚生長(zhǎng)狀況，24小時(shí)內(nèi)死亡雞胚，以為是非特異死亡應(yīng)棄去。提示：禽流感需35℃或37℃培養(yǎng)，哺乳動(dòng)物流感病毒35℃培養(yǎng)（禽流感在35℃時(shí)也會(huì)生長(zhǎng)良好！）（3）雞胚尿囊液和羊水收獲雞胚在收獲前應(yīng)4℃過(guò)夜或－20℃至少放置2小時(shí)。標(biāo)記15ml無(wú)菌塑料管與相應(yīng)雞胚編號(hào)一致。用70%～75％酒精消毒雞胚頂部。用無(wú)菌鑷子撕破雞胚氣室蛋殼，推開(kāi)雞胚尿囊膜。用10ml吸管吸取雞胚尿囊液置于相應(yīng)收集管中。用吸管刺破雞胚羊膜，盡量吸取羊水放置于此外管中。羊水較少時(shí)也可以吸少量尿液沖洗羊膜腔與羊水合并。將雞胚收獲液3000rpm離心5分鐘去除血液和細(xì)胞。進(jìn)行紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)（詳細(xì)辦法參見(jiàn)流感病毒鑒定技術(shù)中HA實(shí)驗(yàn)?zāi)承?，HA≥8進(jìn)行病毒鑒定。如沒(méi)有紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象標(biāo)本，應(yīng)再進(jìn)行雞胚傳代1次（對(duì)于“O”相毒株，需要持續(xù)傳代多次才干具備在雞胚中生長(zhǎng)特性）。傳代后HA滴度仍為陰性標(biāo)本，可以按關(guān)于生物安全規(guī)定進(jìn)行解決。對(duì)于HA≤8雞胚分離物繼續(xù)進(jìn)行雞胚傳代，直至HA≥8時(shí)再進(jìn)行病毒鑒定。經(jīng)持續(xù)傳代后HA<8，可以用RT-PCR辦法鑒定分型。5）對(duì)于HA≥8病毒進(jìn)行雞胚病毒傳代前應(yīng)將病毒液進(jìn)行10-1…10-3稀釋。詳細(xì)稀釋濃度與HA滴度大小關(guān)于。普通滴度不大于32時(shí)選取10-1稀釋度接種；滴度不不大于32以上時(shí)選取10-2或10-3稀釋度接種。（四）、注意事項(xiàng)1．不要在-20℃條件下保存病毒分離物，由于該溫度條件下流感病毒極不穩(wěn)定。2．流感病毒分離操作嚴(yán)格按照生物安全規(guī)程規(guī)定。禁止在同一實(shí)驗(yàn)室，同一時(shí)間解決接種未知臨床標(biāo)本和已知原則病毒。禁止在同一實(shí)驗(yàn)室，同一時(shí)間解決接種采自不同動(dòng)物標(biāo)本；動(dòng)物標(biāo)本（如豬、禽等）必要與人標(biāo)本分別保存。三、病毒鑒定紅細(xì)胞凝集和紅細(xì)胞凝集抑制實(shí)驗(yàn)原理：流感病毒顆粒表面血凝素蛋白（HA）具有能結(jié)合并辨認(rèn)紅細(xì)胞表面含唾液酸糖蛋白或脂蛋白構(gòu)造，許多哺乳動(dòng)物和禽紅細(xì)胞表面均具有這兩種成分。因而流感病毒能與其結(jié)合并辨認(rèn)，產(chǎn)生凝集現(xiàn)象。當(dāng)血清中有特異性抗體與病毒血凝素結(jié)合后，可以抑制凝集現(xiàn)象浮現(xiàn)。生物安全規(guī)定：生物安全規(guī)定及個(gè)人防護(hù)與流感病毒分離相似，并應(yīng)遵守相應(yīng)生物安全規(guī)定。實(shí)驗(yàn)材料：原則流感病毒參照抗原和抗血清：紅細(xì)胞懸液（雞、豚鼠、人）：雞紅細(xì)胞懸液終濃度0.5%；豚鼠何人血球終濃度1%磷酸緩沖液(PBS)：0.01M，PH7.2多孔加樣器、U型96孔微量板等3.實(shí)驗(yàn)流程:紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)(HA實(shí)驗(yàn))稀釋病毒加入配制好紅細(xì)胞充分混勻，置室溫孵育30-60分鐘觀(guān)測(cè)記錄成果及鑒定：血凝效價(jià)鑒定：能引起紅細(xì)胞完全凝集時(shí)病毒最高稀釋度得到數(shù)。實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制加樣量精確稀釋病毒時(shí)吸取液體量精確加過(guò)紅細(xì)胞后，混合均勻室溫孵育時(shí)間精確，孵育時(shí)不要搖動(dòng)5.實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)：4個(gè)凝集單位配制和檢測(cè)稀釋原則參照血清加入25ul4個(gè)血凝單位抗原，室溫孵育15-30分鐘每孔加入50ul紅細(xì)胞懸液，充分搖勻。室溫孵育30-60分鐘觀(guān)測(cè)記錄成果：4個(gè)凝集單位配制：讀取紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)成果計(jì)算所須4個(gè)凝集單位病毒用量用25ul檢測(cè)4個(gè)凝集單位時(shí)，用凝集效價(jià)除以4；用50ul檢測(cè)4個(gè)凝集單位時(shí)，用凝集效價(jià)除以8用紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)“回滴”，復(fù)核4個(gè)凝集單位復(fù)核時(shí)用25ul，前3孔紅細(xì)胞完全凝集；用50ul，前4孔完全凝集。此時(shí)抗原即為4個(gè)凝集單位血清滅活與稀釋1份血清與4份RDE，37℃水浴16h～18h后，置56℃水浴50min常規(guī)解決后已成1：5，因而用維持液倍比稀釋時(shí)，開(kāi)始就為1：10，普通倍比稀釋至1：1280。效價(jià)讀?。貉种菩r(jià)：完全抑制血凝浮現(xiàn)時(shí)血清最高稀釋度倒數(shù)如：某待鑒定病毒對(duì)甲3原則血清在1：160時(shí)完全抑制，1：320沒(méi)有完全抑制。此病毒對(duì)甲3抑制效價(jià)為160。流感病毒型別鑒定：原則參照血清對(duì)待鑒定病毒抑制效價(jià)≥20才可以算為陽(yáng)性。一種待鑒定病毒不能同步被兩種或兩種以上原則血清抑制待鑒定病毒原則參照血清有交叉抑制，但與一種原則參照血清抑制效價(jià)不不大于其她參照血清4倍以上時(shí)，可以鑒定為此性別流感病毒質(zhì)量控制使用試劑可靠無(wú)誤解決后血清有無(wú)殘存非特異性凝集素讀取HA實(shí)驗(yàn)成果與否對(duì)的4個(gè)血凝單位與否精確紅細(xì)胞陰性對(duì)照待鑒定病毒保證沒(méi)有被細(xì)菌污染稀釋血清、病毒、紅細(xì)胞加入量精確

流感病毒分離鑒定工作流程圖接受傳控一部咽拭子標(biāo)本接受傳控一部咽拭子標(biāo)本剩余標(biāo)本液-80℃凍存接種MDCK細(xì)胞34℃96h（每日觀(guān)測(cè)CPE）粗血凝陽(yáng)性接種雞胚34℃72h，4℃過(guò)夜收獲及粗血凝陰性陽(yáng)性培養(yǎng)物121℃20min滅菌棄去HA測(cè)定HA測(cè)定HI鑒定-80℃凍存培養(yǎng)液送國(guó)家流感中心復(fù)檢（冷鏈）培養(yǎng)物121℃20min滅菌棄去咽拭子標(biāo)本編號(hào)并登記接受反饋成果并存檔報(bào)告?zhèn)骺匾徊筷幮躁幮缘诙承悍盅鍖W(xué)如下檢測(cè)成果任一項(xiàng)陽(yáng)性均可確診。紅細(xì)胞凝集和紅細(xì)胞凝集抑制實(shí)驗(yàn)（參照病毒鑒定）補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。按GB15994-1995進(jìn)行。中和實(shí)驗(yàn)：中和實(shí)驗(yàn)慣用有兩種辦法，一種為固定病毒量與等量系列倍比稀釋血清進(jìn)行中和實(shí)驗(yàn)。另一種為固定血清與等量一系列對(duì)數(shù)稀釋病毒進(jìn)行中和實(shí)驗(yàn)。流感病毒中和實(shí)驗(yàn)可在組織細(xì)胞、雞胚和小鼠身上進(jìn)行。操作環(huán)節(jié)固定病毒量—稀釋血清法（以組織培養(yǎng)細(xì)胞為例）(一)病毒滴定：病毒懸液普通覺(jué)得剛收獲雞胚尿囊液，HA≥32