實驗室生物安全管理基礎手冊

第一章總則1.1介紹1.1.1機構(gòu)情況名稱：寧夏回族自治區(qū)固原市動物疾病預防控制中心主任：賀廣霖地址：固原市南關街287號電話：0954—2028644傳真：0954—2028644郵編：7560001.2中心基礎情況固原市動物疾病預防控制中心（以下簡稱“本中心”）是依據(jù)固事機編事發(fā)[]74號文件批復，由原固原市畜牧獸醫(yī)工作站分離更名確立正當動物疫病監(jiān)測（診療）機構(gòu)，同時加掛固原市獸藥飼料監(jiān)察站牌子，內(nèi)設機構(gòu)3個。行政隸屬于固原市農(nóng)業(yè)畜牧局。單位等級為正科級，經(jīng)費由財政全額撥款，屬于純社會公益性機關。本中心地處固原市南關街，環(huán)境優(yōu)美，無噪音、電磁、振動等干擾。中心試驗樓共378.5中心下設綜合辦公室、獸醫(yī)試驗室（設病原學檢測室、血清學檢測室、分子生物學試驗室3個試驗室）、飼料質(zhì)量檢驗室共3個科（室）。編制8人，現(xiàn)實有些人數(shù)8人，擁有專職技術人員8人，其中，大學本科4人，全部為畜牧獸醫(yī)專業(yè)技術人員。檢驗人員理論基礎扎實，中心試驗室占地378.5平方米，儀器設備固定資產(chǎn)103萬元，擁有梯度PCR儀、酶標儀、高速離心機、細菌快速判定系統(tǒng)、電泳儀、研究型顯微鏡、凝膠圖像處理系統(tǒng)、721分光光度計、馬弗爐等儀器設備105多臺（件），檢測能力全區(qū)地市級試驗室中處上游水平，可對各類動物疫病進行組織病理學、血清學、分子生物學和病原學和飼料產(chǎn)品和原料質(zhì)量進行檢測1.3關鍵業(yè)務和服務范圍組織實施全市動物疫病預防和控制，尤其是對重大動物疫病和人獸共患病預防制和應急反應行動；負擔全市動物疫病，尤其是重大動物疫病、新發(fā)病和突發(fā)疫情快速診療和判定；指導、協(xié)調(diào)縣動物防疫監(jiān)督機構(gòu)業(yè)務工作，對上報診療結(jié)果結(jié)合相關疫情資料進行綜合分析，做出疫情確定并上報；負責全市動物疫情檢測和流行病學調(diào)查，全市動物疫情信息網(wǎng)絡管理，區(qū)內(nèi)外動物疫情搜集、匯總、分析、匯報和預警、預報；指導、檢驗全市動物防檢疫工作；開展動物源性食品安全監(jiān)控工作；開展獸醫(yī)公共衛(wèi)生事件調(diào)查處理及應急反應，配合衛(wèi)生部門做好相關工作；從事動物疫病診療、檢測、防治新技術推廣；參與制訂全市動物防疫政策方法、防治計劃、應急預案等；開展對縣級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)業(yè)務指導和試驗室質(zhì)量管理和評價；開展對相關工作人員和執(zhí)業(yè)獸醫(yī)等各類從業(yè)人員培訓；開展地市級技術交流和合作；負擔寧夏獸醫(yī)行政主管機關和自治區(qū)動物疾病預防控制中心交辦其它工作任務。1.4試驗室布局和生物安全等級1.4.11.4.2授權(quán)人員方可進入生物安全水平：一級責任人：閆利珍緊急聯(lián)絡電話：白天電話：2028644晚上電話：20251721.4.3試驗室生物安全等級和生物安全管理手冊制訂依據(jù)中國農(nóng)業(yè)部《獸醫(yī)試驗室生物安全管理規(guī)范》、《試驗室生物安全通用要求》（GB19489-）、《動物病原微生物分類名目》（農(nóng)業(yè)部令第53號）中相關對試驗室生物危險度等級劃分標準、和微生物危險度等級相對應生物安全水平、操作和設備、一級生物安全水平對設施和病原微生物保留等要求和規(guī)范，我中心試驗室為基礎試驗室——一級生物安全水平。依據(jù)生物安全一級試驗室生物安全要求，制訂我中心《試驗室生物安全管理手冊》，以此作為我中心試驗室生物安全運行制度和規(guī)范，期望中心全部職員嚴格遵守《生物安全管理手冊》要求。1.5試驗室生物安全管理組織機構(gòu)1.5.1試驗室生物安全責任人中心主任為生物安全第一責任人，副主任為生物安全第二責任人，試驗室主任為試驗室生物安全直接責任人。1.5.2為了加強試驗室生物安全管理，本中心成立試驗室生物安全管理小組。組長：中心主任賀廣霖副組長：中心副主任吳建寧副組長：中心試驗室主任閆利珍成員：中心試驗室工作人員趙亞峰、謝建亮、楊曉梅，謝建亮任生物安全員。生物安全管理小組實施組長負責制，副組長及組員要主動配合組長做好試驗室生物安全防護工作。第二章試驗室人員和項目準入制度2.1目標規(guī)范試驗室使用和管理，確保操作人員，試驗對象和環(huán)境安全，確保檢測結(jié)果正確可靠。2.2適用范圍適適用于試驗室安全運轉(zhuǎn)及在此環(huán)境下全部檢測工作。2.3職責進入試驗室從事檢測工作全部些人員嚴格根據(jù)本要求實施。2.4具體要求2.4.12.4.1.1本中心在試驗室內(nèi)一切活動，必需遵照生物安全手冊要求進行。試驗室內(nèi)污染空氣需經(jīng)過高效清潔后方能排出室外。試驗室內(nèi)產(chǎn)生污水，必需經(jīng)過消毒后方可進入公共污水系統(tǒng)。試驗室全部廢棄品，必需經(jīng)過高壓滅菌后才能處理和清洗。必需攜出試驗室中間試驗材料、更換維修儀器設備、也只有在確保無病原微生物污染條件下，才能攜出試驗室。試驗室內(nèi)準備二級生物安全柜和生物安全二級無菌室，全部可能造成污染能夠置于生物安全柜內(nèi)或無菌室試驗操作，置其內(nèi)進行，以確保試驗室內(nèi)空間安全。2.4.1本手冊要求各項要求，首先是為了確保試驗室安全運行，包含預防試驗室工作人員感染、預防試驗室操作病原微生物對環(huán)境污染、預防檢測樣品污染，確保試驗結(jié)果正確可靠。2.4.1本手冊要求各項要求，同時也是為了確保試驗室工作質(zhì)量，即：試驗產(chǎn)生各項結(jié)果和數(shù)據(jù)，必需正確可靠：試驗室出具檢驗匯報，必需明確完整。2.4.22.4.2.1開啟試驗室.2.4.2工作人員根據(jù)下列要求進行個人防護，才能進入試驗室區(qū)域：在更衣室中換穿工作服和工作鞋。在清潔區(qū)內(nèi)，依據(jù)試驗要求做好防護。試驗中需使用腐蝕性試劑時，在膠乳手套外加帶一次性塑料手套；需要進行可能造成污染材料飛濺操作時，需加戴防護面罩。2.4.2進入試驗室后，關閉房間紫外線燈。檢驗試驗室運轉(zhuǎn)是否正常。做好開始試驗各項準備。13.4.2一切準備工作就緒后，才將標本和試劑從冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即歸位，使其在冰箱外停留時間盡可能短。2.4.2嚴格根據(jù)試劑使用說明進行操作。洗滌時避免液體材料飛濺。吸收、稀釋液體時，將吸管插入試管底部，用吸球緩慢吸收，避免產(chǎn)生汽泡或汽溶膠。離心時，應使用雙蓋封閉式離心機和全封閉試管，每管離心液總量低于最高容量1個刻度單位：平衡時不得有液體滲陋到管套中，離心機使用后立即用消毒液擦洗消毒。2.4.22.4.2確保不含感染性試驗材料，才能夠從試驗室攜出。容器表面應用75%乙醇消毒。2.4.2每一試驗步驟完成后，均應清理臺面。全部用過試劑均應歸還原位；使過吸管等長形器材放入儲存污物盒內(nèi)；鋒利品放入專用污物盒；紙巾軟物品放入污物袋；在臺面上噴灑75%乙醇，保持20分鐘，然后以紙巾擦干。試驗室其它表面，也應常常見75%乙醇擦拭。2.4.2放置污染物品容器裝滿時，應更換新容器。試驗結(jié)束后，對用過污染物品進行高壓消毒。2.4.2工作完成更衣次序是，先用消毒液浸泡手套5分鐘，然后依次除去口罩、防護服、鞋套，放入高壓消毒袋內(nèi)，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。2.4.2.11每次工作完成，生物安全柜內(nèi)用75%酒精擦拭臺面，消毒液消毒地面，開啟紫外線燈照射1小時后，逐一關閉試驗室送風和通風設備{關閉次序和開啟次序相反}。PCR試驗室應用空氣消毒機進行消毒4小時。2.4.2.4.在試驗室內(nèi)，試驗統(tǒng)計應使用鉛筆或碳素筆書寫。統(tǒng)計內(nèi)容應簡明扼要，包含試驗日期，試驗目標和試驗基礎條件等提醒記憶內(nèi)容，并較具體地記載觀察到實際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結(jié)果。要求字跡應清楚，數(shù)字成行成列，以避免錄入錯誤。2.4.將上述統(tǒng)計在紙張上試驗統(tǒng)計應用80%福爾馬林，密閉熏蒸消毒62.4.試驗統(tǒng)計必需在試驗結(jié)束后二十四小時內(nèi)錄入計算機。統(tǒng)計正確試驗匯報和錄入時間。再根據(jù)由試驗室?guī)С鰰鴮懡y(tǒng)計，正確地記載試驗結(jié)果和數(shù)據(jù)。錄入后，書寫統(tǒng)計保留1周，以備查驗。試驗統(tǒng)計錄入后，通常不得修改。因數(shù)據(jù)統(tǒng)計錯誤，錄入錯誤，或?qū)嶋H觀察到試驗結(jié)果改變，必需更改統(tǒng)計時，不要刪除已經(jīng)錄入描述和數(shù)據(jù)，而應錄入新描寫和數(shù)據(jù)，并注明更改原因。2.4.每個月一次，將上月計算機試驗統(tǒng)計做出備份，備份試驗統(tǒng)計不得修改。試驗室責任人應定時檢驗試驗統(tǒng)計，查對備份和原始試驗統(tǒng)計，對統(tǒng)計中缺點提出修改意見。2.4.試驗統(tǒng)計保留十二個月。已使用試驗統(tǒng)計(出具匯報，發(fā)表論文，或以其它方法引用)，在使用后再保留十二個月。如無特殊必需，備份試驗統(tǒng)計通常永久保留。2.4.根據(jù)《質(zhì)量手冊》第十三章相關要求進行。2.4.2.4.4出試驗室采集標本，本試驗室統(tǒng)一登記編號，能反應出標本起源、種類、性質(zhì)、目標等相關信息。相關單位送檢標本由試驗室統(tǒng)一登記編號，注明送檢單位、送檢時間、種類、性質(zhì)、試驗目標等相關信息。采集和送檢樣本編號規(guī)則：動物種類/樣本類別/檢測目標/年號/樣此次序動物種類：豬—ZH?！狽羊—Y禽—Q樣本類別：全血—QX血清—XQ臟器和組織—ZQ檢驗目標：疫病診療—YBZD疫病監(jiān)測—YBJC免疫效果集中檢測—JZJC免疫質(zhì)量抽檢—MZCJ2.4.4依據(jù)標本性質(zhì)、目標進行保留，每分標本分兩份，一份檢測時使用，另一份備用。標本因多種原因損失時，啟用后備標本，并重新備份。2.4.確定不用標本，采取高壓滅菌后焚燒方法銷毀。2.4.2.4.試驗室定時保養(yǎng)根據(jù)提供試驗室設備廠商要求進行，關鍵是對機械和電器部分進行維護。2.4.5試驗室內(nèi)儀器設備保養(yǎng)由試驗室工作人員進行。維護有專業(yè)人員進行。生物安全柜濾器必需按說明書要求時間定時由專業(yè)人員更換，其它儀器設備也應依據(jù)實際需要清潔保養(yǎng)。2.4.儀器設備需要更新，需要離開試驗室進行維修，或損壞需要更換，和必需臨時進入試驗室使用，使用完成后必需撤出試驗室珍貴儀器，在撤出試驗室之前必需以合適方法嚴格消毒，方可處理或重新投入使用。2.4.2.4.造成或可能造成試驗室污染，但未造成人身傷害試驗室匯報，由試驗室責任人處理。比如試驗過程中。因為標本、試劑益處濺落造成操作臺或地面污染等，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液紙巾，待消毒液根本浸泡30分鐘后，對污染物品進行清理。清理后物品高壓滅菌。并填寫生物安全2級試驗室意外情況登記和處理統(tǒng)計表，試驗室責任人應指導這些處理活動，并檢驗處理效果。試驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂、離心機事故等，應立即關閉試驗室，張貼嚴禁入內(nèi)標識。用消毒液噴霧和紫外線照射污染區(qū)域，二十四小時再進行終末消毒，試驗室責任人除立即采取對應方法外，應向上級部門匯報，并填寫意外情況登記和處理統(tǒng)計表。試驗室工作人員在沒有強毒微生物時，在試驗室內(nèi)受到意外傷害，如割傷、燒傷、燙傷等，在試驗室內(nèi)昏倒或發(fā)生身體嚴重不適，也有試驗室責任人處理。令受到傷害人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損平凡表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用無菌生理鹽水沖洗。由在同一試驗室內(nèi)人員或派人快速著裝進入試驗室，清除造成傷害原因，清理試驗材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離試驗室。受到傷害人員應進行診療并休息，在身體情況未恢復之前，不得重新進入試驗室工作。試驗室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害故障以后，方可重新使用。傷害事故可能造成被強毒微生物感染，比如針頭刺破、銳器割傷、黏膜暴露等路徑接觸到感染性液體，或在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面，意外接種等情況，首優(yōu)異行局部處理，用肥皂和水清洗污染皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處血液，用肥皂和清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。暴露黏膜應立即用生理鹽水或清水沖洗潔凈。試驗室責任人應向上級部門匯報，對受傷害者進行隔離觀察，同時依據(jù)情況預防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預防感染評價和處理方案。發(fā)生可疑試驗室感染事故時，應對被感染人員送醫(yī)療衛(wèi)生部門進行隔離觀察。假如判定為法定傳染病感染，根據(jù)醫(yī)療衛(wèi)生部門要求進行處理并向主管部門和上級業(yè)務部門匯報，同時給有效隔離診療。第三章人員培訓考評制度3.1目標規(guī)范試驗室相關人員培訓考評3.2適用范圍適適用于生物安全包含全部工作人員3.3人員培訓考評制度3.3.新工作人員進入試驗室前，必需經(jīng)過培訓，取得進入試驗室工作資格。培訓由試驗室責任人組織進行，并指定熟悉試驗室工作人員擔任教導。培訓內(nèi)容包含：（1）相關檢驗國家和行業(yè)檢測（診療）標準、處理標準和本手冊內(nèi)容。（2）試驗室全部設備使用方法。（3）個人防護方法。（4）試驗室基礎技術。（5）試驗室消毒凈化方法。3.3.新工作人員經(jīng)過培訓后，由試驗室責任人組織考評。經(jīng)過考評后，還須和有資格工作人員一同工作3個月，才能取得獨立進行試驗室操作正式資格。第四章人員健康監(jiān)護制度3.1目標規(guī)范試驗室相關人員健康監(jiān)護3.2適用范圍適適用于生物安全包含全部工作人員3.3人員健康監(jiān)護制度3.3.1試驗室3.3.2人畜共患病患者或?qū)υ囼灲Y(jié)果有影響疾患患者在康復前應從試驗室崗位調(diào)整到其它工作崗位（如：甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒和布魯氏菌病、結(jié)核病等）3.3.3.3.3.3.第五章生物安全檢驗制度5.1目標規(guī)范試驗室生物安全，確保設備正常運行。13.5.2適適用于生物安全包含儀器設備（比如生物安全柜等）5.3生物安全檢驗制度試驗室內(nèi)，每2個月以細菌培養(yǎng)方法進行安全性檢測。生物安全柜內(nèi)放置平板培養(yǎng)基2個，試驗室4角和中間各放置1個，半污染區(qū)放置2個。將平皿敞開5分鐘，然后蓋上，每平板菌落數(shù)平均不得超出2個，超出標準，需要對試驗室或污染部位進行甲醛熏蒸消毒。第六章試驗室人員生物安全行為規(guī)范6.1目標規(guī)范試驗室人員生物安全行為。6.2適用范圍適適用于生物安全包含全部工作人員6.3生物安全組織管理和行為規(guī)范6.3單位法人（或授權(quán)）責任人：賀廣霖↓試驗室責任人：閆利珍↓生物安全員：謝建亮↓試驗室工作人員：謝建亮、趙亞峰、閆利珍、楊曉梅6.3.6.3.負責組織生物安全試驗室立項、選址，施工隊資質(zhì)驗證。負責成立生物安全管理領導小組負責生物安全，制訂管理制度，監(jiān)督相關法規(guī)和操作規(guī)程實施情況。負責組織對造成外環(huán)境污染、試驗室污染、人身傷害事故調(diào)查和處理。6.3組織制訂安全手冊、操作規(guī)程等文件。根據(jù)上述文件要求組織試驗室各項工作，確保試驗室運行安全和試驗室工作質(zhì)量正確可靠。組織進入試驗室人員進行業(yè)務培訓，確保工作人員熟知微生物操作規(guī)程和技術，掌握試驗室設備特殊要求并熟練操作，對培訓結(jié)果進行考評，決定進入試驗室工作人員資格。6.3對技術方法、化學品、材料和設備定時進行內(nèi)部安全檢驗，確保其符合國家和地方相關安全和衛(wèi)生政策和標準。一旦發(fā)覺不安全原因，立即停止工作并上報試驗室責任人。和相關人員討論研究安全政策問題。確定全部工作人員全部含有進入試驗室工作資格。為全部些人員提供連續(xù)性安全要教育和指導。針對操作程序、技術方法和多種條件要求變更，和新設備引進，為全體工作人員提供最新安全文件和信息資料。定時檢驗試驗室各項技術參數(shù)，組織對試驗室裝備常規(guī)保養(yǎng)。全部可能包含潛在傳染性或有毒物質(zhì)泄露意外事件和事故，即使沒有些人員受傷或暴露，也要給予調(diào)查，并向試驗室責任人員和安全委員會匯報調(diào)查結(jié)果和提出提議。當任何試驗室工作人員疾病或缺勤和工作相關，并被統(tǒng)計為可能試驗室取得性感染時，幫助隨訪調(diào)查其疾病或缺勤情況。確保在發(fā)生傳染性物質(zhì)濺灑其它事件時，監(jiān)督消毒凈化程序得到正確實施；并對這類意外事件和事故進行具體書面統(tǒng)計。確保任何需要修理和維護儀器設備在消毒和凈化以后方可運出試驗室。生物安全員由中級技術專業(yè)職稱以上人員負擔，必需含有以下資質(zhì)：含有實際工作經(jīng)驗；對操作微生物有全方面、完整了解；含有組織試驗室工作能力；對工作有高度責任心。6.3生物安全一級試驗室，只許可進行試驗室目標要求操作，和此無關活動標準上一律不得進行。必需按要求進行個人防護，方得進入試驗室。保持試驗室環(huán)境整齊，每項工作完成以后，必需清理和清潔臺面，離開試驗室注意個人健康情況，出現(xiàn)身體不適情況，應立即向試驗室責任人匯報。試驗室內(nèi)嚴禁飲食、吸煙、訪客和喧嘩。6.3.2.5試驗室工作人員技術要求必需了解試驗室安全原理，熟悉本手冊各項要求，熟記緊急情況下正確應對方法。掌握病原微生物操作基礎要求，正確、安全地實用標本，避免污染，以取得正確、可靠試驗結(jié)果。必需熟悉相關試驗國家標準，能夠完成標準所要求任務。一旦發(fā)生意外，立即向生物安全員匯報。6.4個人防護程序6.4.16.4.16.4.16.4.16.4.16.4.26.6.4.2.26.4.36.4.36.4.36.4.36.4.36.4.3.5用消毒巾擦拭面部，用碘酊或75%酒精第七章事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病匯報制度7.1目標糾正檢驗工作中差錯，立即處理責任事故，吸收事故教訓，確保檢驗設備和人員安全。7.2范圍適適用于檢驗工作中出現(xiàn)事故分析匯報、調(diào)查和處理。7.3職責7.4工作程序7.4.1凡違反各項要求所造成事故均為責任事故，按其經(jīng)濟損失和人身傷害和大小分為以下多個：大小事故界限表損失情況小事故通常事故大事故重大事故經(jīng)濟損失≤100元100~1000元1000~10000元≥10000元人身傷亡一人受傷，休工≤3日一人受傷，休工3日以上兩人受傷或一人受傷，休工1-6個月三人以上受傷，休工十二個月以上，或一人致殘或死亡。7.4.27.4.2.7.4.2.2事故發(fā)生3日內(nèi)，事故責任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓、責任，并由發(fā)生事故科室填寫事故匯報單，報綜合辦公室和中心主任7.4.2.3事故發(fā)生后5日內(nèi)，由綜合辦公室?guī)椭行呢熑稳酥鞒终匍_事故分析會，對事故進行分析并對事故責任人作出處理。綜合辦公室7.4.2.4重大事故發(fā)生后一周內(nèi)，由中心7.4.2.5事故匯報處理單等統(tǒng)計材料由綜合辦公室第八章試驗室生物危險標識使用要求8.1目標規(guī)范生物安全一級試驗室使用和管理。8.2適用范圍適適用于生物安全一級試驗室。8.3具體要求：8.3.1在含有生物安全一8.3.28.3.3高溫、高速、珍貴和冷凍設備加貼對應警示標識，以防無關人員在無意中將儀器損害或造成人員傷害。第九章試驗室內(nèi)務管理制度9.1目標確保生物安全一級試驗室正常運行、試驗人員、物品和環(huán)境安全9.2適應范圍適應于生物安全一級試驗室。9.3職責進入生物安全一級試驗室工作全部工作人員嚴格遵照本管理制度實施。9.4基礎制度9.9.4.29.4.39.4.49.4.59.4.69.4.79.4.89.4.99.4.19.4.19.4.19.5試驗室特殊管理制度9.5.19.5.29.5.39.5.49.5.59.5.69.5.7剩下標本應密封后置于樣本保留室在要求適宜條件下保留，樣本保管人員要立即給予登記9.5.89.5.9第十章試驗室生物樣本安全保管和檔案管理制度10.1目標規(guī)范試驗室生物樣本保管和檔案管理10.2適用范圍試驗室生物樣本處理和檔案管理10.3試驗室菌（毒）種和生物樣本保管10.3.1根據(jù)農(nóng)業(yè)部53號令《動物病原微生物分類名目》要求。一級生物安全試驗室能夠保留三、四類菌（毒）種，由指定專員負責登記、保留和管理。按期傳代、判定，必需在無菌室或接種罩內(nèi)進行，并做好相關統(tǒng)計。在保留過程中發(fā)覺菌（毒）種變異或死亡，應立即上報試驗室主任10.3.210.3.310.3.410.3.5一、二類菌（毒）種，應派專員向提供單位領取，不得郵寄；三、四類菌10.3.610.4檔案管理制度10.4.1非試驗室人員不得隨意查閱試驗室統(tǒng)計。如因異議處理等特殊需要需要查閱試驗室統(tǒng)計，需要提交申請匯報并說明查閱原因10.4.2專員負責妥善保留多種樣品登記本、診療（檢驗）匯報及試驗室原始統(tǒng)計，不得私自修改和銷毀10.4.3本試驗室對重大動物疫病檢測（診療）結(jié)果不是最終止果，須深入確定和上一級試驗室匯報并送檢，在未得到確定前不得出具診療（檢測）匯報及通知委托檢驗者本人或相關單位第十一章試驗室廢棄物管理制度11.1目標規(guī)范廢棄物處理11.2適用范圍尖銳器具和其它廢棄物處理。11.3具體方法：11.3.111.3.1.1尖銳器具，如針、注射器等，除特殊情況外，嚴禁在試驗室使用，盡可能用塑料器材替換11.3.1.2注射和吸收感染性材料時，盡可能使用一次性注射器。用過針頭嚴禁折段、剪段、折段、重新蓋帽或從注射器上取下，嚴禁用手直接操作。用過針頭、注射器直接放入防刺破盛廢棄銳器容器中。非一次性銳器必需放置在堅壁容器中，進行高壓消毒11.3.1.4打壞玻璃器具，嚴禁用手直接清理，必需使用其它工具，如掃把、簸箕、夾子或鑷子11.3.2廢11.3.2.1試驗后廢棄物如不立即處理則會污染環(huán)境，從而對人造成危害，所以相關人員必需嚴11.3.2.2試驗樣本在處理和進行試驗室檢測時產(chǎn)生廢棄物，如一次性針頭、吸頭、離心管、平皿等應11.3.2.3試驗過程中產(chǎn)生污染性液體物質(zhì)、廢棄液體標本等放在盛有消毒液嚴格防滲漏11.3.2.4進行試驗所必需使用容器，如針頭、一次性注射器、吸頭、玻璃器具、手術刀片等，放入專11.3.2.6高壓鍋應有專員負責，嚴格按使用說明操作，確保在121條件下，高壓30分鐘，以達成11.3.2.7全部試驗產(chǎn)生廢棄物，必需經(jīng)嚴格高壓消毒后方能運出試驗區(qū)，并送至指定地點集中第十二章試驗室消毒隔離制度13.1目標規(guī)范微生物試驗室和生物安全一級試驗室消毒隔離工作。13.2適用范圍微生物試驗室和生物安全一級試驗室。13.3職責全部工作人員全部必需遵從本規(guī)程。13.4具體步驟13.4.113.4.113.4.1.2各區(qū)域交叉處應設置有效氯mg/L13.4.113.4.113.4.113.4.113.4.113.4.113.4.113.4.113.4.113.4.213.4.2.1儀器等表面消毒：工作結(jié)束后，用含有效氯1000mg/L13.4.2.2試驗器材分類消毒：將使用后銳器方入防刺破、防滲漏密閉專用銳器處理盒內(nèi)，12113.4.213.4.2.4個人防護用具消毒：試驗結(jié)束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等12113.4.213.4.2.6空氣消毒：每次試驗前后用紫外燈照射消毒，每次不少于1小時，每立方米空間安裝紫外燈瓦數(shù)≥1.5W，距紫外燈1米處照射強度≥13.4.2.7紙張13.4.2.8地面消毒：工作結(jié)束，應用含有有效氯為13.4.2.9廢棄物處理：試驗廢棄物應放入合適容器內(nèi)，就地1213.5試驗室高壓消毒安全操作13.5.113.5.213.5.213.5.213.5.2.3設定滅菌溫度，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)整到滅菌所需溫度，然后按“實施”13.5.2.4設定滅菌時間，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)整到滅菌所需時間，然后按“實施”13.5.2.5按“實施”鍵實施滅菌程序，此時“滅菌”13.5.213.5.213.513.513.513.5.613.5.6.1在滅菌前將雙層高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中體積不能超出袋子體積13.5.613.5.613.5.6.4當開始滅菌時必需確信滅菌中國水量適宜，高壓溫度和時間設置正確。滅菌應保持在120第十三章試驗室應急處理預案13.1目標規(guī)范緊急情況處理工作。13.2適用范圍病原學檢測試驗室、血清學試驗室、分子生物學試驗室，飼料檢驗室。13.3職責遇有緊急情況全部工作人員嚴格按此規(guī)程處理。13.4具體要求：13.4.1造成或可能造成試驗室污染，但未造成人身傷害試驗室事故，由試驗室責任人處理。比如試驗過程中，因為標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面污染等，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液紙巾，等消毒液根本浸泡30分鐘后，對污染物品進行處理。清理后物品高壓滅菌。并填寫生物安全一13.4.213.4.313.4.413.4.5被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染小玻璃瓶及其它容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置30分鐘。其后即可清除掉，玻璃碎片應該用鑷子清理。污染區(qū)域應該用消毒劑清洗。破碎物品清理時假如使用了簸箕，應將其進行高壓滅菌或用有效消毒劑浸泡二十四小時。清理使用過布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應佩戴手套。13.4.613.4.7全部密閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。假如懷疑發(fā)生了破損，應該將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。13.4.8堅固、厚重門、牢靠鎖具和限制出入，全部是適宜防范方法。發(fā)覺蓄意破壞情況后匯報試驗室責任人及生物安全員，視破壞種類根據(jù)上述方法進行處理，并具體填寫意外情況登記和處理統(tǒng)計表。13.4.913.4.9.1工作室忽然停水，對檢驗工作或結(jié)果無影響時，作停水統(tǒng)計13.4.9.2對于供水機構(gòu)通知計劃長時間停水，應事先做好準備，必需時調(diào)整班次，推遲檢測試驗，并做好對應統(tǒng)計13.4.9.313.4.113.4.113.4.1013.4.113.4.113.4.11.2確定火災發(fā)生位置，判定火災發(fā)生原因，如易燃液體、易燃品、13.4.1木材、布料、紙張、橡膠和塑料等固體可燃材料火災，可采取水冷卻法；易燃液體、可燃液體、易燃氣體等化學藥品火災，使用大劑量泡沫滅火劑、干粉滅火劑滅火；帶電電氣設備或電路老化引發(fā)火災，應切斷電源后再滅火；印現(xiàn)場情況及其它原因，不能斷電關鍵帶電滅火時，應使用沙子或干粉滅火器，不能使用泡沫滅火器；視火情大小和發(fā)展情況，如無法控制，立即撥打“119”報警求救，并到顯著位置引導消防車。第十四章試驗活動生物安全標準操作規(guī)程14.1目標確保試驗室檢測結(jié)果正確性。14.2適用范圍動物病毒病病原學和免疫抗體檢測和細菌性疾病檢驗試驗室檢測工作。14.3具體要求14.3.1樣品處理操作規(guī)程14.3.1.1樣品采集安試劑盒要求采集。采血時注意安全，用一次性注射器謹慎操作，預防發(fā)生刺傷和造成外界污染。血樣如即時用可存于一般冰箱，如要長久保留，分離血清置于-20℃14.3.2樣品轉(zhuǎn)送，除特殊需要外，必需是血清或血漿，置于帶有蓋帽試管內(nèi)，或?qū)⑺芰显嚬苡镁凭珶舴馑溃A防樣品流出。試管上標明姓名、時間、編號，將試管放入專門帶蓋容器內(nèi)，容器材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì)，以免碰碎，容器外標有HIV檢測專用字樣和生物危害標志。路途較遠或氣候炎熱時，容器應置于4℃14.3.314.3.314.3.314.3.3.3對試驗室自采樣品，最好將血液先放置1-2個小時，再用3000離心15分鐘，吸出上清液備用，如在幾天內(nèi)檢測可放在2-8℃冰箱中，如要貯存，置于14.3.414.3.4.114.3.4.214.3.414.3.414.3.5進行酶聯(lián)吸附試驗時，應依據(jù)樣品數(shù)量將適宜數(shù)量酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上酶標板條必需保持完整（不足部分可用廢棄微孔添充），檢驗加樣器加樣刻度是否和試劑盒要求加樣量相符，根據(jù)原始統(tǒng)計表表明位置加入多種質(zhì)控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴格根據(jù)試劑盒說明書要求操作，通常先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要正確，小心不要使吸頭碰著酶標板孔上包被抗原。為確保加樣正確，最好使用多孔道加樣器，使用時注意預防吸頭間交叉污染。其它試驗方法也應按攝影關要求進行。14.3.6貼好封板膜，根據(jù)試劑盒要求溫度和時間進行溫育，最好選擇濕育方法。14.3.7開啟洗板機前，先檢驗洗板機廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。根據(jù)試劑盒要求，選擇、修改洗扳方法、洗滌次數(shù)和浸泡時間，依據(jù)所用酶標板條數(shù)確定洗板道數(shù)，依據(jù)酶標板位置調(diào)整洗頭位置，然后開始洗板，洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道。14.3.814.3.914.3.1014.3.1114.3.1214.3.1314.3.1314.3.1314.3.13.3以上兩個條件俊被接收后，依據(jù)試劑盒要求計算cutoff值。小于cutoff值標本為陰性，大于或等于cutoff值得標本為陽性，在cutoff±14.3.14將試驗結(jié)果登記在級路標和標本試劑表上，將OD值打印結(jié)果貼在原始統(tǒng)計表上，檢驗原始統(tǒng)計表是否填寫完整，操作者，復核者簽字。陰性結(jié)果出具HIV抗體篩查報考，陰性結(jié)果填寫HIV抗體篩查陽性送檢單。14.3.15陰性標本搜集血清冷凍保留十二個月。并填寫陰性血清保留統(tǒng)計表，陽性標本搜集血清封口包好，冷藏運輸確定試驗室。14.4細菌性疾病檢測工作試驗室生物安全規(guī)程14..4.1試驗室管理制度14.1.1.1試驗室入口處必需貼上生物危險標志，注明危險因子，生物安全等級，試驗室責任人和相關責任人姓名和電話。14.4.1.2試驗室應有顯著區(qū)域劃分，清潔區(qū)，半污染區(qū)和污染區(qū)。14.4.1.3不管進入試驗室時間長短，必需填寫工作日志。要嚴格遵守試驗室一切操作規(guī)程。14.4.1.4進行細菌性疾病檢測操作時，需有兩名工作人員同時進入試驗室，盡可能避免單獨工作。14.4.1.5在對大批量標本和菌株進行分離培養(yǎng)和藥敏試驗前，應于中心主任和試驗室主任討論，必需時加強預防方法。14.4.1.6外來進修，參觀人員必需學習試驗室一切規(guī)章制度和相關操作規(guī)程，經(jīng)試驗室主任同意方可進入試驗室。14.4.2標本采集人員安全要求14.4.2.1標本采集人員防護：采集鼻拭子、咽拭子等特殊標本時，采集人員應穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術手套，采集動物尸體臟器標本時，采集人員應穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術手套，腳穿鞋套或雨靴。14.4.2.2發(fā)覺患畜急性死亡時，在排除炭疽感染等烈性人畜共患病后，方可進行剖解。剖解時，要做好個人防護，嚴防操作人員感染，同時要做好尸體無害化處理和環(huán)境消毒工作，預防疫病傳輸，并對樣品起源、采集樣品和方法等作具體統(tǒng)計。采樣時，應嚴格遵照無菌操作要求，采樣次序通常為：棉拭子——血液——分泌物——排泄物——體液——實質(zhì)性器官——其它組織，即先采集體表和可暴露樣品，最終進行剖解采樣。14.4.2.3采集標本污染器材處理：采集標本容器等污染器材均需高壓處理。14.4.3標本運輸安全要求檢驗標本需并放置在專用標本運輸箱內(nèi)，液體標本留置在特制（直徑4cm，高2cm）光口蓋密閉塑料盒，運輸過程中切勿倒置,嚴防標本外溢或掉出。由有專員送至試驗室，標本送達后標本運輸箱立即用乙醇或石碳酸等化學消毒劑或高壓措施根本消毒。14.4.414.4.4.1細菌學試驗室要求應含有安全設備,緩沖間試驗室條件應滿足工作任務要求，有完善試驗設施，試驗室環(huán)境應清潔，衛(wèi)生，平靜，無污染，試驗室內(nèi)管線設置應整齊，要有安全管理方法和報警系統(tǒng)，應有搶救設施，房間數(shù)量不少于七間，包含試驗室準備室，培養(yǎng)基制備室，顯微鏡檢驗室，圖片檢驗室，接種室，培養(yǎng)室高壓消毒室等。含有完善質(zhì)量確保體系中應有明確分級責任制度，以確保檢驗工作質(zhì)量，確保檢驗，復核，科研結(jié)果等各項匯報正確可靠性。14.4.4.2試驗室儀器設備及功效要求細菌學或血清學檢驗時必需在二級生物安全柜內(nèi)進行，無菌操作內(nèi)禁放雜物，并應制訂地面、門窗、墻壁、設施等定時清潔、滅菌規(guī)程，操作間沒有紫外線燈；試驗室內(nèi)應光線明亮，含有性能良好Ⅱ型生物安全柜，恒溫培養(yǎng)儀器，雙目生物顯微鏡，蒸汽凝固滅菌箱，高壓蒸汽滅菌鍋等儀器設備，并對多種儀器專員管理，定時檢定,對不合格，待修，待檢儀器，要有顯著德狀態(tài)標志，并應立即進行對應處理。儀器使用人應經(jīng)考評合格后方可操作儀器。14.4.4.3對檢驗人員安全要求從事細菌學檢驗工作人員須經(jīng)培訓后方能參與操作，并嚴格根據(jù)操作規(guī)則和國家標準進行各項試驗，正確診療試驗結(jié)果，培訓標準由中心依據(jù)國家標準和要求自行制訂，經(jīng)過考評后，還須和有資格工作人員一同工作3個月，才能取得操作資格，非專業(yè)人員，無專業(yè)技術職稱者不得從事檢驗技術工作。14.4.4.4進入試驗室規(guī)章制度a.非試驗室工作人員一律嚴禁進入試驗區(qū)。b.試驗室內(nèi)嚴禁飲食、吸煙，接待訪客和喧嘩。c.進行細菌學檢驗操作時，需有兩名工作人員同時進入試驗室。d.工作人員如有皮膚損傷，發(fā)燒，感冒和妊娠六個月以上者，不能進入試驗室。e.工作完成，檢驗各試驗室水、電、防火設備，打開防盜報警裝置。f.從事和毒菌相關（尤其是人畜共患病）工作后，7日內(nèi)不可離開試驗室所在城市。如出現(xiàn)身體不適現(xiàn)象，應在試驗室所在地醫(yī)療預防控制部門進行醫(yī)學觀察，因工作原因必需離開時，用口服抗菌藥品預防。14.4.4.5意外事故及處理a.試驗過程中，操作臺或地面污染，如菌液溢出,打破細菌培養(yǎng)皿和藥敏管等，應立即噴灑消毒液，待消毒液根本浸泡30分鐘后，進行清理。