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文檔簡介
上海中學(xué)2024年高三第二次聯(lián)考生物試卷考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2.請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.圖甲是縮手反射的示意圖,圖乙和圖丙分別為圖甲中的d和e的放大示意圖。下列相關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是A.刺激圖甲中的b點(diǎn),效應(yīng)器a會(huì)發(fā)生收縮反應(yīng),該過程可稱為反射B.圖乙中的A為突觸小體,B為突觸后膜,前者中的小泡內(nèi)儲(chǔ)存的是信號(hào)分子C.刺激圖丙中的A點(diǎn)時(shí),A處膜外鈉離子內(nèi)流,興奮傳導(dǎo)的方向與膜內(nèi)電流方向一致D.圖丙中AB段小于BD段,同時(shí)同強(qiáng)度刺激A、D兩點(diǎn),B處膜電位僅出現(xiàn)一次外負(fù)內(nèi)正2.下圖表示小麥的三個(gè)純合品系,甲、乙不抗矮黃病,丙抗矮黃病。圖中Ⅰ、Ⅱ表示染色體,A為矮桿基因,B為抗矮黃病基因(B位于Ⅰ或Ⅱ染色體上)。乙品系Ⅰ染色體中黑色部分是來自偃麥草的染色體片段,與小麥的Ⅰ染色體不能正常配對(duì)。下列敘述錯(cuò)誤的是(減數(shù)分裂中配對(duì)異常的染色體會(huì)隨機(jī)分配,不影響子代的存活,不考慮基因突變)A.甲和乙雜交所得的F1,可能產(chǎn)生4種基因型的配子B.若丙Ⅰ染色體片段缺失,其自交后代出現(xiàn)不抗矮黃病植株,則基因B位于Ⅰ染色體上C.若甲與丙雜交,F(xiàn)1中的Ⅱ號(hào)三體與乙雜交,F(xiàn)2中抗矮黃病:不抗矮黃病=5∶1,則基因B位于Ⅱ染色體上D.若基因型為AaBb的品系自交后代性狀分離比為9∶3∶3∶1,則B基因一定位于Ⅰ染色體上3.克里斯琴認(rèn)為:種群數(shù)量上升時(shí),種內(nèi)個(gè)體間的社群壓力會(huì)影響種群數(shù)量,其調(diào)節(jié)機(jī)制如下圖所示,以下說法不正確的是()A.社群壓力會(huì)導(dǎo)致漿細(xì)胞分泌的抗體數(shù)量減少B.社群壓力會(huì)導(dǎo)致機(jī)體胰島B細(xì)胞分泌的胰島素增多C.社群壓力通過神經(jīng)、體液、免疫三種調(diào)節(jié)方式調(diào)控種群數(shù)量D.社群壓力會(huì)導(dǎo)致出生率升高,死亡率下降,從而改變種群數(shù)量4.下圖所示為某種多倍體的培育過程,下列有關(guān)這一過程的描述,正確的是A.物種a和物種b是生物繁殖和進(jìn)化的基本單位B.雜種植物細(xì)胞內(nèi)的染色體來自不同物種,一定不含同源染色體C.圖示多倍體的形成過程中,既發(fā)生了染色體變異,也發(fā)生了基因重組D.圖示雜種植物的形成,說明物種a和物種b之間不存在生殖隔離5.下列關(guān)于元素和化合物的敘述正確的是()A.DNA和RNA屬于核酸,都是細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)B.脂質(zhì)存在于所有細(xì)胞中,是組成細(xì)胞的重要化合物C.Mg是植物細(xì)胞中的微量元素,缺Mg可使葉片發(fā)黃D.強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、低溫或高溫都會(huì)使蛋白質(zhì)變性失活6.新型冠狀病毒感染的肺炎是一種急性感染性肺炎,其病原體為2019新型冠狀病毒(SARS-CoV-2注:國際病毒分類委員會(huì)命名),屬于單股正鏈RNA病毒。下列相關(guān)敘述正確的是()A.人體的細(xì)胞能為SARS-CoV-2的繁殖提供模板、原料和能量等B.SARS-CoV-2病毒侵入人體后,在內(nèi)環(huán)境中不會(huì)發(fā)生增殖C.該病毒在人體細(xì)胞的核糖體上合成多肽鏈需要RNA聚合酶的催化D.患者在感染初期須要用抗生素進(jìn)行治療以阻止SARS-CoV-2病毒的擴(kuò)散二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)幾丁質(zhì)是構(gòu)成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分,高等動(dòng)植物和人類體內(nèi)不含幾丁質(zhì)。某些微生物能合成幾丁質(zhì)酶(胞外酶),將幾丁質(zhì)降解為N-乙酰氨基葡萄糖??蒲腥藛T通過微生物培養(yǎng)獲得幾丁質(zhì)酶,用于生物防治。回答下列問題。(l)幾丁質(zhì)酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢(shì)是____。(2)欲篩選幾丁質(zhì)酶高產(chǎn)菌株,應(yīng)在培養(yǎng)基中加入幾丁質(zhì),為微生物提供____。菌株接種前對(duì)培養(yǎng)基滅菌,殺死培養(yǎng)基內(nèi)外_______。菌株篩選成功后,可將培養(yǎng)的菌液與滅菌后的___混合,在-20℃長期保存。(3)將篩選出的菌株接種到培養(yǎng)基中,30℃恒溫振蕩培養(yǎng)至幾丁質(zhì)降解完全,得到幾丁質(zhì)酶發(fā)酵液,將其離心,保留_________(填“上清液”或“沉淀”),獲得粗酶樣品;在膠體幾丁質(zhì)固體培養(yǎng)基上打孔,將粗酶樣品加入孔內(nèi),恒溫靜置8h,根據(jù)透明圈的大小可判____________________。(4)通過SDS-___法進(jìn)行幾丁質(zhì)酶樣品純度檢測(cè),加入SDS的目的是____。8.(10分)閱讀以下資料,回答相關(guān)問題。資料1:小鼠制備的抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕試劑盒”,檢測(cè)早孕的準(zhǔn)確率在90%以上。資料2:葡萄糖異構(gòu)酶在工業(yè)上應(yīng)用廣泛,為提高其熱穩(wěn)定性,朱國萍等人在確定第138位甘氨酸為目標(biāo)氨基酸后,用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸,結(jié)果其最適反應(yīng)溫度提高了10—12℃,使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)更具剛性。資料3:巴西是全球最大的甘蔗生產(chǎn)國,但是甘蔗易受螟蟲的侵害。2017年6月8日,巴西向世界宣布,全球首款能抵抗螟蟲的轉(zhuǎn)基因甘蔗已培育成功,并且批準(zhǔn)該品種進(jìn)入市場(chǎng)。資料4:大腸埃希菌,俗稱大腸桿菌。是人和動(dòng)物腸道中的正常棲居菌。自來水一旦被它污染,就有可能引發(fā)腸道傳染病,甚至流行病。因此,必須對(duì)自來水進(jìn)行嚴(yán)格的檢測(cè),以確保飲水安全。我國規(guī)定1000ml自來水中的大腸桿菌數(shù)不得超過3個(gè)。(1)資料1中,在該“單抗”的生產(chǎn)過程中,將______________作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行接種后,從脾臟中提取B淋巴細(xì)胞,并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,選出融合的雜種細(xì)胞,對(duì)該細(xì)胞還需進(jìn)行____________________,經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的____________。單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)有_________________。(2)資料2中提到的生物技術(shù)屬于____工程的范疇。在該實(shí)例中,直接需要操作的____________(選填“肽鏈結(jié)構(gòu)”、“蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)”、“基因結(jié)構(gòu)”)。(3)資料3中獲得轉(zhuǎn)基因甘蔗的過程中,核心步驟是________________________,為了避免目的基因和運(yùn)載體的自身連接成環(huán)和反向連接,應(yīng)該采取的措施是用____________________對(duì)目的基因和載體分別進(jìn)行切割。(4)實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行無菌處理。將漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進(jìn)行
_________________滅菌。培養(yǎng)基進(jìn)行_______________滅菌。為了鑒定大腸桿菌,在培養(yǎng)基中應(yīng)加入_______________________。在該培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)_________________色。9.(10分)食品安全是關(guān)系到千萬人健康和生命的大事,為檢測(cè)某食品廠生產(chǎn)的果汁中總菌量和大腸桿菌量是否超標(biāo),常采用微生物培養(yǎng)的方法,下表為培養(yǎng)細(xì)菌常用的培養(yǎng)基配方,請(qǐng)回答下列問題:牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂蒸餾水1.0g2.0g1.0g3.0g定容至30mL(1)該培養(yǎng)基是_____(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中的蛋白胨主要為細(xì)菌的生長提供_________等營養(yǎng)。培養(yǎng)基制備好以后,在接種前通常需要檢測(cè)其是否被污染,檢測(cè)方法是__________________。(2)應(yīng)用_________________法進(jìn)行接種,該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測(cè)樣品中的活菌數(shù),其原理是_________________________。(3)培養(yǎng)一定時(shí)間后,對(duì)_____________進(jìn)行計(jì)數(shù),以得出總菌量的數(shù)據(jù),若要得到大腸桿菌量的數(shù)據(jù),應(yīng)該在配制培養(yǎng)基時(shí)向培養(yǎng)基中加入____________試劑。10.(10分)宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤之一,人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)??笻PV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV,從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生,以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程。據(jù)圖回答下列問題:(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有________________________。(2)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是____________。(3)滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的_______和_______能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝集,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子中心排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。(4)對(duì)于抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀釋法,即稀釋細(xì)胞到3~11個(gè)/mL,每孔加入細(xì)胞稀釋液1.1mL,目的是____________。(5)可以利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)抗HPV抗體進(jìn)行改造以延長其體外保存的時(shí)間,蛋白質(zhì)工程是指以____________的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過______________,對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。11.(15分)在懷化市城鎮(zhèn)化快速發(fā)展的過程中,隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人口增長,污水排放量增加,污水處理越來越困難。如何科學(xué)有效地處理污水,成為懷化市城鎮(zhèn)化過程中亟待解決的問題。建立人工濕地公園是首選方案,可以獲得生態(tài)、社會(huì)和經(jīng)濟(jì)三重效益。如圖甲是某人工濕地公園污水處理示意圖。請(qǐng)回答下列問題:(1)圖甲濕地中蘆葦、綠藻和黑藻等植物的分層配置,體現(xiàn)了群落的____________結(jié)構(gòu)。人工濕地中植物的根系不僅能吸收____________等營養(yǎng)物質(zhì),還能為____________吸附和代謝提供良好的環(huán)境條件,利于它們通過分解作用降解污水中的有機(jī)物。但人們對(duì)污水排放量還要加以控制,原因是人工濕地以____________為基礎(chǔ)的____________是有限的。(2)圖乙表示該人工濕地公園草魚的種群數(shù)量增長速率隨時(shí)間的變化情況,如果在t1時(shí)用標(biāo)志重捕法調(diào)查草魚的種群密度,第一次捕獲40條全部標(biāo)志釋放,一段時(shí)間后進(jìn)行了第二次捕捉,其中未標(biāo)志的30條、標(biāo)志的10條,估算草魚種群在t2時(shí)是____________條。(3)在此基礎(chǔ)上,某地進(jìn)一步建立了一個(gè)集污水凈化、休閑、養(yǎng)魚為一體的新型人工生態(tài)系統(tǒng)??蒲行〗M對(duì)該新型人工生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)進(jìn)行定量分析,得出相關(guān)數(shù)據(jù),如下表所示(部分?jǐn)?shù)據(jù)未給出,能量單位為,肉食性動(dòng)物作為只占據(jù)一個(gè)營養(yǎng)級(jí)研究)。生物類型X傳遞給分解者的能量未利用的能量傳給下一營養(yǎng)級(jí)的能量外來有機(jī)物輸入的能量生產(chǎn)者44.05.095.020.00植食性動(dòng)物9.51.511.0Y5.0肉食性動(dòng)物6.30.56.50.711.0據(jù)表分析,流入該生態(tài)系統(tǒng)的總能量為____________,X是指____________的能量,數(shù)據(jù)Y為____________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、A【解析】刺激圖甲中傳出神經(jīng)上的b點(diǎn),效應(yīng)器a會(huì)發(fā)生收縮反應(yīng),因沒有經(jīng)過完整的反射弧,該過程不能稱為反射,A錯(cuò)誤;圖乙中的A為突觸小體,B為突觸后膜,前者中的小泡內(nèi)儲(chǔ)存的神經(jīng)遞質(zhì)是信號(hào)分子,B正確;刺激圖丙中的A點(diǎn)時(shí),A處膜外鈉離子內(nèi)流,A處膜兩側(cè)的電位表現(xiàn)為外負(fù)內(nèi)正,與A處相鄰的未刺激部位的膜兩側(cè)的電位表現(xiàn)為外正內(nèi)負(fù),而電流是由正電位流向負(fù)電位,所以此時(shí)興奮傳導(dǎo)的方向與膜內(nèi)電流方向一致,C正確;圖丙中AB段小于BD段,同時(shí)同強(qiáng)度刺激A、D兩點(diǎn),A處產(chǎn)生的神經(jīng)沖動(dòng)通過B處與D處產(chǎn)生的神經(jīng)沖動(dòng)在AD段的中點(diǎn)相遇而消失,所以B處膜電位僅出現(xiàn)一次外負(fù)內(nèi)正,D正確?!军c(diǎn)睛】本題以圖文結(jié)合為情境,綜合考查學(xué)生對(duì)反射與反射弧、突觸的結(jié)構(gòu)、興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)和在神經(jīng)細(xì)胞間的傳遞的理解和掌握情況。解答本題的前提是:熟記并理解有關(guān)知識(shí)點(diǎn)、系統(tǒng)地全面地構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上,明辨圖甲、乙字母所示的結(jié)構(gòu)名稱,準(zhǔn)確定位圖乙反射弧的各個(gè)組成,運(yùn)用所學(xué)相關(guān)知識(shí)及從題圖中獲取的有效信息進(jìn)行綜合分析判斷。2、D【解析】
基因自由組合定律的實(shí)質(zhì):(1)位于非同源染色體上的非等位基因的分離或組合是互不干擾的;(2)在減數(shù)分裂過程中,同源染色體上的等位基因彼此分離的同時(shí),非同源染色體上的非等位基因自由組合?!驹斀狻緼、甲和乙雜交所得的F1減數(shù)分裂時(shí),來自甲、乙的Ⅰ染色體不能正常配對(duì),隨機(jī)移向細(xì)胞的一極,可能產(chǎn)生4種基因型的配子,A正確;B、若丙Ⅰ染色體片段缺失,其自交后代出現(xiàn)不抗矮黃病植株,說明缺失片段包含B基因,即基因B位于Ⅰ染色體上,B正確;C、若基因B位于Ⅱ染色體上,甲與丙雜交,F(xiàn)1中的Ⅱ號(hào)三體BBb可產(chǎn)生B、BB、Bb、b四種配子,且比例為2∶1∶2∶1,與乙bb雜交,F(xiàn)2中抗矮黃病∶不抗矮黃病=5∶1,C正確;D、基因型為AaBb的品系自交后代性狀分離比為9∶3∶3∶1,則B基因一定位于Ⅱ染色體上,D錯(cuò)誤。故選C?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是:(1)明確甲和乙雜交所得的F1減數(shù)分裂時(shí),來自甲、乙的Ⅰ染色體不能正常配對(duì),隨機(jī)移向細(xì)胞的一極,因此可能產(chǎn)生4種基因型的配子。(2)明確甲、乙、丙均為純合品系,若基因B位于Ⅱ染色體上,則丙的基因型為BBB,甲與丙雜交,F(xiàn)1中的Ⅱ號(hào)三體應(yīng)為BBb,減數(shù)分裂時(shí),兩條Ⅱ號(hào)染色體配對(duì),不配對(duì)的Ⅱ號(hào)染色體隨機(jī)移向細(xì)胞的一極,可產(chǎn)生B、BB、Bb、b四種配子,且比例為2∶1∶2∶1。3、D【解析】
據(jù)圖分析,①下丘腦通過傳出神經(jīng)作用于胰島B細(xì)胞,使其分泌的胰島素增加,導(dǎo)致低血糖、休克;②下丘腦作用于垂體,使得生長激素減少,生長代謝阻礙,漿細(xì)胞產(chǎn)生的抗體減少;兩者共同作用增加死亡率。③垂體產(chǎn)生的促性腺激素減少,進(jìn)而影響生物的出生率,使種群數(shù)量減少?!驹斀狻緼、據(jù)圖分析,社群壓力會(huì)導(dǎo)致抗體數(shù)量減少,抗體是由漿細(xì)胞分泌,A正確;B、據(jù)圖分析,社群壓力會(huì)導(dǎo)致機(jī)體低血糖、休克,說明可能是胰島B細(xì)胞分泌的胰島素增多,B正確;C、據(jù)圖分析,種群數(shù)量過多時(shí),可通過神經(jīng)、體液、免疫的調(diào)節(jié)方式,影響種群的出生率和死亡率,使種群數(shù)量減少,C正確;D、據(jù)圖分析,社群壓力會(huì)使得性激素減少,生殖細(xì)胞成熟減少,進(jìn)而降低出生率,另外對(duì)疾病和外界抵抗力降低,增加死亡率,從而使種群數(shù)量降低,D錯(cuò)誤。故選D。4、C【解析】
本題以圖文結(jié)合為情境,考查學(xué)生對(duì)現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點(diǎn)、多倍體育種等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力,以及獲取信息、分析問題的能力?!驹斀狻糠N群是生物繁殖和進(jìn)化的基本單位,A錯(cuò)誤;雜種植物細(xì)胞內(nèi)的染色體來自不同物種,但可能含同源染色體,例如:二倍體西瓜和四倍體西瓜雜交得到的三倍體西瓜,B錯(cuò)誤;圖示多倍體的形成過程中,經(jīng)歷了有性雜交、染色體加倍,因此既發(fā)生了染色體變異,也發(fā)生了基因重組,C正確;不同物種之間存在生殖隔離,圖示雜種植物是不育的,說明物種a和物種b之間存在生殖隔離,D錯(cuò)誤。5、B【解析】
大量元素,是指植物正常生長發(fā)育需要量或含量較大的必需營養(yǎng)元素。一般指碳、氫、氧、氮、磷和鉀6種元素。在正常生長條件下,這些元素的含量占植物干物質(zhì)質(zhì)量的1%以上。微量元素約有70種,指的是在人體中含量低于人體質(zhì)0.01%~0.005%的元素包括鐵、碘、鋅、硒、氟、銅、鈷、鎘、汞、鉛、鋁、鎢、鋇、鈦、鈮、鋯、銣、鍺和稀土元素等。一般植物含鎂量為干物質(zhì)的0.05~0.7%。鎂在植物體內(nèi)屬于移動(dòng)性較強(qiáng)的元素,進(jìn)入根系中柱的鎂,通過木質(zhì)部空間到達(dá)植物地上各器官。鎂是葉綠素的主要成分,是植物體內(nèi)的大量元素?!驹斀狻緼、DNA和RNA屬于核酸,DNA是細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì),A錯(cuò)誤;B、脂質(zhì)包含脂肪、磷脂、固醇等,如磷脂是細(xì)胞膜的重要成分,因此脂質(zhì)存在于所有細(xì)胞中,是組成細(xì)胞的重要化合物,B正確;C、Mg是植物細(xì)胞中的大量元素,缺Mg可使葉片發(fā)黃,C錯(cuò)誤;D、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、或高溫都會(huì)使蛋白質(zhì)變性失活,低溫不會(huì),D錯(cuò)誤。故選B。6、B【解析】
抗生素,是指由微生物(包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動(dòng)植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其他活性的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物,能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。臨床常用的抗生素有微生物培養(yǎng)液中的提取物以及用化學(xué)方法合成或半合成的化合物。抗生素等抗菌劑的抑菌或殺菌作用,主要是針對(duì)“細(xì)菌有而人(或其他動(dòng)植物)沒有”的機(jī)制進(jìn)行殺傷,包含四大作用機(jī)理,即:抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成,增強(qiáng)細(xì)菌細(xì)胞膜通透性,干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)合成以及抑制細(xì)菌核酸復(fù)制轉(zhuǎn)錄?!驹斀狻緼、人體的細(xì)胞能為SARS-CoV-2的繁殖提供原料和能量等,模板來自病毒本身,A錯(cuò)誤;B、病毒需寄生在宿主細(xì)胞內(nèi)才能繁殖,SARS-CoV-2病毒侵入人體后,在內(nèi)環(huán)境中不會(huì)發(fā)生增殖,B正確;C、RNA聚合酶催化的是RNA的形成,是轉(zhuǎn)錄的過程,而該病毒在人體細(xì)胞的核糖體上合成多肽鏈?zhǔn)欠g,需要合成多肽鏈的相關(guān)酶來催化,C錯(cuò)誤;D、抗生素對(duì)病毒無效,D錯(cuò)誤。故選B。二、綜合題:本大題共4小題7、無毒、無污染碳源、氮源所有的微生物,包括芽孢和孢子甘油上清液幾丁質(zhì)酶活力的高低聚丙烯酰胺凝膠電泳使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性;消除凈電荷對(duì)遷移率的影響【解析】
1、培養(yǎng)基的成分:碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子等。培養(yǎng)基按照用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基具有能夠滿足篩選微生物正常生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)或條件,而不利于非篩選微生物的生長。而獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,因此采用無菌技術(shù)避免雜菌的污染,對(duì)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌處理,目的是殺傷物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。2、凝膠色譜法原理:凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法,相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程長,移動(dòng)的速度慢,相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程短,移動(dòng)的速度快,因此相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離?!驹斀狻浚?)幾丁質(zhì)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),其作用主要是降解幾丁質(zhì),而幾丁質(zhì)是構(gòu)成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分,且高等動(dòng)植物和人類體內(nèi)不含幾丁質(zhì),幾丁質(zhì)酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢(shì)是無污染。(2)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基必不可少的條件是碳源、氮源、無機(jī)鹽、水、適宜pH以及溫度等。要篩選幾丁質(zhì)酶高產(chǎn)菌株,應(yīng)在培養(yǎng)基中加入幾丁質(zhì)作為微生物營養(yǎng)來源,幾丁質(zhì)為N-乙酰葡糖胺通過β-1,4-糖苷鍵連接聚合而成的多糖,為其提供碳源和氮源。微生物的接種過程需要嚴(yán)格無菌操作,防止菌株受到污染,在菌株接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基滅菌,殺死培養(yǎng)基內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子。污染菌液的長期保存應(yīng)隔絕空氣,防止受到其他污染,通常在菌株篩選成功后,將培養(yǎng)的菌液與滅菌的甘油混合,在-20℃長期保存。(3)將幾丁質(zhì)發(fā)酵液離心,重的菌株沉淀在底部,而粗酶樣品分布于上清液;通過觀察固體培養(yǎng)基上是否產(chǎn)生透明圈來確定菌株是否具有降解幾丁質(zhì)的酶活性,而透明圈的大小指幾丁質(zhì)酶活力的高低。(4)幾丁質(zhì)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)樣品純度檢測(cè)采用的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子大小等因素,為了消除凈電荷對(duì)遷移率的影響,可以在凝膠中加入SDS?!军c(diǎn)睛】本題考查微生物的篩選和培養(yǎng)以及蛋白質(zhì)的純度的鑒定方法的知識(shí)點(diǎn),要求學(xué)生掌握培養(yǎng)基的成分和類型,把握選擇培養(yǎng)基的作用及其特點(diǎn),能夠根據(jù)題意判斷該題中微生物選擇的方法,識(shí)記滅菌的目的和生物防治的優(yōu)點(diǎn),理解蛋白質(zhì)純度的鑒定方法和原理,這是該題考查的重點(diǎn)。8、人絨毛膜促性腺激素克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備蛋白質(zhì)基因結(jié)構(gòu)基因表達(dá)載體的構(gòu)建使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的(不同)限制酶干熱高壓蒸汽伊紅—美藍(lán)黑【解析】
1、單克隆抗體的制備過程的細(xì)節(jié):(1)二次篩選:①篩選得到雜交瘤細(xì)胞(去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞);②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。(2)細(xì)胞來源:B淋巴細(xì)胞:能產(chǎn)生特異性抗體,在體外不能無限繁殖;骨髓瘤細(xì)胞:不產(chǎn)生專一性抗體,體外能無限繁殖。(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。(4)提取單克隆抗體:從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。2、單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,能大量制備。3、基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲??;第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建;第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。【詳解】(1)資料1中,在該“單抗”的生產(chǎn)過程中,將人絨毛膜促性腺激素作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行接種后,從脾臟中提取B淋巴細(xì)胞,并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,選出融合的雜種細(xì)胞,對(duì)該細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的雜交瘤細(xì)胞。單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)有特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備。(2)資料2是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì),使之符合人類需求,屬于蛋白質(zhì)工程,其原理是通過改造基因來獲得相應(yīng)功能的蛋白質(zhì)。(3)基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是構(gòu)建基因表達(dá)載體,為了避免目的基因和運(yùn)載體的自身連接成環(huán)和反向連接,應(yīng)該采取的措施是使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的(不同)限制酶對(duì)目的基因和運(yùn)載體分別進(jìn)行切割。(4)微生物培養(yǎng)過程中要注意防止雜菌污染,培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進(jìn)行干熱或高壓蒸汽滅菌,為了鑒定大腸桿菌,在培養(yǎng)基中應(yīng)加入伊紅——美藍(lán)。在該培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色?!军c(diǎn)睛】本題考查單克隆抗體的制備過程和基因工程等相關(guān)知識(shí),意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn),把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力;能運(yùn)用所學(xué)知識(shí),準(zhǔn)確判斷問題的能力,屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。9、固體氮源、碳源(和維生素)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落形成或:將空白的培養(yǎng)基在適宜條件下放置一段時(shí)間,觀察是否形成菌落或:以未接種(空白)培養(yǎng)基為對(duì)照,觀察是否形成菌落稀釋涂布平板當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌培養(yǎng)基中的菌落(或平板上的菌落)伊紅和美藍(lán)【解析】
1、接種微生物常用的接種方法由平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種接種方法:①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板、接種、劃線、在恒溫箱里培養(yǎng),在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落;②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。2、根據(jù)物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)化學(xué)性質(zhì)可將培養(yǎng)基分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基;根據(jù)功能可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。【詳解】(1)由于該培養(yǎng)基中添加了凝固劑瓊脂,故該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基;培養(yǎng)基中的蛋白胨主要為細(xì)菌的生長提供氮源、碳源(和維生素)等營養(yǎng);培養(yǎng)基制備好以后,在接種前通常需要檢測(cè)其是否被污染,檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落形成。(2)接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,但只有稀釋涂布平板法才可用于對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù),該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測(cè)樣品中的活菌數(shù),其原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。(3)培養(yǎng)一定時(shí)間后,對(duì)培養(yǎng)基中的菌落(或平板上的菌落)進(jìn)行計(jì)數(shù),以得出總菌量的數(shù)據(jù);若要得到大腸桿菌量的數(shù)據(jù),應(yīng)該在配制培養(yǎng)基時(shí)向培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)試劑?!军c(diǎn)睛】本題考查了培養(yǎng)基的成分和分類、常用的微生物的接種方法、估算樣品中的菌落數(shù)的方法等知識(shí),要求考生能夠掌握微生物分離與純化的一般方法等。10、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)糖蛋白一些酶使每個(gè)孔內(nèi)細(xì)胞一般不多于一個(gè),達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能基因修飾或基因合成【解析】
1.動(dòng)物細(xì)胞融合指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程,融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜種細(xì)胞。2.單克隆抗體制備過程中的兩次篩選:第一次用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞;第二次用專一抗體檢測(cè)得到能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。3.動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等。其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物工程技術(shù)的基礎(chǔ)。4.滅火病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。5.蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?!驹斀狻浚?)單克隆抗體制備過程中需要經(jīng)過骨髓瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞的融合及雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),故涉及的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的融合。(2)由分析可知,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物工程技術(shù)的基礎(chǔ)。(3)由分析可知,病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。(4)克隆化的方法最常用的是有限稀釋法,即稀釋細(xì)胞到3~11個(gè)/mL,每孔加入細(xì)胞稀釋液1
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