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PAGEPAGE(2011年江蘇卷)33.(8分)請回答基因工程方面的有關問題:(1)利用PCR技術擴增目的基因,其原理與細胞內DNA復制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎。①從理論上推測,第四輪循環(huán)產物中含有引物A的DNA片段所占的比例為▲。②在第▲輪循環(huán)產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。(2)設計引物是PCR技術關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)都不合理(如下圖),請分別說明理由。①第1組:▲;②第2組:▲。(3)PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能,這是因為▲。(4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨或聯合切割同一種質粒,得到的DNA片段長度如下圖(1kb即1000個堿基對),請在答題卡的指定位置畫出質粒上EcoRV、Mbol的切割位點。33.(8分)(1)①15/16②三(2)①引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補配對而失效②引物I’自身折疊后會出現局部堿基互補配對而失效(3)DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結合到雙鏈DNA片段的引物鏈上(4)見右圖(11年北京卷)31.(16分)T-DNA可能隨機插入植物基因組內,導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時,將地上部分浸入農桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實現轉化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為T1代)。(1)為促進植株側枝發(fā)育以形成更多的花蕾,需要去除,因為后者產生的會抑制側芽的生長。(2)為篩選出已轉化的個體,需將T代播種在含的培養(yǎng)基上生長,成熟后自交,收獲種子(稱為T代)。(3)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將T代播種在含的培養(yǎng)基上,獲得所需個體。(4)經過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起,需將該突變體與植株進行雜交,再自交代后統(tǒng)計性狀分離比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失,從該突變體的表現型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性。(6)根據T-DNA的已知序列,利用PCR技術可以擴增出被插入的基因片段。其過程是:提取植株的DNA,用限制酶處理后,再用將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如右圖)以此為模板,從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取作為引物進行擴增,得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。答案:31(16分)(1)頂芽生長素(2)(一定濃度的)除草劑(3)(一定濃度的)鹽(4)野生型1(降低(6)突變體DNA連接酶B、C(2011年安徽卷)31.(21分)Ⅱ.(9分)家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。(1)進行轉基因操作前,需用___________酶短時處理幼蠶組織,以便獲得單個細胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達,需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。(3)采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經導入家蠶細胞。改PCR反應體系的主要成分應該包含:擴增緩沖液(含Mg2+)、水,4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。(4)利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時,的細胞會產生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中,這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細胞數量,也有利于空氣交換。答案:(1)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)(2)啟動子終止子(3)TaqDNA聚合酶對干擾素基因特異性的DNA引物對(4)增大細胞貼壁生長的附著面積解析:考查的知識點為動物細胞培養(yǎng)和基因工程.(1)與擬南芥t基因的mRNA相比,若油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)椋粒牵?,其末端序列成為“-AGCGCGACCAGAACUCUAA”,則Tn比t多編碼個氨基酸(起始密碼子位置相同,UGA、UAA為終止密碼子)。(2)圖中①應為。若②不能在含抗生素Kan的培養(yǎng)基上生長,則原因是.若③的種皮顏色為,則說明油菜基因與擬南芥T基因的功能相同。(3)假設該油菜基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個t基因,則③中進行減數分裂的細胞在聯會時的基因為;同時,③的葉片卷曲(葉片正常對葉片卷曲為顯性,且與種皮性狀獨立遺傳),用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交,其后代中所占比列最小的個體表現為;?、鄣那o尖培養(yǎng)成16顆植珠,其性狀通常(填不變或改變)。(4)所得的轉基因擬南芥與野生型擬南芥(填是或者不是)同一個物種。答案:31.(16分)(1)2(2)重組質粒(重組DNA分子)重組質粒未導入深褐色(3)TnTntt;黃色正常、黃色卷曲;不變(4)是解析:通過對基因工程和遺傳知識相結合來考查學生對該部分知識的掌握,屬中檔題,較難。油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)锳GA,而末端序列為“——AGCGCGACCAGACUCUAA——”,在擬南芥中的UGA本是終止密碼子不編碼氨基酸,而在油菜中變?yōu)锳GA可編碼一個氨基酸,而CUC還可編碼一個氨基酸,直到UAA終止密碼子不編碼氨基酸。假設油菜Tn基因連接到擬南芥染色體并替換其是一個t基因,注意擬南芥是指實驗有的突變體tt,所以③轉基因擬南芥基因型為Tnt,減數分裂聯會時形成四分體是由于染色體進行了復制,基因也進行了復制,因而基因型為TnTntt。設③轉基因擬南芥的葉片卷曲與正常葉是由B、b基因控制,正常葉為顯性,而該對性狀與種皮性狀為獨立遺傳,則這兩對性狀遵循基因的分離與自由組合定律。則:③轉基因擬南芥╳雙雜合擬南芥TntbbTtBb進行逐對分析:Tnt╳Tt1/4TnT、1/4Tnt、1/4Tt、1/4tt由于Tn和T的功能相同,所以表示為3/4T--(深褐色)、1/4tt(黃色)bb╳Bb1/2Bb(正常葉)、1/2bb(卷曲葉)所以后代中有四種表現型;3/8種皮深褐色正常葉;3/8種皮深褐色卷曲葉1/8種皮黃色正常葉;1/8種皮黃色卷曲葉取③轉基因擬南芥的莖尖培養(yǎng)為植物組織培養(yǎng)為無性生殖,所以后代性一般不變。(排除基因突變)由上可知所得③轉基因擬南芥Tnt和野生型擬南芥TT兩個品種相當于發(fā)生基因突變,沒有隔離,能雜交產生可育后代,因此是同一個種。此套題難度不大,考查識記的偏多,理解推理分析較少,而填空題中類似判斷題型的填空又多,降低了難度,而不能很好考查學生能力,區(qū)分度不明顯。(11年廣東卷)27.(16分)登革熱病毒感染蚊子后,可在蚊子唾液腺中大量繁殖,蚊子在叮咬人時將病毒傳染給人,可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克??茖W家用以下方法控制病毒的傳播。(1)將S基因轉入蚊子體內,使蚊子的唾液腺細胞大量表達S蛋白,該蛋白可以抑制登革熱病毒的復制。為了獲得轉基因蚊子,需要將攜帶S基因的載體導入蚊子的細胞。如果轉基因成功,在轉基因蚊子體內可檢測出、和。(2)科學家獲得一種顯性突變蚊子(AABB)。A、B基因位于非同源染色體上,只有A或B基因的胚胎致死。若純合的雄蚊(AABB)與野生型雌蚊(aabb)交配,F1群體中A基因頻率是,F2群體中A基因頻率是。(3)將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置(如圖11),將該純合的轉基因雄蚊釋放到野生群體中,群體中蚊子體內病毒的平均數目會逐代,原因是。27、答案:(1)受精卵S基因、由S基因轉錄的mRNAS蛋白(2)50%60%(3)減少S基因表達的S蛋白會抑制登革熱病毒復制(11年山東卷)35.(8分)【生物—現代生物科技專題】人類疾病的轉基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉基因模型大鼠的流程如圖所示。(1)卵母細胞除從活體輸卵管中采集外,還可以從處死的雌鼠________中獲取。(2)圖中的高血壓相關基因作為__________,質粒作為_________,二者需用________切割后連接成重組載體,該過程與質粒上含有________有關。(3)子代大鼠如果________和__________,即可分別在水平上說明高血壓相關基因已成功表達,然后可用其建立高血壓轉基因動物模型。(4)在上述轉基因大鼠的培育過程中,所用到的主要胚胎工程技術是___________、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。答案:(1)卵巢(2)目的基因載體同種限制性核酸內切酶(或同種限制酶)限制酶切割位點(3)檢測到體內有相關蛋白出現高血壓(4)體外受精(2011年江蘇卷)16.下列有關植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是DA.愈傷組織是一團有特定結構和功能的薄壁細胞B.二倍體植株的花粉經脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C.用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子D.植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得(2011上海生命科學卷)22.下列關于植物組織培養(yǎng)的表述,錯誤的是A.外植體可以來自于植物的任何細胞B.培養(yǎng)應在無菌條件下進行C.以花粉作為外植體可得到單倍體植株D.不同階段的培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素的比例不同答案:A(2011年江蘇卷)14.關于現代生物技術應用的敘述,錯誤的是BA.蛋白質工程可合成自然界中不存在的蛋白質B.體細胞雜交技術可用于克隆動物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術可用于植物莖尖脫毒D.動物細胞培養(yǎng)技術可用于轉基因動物的培育(2011年浙江卷)31.(12分)(1)實驗分組:甲組:培養(yǎng)液+Y細胞+-TdR(標記的胸腺嘧啶脫氧核苷)+生理鹽水乙組:培養(yǎng)液+Y細胞+-TdR+X(生理鹽水配制)每組設置若干個重復樣品。(2)分別測定兩組的CRD(細胞內的放射性強度),求每組的平均值。(3)將各樣品在適宜條件下培養(yǎng)合適時間后,測定其CRD,求每組平均值并進行統(tǒng)計分析。(與說明,答題時用X、CRD、3H-TdR表示相關名詞;Y細胞是能增殖的高等動物體細胞)請回答:(1)實驗目的:(2)預測實驗結果集結論:__________。(3)實驗中采用3H-TdR的原因:_____________。答案:31.(13分)探究X對Y細胞增殖(DNA合成)的影響如果乙組CRD明顯高于甲組,說明X對Y細胞增殖(DNA合成)有促進作用。如果乙組CRD與甲組基本相同,說明X對Y細胞增殖(DNA合成)無影響。如果乙組CRD明顯低于甲組,說明X對Y細胞增殖(DNA合成)有抑制作用。(3)3H-TdR是DNA合成的原料之一,可根據CRD變化來判斷細胞增殖(DNA合成)情況(11天津理綜卷)8.(14分)絮凝性細菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能與石油污水中的懸浮顆粒和有機物等形成絮狀沉淀,起到凈化污水的作用。為進一步提高對石油污水的凈化效果,將絮凝性細菌和石油降解菌融合,構建目的菌株。其流程圖如下。據圖回答:(1)溶菌酶的作用是_________________________。(2)PEG的作用是_________________________。(3)經處理后,在再生培養(yǎng)基上,未融合的A、B難以生長。圖中AB融合菌能生長和繁殖的原因是____________________________________________________________________。(4)目的菌株的篩選:篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有_________________的培養(yǎng)基上生長的AB融合菌,選擇效果最好的最為目的菌株。(5)為探究目的菌株不同發(fā)酵時間發(fā)酵液的絮凝效果,將目的菌株進行發(fā)酵培養(yǎng),定時取發(fā)酵液,加入石油污水中:同時設置_____________________________為對照組。經攪拌、靜置各3分鐘后,分別測定上層水樣的石油濃度COD值(COD值越高表示有機物污染程度越高),計算石油去除率和COD去除率,結果如下圖。(6)目的菌的種群增長曲線是__________________型。在40~44小時,發(fā)酵液對石油污水的凈化效果最好,其原因是_________________________________________________________。答案:8(14分)分解細胞壁誘導原生質體融合兩親本失活部位不同,融合后活性部位互補石油不加發(fā)酵液的石油淺水S此期間,目的菌及其產生的絮凝活性高分子化合物的含量高(11年廣東卷)①轉基因②核移植③體外受精④體細胞克?、菖咛ヒ浦睞.①③B.①④C.②⑤D.③⑤3、【解析】試管動物技術的核心環(huán)節(jié)就是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植,答案:D。(2011年江蘇卷)18.下列關于胚胎工程的敘述,錯誤的是BA.體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應溶液中受精B.受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進行胚胎移植C.早期胚胎培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清D.試管嬰兒技術主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(2011年浙江卷)2.培育“試管山羊”的基本過程如下圖所示,若要培育成功,下列敘述正確的是A.甲過程中可通過給母山羊注射有關激素使其超數排卵B.乙過程的目的之一是促進卵母細胞和精子的成熟C.丙過程與乙過程中應采用相同成分的培養(yǎng)液D.丁過程中早期胚胎須移植到供體性狀相同的代孕母羊子宮內答案:A(2011年福建卷)32.[生物現代生物科技專題]必答題(10分)一對表現型正常的夫婦,生了一個鐮刀型細胞貧血癥(常染色體隱性遺傳病)患兒。在他們欲生育第二胎時,發(fā)現妻子的雙側輸卵管完全堵塞,不能完成體內受精。醫(yī)生為該夫婦實施了體外受精和產前基因診斷,過程如右圖。請回答:(1)過程①是指在體外進行的處理,從而使精子與卵子結合形成受精卵;過程②稱為。(2)在對胎兒進行鐮刀形細胞貧血癥的產前基因診斷時,要先從羊水中的胎兒細胞提取物質③進行PCR擴增。然

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