胡蘿卜根的培養(yǎng)賽課

胡蘿卜根的培養(yǎng)賽課無籽西瓜成都師范學(xué)院如何繁殖？成都師范學(xué)院植物組織愈傷組織長出叢芽長根完整植株成都師范學(xué)院在下，把植物體的器官或組織片段切下來，接種在適當(dāng)?shù)纳线M(jìn)行離體培養(yǎng)，這些器官或組織的細(xì)胞就會經(jīng)過和的過程，逐漸產(chǎn)生出植物的各種組織和器官，進(jìn)而發(fā)育成。無菌條件人工培養(yǎng)基脫分化再分化一顆完整的植株植物細(xì)胞的全能性成都師范學(xué)院用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段，叫做外植體選擇外植體的原則分生能力強無病毒苗成都師范學(xué)院外植體必須使用無菌材料整個組培流程也必須無菌如何創(chuàng)造組織培養(yǎng)無菌的條件成都師范學(xué)院1、操作房間、操作流程的無菌2、操作人員的消毒3、接種器械的消毒滅菌4、外植體消毒滅菌1、操作房間、操作流程的無菌接種室的消毒超凈工作臺的消毒成都師范學(xué)院甲醛高錳酸鉀熏蒸高錳酸鉀與甲醛反應(yīng)，緩慢放熱，促進(jìn)甲醛揮發(fā)，殺滅物體表面和空氣中的細(xì)菌繁殖體紫外線殺菌使細(xì)菌核酸突變，生產(chǎn)蛋白質(zhì)能力丟失，導(dǎo)致細(xì)菌死亡。成都師范學(xué)院紫外燈開啟殺菌殺菌結(jié)束，白熾燈開啟工作2、操作人員的消毒a.操作人員進(jìn)入無菌接種室需要穿白大褂，在無菌室禁止交談b.接種前，操作者要用肥皂清洗雙手，擦干成都師范學(xué)院c.操作者進(jìn)入接種室后，用酒精棉球擦拭雙手及操作臺面成都師范學(xué)院3、接種器械的消毒滅菌灼燒滅菌鑷子、剪刀、解剖刀等侵入95%的酒精中，使用之前取出在酒精燈上灼燒滅菌成都師范學(xué)院使用注意：通過高溫殺滅細(xì)菌，冷卻后立即使用，每次接觸外植體后需要重新灼燒。利用酒精燈的外焰常用消毒劑：75%的乙醇及10%的次氯酸鈉消毒的原則：成都師范學(xué)院4、外植體消毒滅菌1）消毒劑與外植體應(yīng)該接觸足夠長的時間以除去外植體表面的微生物，但應(yīng)盡量減少對外植體細(xì)胞的破壞。2）滅菌時間從倒入消毒液開始計時，至倒入無菌水為止3）滅菌液要充分侵沒材料。

胡蘿卜根的離體培養(yǎng)選取對象：

P-木質(zhì)部、C-形成層、X-韌皮部成都師范學(xué)院C-形成層為什么選取形成層？成都師范學(xué)院形成層的細(xì)胞分裂能力強，且基本不攜帶病毒.全能性也相對比較高。1.清洗清水洗凈胡蘿卜去掉表皮把胡蘿卜切成3cm的段成都師范學(xué)院（一）胡蘿卜根的消毒滅菌2.消毒向帶有螺口蓋的玻璃瓶中倒入適量的75%的酒精，取胡蘿卜條，侵入75%的酒精中，30s后倒出酒精。成都師范學(xué)院（一）胡蘿卜根的消毒滅菌75%酒精3.滅菌向玻璃瓶中倒入10%的次氯酸鈉溶液，擰上瓶蓋，消毒5-10min。成都師范學(xué)院消毒期間，要將玻璃瓶搖動2-3次。（一）胡蘿卜根的消毒滅菌10%次氯酸鈉4.洗掉消毒劑消毒后，打開瓶蓋，將消毒液倒入燒杯中，在玻璃瓶中加入適量的無菌水，蓋上瓶蓋，搖動數(shù)次，將水倒去。重復(fù)3-4次，用無菌濾紙將胡蘿卜段表面的水吸干。成都師范學(xué)院（一）胡蘿卜根的消毒滅菌1.打孔將消毒的胡蘿卜段放入無菌培養(yǎng)皿中，用滅過菌的打孔器沿著形成層穿入胡蘿卜中，取得一段含有形成層的3cm的圓柱體。

成都師范學(xué)院（二）接種（二）接種2.切割用消毒后的解剖刀截去兩頭越1cm長度的與消毒劑接觸的胡蘿卜段，余下部分沿截面將其橫切成1mm左右的小圓片。成都師范學(xué)院3.接種到培養(yǎng)基將切好的胡蘿卜的外植體迅速接種在MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA的固體培養(yǎng)基上。成都師范學(xué)院（二）接種3.接種每個培養(yǎng)瓶可接種4-6塊外植體，注意培養(yǎng)瓶口應(yīng)斜向火焰。成都師范學(xué)院（二）接種（三）接種成都師范學(xué)院3.接種材料接種好后，將培養(yǎng)瓶的瓶口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動灼燒一遍，擰緊瓶蓋，以免微生物進(jìn)入，造成污染，導(dǎo)致培養(yǎng)失敗，（三）接種成都師范學(xué)院4.標(biāo)記接種完成后，在瓶壁上貼上標(biāo)簽，注明接種材料的名稱、編號和接種日期。操作示例成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院成都師范學(xué)院