影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)標(biāo)修改

培訓(xùn)匯報(bào)

-11月10-11,CharlesRiver亞洲短期培訓(xùn)-11月24-25,新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)詳解培訓(xùn)班(二期)

1.提綱影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素〔動(dòng)技部近期改進(jìn)事項(xiàng)〕病原生物相關(guān)國(guó)標(biāo)的修改實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病源生物監(jiān)測(cè)目錄2.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素環(huán)境(外部)因素

溫度病原生物濕度

(粉塵刺激性氣味)

噪音

內(nèi)在因素光照

疾病遺傳飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)密度生理節(jié)律代謝機(jī)能實(shí)驗(yàn)操作運(yùn)輸飼料飲水墊料3.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素溫度恒溫動(dòng)物能夠適應(yīng)一定的溫度變化范,但是,保持最低的溫度波動(dòng)十分重要(日溫差≤4℃)長(zhǎng)時(shí)間超過(guò)耐受范圍,可能誘發(fā)臨床體征的改變.熱的中性域(TNZ):恒溫動(dòng)物發(fā)揮最小的能量以維持核心體溫的溫度范圍。高于或者低于TNZ將導(dǎo)致動(dòng)物行為或適應(yīng)性調(diào)整以保證體內(nèi)平衡：身體蜷縮、立毛、外周血管收縮/擴(kuò)張、呼吸及食物消耗量等的改變等。長(zhǎng)時(shí)間暴露于高/低的溫度，或者適應(yīng)性調(diào)整缺乏以維持體內(nèi)平衡時(shí)，會(huì)導(dǎo)致根底代謝率發(fā)生改變?！财胀ōh(huán)境16-26，屏障環(huán)境20-26〕物種溫度范圍℃小鼠4~34大鼠6~33豚鼠4~34兔子4~33恒河猴6~35犬-10~28常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耐受溫度范圍影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素溫度環(huán)境溫度的改變可能會(huì)影響毒性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果在嚙齒類(lèi)體內(nèi)，↑溫度可導(dǎo)致Amphetamine的毒性↑,而麻黃素的毒性↓特定溫度的預(yù)暴露也可能影響動(dòng)物的毒性反響小鼠暴露于4℃的環(huán)境7天以后，對(duì)β-antagonistisoproterenol的毒性反響比暴露于24℃環(huán)境中的對(duì)照小鼠強(qiáng)〔＞100倍〕環(huán)境溫度升高的急性效應(yīng)動(dòng)物出現(xiàn)死亡，雄性大鼠繁殖性能下降〔睪丸發(fā)育退化〕環(huán)境問(wèn)題升高的慢性效應(yīng)生長(zhǎng)速率降低每窩產(chǎn)仔數(shù)量減少新生動(dòng)物死亡率升高影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素濕度(40-70%)偏高微生物易于繁殖，動(dòng)物易發(fā)生傳染病飼料墊料易于霉變與高溫協(xié)同作用：抑制動(dòng)物的蒸發(fā)散熱，危害巨大與低溫協(xié)同作用：顯著增加動(dòng)物的非蒸發(fā)散熱偏低使動(dòng)物皮膚和黏膜發(fā)生干裂，減弱皮膚和黏膜對(duì)微生物的防御能力使室內(nèi)灰塵飛揚(yáng)，易引起動(dòng)物的呼吸道疾病相對(duì)濕度低于40%時(shí)，大鼠容易發(fā)生環(huán)尾癥，可能導(dǎo)致死亡率升高低濕環(huán)境下，常發(fā)生大、小鼠乳母拒絕哺乳或食仔現(xiàn)象，仔鼠發(fā)育不良、體重增長(zhǎng)停滯6.不同因素對(duì)有效環(huán)境溫度的影響及給動(dòng)物健康與福利的對(duì)應(yīng)危害影響因素極低溫度危害程度極高溫度危害程度相對(duì)濕度高幾乎沒(méi)有影響低熱得多極高空氣流速高冷得多高涼爽低糧食匱乏冷得多高幾乎沒(méi)有影響低飲水匱乏更冷中熱得多高高密度暖和無(wú)影響或影響正面熱很多極高生?。òl(fā)熱）更冷中等更熱中等肥胖（皮下絕緣好）暖和（保護(hù)）低更熱高應(yīng)激基因敏感型更冷高更熱高表面覆蓋（羽毛和毛發(fā)）暖和保護(hù)更熱高過(guò)往經(jīng)驗(yàn)或適應(yīng)更冷高或保護(hù)更熱高或保護(hù)

注：數(shù)據(jù)來(lái)源：GuidelinesfortheHumaneTransportationofResearchAnimals，NRC2006.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素7.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素噪音來(lái)源關(guān)門(mén)〔84-105db〕，說(shuō)話(huà)、喊叫〔83-100db〕，推車(chē)〔83db〕壓差條件下密封不嚴(yán)產(chǎn)生哨聲動(dòng)物兔子蹬地，非人靈長(zhǎng)類(lèi)晃動(dòng)籠具的聲音非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物和狗的叫聲樓下飼養(yǎng)的犬吠聲音可能對(duì)樓上的影響〔80-82db〕報(bào)警設(shè)備測(cè)試播送系統(tǒng)等等〔≤60db〕8.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素噪音常見(jiàn)影響聽(tīng)覺(jué)：聽(tīng)力喪失非聽(tīng)覺(jué)：心血管：血壓升高〔大鼠，獼猴〕；大鼠心肌肥大、心率加速、外周血管收縮、呼吸頻率加快等神經(jīng)〔聽(tīng)源性癲癇〕、激素/生化、生殖、睡眠、行為等等突然的鋒利、大聲的噪音會(huì)引發(fā)癲癇發(fā)作記憶性的癲癇間歇性和持續(xù)性的噪音通常超過(guò)85-100db最有可能導(dǎo)致臨床和生理的改變9.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素光照重要參數(shù)：周期、強(qiáng)度、波長(zhǎng)顯著影響：繁殖、行為、生理機(jī)能，且有種群差異光周期較長(zhǎng)的光周期可能會(huì)改善某些種群/品系的繁育情況〔12/12，14/10〕恒定的光照，能導(dǎo)致大鼠卵巢的改變，出現(xiàn)持續(xù)發(fā)情〔無(wú)周期性〕光強(qiáng)度光毒性視網(wǎng)膜病變：白化嚙齒類(lèi)大小鼠高強(qiáng)度：延長(zhǎng)發(fā)情周期，降低繁殖性能〔動(dòng)物照度：大、小鼠、豚鼠15-20lux，犬、猴、兔100-200lux〕〔工作照度：≥200，原國(guó)標(biāo)最大離地1米照度不超過(guò)300lux的意義，長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)有必要定期調(diào)整和改變動(dòng)物放置的位置〕10.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素病原生物導(dǎo)致臨床疾病：發(fā)病和死亡可能會(huì)影響研究工程無(wú)臨床病癥感染，但產(chǎn)生的變化會(huì)擾亂研究結(jié)果組織學(xué)改變：肝臟、腎臟變化生化改變免疫學(xué)差異等等粉塵：病原微生物重要的傳播媒介〔空氣潔凈度和落下菌〕〔空氣潔凈度：屏障7級(jí)，普通無(wú)要求〕〔落下菌：屏障環(huán)境每平皿≤3個(gè)/半小時(shí)，普通環(huán)境無(wú)要求〕11.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素飼料營(yíng)養(yǎng)成分全價(jià)飼料采用了標(biāo)準(zhǔn)配方,營(yíng)養(yǎng)成分相對(duì)穩(wěn)定常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分方面小的改變不會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果蛋白質(zhì),脂肪,水分,碳水化合物,灰份優(yōu)質(zhì)飼料只需要檢驗(yàn)少量工程的有毒/致癌物質(zhì)即可微生物污染可能隨季節(jié)、飼料類(lèi)型和水分含量而變化?？赡軙?huì)發(fā)生沙門(mén)氏菌引起的飼料污染，并且在最終產(chǎn)品中存活。顆粒飼料生產(chǎn)過(guò)程中僅在短時(shí)間內(nèi)可能到達(dá)88℃的溫度，達(dá)不到滅菌效果。飼料中霉菌的影響主要由產(chǎn)毒霉菌產(chǎn)生的毒素所引起的。必須營(yíng)養(yǎng)如：Vc〔豚鼠，猴〕〔探討各類(lèi)飼料的檢測(cè)指標(biāo)〕12.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素墊料材質(zhì)儲(chǔ)存分析：參考飼料飲水可能的污染物質(zhì)：重金屬、殺蟲(chóng)劑、揮發(fā)性有機(jī)物，由水傳播的微生物病原體等水質(zhì)硬度根據(jù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)處理13.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素飲水普通處理選擇消毒處理：酸化處理，加氯消毒，反滲透，臭氧消毒，過(guò)濾〔顆粒物，活性碳〕，去離子高壓滅菌酸化抑菌：改變飲水消耗量，生長(zhǎng)速率，及器官比重，改變消化道菌群/數(shù)量。加氯：消毒能力較強(qiáng)，有報(bào)道稱(chēng)可引起免疫系統(tǒng)改變，可能產(chǎn)生有致癌性和細(xì)胞毒性，影響毒性評(píng)價(jià)結(jié)果。14.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素小結(jié)許多環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響力比較小設(shè)立同期對(duì)照十分重要將抵消很多環(huán)境因素的影響但是，當(dāng)比較長(zhǎng)期研究及不同的機(jī)構(gòu)間的研究時(shí)仍然有問(wèn)題。標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)設(shè)施中的環(huán)境條件將有助于減少由長(zhǎng)時(shí)間引起的變化飼養(yǎng)條件：清潔，規(guī)律，恒定飼料、墊料、飲水等：符合動(dòng)物生長(zhǎng)特性，無(wú)菌，無(wú)/低有害物質(zhì)生物平安程序：人流/物流/動(dòng)物流/氣流控制，外來(lái)人員的控制管理。等等。15.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素環(huán)境(外部)因素

溫度病原生物濕度

粉塵刺激性氣味

噪音

內(nèi)在因素光照

疾病遺傳飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)密度生理節(jié)律代謝機(jī)能實(shí)驗(yàn)操作運(yùn)輸飼料飲水墊料16.影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的環(huán)境因素光照：新增動(dòng)物照度〔常規(guī)實(shí)驗(yàn)〕生殖實(shí)驗(yàn)建議維持原照度，可嘗試改變周期〔12/1214/10〕屏障根本改造完成,普通動(dòng)物區(qū)域也可實(shí)現(xiàn),但均需要繼續(xù)改進(jìn).飼料間夏季溫度根本能保證在20℃上下冬季甚至超過(guò)25℃正在方案改造飼料間,目標(biāo)將冬季溫度控制到小于等于21℃飲水:新引入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲水軟化裝置,有害物質(zhì)特別是硬度得到了有效降低17.序號(hào)檢測(cè)項(xiàng)目計(jì)量單位未高壓滅菌過(guò)濾水未高壓滅菌自來(lái)水委托自檢委托自檢1色度（Color）Degree<50<5<22渾濁度NTU0.7100.72<13pH——7.656.57.797.54硝酸鹽（NO3-）mg/L0.22≤0.23.325~105亞硝酸鹽（NO2-）mg/LNDNDNDND復(fù)核0.003——0.006——6總硬度（以碳酸鈣計(jì)）（TotalHardness）mg/L7.410~10208100~2007氯化物（Cl-）mg/L0.680~220.820-508鋅（Zn）mg/LND0~0.2ND0.2~0.59三氯甲烷（Trichloromethane）mg/L0.00084——0.00082——10硫酸鹽（SO42-）mg/L0.78——36.6——11氟化物（F-）mg/LND——0.36——12耗氧量（以O(shè)2計(jì)）mg/LND——0.45——13溶解性總固體（TDS）mg/L10——342——飲水軟化裝置處理前后水質(zhì)比照另有20項(xiàng)指標(biāo)在處理前后均未檢出新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)詳解培訓(xùn)班學(xué)習(xí)心得本次學(xué)習(xí)的標(biāo)準(zhǔn)工程GB14925-2021實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施〔替代GB14925-2001〕GB14922.1-201?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)監(jiān)測(cè)GB14922.2-2021實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)〔替代GB14922.2-2001〕及涉及的局部檢測(cè)方法GB14923-2021實(shí)驗(yàn)動(dòng)物哺乳類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制〔替代GB14923-2001〕19.新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)詳解培訓(xùn)班學(xué)習(xí)心得本次標(biāo)準(zhǔn)的總體印象完全強(qiáng)制局部強(qiáng)制+局部推薦引用標(biāo)準(zhǔn)刪除了年份，而以“最新〞替代抗體效價(jià)合格率由原來(lái)必須到達(dá)100%才算免疫合格改為只需要到達(dá)70%即為合格20.新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)詳解培訓(xùn)班學(xué)習(xí)心得GB14922.2廢除了對(duì)“單核細(xì)胞增生性李斯特桿菌〞的檢驗(yàn)要求GB/T14926.21普通級(jí)兔如果免疫接種兔出血熱疫苗，那么HAI抗體效價(jià)應(yīng)大于1：10，同時(shí)免疫抗體合格率≥70%即判斷該群里免疫合格GB/T14926.46犬鉤端螺旋體免疫抗體合格率≥70%即判斷該犬群里免疫合格GB/T14926.56犬狂犬病病毒免疫抗體合格率≥70%即判斷該犬群里免疫合格GB/T14926.57犬細(xì)小病毒免疫抗體合格率≥70%即判斷該犬群里免疫合格GB/T14926.58傳染性犬肝炎病毒免疫抗體合格率≥70%即判斷該犬群里免疫合格GB/T14926.59犬瘟熱病毒免疫抗體合格率必須到達(dá)100%才能判斷該犬群里免疫合格21.病原種類(lèi)病原項(xiàng)目寄生蟲(chóng)Parasites體外寄生蟲(chóng)（節(jié)肢動(dòng)物）Ectoparasites弓形蟲(chóng)Toxoplasmagondii病毒Viruses狂犬病病毒RabiesVirus（RV）犬細(xì)小病毒CanineParvovirus（CPV）犬傳染性肝炎病毒InfectiousCanineHepatitisVirus(ICHV)犬瘟熱病毒CanineDistemperVirus(CDV)細(xì)菌/真菌Bacteria/Fungi沙門(mén)菌Salmonellaspp.布魯桿菌Brucellaspp.皮膚病原真菌Pathogenicdermalfungi實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病源生物控制目錄犬Canine實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病源生物控制目錄〔續(xù)1〕病原種類(lèi)病原項(xiàng)目寄生蟲(chóng)Parasites體外寄生蟲(chóng)（節(jié)肢動(dòng)物）Ectoparasites弓形蟲(chóng)Toxoplasmagondii病毒Viruses獼猴皰疹病毒1型（B病毒）CerconpithecineHerpesvirusType1（B-virus）細(xì)菌/真菌Bacteria/Fungi沙門(mén)菌Salmonellaspp.志賀菌Shigellaspp.結(jié)核分支桿菌Mycobacteriumtuberculosis皮膚病原真菌Pathogenicdermalfungi非人靈長(zhǎng)類(lèi)〔恒河猴，食蟹猴〕Non-humanPrimates〔MacacaMulatta,MacacaFascicularis〕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病源生物控制目錄[續(xù)2]病原種類(lèi)病原項(xiàng)目寄生蟲(chóng)Parasites體外寄生蟲(chóng)（節(jié)肢動(dòng)物）Ectoparasites弓形蟲(chóng)Toxoplasmagondii全部蠕蟲(chóng)AllHelminths鞭毛蟲(chóng)Flagellates纖毛蟲(chóng)Ciliates病毒Viruses漢坦病毒Hantavirus(HV)仙臺(tái)病毒SendaiVirus(SV)小鼠肺炎病毒(PVM)PneumoniaVirusofMice呼腸孤病毒III型(Rec-3)ReovirustypeIII大鼠細(xì)小病毒RV株RatParvovirus（KRV）大鼠細(xì)小病毒H-1株RatParvovirus（H-1）大鼠冠狀病毒/大鼠涎淚腺炎病毒RatCoronavirus（RCV）/SialodacryoadenitisVirus(SDAV)細(xì)菌/真菌Bacteria/Fungi沙門(mén)菌Salmonellaspp.支氣管鮑特桿菌Bordetellabronchiseptica支原體Mycoplasmaspp.鼠棒狀桿菌Corynebacteriumkutscheri泰澤病原體Tyzzer’sorganism肺炎克雷伯桿菌Klebsiellapneumonica嗜肺巴斯德桿菌Pasteurellapneumotropica金黃色葡萄球菌Stphylococcusaureus綠膿桿菌Pseudomonasaeruginosa大鼠Rats病原種類(lèi)病原項(xiàng)目寄生蟲(chóng)Parasites體外寄生蟲(chóng)（節(jié)肢動(dòng)物）Ectoparasites弓形蟲(chóng)Toxoplasmagondii全部蠕蟲(chóng)AllHelminths鞭毛蟲(chóng)Flagellates纖毛蟲(chóng)Ciliates病毒Viruses鼠痘病毒EctromeliaVirus(Ect.)小鼠肝炎病毒MouseHepatitisVirus（MHV）仙臺(tái)病毒SendaiVirus(SV)小鼠肺炎病毒(PVM)PneumoniaVirusofMice呼腸孤病毒III型(Rec-3)ReovirustypeIII小鼠細(xì)小病毒MinuteVirusofmice(MVM)細(xì)菌/真菌Bacteria/Fungi沙門(mén)菌Salmonellaspp.支原體Mycoplasmaspp.鼠棒狀桿菌Corynebacteriumkutscheri泰澤病原體Tyzzer’sorganism肺炎克雷伯桿菌Klebsiellapneumonica嗜肺巴斯德桿菌Pasteurellapneumotropica金黃色葡萄球菌Stphylococcusaureus綠膿桿菌Pseudomonasaeruginosa實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病源生物控制目錄[續(xù)3]小鼠Mice謝謝！26.GB14925修改前后比照序號(hào)GB14925-2001GB14925-20101標(biāo)準(zhǔn)的范圍實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育，生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件和設(shè)施技術(shù)要求及檢測(cè)方法，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施和環(huán)境條件技術(shù)要求及檢測(cè)方法，2引用標(biāo)準(zhǔn)GB30951996環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB30961993城市區(qū)域環(huán)境噪聲標(biāo)準(zhǔn)GB47921984放射衛(wèi)生防護(hù)基本標(biāo)準(zhǔn)GB57491985生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB89781996污水排放綜合標(biāo)準(zhǔn)GB50243-1997通風(fēng)與空調(diào)工程及驗(yàn)收規(guī)范GB502591996電氣裝置安裝工程電氣照明裝置施工及驗(yàn)收規(guī)范GBJ73-1984潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范GBJ68-1984建筑結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)JGJ-71-1990潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB8978污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)GB18871電離輻射防護(hù)與輻射源安全基本標(biāo)準(zhǔn)GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB50052供配電系統(tǒng)設(shè)計(jì)規(guī)范GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范（最新標(biāo)準(zhǔn)）GB14925修改前后比照序號(hào)GB14925-2001GB14925-2010定義更具體化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物特殊實(shí)驗(yàn)設(shè)施包括感染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室）和應(yīng)用放射性物質(zhì)或有害化學(xué)物質(zhì)等進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)施。空氣潔凈度原國(guó)標(biāo)為100級(jí)、10000級(jí)、1000000級(jí)。新國(guó)標(biāo)按5級(jí)、7級(jí)、8級(jí)劃分（空氣中塵埃粒子數(shù)0.5um.1um.5um）分類(lèi)具體化普通環(huán)境、屏障環(huán)境和隔離環(huán)境環(huán)境：普通環(huán)境、屏障環(huán)境（正壓和負(fù)壓）和隔離環(huán)境（正壓和負(fù)壓）使用功能：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫運(yùn)用動(dòng)物等級(jí)：基礎(chǔ)動(dòng)物、清潔動(dòng)物、SPF動(dòng)物、悉生動(dòng)物、無(wú)菌動(dòng)物GB14925修改前后比照序號(hào)GB14925-2001GB14925-2010建筑設(shè)施要求實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)設(shè)施應(yīng)與生活伙保持大于50m的距離走廊寬度不應(yīng)小于1.5m，門(mén)寬度不應(yīng)小于1.0m動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室與生活區(qū)的距離應(yīng)符合GB19489和GB50346的要求走廊寬度不應(yīng)小于1.5m，門(mén)寬度不應(yīng)小于0.8m大型動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)設(shè)施根據(jù)情況加大實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的電力負(fù)荷等級(jí)要求按GB50052要求確定屏障環(huán)境和隔離環(huán)境采用不低于二級(jí)電力負(fù)荷供電GB14925修改前后比照動(dòng)物實(shí)驗(yàn)間環(huán)境技術(shù)指標(biāo)溫度：屏障環(huán)境和隔離環(huán)境均變成20～26，和動(dòng)物生產(chǎn)間保