巴比妥類藥物分析

第五章巴比妥類藥物的分析結(jié)構(gòu)剖析理化特征鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)檢查含量測定1精選ppt根本要求一、掌握我國藥典中巴比妥類藥物的鑒別和含量測定的根本原理與方法。二、熟悉藥典中本類藥物特殊雜質(zhì)檢查的根本原理與方法。三、了解本類藥物的體內(nèi)分析方法。2精選ppt一、結(jié)構(gòu)特征與典型藥物〔一〕根本結(jié)構(gòu)巴比妥酸的衍生物，結(jié)構(gòu)通式如下巴比妥酸的5，5－取代物1，5，5－取代物C2位硫取代物母核：巴比妥酸，丙二酰脲的結(jié)構(gòu)3精選ppt4精選ppt5精選ppt6精選ppt硫噴妥鈉7精選ppt巴比妥類藥物結(jié)構(gòu):

丙二酰脲性質(zhì)：丙二酰脲類反響應(yīng)用：鑒別、含量測定1,3-二酰亞胺鑒別弱酸性苯環(huán)、丙烯基、S鑒別含量測定各有特性結(jié)構(gòu)決定性質(zhì)8精選ppt1.弱酸性1,3-二酰亞胺基團(tuán)，能發(fā)生酮式-烯醇式互變異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二級電離〔二〕主要性質(zhì)9精選ppt

弱酸性弱堿性白色結(jié)晶易溶于有機(jī)溶劑易溶于水H+用于：別離、鑒別、檢查和含量測定。10精選ppt(1)巴比妥類藥物的水解主要是酰亞胺基團(tuán)的性質(zhì)，與堿溶液共沸就可以水解生成氨氣，生成的氨氣可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。反響式如下：JP(14)采用這一反響鑒別異戊巴比妥和巴比妥。2.水解反響11精選ppt(2)巴比妥類藥物鈉鹽的水解本類藥物鈉鹽的水溶性比較大，在吸濕的情況下也能水解。水解的速度與溫度和pH值有關(guān)。室溫和pH10以下時水解較慢，pH11以上隨著堿度的增加水解速度也隨之加快。12精選ppt3.與重金屬反響〔丙二酰脲基團(tuán)〕(1)與Ag+的反響可溶性一銀鹽不溶性二銀鹽白色↓13精選ppt(2)與Cu2+的反響巴比妥類+銅吡啶試液吡啶紫色或紫色↓硫噴妥鈉+銅吡啶試液吡啶綠色14精選ppt15精選ppt16精選ppt(3)與Co2+的反響這一反響的現(xiàn)象與銅鹽反響的現(xiàn)象相似，均生成紫堇色配位化合物。本反響要求在無水的條件下進(jìn)行，所用試劑均應(yīng)不含水分，以使反響靈敏，而且形成的有色產(chǎn)物也比較穩(wěn)定，常用無水乙醇或甲醇；鈷鹽為醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷；堿以有機(jī)堿為好，一般采用異丙胺。17精選ppt18精選ppt(4)與Hg2+的反響白色19精選ppt4.與香草醛的反響丙二酰脲基團(tuán)中氫比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反響，生成棕紅色產(chǎn)物。20精選ppt加乙醇后，其反響產(chǎn)物可轉(zhuǎn)變?yōu)樽丶t色藍(lán)色21精選ppt

5.紫外吸收光譜特征

主要特點(diǎn)：隨著電離級數(shù)的不同，巴比妥類藥物的紫外光譜會發(fā)生顯著的變化。也就是說，溶液pH值的不同以及取代基的不同會對紫外光譜產(chǎn)生影響。22精選pptA.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)B.pH9.9緩沖液(一級電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級電離)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜λ(nm)2902702502300.51.01.5AABC23精選ppt硫噴妥的紫外吸收光譜HCl溶液(0.1mol/L)

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NaOH溶液(0.1mol/L)

24精選pptpH5,5-取代物（nm）1,5,5-取代物（nm）C2硫代（nm）1(原形)無無287（大）238（?。?0(一級電離)240240304（大）255（?。?3(二級電離)25524030425精選ppt6.色譜行為特征〔主要用于鑒別〕〔1〕TLC一般采用對照品比較法，要求供試品主斑點(diǎn)應(yīng)與對照品斑點(diǎn)一致。〔2〕HPLC與對照品比較保存行為，主要是比較保存時間和相對保存時間。26精選ppt7.顯微結(jié)晶〔1〕藥物本身的晶型巴比妥類藥物的酸性水溶液可析出相應(yīng)巴比妥類藥物的特殊結(jié)晶。

巴比妥：長方形苯巴比妥：球形→花瓣?duì)?7精選ppt巴比妥苯巴比妥硫酸銅-吡啶試液十字形紫色結(jié)晶淺紫色細(xì)小不規(guī)那么的或類似菱形的結(jié)晶〔2〕反響產(chǎn)物的晶型28精選ppt二、鑒別試驗(yàn)(一)丙二酰脲鑒別反響這一鑒別試驗(yàn)已經(jīng)收載在中國藥典附錄中的“一般鑒別試驗(yàn)〞項(xiàng)下。包括銀鹽反響和銅鹽反響，分別生成沉淀和呈色反響。29精選ppt(二〕測定熔點(diǎn)巴比妥類的鈉鹽＋酸→游離巴比妥類藥物↓→過濾→洗滌→枯燥→測熔點(diǎn)30精選ppt例如：司可巴比妥鈉的鑒別取本品1g溶解強(qiáng)力攪拌加水煮沸溶解成澄清溶液放冷過濾結(jié)晶在70℃枯燥后，熔點(diǎn)約為97℃。苯巴比妥鈉的鑒別中國藥典的方法：取本品約0.5g加水溶解加過量稀鹽酸白色結(jié)晶性沉淀過濾用水洗凈沉淀105℃枯燥，熔點(diǎn)應(yīng)為174℃～178℃。水稀醋酸31精選ppt〔三〕利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn)1.利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)司可巴比妥鈉原理：含烯丙基，可發(fā)生加成或氧化反響〔碘、溴〕〔高錳酸鉀〕①與碘試液反響32精選ppt②與高錳酸鉀的反響原理：具有復(fù)原性，在堿性溶液中與高錳酸鉀反響，使紫色的高錳酸鉀復(fù)原成棕色的二氧化錳。33精選ppt2.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)苯巴比妥①硝化反響苯巴比妥或其鈉鹽，與硝酸鉀和硫酸共熱，生成黃色硝基化合物。黃色34精選ppt③與甲醛-硫酸的反響苯巴比妥與甲醛-硫酸反響，生成玫瑰紅色產(chǎn)物。②與硫酸-亞硝酸鈉的反響苯巴比妥與硫酸-亞硝酸鈉反響生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色。35精選ppt3.硫元素的反響硫噴妥鈉可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)硫離子，而顯硫化物的反響。如硫噴妥鈉在氫氧化鈉試液中與鉛離子反響生成白色沉淀；加熱后，沉淀轉(zhuǎn)變成黑色的硫化鉛。36精選ppt〔四〕紅外分光光度法一種有效而可靠的定性分析手段。?中國藥典?(2021年版)收載的巴比妥類藥物采用紅外分光光度法〔標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法〕作為鑒別手段。37精選ppt

三、特殊雜質(zhì)檢查

特殊雜質(zhì)：在特定藥物的生產(chǎn)和貯存過程中引入的雜質(zhì)。藥物中特殊雜質(zhì)的檢查主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理、化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的。38精選ppt

1.苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查乙?；?9精選ppt主要是控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲。苯基丙二酰脲是由于中間體〔Ⅱ〕的乙基化反響不完全，而與脲素縮合生成的。其酸性比苯巴比妥強(qiáng)，能使甲基橙指示劑呈紅色。方法：在一定量苯巴比妥供試液中，參加甲基橙指示劑不得顯紅色〔1〕酸度〔指示劑法〕

40精選ppt〔2〕溶液的澄清度主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶性雜質(zhì)利用苯巴比妥酸這些雜質(zhì)在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小的特性進(jìn)行檢查。方法：41精選ppt〔3〕中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì)是由中間體〔Ⅰ〕形成的酰胺、酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)，不溶于氫氧化鈉試液但溶于乙醚；而苯巴比妥具有酸性，溶于氫氧化鈉試液，故采用提取重量法測定其含量?！搽s質(zhì)〕42精選ppt四、含量測定

銀量法溴量法巴比妥類藥物的含酸堿滴定法量測定方法紫外分光光度提取重量法

HPLC法、GC法

電泳法

43精選ppt〔一〕銀量法優(yōu)點(diǎn)：操作簡便，專屬性較強(qiáng)。缺點(diǎn)：受溫度影響較大；以溶液出現(xiàn)渾濁來指示終點(diǎn)難以觀察。1.原理：巴比妥類一銀鹽二銀鹽↓Na2CO3AgNO3終點(diǎn)：電位法〔Ag－玻璃電極系統(tǒng)〕AgNO344精選ppt2.測定方法與計(jì)算例如:異戊巴比妥及其鈉鹽的測定：溶劑：甲醇堿性試液：新配3％無水Na2CO3滴定液：AgNO3滴定液〔0.1mol/L〕終點(diǎn)：電位法45精選ppt1.原理：司可巴比妥鈉含不飽和鍵，與溴定量地發(fā)生加成反響〔定量過量〕Br2+2KI2KBr+I2〔剩余〕I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6〔二〕溴量法近終點(diǎn)時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正46精選ppt

原料藥剩余滴定法2.計(jì)算本卷須知：〔1〕操作中要防止溴和碘的逸失?！?〕平行條件進(jìn)行空白試驗(yàn)可以減少溴和碘逸失帶來的誤差。47精選ppt呈弱酸性，可作為一元酸以標(biāo)準(zhǔn)堿液直接滴定，或在非水溶液中用強(qiáng)堿溶液直接滴定。常用的方法舉例如下：在乙醇溶劑中滴定

基于本類藥物在水中的溶解度較小，滴定時多在醇溶液或含水的醇溶液中進(jìn)行，這樣可防止反響中產(chǎn)生的弱酸鹽易于水解而影響滴定終點(diǎn)。常以麝香草酚酞為指示劑，滴定至淡藍(lán)色為終點(diǎn)?！踩乘釅A滴定法〔酸量法〕48精選ppt例如：異戊巴比妥的含量測定取本品約0.5g，精密稱定，加乙醇20ml溶解后，加麝香草酚酞指示劑6滴，用氫氧化鈉滴定液〔0.1mol/L〕滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每1ml氫氧化鈉滴定液〔0.1mol/L〕相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。49精選ppt

原理：巴比妥類藥物在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu)，因而可采用紫外分光光度法測定其含量。

適用：本法靈敏度高，專屬性強(qiáng)，廣泛應(yīng)用于巴比妥類藥物的原料及其制劑的含量測定，以及固體制劑的溶出度和含量均勻度檢查，也常用于體內(nèi)巴比妥類藥物的檢測。〔四〕紫外分光光度法50精選ppt本法是將供試品溶解后，根據(jù)溶液的pH，在最大吸收波長〔λmax〕處，直接測定對照品溶液和供試品溶液的吸收度，再計(jì)算藥物的含量。中國藥典對注射用硫噴妥鈉的含量測定采用本法

1.直接測定的紫外分光光度法51精選ppt

對照法Lambert-Beer定律52精選ppt每1mg硫噴妥相當(dāng)于1.091mg的C11H17N2NaS。注射用硫噴妥鈉的含量測定：在304nm處，測定A供A對53精選ppt2.提取別離后的紫外分光光度法適用于：含干擾物質(zhì)的樣品原理：巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機(jī)溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶54精選ppt巴比妥類鈉鹽酸化氯仿提取水層×氯仿層0.45mol/LNaOH氯仿層×水層調(diào)pHλmax處測A55精選pptUSP〔24〕對苯巴比妥鈉的含量測定采用本法樣品溶解酸化氯仿提取精密量取適量氯仿液蒸氣浴上揮干乙醇、pH9.6緩沖液供試品溶液〔樣品液〕苯巴比妥對照品乙醇、pH9.6緩沖液標(biāo)準(zhǔn)溶液〔對照液〕240nm為測定波長56精選ppt〔五〕HPLC多用于制劑及體液中巴比妥類藥物的含量測定如：苯巴比妥、苯妥英、卡馬西平的血藥濃度監(jiān)測色譜條件：色譜柱AgilentZORBAXSB-C18柱〔4.6mm×250mm，5μm〕預(yù)柱：AgilentZORBAXSB-C18柱〔4mm×4mm，5μm〕流動相：水-甲醇-乙腈(45:45:10)57精選ppt58精選ppt〔六〕CE〔電泳法〕具有別離度高、樣品和試劑用量少、快速的特點(diǎn)，成為進(jìn)行巴比妥類藥物濫用分析的有效檢測手段。59精選ppt〔七〕GC-MS采用直接固相微萃取GC-MS法可同時測定人體液中七種巴比妥類藥物，該法靈敏、快速、準(zhǔn)確和簡便，適用于巴比妥類藥物的毒物分析。60精選ppt61精選ppt思考題1.如何根據(jù)巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)特征來選擇分析方法？2.巴比妥類藥物的紫外吸收光譜有何特征？3.巴比妥類藥物的含量測定方法及其原理是什么？練習(xí)與思考62精選ppt練習(xí)題[A型題]1.苯巴比妥中檢查的特殊雜質(zhì)是

A.巴比妥

B.間氨基酚

C.水楊酸

D.中性或堿性物質(zhì)

E.氨基酚63精選ppt2.司可巴比妥鈉?中國藥典?規(guī)定的含量測定方法為A.中和法B.溴量法C.碘量法D.紫外分光法E.高錳酸鉀法64精選ppt3.于Na2CO3溶液中加AgNO3試液，開始生成白色沉淀經(jīng)振搖即溶解，繼續(xù)加AgNO3試液，生成的沉淀那么不再溶解，該藥物應(yīng)是鹽酸可待因咖啡因C.新霉素D.維生素CE.異戊巴比妥65精選ppt4.與KNO3～H2SO4反響生成