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臨床微生物標(biāo)本采集手冊(cè)總則感染性疾病的正確診治需要以正確的病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果作為指導(dǎo),而獲得正確的病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果的前提是正確采集和送檢合格標(biāo)本。因此,應(yīng)規(guī)范微生物標(biāo)本的采集和運(yùn)送,避免因標(biāo)本不合格,產(chǎn)生錯(cuò)誤的病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果而誤導(dǎo)臨床診治。一、微生物標(biāo)本采集的基本原則1.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本
臨床疑似感染的患者,應(yīng)先采集微生物標(biāo)本送檢,再使用抗菌藥物進(jìn)行治療。2.從無菌部位采集的標(biāo)本更具有臨床價(jià)值,從有菌部位采集的標(biāo)本需要清除正常菌群和定植菌的干擾才有意義,應(yīng)盡量送檢無菌部位的標(biāo)本,尤其是血培養(yǎng)。有菌部位標(biāo)本應(yīng)避免“正常菌群導(dǎo)致標(biāo)本的污染”。人體很多部位,如下呼吸道(痰液標(biāo)本)、鼻竇、皮膚傷口等處的正常菌群極易污染標(biāo)本。因此,從這些部位采集標(biāo)本,要盡可能降低這些部位正常菌群或定植細(xì)菌對(duì)標(biāo)本污染的可能性。從有菌部位采集的標(biāo)本不是最理想的微生物標(biāo)本。3.標(biāo)本的標(biāo)簽和申請(qǐng)單信息要完整
對(duì)于每一份標(biāo)本,實(shí)驗(yàn)室都需要了解該患者和標(biāo)本的詳細(xì)信息以及醫(yī)生送檢的目的。事實(shí)上,實(shí)驗(yàn)室對(duì)于標(biāo)本所做的所有分析,都會(huì)基于這些信息。申請(qǐng)單的內(nèi)容應(yīng)包括:(1)患者信息:姓名、性別、年齡、患者唯一編碼(如住院號(hào))等。(2)申請(qǐng)科室或病區(qū)、申請(qǐng)醫(yī)生。(3)標(biāo)本信息:標(biāo)本類型、采集日期及時(shí)間、采集部位、采集方法。(4)臨床診斷,尤其是感染性疾病的疑似診斷。(5)檢測(cè)目的,尤其是一些特殊檢測(cè)項(xiàng)目和希望提醒臨床微生物室重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容。(6)是否已使用抗菌藥物。每份標(biāo)本上應(yīng)貼有標(biāo)簽,無論手工書寫、條形碼、二維碼標(biāo)簽,都應(yīng)含有以下信息:(1)患者姓名。(2)患者唯一編碼(如住院號(hào))。(3)申請(qǐng)醫(yī)生。(4)標(biāo)本類型及采集部位。(5)檢測(cè)目的。(6)標(biāo)本采集的日期和時(shí)間。4.嚴(yán)格無菌操作
應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作,避免標(biāo)本被污染。盛放標(biāo)本的容器須經(jīng)滅菌處理。滅菌宜采用壓力蒸汽等物理滅菌方法,不應(yīng)使用化學(xué)消毒劑滅菌。采集無菌標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意對(duì)局部及周圍皮膚的消毒。如使用消毒液消毒皮膚,須作用一定時(shí)間,待其干燥后采樣。二、微生物標(biāo)本運(yùn)送的基本原則1.所有標(biāo)本采集后都應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室,多數(shù)標(biāo)本應(yīng)在2h內(nèi)送達(dá),有些樣本量小的標(biāo)本應(yīng)在采樣后15-30min內(nèi)送達(dá)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與臨床共同設(shè)計(jì)標(biāo)本采樣和送檢的流程,在人力、物力上保證標(biāo)本可按要求送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。2.保證必要的運(yùn)送條件
不同種類的標(biāo)本因檢測(cè)的目標(biāo)致病微生物不同,對(duì)標(biāo)本保存和運(yùn)送的環(huán)境條件有不同的要求(詳見表1)。對(duì)溫度敏感的細(xì)菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應(yīng)保溫并立即送檢。3.標(biāo)本運(yùn)輸通用原則三、實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本質(zhì)量管理基本原則1.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)拒收質(zhì)量不合格的標(biāo)本
實(shí)驗(yàn)室要建立標(biāo)本質(zhì)量管理要求,制定拒收標(biāo)準(zhǔn),建立退檢機(jī)制。實(shí)驗(yàn)室有責(zé)任嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本驗(yàn)收和拒收標(biāo)準(zhǔn),并通過溝通、培訓(xùn)使臨床充分掌握標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)和退檢機(jī)制。微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)標(biāo)本的拒收標(biāo)準(zhǔn):(1)標(biāo)本采集至實(shí)驗(yàn)室接收過程間隔過長(zhǎng),或無標(biāo)本采集時(shí)間,或保存的溫度不當(dāng)。(2)標(biāo)本運(yùn)送條件不正確:如厭氧培養(yǎng)標(biāo)本卻在有氧條件下送檢。(3)容器不規(guī)范:如容器有裂縫或被打破導(dǎo)致標(biāo)本泄露、容器非無菌等。(4)未貼標(biāo)簽或貼錯(cuò)標(biāo)簽:標(biāo)本與檢驗(yàn)?zāi)康牟环希缣蹬囵B(yǎng)送檢尿標(biāo)本;患者信息與標(biāo)本不符,如女性患者送檢前列腺標(biāo)本。(5)標(biāo)本明顯被污染,如痰標(biāo)本中混有食物殘?jiān)?。?)拭子上的標(biāo)本已經(jīng)干涸。(7)標(biāo)本不符合檢驗(yàn)要求,如痰標(biāo)本以唾液為主。(8)標(biāo)本使用了固定劑或防腐劑。(9)標(biāo)本量太少。(10)一支拭子要求檢驗(yàn)項(xiàng)目太多。(11)24h內(nèi)重復(fù)送檢的標(biāo)本(血培養(yǎng)除外)。實(shí)施標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)過程中與臨床溝通的方法:標(biāo)本拒收不應(yīng)輕易將標(biāo)本丟棄,應(yīng)電話聯(lián)系臨床醫(yī)生再?zèng)Q定標(biāo)本的處置方式,如醫(yī)生堅(jiān)持繼續(xù)檢測(cè),則應(yīng)在報(bào)告中說明標(biāo)本質(zhì)量情況,并注明"應(yīng)臨床要求,完成檢測(cè)"。2.為臨床提供隨時(shí)可查閱的標(biāo)本采集規(guī)范手冊(cè)
每所醫(yī)療機(jī)構(gòu)都要制訂標(biāo)本采集送檢規(guī)范的手冊(cè),采取書面或電子化的方式提供給臨床醫(yī)護(hù)人員,以保證臨床醫(yī)護(hù)人員可以隨時(shí)查閱。要制訂計(jì)劃,定期對(duì)臨床醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行培訓(xùn)。第一節(jié)血培養(yǎng)標(biāo)本血液是來自無菌部位的標(biāo)本。血液培養(yǎng)對(duì)感染性疾病的診斷、治療和預(yù)后有重要的臨床意義。血培養(yǎng)檢測(cè)可以為臨床進(jìn)行血流感染和其他部位感染的診斷提供有力依據(jù)??焖?、準(zhǔn)確的血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果,對(duì)臨床的治療和患者的預(yù)后有著至關(guān)重要的作用。一、臨床采樣指征1.菌血癥
患者出現(xiàn)發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃),或寒顫;白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多(計(jì)數(shù)>10.0×10e9/L,中性粒細(xì)胞增多;或白細(xì)胞計(jì)數(shù)減少(計(jì)數(shù)<3.0×10e9/L);有皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、休克等全身感染癥狀體征,只要具備其中之一,又不能排除細(xì)菌、真菌血流感染的,就應(yīng)進(jìn)行血培養(yǎng)。伴有以下情況之一時(shí),應(yīng)立刻進(jìn)行血培養(yǎng):(1)醫(yī)院獲得性肺炎;(2)留置中心靜脈導(dǎo)管、PICC等血管導(dǎo)管>48h;(3)有免疫功能缺陷伴全身感染癥狀。2.感染性心內(nèi)膜炎
凡原因未明的發(fā)熱,持續(xù)在1周以上,伴有心臟雜音或心臟超聲發(fā)現(xiàn)贅生物,或原有心臟基礎(chǔ)疾病、人工心臟瓣膜植入患者,均應(yīng)多次進(jìn)行血培養(yǎng)檢測(cè)。3.導(dǎo)管相關(guān)血流感染
患者帶有血管內(nèi)導(dǎo)管超過1天或者拔除導(dǎo)管未超過48h,出現(xiàn)發(fā)熱(>38℃)、寒顫或低血壓等全身感染表現(xiàn),不能除外由血管內(nèi)導(dǎo)管引起感染可能的,應(yīng)多次進(jìn)行血培養(yǎng)檢測(cè)。二、標(biāo)本采集1.菌血癥(1)盡可能在患者寒顫開始時(shí),發(fā)熱高峰前30-60min內(nèi)采血。(2)盡可能在使用抗菌藥物治療前采集血培養(yǎng)標(biāo)本;如患者已經(jīng)使用抗菌藥物治療,應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)。(3)采血部位:通常為肘靜脈,切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采血。除非懷疑有導(dǎo)管相關(guān)的血流感染,否則不應(yīng)從留置靜脈或動(dòng)脈導(dǎo)管取血,因?yàn)閷?dǎo)管常伴有定植菌存在。(4)采血工具:建議采用商業(yè)化的真空血培養(yǎng)瓶,室溫保存。同一部位采集兩瓶血培養(yǎng)時(shí)不建議更換針頭。(5)采血次數(shù)、血培養(yǎng)瓶選擇:對(duì)于成人患者,應(yīng)同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本;每個(gè)部位應(yīng)需氧和厭氧培養(yǎng)各一瓶。對(duì)于兒童患者,應(yīng)同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本,分別注入兒童瓶,厭氧瓶一般不需要,除非懷疑患兒存在厭氧菌血流感染。(6)采血量:采血量是影響血培養(yǎng)檢出陽性率的重要因素,采血量過少會(huì)明顯降低血培養(yǎng)陽性率。成人每次每培養(yǎng)瓶應(yīng)采血5-10ml注入成人瓶;嬰幼兒根據(jù)孩子的體重確定采血總量,每培養(yǎng)瓶(兒童瓶)采血2-4ml。(7)皮膚、血培養(yǎng)瓶消毒:為減少皮膚、培養(yǎng)瓶口等對(duì)血培養(yǎng)造成的污染,在穿刺前,應(yīng)對(duì)皮膚和培養(yǎng)瓶口進(jìn)行消毒并充分干燥,以減少假陽性的發(fā)生概率。(8)避免采血管內(nèi)空氣注入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶。(9)避免在靜脈留置導(dǎo)管連接處(如肝素帽處)采血標(biāo)本,避免標(biāo)本污染。2.感染性心內(nèi)膜炎(1)建議在經(jīng)驗(yàn)用藥前30min內(nèi)在不同部位采集2-3套外周靜脈血培養(yǎng)標(biāo)本。如果24h內(nèi)3套血培養(yǎng)標(biāo)本均為陰性,建議再采集3套血培養(yǎng)標(biāo)本送檢。(2)懷疑左心心內(nèi)膜炎時(shí),采集動(dòng)脈血提高血培養(yǎng)陽性率。3.導(dǎo)管相關(guān)血流感染:分為保留導(dǎo)管和不保留導(dǎo)管兩種情況(1)保留導(dǎo)管:分別從外周靜脈和導(dǎo)管內(nèi)各采取1套血培養(yǎng)標(biāo)本,在培養(yǎng)瓶上標(biāo)注采集部位,送往微生物實(shí)驗(yàn)室,同時(shí)進(jìn)行上機(jī)培養(yǎng)。2套血培養(yǎng)檢出同種細(xì)菌,且來自導(dǎo)管的血培養(yǎng)標(biāo)本報(bào)陽時(shí)間比來自外周的血培養(yǎng)標(biāo)本報(bào)陽時(shí)間早2h以上,可診斷導(dǎo)管相關(guān)血流感染。(2)不保留導(dǎo)管:在外周靜脈采集2套血培養(yǎng)標(biāo)本。同時(shí),通過無菌操作剪取已拔出的導(dǎo)管尖端5cm,在血平板上交叉滾動(dòng)4次進(jìn)行送檢。或采用超聲震蕩法留取菌液接種。從導(dǎo)管尖端和外周血培養(yǎng)培養(yǎng)出同種同源細(xì)菌,且導(dǎo)管尖端血平皿的菌落計(jì)數(shù)>15CFU有意義。三、標(biāo)簽和申請(qǐng)單每套血培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽應(yīng)有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,并注明標(biāo)本采集時(shí)間和部位。如疑似感染性心內(nèi)膜炎或疑似導(dǎo)管相關(guān)血流感染患者的標(biāo)本,申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,一定要注明疑似診斷。四、標(biāo)本運(yùn)輸1.血液標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,最好在2h內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。不能及時(shí)送檢者,應(yīng)置室溫暫存。血培養(yǎng)瓶接種前后都禁止放冰箱。2.運(yùn)送的裝置要足夠安全,避免血培養(yǎng)瓶的運(yùn)送過程中因碰撞發(fā)生破裂。五、實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)由于血培養(yǎng)標(biāo)本采取不易,且血流感染患者往往病情急重,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡可能接受血培養(yǎng)標(biāo)本,并盡快進(jìn)行培養(yǎng)檢測(cè)。除非以下幾種情況:1.血培養(yǎng)瓶破裂、滲漏。2.血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)注入非無菌標(biāo)本。第二節(jié)呼吸道標(biāo)本呼吸道感染分為上呼吸道感染和下呼吸道感染。不同部位的感染病原菌差異較大,上呼吸道感染多以病毒為主,下呼吸道感染病原菌多樣,選擇合適的標(biāo)本尤為重要,因?yàn)闃?biāo)本很容易受到口咽部菌群的污染,導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果與臨床不符,誤導(dǎo)臨床診斷與治療。一、咽拭子標(biāo)本咽拭子標(biāo)本僅用于診斷上呼吸道感染,常規(guī)僅報(bào)告A群鏈球菌。1.臨床采樣指征
突發(fā)的咽痛、扁桃體腫大、頸部或頜下淋巴結(jié)腫痛,常伴有發(fā)熱,通常無咳嗽和明顯的鼻溢。Centor標(biāo)準(zhǔn)可作為A群鏈球菌上呼吸道感染的臨床預(yù)測(cè)指標(biāo)。標(biāo)準(zhǔn)包括下列4項(xiàng)內(nèi)容:①扁桃體膿性滲出;②頸部或頜下淋巴結(jié)腫大伴壓痛;③發(fā)熱;④無咳嗽。對(duì)符合3條或以上的成人患者建議進(jìn)行咽拭子培養(yǎng)。2.標(biāo)本采集
囑患者張口發(fā)"啊"音,以暴露咽喉部,必要時(shí)用壓舌板;取出咽拭子中的無菌長(zhǎng)棉簽,快速擦拭兩側(cè)腭弓和咽、扁桃體的分泌物,扁桃體有膿點(diǎn)時(shí)最好擠破膿點(diǎn)并采集膿性物,將棉簽插入運(yùn)送管,蓋緊送檢。3.標(biāo)簽和申請(qǐng)單
申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測(cè)目的,一定要注明標(biāo)本采集時(shí)間。標(biāo)本盒上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明標(biāo)本采集時(shí)間、檢測(cè)目的。4.標(biāo)本運(yùn)送
咽拭子標(biāo)本的運(yùn)送宜采用帶保濕功能的運(yùn)送培養(yǎng)基,避免由于送檢時(shí)間過長(zhǎng)而干燥。如未采用運(yùn)送培養(yǎng)基,應(yīng)于0.5h內(nèi)送檢。即使采用運(yùn)送培養(yǎng)基,室溫保存也不應(yīng)超過24h。二、痰液標(biāo)本痰培養(yǎng)僅用于下呼吸道感染,主要是肺部感染的診斷。但它不是診斷肺部感染的最佳標(biāo)本。血培養(yǎng)、肺泡灌洗液或經(jīng)氣管吸取物的培養(yǎng)結(jié)果更加準(zhǔn)確。痰標(biāo)本不能進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)。痰標(biāo)本采集前,要判斷患者是否有能力配合完成深部咳痰。要向患者充分說明口腔清潔、深咳、避免口咽部菌群污染的意義,指導(dǎo)患者如何正確留取痰標(biāo)本?;颊邞?yīng)在醫(yī)生或護(hù)士直視下留取痰液標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)室要建立痰標(biāo)本的質(zhì)量控制流程,對(duì)于被口咽部菌群污染的標(biāo)本,要予以拒收,并建議臨床再次采集合格標(biāo)本送檢。1.臨床采樣指征
咳嗽、膿性痰,伴有發(fā)熱,影像學(xué)檢查出現(xiàn)新的或擴(kuò)大的浸潤(rùn)影;氣道開放患者,出現(xiàn)膿痰或血性痰;考慮下呼吸道感染患者采集痰液標(biāo)本,同時(shí)送血培養(yǎng)標(biāo)本。2.采集要求
由于肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌等苛養(yǎng)菌是最常見的肺部感染病原體,標(biāo)本盒內(nèi)細(xì)菌在室溫環(huán)境下很容易自溶死亡,如不能在采集標(biāo)本后2h內(nèi)接種將明顯影響檢出率。因此痰標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)十分關(guān)鍵,應(yīng)嚴(yán)格遵循以下原則采集標(biāo)本:(1)爭(zhēng)取首劑抗菌藥物治療使用前及更換抗菌藥物前采集。(2)標(biāo)本采集后保證2h內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室并得到接種。(3)只要有可能得到合格的痰標(biāo)本,應(yīng)馬上采集、送檢。(4)宜在醫(yī)護(hù)人員直視下留取合格痰標(biāo)本。(5)送檢痰標(biāo)本后三天內(nèi)不主張?jiān)俅嗡蜋z。3.標(biāo)本采集
采集前準(zhǔn)備無菌杯(螺口、有蓋、密封)、清水。并向患者提供口頭及書面采樣指導(dǎo),以保證患者充分理解口腔清潔、深咳、避免口咽部菌群污染的意義和方法。(1)用清水漱口2-3次,有假牙者應(yīng)先取下假牙;再用力咳嗽咳出深部痰液。(2)將痰液咳入無菌杯內(nèi)。(3)蓋好并擰緊杯蓋,盡快送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。4.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測(cè)目的,標(biāo)識(shí)是普通培養(yǎng)、抗酸桿菌還是真菌培養(yǎng)。一定要注明標(biāo)本采集時(shí)間。標(biāo)本盒上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明痰標(biāo)本采集時(shí)間和檢測(cè)目的。5.標(biāo)本運(yùn)輸(1)標(biāo)本采集后需盡快送到實(shí)驗(yàn)室,不能超過2h。不及時(shí)運(yùn)送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。(2)不能及時(shí)送達(dá)或待處理標(biāo)本應(yīng)置于4℃冰箱保存(疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列),以免雜菌生長(zhǎng)。但不能超過24h。6.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)質(zhì)量不合格標(biāo)本:顯微鏡下細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)標(biāo)本受口咽部菌群污染。合格痰標(biāo)本鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍視野,白細(xì)胞>25個(gè)/低倍視野,或白細(xì)胞與鱗狀上皮細(xì)胞的數(shù)量比值>2.5。(2)無標(biāo)簽或標(biāo)簽貼錯(cuò)。(3)標(biāo)識(shí)信息不明,未提供采集時(shí)間及送檢目的等。(4)超過2h送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,且未正確保存的標(biāo)本。(5)運(yùn)送容器有滲漏。(6)同一天同一項(xiàng)目重復(fù)送檢的痰標(biāo)本。三、支氣管鏡-肺泡灌洗液(BALF)采集肺泡灌洗液進(jìn)行檢測(cè),可減少口咽部菌群的污染,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。須做定量或半定量接種培養(yǎng)。1.臨床采樣指征
對(duì)于疑似肺炎患者,若有機(jī)會(huì)進(jìn)行氣管鏡檢查,則可同時(shí)采集肺泡灌洗液進(jìn)行培養(yǎng)。不能進(jìn)行深部咳痰的患者,也可考慮通過氣管鏡獲取標(biāo)本。2.標(biāo)本采集
患者咽喉局部麻醉后,導(dǎo)入纖維支氣管鏡。通過纖維支氣管鏡對(duì)病灶所在支氣管以下肺段或亞肺段水平,用37℃或室溫?zé)o菌生理鹽水多次灌洗,每次注入20-60ml(常規(guī)進(jìn)行4-5次),直到總共灌洗100-300ml,并充分吸引回收,從回收液中取出10ml標(biāo)本,放入無菌管中,旋緊蓋子,即刻送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測(cè)目的,標(biāo)識(shí)是普通培養(yǎng)、抗酸桿菌還是真菌培養(yǎng)。一定要注明標(biāo)本種類為肺泡灌洗液,以及采集時(shí)間。無菌管上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明標(biāo)本采集時(shí)間、檢測(cè)目的。4.標(biāo)本運(yùn)輸
標(biāo)本采集后需盡快送到實(shí)驗(yàn)室,不要冷藏標(biāo)本。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)無標(biāo)簽或標(biāo)簽貼錯(cuò)。(2)標(biāo)識(shí)信息不明,未提供采集時(shí)間及送檢目的等。(3)無菌管無蓋子,有污染可能。(4)未及時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本。(5)運(yùn)送容器有滲漏。四、氣道吸取標(biāo)本1.臨床采樣指征
有氣管插管或氣管切開等人工氣道患者,無法自行咳痰,可通過吸痰管從氣道吸取標(biāo)本。2.標(biāo)本采集
通過氣管內(nèi)插管將一次性無菌吸痰管推進(jìn)呼吸道直至遇到阻力后開始抽吸,留取標(biāo)本在吸痰杯內(nèi)。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
每個(gè)標(biāo)本都應(yīng)在申請(qǐng)單上詳細(xì)填寫患者姓名、病歷號(hào)、采集日期時(shí)間、診斷、檢驗(yàn)項(xiàng)目等。在標(biāo)本上粘貼條碼,條碼中應(yīng)包括患者姓名、病歷號(hào)、采集時(shí)間等。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。4.標(biāo)本運(yùn)輸(1)標(biāo)本采集后需盡快送到實(shí)驗(yàn)室,不能超過2h。未及時(shí)運(yùn)送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡;(2)不能及時(shí)送達(dá)或待處理標(biāo)本應(yīng)置于4℃冰箱保存(疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列),以免雜菌生長(zhǎng)。但不能超過24h;(3)對(duì)可疑烈性呼吸道傳染?。⊿ARS、肺炭疽、肺鼠疫等)的患者標(biāo)本,在采集、運(yùn)送或保存過程中應(yīng)注意生物安全保護(hù)。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)無標(biāo)簽或標(biāo)簽貼錯(cuò)。(2)標(biāo)識(shí)信息不明,未提供采集時(shí)間等。(3)超過2h送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,且未正確保存的標(biāo)本。(4)運(yùn)送容器選擇不當(dāng)或有滲漏。(5)同一天同一項(xiàng)目重復(fù)送檢。第三節(jié)尿液標(biāo)本泌尿系統(tǒng)感染可分為單純性尿路感染、復(fù)雜性尿路感染及尿膿毒血癥,診斷主要通過采集尿液標(biāo)本進(jìn)行微生物學(xué)檢測(cè)。其中90%的門診患者和50%左右的住院患者,其病原菌是大腸埃希菌;其他致病微生物還包括其他細(xì)菌、假絲酵母等。泌尿系統(tǒng)感染微生物學(xué)檢測(cè)的方法為尿培養(yǎng)、免疫學(xué)檢測(cè)等。尿液標(biāo)本通常是無菌的或有暫時(shí)性少量定植菌存在。在標(biāo)本采集過程中,應(yīng)避免尿液被尿道或尿道周圍的正常菌群污染。一、臨床采樣指征當(dāng)患者出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛、血尿、腎區(qū)疼痛等癥狀,同時(shí)可能伴有寒顫、高熱、白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高,懷疑存在泌尿系感染;或尿常規(guī)結(jié)果提示泌尿系感染;或留置導(dǎo)尿管患者出現(xiàn)發(fā)熱時(shí),應(yīng)考慮送檢尿液標(biāo)本。無癥狀的患者不建議常規(guī)進(jìn)行尿培養(yǎng)檢測(cè)。二、標(biāo)本采集1.清潔中段尿清潔的中段尿標(biāo)本,是泌尿系感染診斷的主要標(biāo)本;如何避免采集過程中周圍皮膚黏膜及尿道定植菌的污染,是標(biāo)本采集的關(guān)鍵。中段尿標(biāo)本的采集往往由患者獨(dú)立完成,應(yīng)向患者充分說明留取無污染中段尿的意義和具體采集方法。盡可能在未使用抗菌藥物前送檢,晨尿最佳。采集方法如下:(1)女性:在采集標(biāo)本前充分清洗尿道口部位。Ⅰ.分開兩腿;Ⅱ.用肥皂水清洗尿道口部位;Ⅲ.手持采樣杯外側(cè),避免接觸杯口邊緣。先將少量尿液排入便池,然后用采樣杯采集半杯尿液;將蓋子蓋好、旋緊;Ⅳ.檢查杯蓋是否密封,避免溢灑。(2)男性:在采集標(biāo)本前充分清洗尿道口。Ⅰ.將包皮上翻(如果未割包皮),充分暴露龜頭;Ⅱ.用肥皂水清洗尿道口;Ⅲ.手持采樣杯外側(cè),避免接觸杯口邊緣。先將少量尿液排入便池,然后用采樣杯采集半杯尿液;將蓋子蓋好、旋緊;Ⅳ.檢查杯蓋是否密封,避免溢灑。2.導(dǎo)尿管采集尿液因存在著極大的污染可能,禁止從集尿袋中采集標(biāo)本,可直接穿刺導(dǎo)尿管近端側(cè)壁采集尿液標(biāo)本。具體操作如下:(1)夾閉導(dǎo)尿管不超過30min;(2)用酒精棉球消毒清潔導(dǎo)管近端采樣部位周圍外壁;(3)將注射器針頭穿刺進(jìn)入導(dǎo)管腔,抽吸出尿液;(4)收集的尿液置于無菌尿杯或試管中;(5)檢查杯蓋是否密封,避免灑溢。3.恥骨上膀胱穿刺如需進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)或兒童及其他無法配合獲得清潔尿液標(biāo)本時(shí),應(yīng)采用恥骨上膀胱穿刺。(1)消毒臍部至尿道之間區(qū)域的皮膚。(2)對(duì)穿刺部位進(jìn)行局部麻醉。(3)在恥骨聯(lián)合和臍部中線部位將針頭插入充盈的膀胱。(4)用無菌注射器從膀胱吸取尿液。(5)無菌操作將尿液轉(zhuǎn)入無菌螺口杯,盡快送至實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。(6)厭氧菌培養(yǎng),可進(jìn)行床旁接種,將培養(yǎng)平板放入?yún)捬醮迌?nèi)送檢;或無菌操作直接將注射器中的尿液注入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶中,迅速送檢。三、標(biāo)簽及申請(qǐng)單申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,一定注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本留取方式和采集時(shí)間。尿杯上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明標(biāo)本種類和采集時(shí)間,此信息尤其重要。四、標(biāo)本運(yùn)輸(1)尿標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。(2)若不能在采集30min內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),應(yīng)放入4℃冰箱保存,但也不能超過24h。五、實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)標(biāo)識(shí)不明,未提供采集時(shí)間及采集方法。(2)標(biāo)本類型與標(biāo)簽信息不符。(3)尿標(biāo)本采集后超過30min送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,且未冷藏保存的。(4)患者集尿袋中的尿液標(biāo)本。(5)申請(qǐng)做厭氧菌培養(yǎng)但未從恥骨弓上穿刺采集尿液。(6)容器破損、尿液滲漏。(7)明顯污染的標(biāo)本。(8)標(biāo)本量太少。(9)申請(qǐng)厭氧菌培養(yǎng),標(biāo)本未在厭氧條件下送檢。第四節(jié)其他無菌體液標(biāo)本一、腦脊液腦脊液是診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染最主要的標(biāo)本。1.臨床采樣指征
臨床出現(xiàn)不明原因的頭痛、發(fā)熱、腦膜刺激征(頸強(qiáng)直、克氏征、布氏征陽性)、腦神經(jīng)病理征象;腦積水;腦性低鈉血癥等癥狀,懷疑中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時(shí)應(yīng)送檢腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本,并同時(shí)送檢血培養(yǎng)標(biāo)本。2.標(biāo)本采集
懷疑患者細(xì)菌性腦膜炎時(shí),應(yīng)立即采集腦脊液和血培養(yǎng),應(yīng)在抗菌藥物使用前采集。懷疑分枝桿菌、隱球菌或慢性腦膜炎時(shí),可能需多次采集腦脊液標(biāo)本。如懷疑存在顱內(nèi)壓增高時(shí),應(yīng)先行檢查頭顱CT,必要時(shí),可先予以脫水治療再行穿刺。懷疑細(xì)菌性腦膜炎時(shí),建議同時(shí)送檢2-4套血培養(yǎng)標(biāo)本。由臨床醫(yī)師采集,嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。消毒穿刺部位皮膚,通常在第3、4腰椎或第4、5腰椎間隙插入帶有管芯針的空針,進(jìn)針至蛛網(wǎng)膜間隙,拔去管芯針,收集腦脊液5-10ml,分別置于3支無菌試管中,第一管做化學(xué)或免疫學(xué)檢查,第二管做細(xì)菌學(xué)檢查,第三管做細(xì)胞學(xué)檢查?!拘【幾ⅰ吭缦鹊馁Y料推薦的是第1管腦脊液做細(xì)菌學(xué)檢查,第2管腦脊液做化學(xué)/免疫學(xué)檢查。2014年出版的《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)》開始推薦,采集的第1管腦脊液用于化學(xué)/免疫學(xué)檢查,第2管腦脊液用于病原微生物學(xué)檢查,第3管腦脊液用于理學(xué)和顯微鏡檢查(即常規(guī)檢查)。隨后,新版的人衛(wèi)社醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)本科教材,2017年出版的工具書《臨床血液與體液檢驗(yàn)》(彭明婷主編),均采用了這一順序?!杜R床血液與體液檢驗(yàn)》對(duì)此給出的解釋是,第1管腦脊液可能受到皮屑等物的干擾。細(xì)菌學(xué)檢查要求適量標(biāo)本:細(xì)菌≥1ml,真菌≥2ml,分枝桿菌≥2ml。腦脊液采集量不能<1ml。盡可能多收集腦脊液,可以提升培養(yǎng)的陽性檢出率,尤其是針對(duì)真菌和分枝桿菌的培養(yǎng)。如送檢T-SPOT.TB,還需注意添加肝素抗凝。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。血培養(yǎng)瓶及無菌管需清晰標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的、臨床診斷、申請(qǐng)醫(yī)師等。應(yīng)注明是否已經(jīng)使用抗菌藥物。特殊病原菌檢查如奴卡菌、真菌、分枝桿菌應(yīng)注明。不同來源部位要進(jìn)行注明,腦室分流的標(biāo)本應(yīng)注明"腦室分流液",而不是"腦脊液"。4.標(biāo)本運(yùn)輸
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,不超過1h;腦脊液標(biāo)本不可冷藏。臨床懷疑腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌感染,標(biāo)本應(yīng)注意保溫運(yùn)送。若懷疑厭氧菌感染,可將腦脊液直接注入血厭氧培養(yǎng)瓶中,迅速送檢。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符。(2)樣本外漏、容器破損或明顯受到污染。(3)標(biāo)本量少,送檢延遲,未按規(guī)定保存。(4)申請(qǐng)厭氧菌培養(yǎng),標(biāo)本未在厭氧條件下送檢。二、胸水胸水以細(xì)菌性胸膜炎最為常見,也可見于膈下炎癥、肺結(jié)核、肺炎等疾病。低蛋白或腫瘤性疾病也可以引起的胸腔積液。1.臨床采樣指征
患者聽診、影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)胸腔積液,胸腔穿刺后發(fā)現(xiàn)胸腔積液渾濁、乳糜性、血性或膿性,考慮感染性胸腔積液(肺結(jié)核、肺炎、胸膜炎)患者應(yīng)送檢,進(jìn)行涂片染色、細(xì)菌培養(yǎng)等細(xì)菌學(xué)檢測(cè)。2.標(biāo)本采集
盡可能在抗菌藥物使用前采集。由臨床醫(yī)師經(jīng)皮穿刺或外科方式獲得;嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。通過影像學(xué)或叩診定位穿刺部位,消毒穿刺部位皮膚,麻醉穿刺部位,用中空孔針穿刺至胸膜腔內(nèi),抽取胸水標(biāo)本;標(biāo)本采集后可直接注入血培養(yǎng)瓶送檢,或?qū)?biāo)本收集到帶螺旋帽內(nèi)無菌管送檢,以便微生物室進(jìn)行涂片檢查。標(biāo)本量分別為細(xì)菌培養(yǎng)≥1ml,真菌培養(yǎng)≥10ml,分枝桿菌培養(yǎng)≥10ml。不要拭子蘸取標(biāo)本。如送檢T-SPOT.TB,還需注意添加肝素抗凝。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本來源、檢測(cè)目的,注明胸水的類型、性狀,以及特殊檢驗(yàn)需求。血培養(yǎng)瓶及無菌管要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。需標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的等。4.標(biāo)本運(yùn)輸
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,通常室溫15min內(nèi)應(yīng)送至實(shí)驗(yàn)室,若不能及時(shí)送檢,不可冷藏。室溫保存不得超過24h。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符。(2)樣本外漏、容器破損或明顯受到污染。(3)標(biāo)本量過少,或凝固。(4)送檢延遲,未按規(guī)定保存。三、腹水腹腔積液分為漏出液和滲出液,滲出液多由感染引起,常見細(xì)菌、結(jié)核分枝桿菌、厭氧菌感染。1.臨床采樣指征
出現(xiàn)但不局限于發(fā)熱、腹脹、腹部疼痛、壓痛、反跳痛;并經(jīng)影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)積液者。2.標(biāo)本采集
盡可能在抗菌藥物使用前采集。由臨床醫(yī)師經(jīng)皮穿刺或外科方式獲得;嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。可由超聲定位。消毒穿刺部位皮膚,麻醉穿刺部位,用中空孔針穿刺,標(biāo)本采集后可注入無菌瓶或無菌試管送檢。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本來源、檢測(cè)目的,注明腹水的類型、性狀,以及特殊檢驗(yàn)需求。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。無菌管需標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的等。4.標(biāo)本運(yùn)輸
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,通常室溫15min內(nèi)應(yīng)送至實(shí)驗(yàn)室,若不能及時(shí)送檢,不可冷藏。室溫保存不得超過24h。腹水如需厭氧菌檢測(cè),使用標(biāo)本采集管留取腹水,把試管放置在厭氧袋等無氧條件下迅速送檢;或?qū)⒏顾苯幼⑷雲(yún)捬跹囵B(yǎng)瓶中送檢。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符。(2)樣本外漏、容器破損或明顯受到污染。(3)標(biāo)本量過少,或凝固。(4)送檢延遲,未按規(guī)定保存。(5)申請(qǐng)厭氧菌培養(yǎng),標(biāo)本未在厭氧條件下送檢。四、關(guān)節(jié)液感染是導(dǎo)致關(guān)節(jié)滑膜炎一個(gè)主要原因。常見細(xì)菌感染,偶見病毒、真菌、分枝桿菌感染??沙槿£P(guān)節(jié)腔積液進(jìn)行革蘭氏染色、細(xì)菌培養(yǎng)、厭氧菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核分枝桿菌等細(xì)菌學(xué)檢測(cè)。1.臨床采樣指征
影像學(xué)發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)腔積液,伴有關(guān)節(jié)腫脹、疼痛,活動(dòng)受限,病因不明、治療無效,懷疑感染性關(guān)節(jié)炎應(yīng)送檢。2.標(biāo)本采集
盡可能在抗菌藥物使用前采集。關(guān)節(jié)腔穿刺應(yīng)由有經(jīng)驗(yàn)的臨床醫(yī)師在嚴(yán)格的無菌操作下進(jìn)行。嚴(yán)格的皮膚消毒,局部麻醉穿刺部位,中空針頭穿刺入關(guān)節(jié)腔,盡可能多地抽取關(guān)節(jié)液標(biāo)本。可直接注入血培養(yǎng)瓶或無菌管內(nèi)送檢。如果考慮厭氧菌培養(yǎng),需要在厭氧條件下運(yùn)送標(biāo)本。如有全身發(fā)熱癥狀,應(yīng)同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本來源、檢測(cè)目的,注明關(guān)節(jié)液的性狀,以及特殊檢驗(yàn)需求。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。需標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的等。4.標(biāo)本運(yùn)輸
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,通常室溫15min內(nèi)應(yīng)送至實(shí)驗(yàn)室,若不能及時(shí)送檢,不可冷藏。室溫保存不得超過24h。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符。(2)樣本外漏、容器破損或明顯受到污染。(3)標(biāo)本量過少,或凝固。(4)送檢延遲,未按規(guī)定保存。第五節(jié)胃腸道標(biāo)本胃腸道感染,包括細(xì)菌性痢疾、微生物引起的胃腸炎、細(xì)菌性食物中毒、腸道感染、消化性潰瘍和抗菌藥物相關(guān)性腹瀉等疾病,是細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲和寄生蟲經(jīng)口腔進(jìn)入消化道后一定條件下引起的胃腸道功能障礙。由于引起胃腸道感染的微生物種類繁多,診斷比較困難,因此加強(qiáng)對(duì)胃腸道標(biāo)本的病原微生物檢測(cè)具有重要臨床意義。正確的標(biāo)本采集和及時(shí)送檢是保證胃腸道感染細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量的關(guān)鍵。一、糞便標(biāo)本糞便是診斷胃腸道感染的最主要標(biāo)本。1.臨床采樣指征
當(dāng)患者出現(xiàn)腹痛、腹瀉(水樣便、膿血便),或伴有發(fā)熱;糞便常規(guī)鏡檢異常,建議采集糞便標(biāo)本,進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。2.標(biāo)本采集與要求
標(biāo)本的采集盡可能在應(yīng)用抗菌藥物治療前,標(biāo)本應(yīng)收集在寬口便盒內(nèi),并加蓋密封。如考慮空腸彎曲菌需要無血彎曲菌瓊脂培養(yǎng)基。艱難梭狀桿菌需在厭氧環(huán)境中生存,建議在床旁進(jìn)行標(biāo)本的采集及接種。接種后的標(biāo)本立即放入?yún)捬醮鼉?nèi),送至實(shí)驗(yàn)室。重復(fù)采集標(biāo)本,可提高陽性檢出率。(1)自然排便法患者在干燥清潔便盆(避免使用坐式或蹲式馬桶)內(nèi)自然排便后,挑取有膿血、黏液部分的糞便2-3g(液體糞便則取絮狀物1-3ml)放入無菌便盒內(nèi)送檢。若無黏液、膿血,則在糞便上多點(diǎn)采集送檢。此為常規(guī)方法。(2)直腸拭子法用肥皂水將肛門周圍洗凈,將蘸有無菌生理鹽水的棉拭子插入肛門4-5cm(兒童為2-3cm)。棉拭子與直腸黏膜表面接觸,輕輕旋轉(zhuǎn)拭子,可明顯在拭子上見到糞便。將帶有糞便標(biāo)本的棉拭子插入運(yùn)送培養(yǎng)基,立即送檢。本方法僅適用于排便困難的患者或嬰幼兒,不推薦使用拭子做常規(guī)標(biāo)本。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單上應(yīng)包括患者姓名、病歷號(hào)、采集日期時(shí)間、診斷、相關(guān)旅行史等。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。標(biāo)本上的標(biāo)簽中應(yīng)包括患者姓名、病歷號(hào)、采集時(shí)間等。送檢的新鮮標(biāo)本應(yīng)報(bào)告糞便的性狀,標(biāo)本表面或標(biāo)本里面存在血液也應(yīng)注明。4.標(biāo)本運(yùn)輸
糞便標(biāo)本應(yīng)盡快送檢,室溫下運(yùn)送標(biāo)本時(shí)間不超過2h。若不能及時(shí)送檢,可加入pH=7.0磷酸鹽甘油緩沖保存液或使用Cary-Blair送培養(yǎng)基置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過24h。直腸拭子采集的標(biāo)本應(yīng)置入Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基或GN肉湯中送檢。室溫下運(yùn)送時(shí)間不應(yīng)超過2h,4℃冰箱保存不超過24h。高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本需專人運(yùn)送,應(yīng)符合特殊標(biāo)本的安全要求。5.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)
標(biāo)本容器上未貼標(biāo)簽或貼錯(cuò)標(biāo)簽、送檢時(shí)間超過規(guī)定時(shí)間、保存不當(dāng)、標(biāo)本有泄漏、送檢容器不合格(如容器被壓碎或有破裂)、標(biāo)本量不足、干燥的拭子、含鋇糞便、干便、明顯污染的糞便以及一日內(nèi)重復(fù)送檢的標(biāo)本,不做實(shí)驗(yàn)室相關(guān)檢測(cè),并應(yīng)設(shè)法與臨床醫(yī)師聯(lián)系,可要求重新留取標(biāo)本,做好記錄。在未與醫(yī)師溝通之前標(biāo)本不應(yīng)丟棄,仍按實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本保存原則存放。若采集2h后未使用運(yùn)輸培養(yǎng)基運(yùn)送、以運(yùn)輸培養(yǎng)基送檢但4℃保存超過48h或35℃保存超過24h的標(biāo)本不能送檢,應(yīng)在報(bào)告單上標(biāo)記"樣本運(yùn)送延遲,培養(yǎng)可能出現(xiàn)假陰性"。二、胃活檢組織標(biāo)本胃鏡活檢組織培養(yǎng)適用于胃炎、消化性潰瘍的患者,主要用于幽門螺旋桿菌的檢測(cè)。1.臨床采樣指征
一般不建議只為幽門螺旋桿菌診斷進(jìn)行胃鏡檢查。接受胃鏡檢查者,可進(jìn)行活組織染色鏡檢。幽門螺旋桿菌培養(yǎng)因其生長(zhǎng)條件要求復(fù)雜,不能常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。2.標(biāo)本采集與要求
經(jīng)胃鏡用活檢鉗在胃竇小彎側(cè)距幽門5cm(鄰近胃角處)、胃竇大彎側(cè)正對(duì)胃角處或病變鄰近處采集1-2塊樣品。為了明確內(nèi)鏡所見病變的性質(zhì),可選擇病變處局部黏膜進(jìn)行活檢。隆起性病灶在其頂部(充血、糜爛等)及其基底部(糜爛、凹凸不平、色澤改變等)活檢,息肉的隆起性病灶也可完整切除后送檢;平坦性病灶在病灶周邊或中央、黏膜皺襞中斷處活檢;潰瘍性病灶在潰瘍邊緣黏膜隆起的頂部或內(nèi)側(cè)黏膜多點(diǎn)活檢;局部黏膜病灶也可根據(jù)染色、放大內(nèi)鏡觀察的結(jié)果,針對(duì)最可疑或最典型的病變部位進(jìn)行活檢。標(biāo)本采集應(yīng)在停服鉍劑或抗菌藥物7天后進(jìn)行。3.標(biāo)簽及申請(qǐng)單
申請(qǐng)單上應(yīng)包括患者姓名、病歷號(hào)、采集日期時(shí)間、診斷等,要明確注明標(biāo)本采集的部位,以及檢測(cè)目的,如"幽門螺旋桿菌培養(yǎng)"。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。標(biāo)本上的標(biāo)簽中應(yīng)包括患者姓名、病歷號(hào)、采集時(shí)間、采集部位等。4.實(shí)驗(yàn)室拒收原則
對(duì)于未將患者和采集信息標(biāo)識(shí)完整的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)聯(lián)系臨床醫(yī)師,補(bǔ)全信息;對(duì)于標(biāo)本容器貼錯(cuò)標(biāo)簽、送檢容器不合格、送檢時(shí)間超過規(guī)定時(shí)間、樣本保存不當(dāng)、有明顯的污染等時(shí)應(yīng)拒收。第六節(jié)生殖道標(biāo)本生殖系統(tǒng)感染主要包括外陰部病變、尿道炎、陰道炎、陰道病、宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎和盆腔炎。病原體包括細(xì)菌、真菌、淋病奈瑟菌、解脲脲原體和人型支原體、沙眼衣原體等。各類感染的臨床癥狀和體征比較相似,臨床不易區(qū)分。通過檢測(cè)明確診斷對(duì)于治療,尤其是保證患者治療依從性至關(guān)重要。大多數(shù)生殖道感染為性傳播性疾?。⊿TD),當(dāng)疑為生殖道感染性疾病時(shí),首先了解是否有不潔性交史,然后根據(jù)癥狀確定檢查方向。對(duì)于男性患者來講,先檢查尿道是否有膿性分泌物,再依次是前列腺液、精液。對(duì)于女性患者,采集陰道后穹隆處或?qū)m頸分泌物作培養(yǎng)或涂片鏡檢。1.臨床采樣指征具有外陰潰瘍、瘙癢及灼熱感,出現(xiàn)分泌物、贅生物等癥狀者。2.采樣要求(1)病原體培養(yǎng)應(yīng)在抗菌藥物應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本。(2)生殖器是開放性器官,標(biāo)本采集過程中應(yīng)遵循無菌操作以減少雜菌污染。(3)陰道內(nèi)有大量正常菌群存在,采取宮頸標(biāo)本應(yīng)避免觸及陰道壁。(4)沙眼衣原體在宿主細(xì)胞內(nèi)繁殖,采集時(shí)盡可能多的取上皮細(xì)胞。3.采集方法(1)尿道分泌物Ⅰ.男性:取樣前至少1h內(nèi)不要小便。用無菌生理鹽水清洗尿道口,用滅菌紗布或棉球擦干,用男性拭子采取從尿道口溢出的膿性分泌物或?qū)⒛行允米硬迦肽虻纼?nèi)2-4cm取分泌物,置無菌試管中。如無膿液溢出,可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩,促使分泌物溢出。Ⅱ.女性:取樣前至少1h內(nèi)不要小便。用無菌生理鹽水清洗尿道口,用滅菌紗布或棉球擦干,然后經(jīng)陰道內(nèi)診壓迫尿道,從尿道的后面向前按摩,使分泌物溢出,用無菌女性拭子采樣。無肉眼可見的分泌物時(shí),可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi),轉(zhuǎn)動(dòng)并停留10-20s,拔出后,置入無菌試管內(nèi)送檢。(2)陰道分泌物:用擴(kuò)陰器擴(kuò)張陰道,用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4cm內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物。退出時(shí)不要觸及皮膚,避免污染。(3)宮頸分泌物:用擴(kuò)陰器擴(kuò)張陰道,先用無菌棉球擦除宮頸口分泌物,再用女性拭子插入宮頸管2cm,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),并停留10-30s。采樣拭子置入無菌試管內(nèi)送檢。(4)子宮腔分泌物:用擴(kuò)陰器擴(kuò)張陰道,在宮頸內(nèi)放置導(dǎo)管,通過導(dǎo)管插入培養(yǎng)拭子的尖端并采集子宮內(nèi)腔分泌物。防止接觸宮頸黏膜,減少污染。拭子置于無菌試管內(nèi)送檢。(5)巴氏腺、尿道旁腺:清洗或局部消毒,然后壓迫腺體,使分泌物溢出,用無菌拭子采樣。(6)盆腔膿腫者:應(yīng)消毒陰道后,進(jìn)行后穹隆穿刺,由直腸子宮凹陷處抽取標(biāo)本。(7)前列腺液:用肥皂和水清洗陰莖頭,經(jīng)直腸前列腺按摩獲取前列腺液,用無菌拭子采集前列腺液。標(biāo)本置于無菌容器內(nèi)送檢。(8)精液:受檢者應(yīng)在5天內(nèi)未排精。清洗尿道口,體外排精,精液置于滅菌容器內(nèi)送檢。(9)潰瘍分泌物:先用生理鹽水清洗患處,再用滅菌棉拭子取其邊緣或其基底部的分泌物,標(biāo)本置于滅菌試管內(nèi)送檢。4.標(biāo)簽及申請(qǐng)單每份標(biāo)本都應(yīng)貼上標(biāo)簽并標(biāo)明必要信息,在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫足夠的有關(guān)臨床資料。包括患者情況(病區(qū)、患者姓名、住院號(hào))、標(biāo)本情況(標(biāo)本類型、檢驗(yàn)?zāi)康?、采集部位、采集方法、采集時(shí)間等)和患者用藥等信息。5.標(biāo)本運(yùn)輸標(biāo)本應(yīng)在室溫下15min內(nèi)送到檢驗(yàn)科。若超過2h送達(dá),4℃冷藏保存。6.實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)(1)申請(qǐng)錯(cuò)誤:如下生殖道標(biāo)本要求做厭氧培養(yǎng),陰道分泌物要求做淋病奈瑟菌涂片。(2)標(biāo)識(shí)錯(cuò)誤:無標(biāo)簽或標(biāo)簽不完整,或標(biāo)本標(biāo)識(shí)與申請(qǐng)單標(biāo)識(shí)不一致;未標(biāo)出標(biāo)本采集時(shí)間及部位;未在申請(qǐng)單上注明標(biāo)本來源和送檢目的等。(3)送檢錯(cuò)誤:送檢延誤;運(yùn)送培養(yǎng)基錯(cuò)誤;運(yùn)送溫度錯(cuò)誤。(4)容器錯(cuò)誤:未用無菌容器,容器破裂或滲漏。(5)標(biāo)本錯(cuò)誤:標(biāo)本有明顯污染,標(biāo)本量不足或已干。第七節(jié)皮膚、軟組織標(biāo)本皮膚及軟組織感染(SSTI)是致病菌侵犯表皮、真皮和皮下組織引起的炎癥性疾病。皮膚及軟組織感染包括燒傷創(chuàng)面感染、手術(shù)后切
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