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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組:①分組原則:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組應(yīng)嚴(yán)格按照隨機(jī)分組的原則進(jìn)行,使每只動(dòng)物都有同等機(jī)會(huì)被分配到各個(gè)實(shí)驗(yàn)組中去,盡量避免人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響。②建立對(duì)照組:空白對(duì)照:指在對(duì)照組不加任何處理的”空白“條件下進(jìn)行觀察、研究;實(shí)驗(yàn)對(duì)照:指在一定實(shí)驗(yàn)條件下所進(jìn)行的觀察、對(duì)比;標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照:是以正常值或標(biāo)準(zhǔn)值作為對(duì)照,在所謂標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行觀察的對(duì)照;自身對(duì)照:在觀察的不同時(shí)期接受不同療法,然后比較它們的差異,這種方法也稱自身交叉對(duì)照;相互對(duì)照:各實(shí)驗(yàn)相互對(duì)照。2.目前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)常用的標(biāo)記編號(hào)方法有染色法、耳孔法、烙印法、掛牌法等。此外還有針刺法、斷趾編號(hào)法、剪尾編號(hào)法、被毛剪號(hào)法、籠子編號(hào)法等。3.常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛去除方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法、脫毛法4種。4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥和采血:小鼠:給藥方法:灌胃給藥、注射給藥【皮下注射給藥、皮內(nèi)注射給藥、肌內(nèi)注射給藥、靜脈注射給藥、腹腔注射給藥;采血:剪尾采血、摘除眼球采血、心臟采血、斷頭采血。大鼠:給藥方法:灌胃給藥、注射給藥【皮下注射給藥、皮內(nèi)注射給藥、肌內(nèi)注射給藥、靜脈注射給藥、腹腔注射給藥;采血:剪尾采血、割尾靜脈取血、眼眶靜脈叢(竇)取血、摘除眼球采血、心臟采血、斷頭采血。5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉方法:對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行麻醉的目的是,消除實(shí)驗(yàn)過(guò)程中引起的痛苦和不適,確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。①
全身麻醉藥:常用的包括非揮發(fā)性和揮發(fā)性兩大類,非揮發(fā)性麻醉藥如戊巴比妥鈉、異戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、烏拉坦、氯胺酮等,以及揮發(fā)性麻醉藥入乙醚氯仿等。全身麻醉方法:有吸入麻醉法和注射麻醉法兩種途徑,吸入麻醉法用揮發(fā)性麻醉藥,注射麻醉法用非揮發(fā)性麻醉藥。其中,麻醉藥經(jīng)呼吸道吸入而產(chǎn)生麻醉者稱吸入麻醉法,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)大都采用開(kāi)放吸入法。而注射麻醉法,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中比較常用,麻醉藥物中使用頻率最高的是戊巴比妥鈉;家兔、貓、犬、猴等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用腹腔注射或靜脈注射戊巴比妥鈉進(jìn)行全麻,嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物則僅用腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉。②
局部麻醉藥物:常用的有普魯卡因、丁卡因等。局麻方法:表面麻醉:主要用于局部黏膜麻醉,常用藥物為2%鹽酸丁卡因溶液;局部浸潤(rùn)麻醉:主要用于手術(shù)切口等麻醉,使用藥物為0.5%-1.0%鹽酸普魯卡因溶液。6.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的病例剖檢:(詳見(jiàn)P207)①基本要求:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景資料記錄、體表檢查、病理取材基本要求;②病理剖檢基本操作:常用器械及使用方法:解剖刀、手術(shù)剪、血管鉗、手術(shù)鑷、拉鉤;基本操作:切開(kāi)、組織分離法、結(jié)扎、止血(紗布?jí)K壓迫止血法、鉗夾止血法、結(jié)扎止血法)。③
剖檢取材程序:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體的固定:通常為仰臥位固定;剖檢順序:多為先腹腔后胸腔,再腦、脊髓、骨髓、皮膚肌肉等,取材順序基本與此相同;檢查內(nèi)容:位置、大小、色澤、附加物、質(zhì)地、切面、中空、器官的黏膜面;剖檢和取材程序:腹腔和腹腔器官、盆腔器官、胸腔口腔及其器官、顱腔及腦。
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