添加果寡糖和枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道菌群數(shù)量及生產(chǎn)性能的影響

添加果寡糖和枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道菌群數(shù)量及生產(chǎn)性能的影響

氨基葡萄糖和苦草芽的細(xì)菌；基礎(chǔ)食品：150mg/kg金霉素（有效成分為15%）?；A(chǔ)飼糧參照NRC(1994)家禽營(yíng)養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn),見表1。試驗(yàn)雞自由采食和飲水,飼養(yǎng)管理和免疫程序參照有關(guān)文獻(xiàn)資料進(jìn)行。試驗(yàn)地點(diǎn)為北京農(nóng)學(xué)院實(shí)驗(yàn)雞舍。1.2果寡糖和枯草芽孢桿菌果寡糖由江南大學(xué)食品學(xué)院提供,組分按HPLC法測(cè)定為:單糖1.83%,蔗糖1.13%,蔗果三糖39.81%,蔗果四糖49.78%,蔗果五糖7.06%;枯草芽孢桿菌為本課題組跨越計(jì)劃項(xiàng)目“安全畜牧微生物飼料生產(chǎn)與使用技術(shù)(中試)科研成果,枯草芽孢桿菌總含量(60±5)億/g。1.3腸道檢測(cè)細(xì)菌數(shù)量1.3.1生產(chǎn)性能于0,3,6周齡時(shí)分別按每個(gè)重復(fù)進(jìn)行稱重;于3,6周齡末時(shí)按重復(fù)結(jié)算飼料消耗量。以重復(fù)為單位分別計(jì)算各處理組肉雞的平均日增重、平均日采食量和飼料轉(zhuǎn)化率。每日定期觀察試驗(yàn)雞的健康狀況,記錄腹瀉雞數(shù)和死淘數(shù),腹瀉的標(biāo)準(zhǔn)為在泄殖腔口可見明顯的干或稀濕糞便黏附。以重復(fù)為統(tǒng)計(jì)單位,分別計(jì)算各處理組試驗(yàn)雞的腹瀉率和死淘率。1.3.2腸道菌群數(shù)量分別從21日齡和42日齡各處理組中隨機(jī)選取6只試雞,肌肉注射戊巴比妥酸鈉麻醉后,迅速解剖,截取盲腸末端2cm腸段,液氮保存至實(shí)驗(yàn)分析。將樣品從液氮中取出,在超凈操作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行10-4~10-9倍比稀釋。本試驗(yàn)擬測(cè)定肉雞盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌、沙門氏菌、總需氧菌和乳酸桿菌的數(shù)量。大腸桿菌、沙門氏菌和總需氧菌:將盲腸內(nèi)容物的稀釋液(每類細(xì)菌分設(shè)3個(gè)適宜梯度)各200μL分別接種于伊紅美蘭瓊脂、SS瓊脂和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿上(各稀釋度分設(shè)3個(gè)重復(fù)),用滅菌曲玻棒小心攤勻,在37℃生化培養(yǎng)箱中有氧培養(yǎng)24h后菌落計(jì)數(shù)。乳酸桿菌:將盲腸內(nèi)容物的稀釋液(每類細(xì)菌分設(shè)3個(gè)適宜梯度)200μL接種于乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)(LBS)平皿上(各稀釋度分設(shè)3個(gè)重復(fù)),用滅菌曲玻棒小心攤勻,將培養(yǎng)平皿置于自制厭氧罐中,在37℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。平皿培養(yǎng)后,選擇最適宜的稀釋梯度(以長(zhǎng)30~300個(gè)菌落為宜),對(duì)4種微生物進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù),求其平均值并計(jì)算每克腸道內(nèi)容物所含的細(xì)菌數(shù)(LgCFU/g)。1.4數(shù)據(jù)處理采用SPSS11.0軟件,對(duì)所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,差異顯著者再作Duncan氏多重比較。2抗生素的影響2.1果寡糖和枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響由表2可見,果寡糖、枯草芽孢桿菌和果寡糖+枯草芽孢桿菌均顯著(P<0.05)提高肉雞生長(zhǎng)全期(0~6周齡)的平均日增重,但果寡糖對(duì)0~3周齡肉雞平均日增重的影響不明顯;抗生素雖然顯著(P<0.05)提高0~3周齡肉雞的平均日增重,但這種影響未能在3~6周齡和0~6周齡表現(xiàn)出來。果寡糖、枯草芽孢桿菌、果寡糖+枯草芽孢桿菌和抗生素均顯著(P<0.05)改善肉雞生長(zhǎng)全期(0~6周齡)的飼料轉(zhuǎn)化率;與果寡糖、枯草芽孢桿菌和果寡糖+枯草芽孢桿菌不同的是,抗生素對(duì)飼料轉(zhuǎn)化率的影響主要體現(xiàn)在0~3周齡階段。各處理組之間平均日采食量的差異均不顯著(P>0.05)。各處理組肉雞的腹瀉主要出現(xiàn)在0~3周齡;腹瀉率以抗生素組為最低,枯草芽孢桿菌組和果寡糖+枯草芽孢桿菌組其次,果寡糖組則與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。本試驗(yàn)肉雞的死淘率都很低,僅有零星個(gè)例發(fā)生,各處理組之間差異均不顯著3果寡糖和枯草芽孢桿菌對(duì)雞肉盲腸微生物的影響腸道菌群存在于宿主動(dòng)物的消化道中,受飼料和環(huán)境等因素的影響而發(fā)生變化?？股卦缭?0世紀(jì)40年代就開始用于調(diào)控畜禽消化道微生物區(qū)系,曾對(duì)飼料工業(yè)的發(fā)展起到重要推動(dòng)作用?，F(xiàn)有的科研和生產(chǎn)都表明,抗生素不但在促生長(zhǎng)機(jī)理方面不明確,而且在實(shí)際應(yīng)用中還存在一系列以下問題,如殘留、耐藥性、二重感染和降低機(jī)體免疫力等,其應(yīng)用受到了很大的限制。因此,研制安全性高的抗生素和抗生素的替代品已成為研究熱點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外眾多報(bào)道認(rèn)為,果寡糖、益生素及其合生元等微生態(tài)制劑能夠調(diào)控畜禽消化道微生態(tài)環(huán)境,提高其生產(chǎn)性能和改善機(jī)體健康狀況。在本研究中,果寡糖和枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞盲腸微生物的影響較為相似,而與金霉素有較大的不同。這兩種添加劑都減少肉雞盲腸中的總需氧菌、大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量,增加乳酸桿菌的數(shù)量;而且隨著肉雞的生長(zhǎng),這種作用更加明顯。據(jù)報(bào)道,芽孢桿菌可使胃腸道內(nèi)有益菌如乳酸桿菌和鏈球菌的數(shù)量增加,這些細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生大量的有機(jī)酸使腸道內(nèi)pH下降,從而抑制胃腸道內(nèi)病原菌的繁殖;而且有報(bào)道已從芽孢桿菌中分離出桿菌肽,這也可抑制病原菌的繁殖。芽孢桿菌雖然耐熱,有利于飼料加工,但由于不是畜禽消化道主要正常菌群,在消化道內(nèi)發(fā)芽和定植不穩(wěn)定,使其推廣應(yīng)用受到一定的限制。果寡糖是一種非消化寡糖,不能被單胃動(dòng)物體內(nèi)分泌的消化酶分解,只能以未降解的形式進(jìn)入后段腸道被乳酸桿菌和雙歧桿菌等有益微生物分解利用,使腸道有益微生物得到大量繁殖,成為腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌群;幾乎不能被有害菌(如大腸桿菌、沙門氏菌等)利用;從而維持了腸道菌群的平衡,促進(jìn)了動(dòng)物的健康;而且寡糖具有低熱、穩(wěn)定、無殘留和耐藥性等優(yōu)點(diǎn),是一種很有開發(fā)潛力的綠色飼料添加劑。在本研究中,果寡糖對(duì)肉雞盲腸大腸桿菌和總需氧菌的抑制作用在3周齡以前并不明顯,而在肉雞生長(zhǎng)后期才表現(xiàn)出來,可能是由于果寡糖對(duì)宿主消化道微生物區(qū)系的調(diào)控需要一定的時(shí)間,這與Houdijk等(1998)報(bào)道類似。非消化性寡糖(NDOs)和能降解NDOs的益生素配合使用,能很好地控制腸道微生態(tài)系統(tǒng),由于這些益生菌與腸道固有菌產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性的酵解作用,從而使益生菌在通過上段腸道時(shí)存活率得到改善,結(jié)腸微生物的定植