護(hù)肝寧片對(duì)卡馬西平在大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)的影響

護(hù)肝寧片對(duì)卡馬西平在大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)的影響

肝寧片劑由中藥組成，包括垂盆草、虎杖、丹參和靈芝。它對(duì)四氯化碳中毒引起的大鼠肝臟損傷也有預(yù)防作用。多年臨床驗(yàn)證顯示護(hù)肝寧片對(duì)治療急、慢性肝炎的療效顯著,具有保肝降酶作用,是目前預(yù)防及治療肝炎的常用藥物?？R西平(carbamazepine,1)是臨床上常用的抗癲癇藥,但由于1的治療窗十分窄(4～10μg/ml),其它藥物可能會(huì)影響1的體內(nèi)過(guò)程,產(chǎn)生不良反應(yīng)或降低療效。1是被肝臟中CPY3A4所代謝的藥物之一,而1與其它藥物的相互作用常發(fā)生在藥物代謝環(huán)節(jié)中。近年來(lái)西藥與中藥之間發(fā)生相互作用的現(xiàn)象日益引起醫(yī)療工作者的重視,而有關(guān)1與中藥間的相互作用報(bào)道較少。本研究探討了在大鼠體內(nèi)護(hù)肝寧片對(duì)1藥物動(dòng)力學(xué)的影響。1護(hù)肝寧片與茶堿對(duì)照品HP1100型高效液相色譜儀(Agilent公司)。1片(上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司,規(guī)格100mg,批號(hào)040503);護(hù)肝寧片(吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司,規(guī)格0.3g,批號(hào)040503);1對(duì)照品(含量99%,批號(hào)082k07011)和茶堿對(duì)照品(內(nèi)標(biāo),含量99%,批號(hào)102k0547)均為Sigma公司提供;甲醇為色譜純,丙二醇、乙醇、異丙醇、氯仿均為分析純。2方法和結(jié)果2.1流速和檢測(cè)方法色譜柱C18柱(4.6mm×125mm,5μm);流動(dòng)相甲醇-水(50∶50);流速1.0ml/min;柱溫室溫;檢測(cè)波長(zhǎng)254nm;進(jìn)樣量20μl。在上述色譜條件下,典型色譜圖見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示,護(hù)肝寧片給藥后血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾1的測(cè)定,各雜質(zhì)峰與1峰、內(nèi)標(biāo)峰分離良好。2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制內(nèi)標(biāo)溶液:精密稱取茶堿對(duì)照品適量,用甲醇溶解得500μg/ml的內(nèi)標(biāo)貯備液。再用甲醇稀釋得20μg/ml的內(nèi)標(biāo)工作液。1對(duì)照品溶液:精密稱取1對(duì)照品適量,用甲醇溶解得1000μg/ml的對(duì)照品貯備液。2.3異丙醇快干產(chǎn)品取血漿0.1ml,加內(nèi)標(biāo)工作液20μl、5%異丙醇氯仿溶液3ml,旋渦3min,離心(4000r/min)5min。取有機(jī)層,60℃水浴用氮?dú)獯蹈?剩余物用0.1ml甲醇溶解,待測(cè)。2.4含藥血漿標(biāo)準(zhǔn)取1對(duì)照品貯備液適量,加甲醇稀釋得1濃度分別為10、50、100、250、500、1000μg/ml的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取上述溶液各0.05ml,加空白血漿0.95ml,配制得1濃度分別為0.5、2.5、5、12.5、25、50μg/ml的含藥血漿。按“2.3”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定,記錄色譜圖。以1與內(nèi)標(biāo)峰面積之比(R)對(duì)1濃度(c)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為R=0.1631c-0.0216,r=0.9997。結(jié)果表明,1濃度在0.5～50μg/ml范圍內(nèi),線性關(guān)系良好。定量限為0.5μg/ml。2.5加標(biāo)回收率測(cè)定按“2.4”項(xiàng)下方法制得0.5、5、50μg/ml的低、中、高濃度血漿樣品,各5份。按“2.3”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定,以濃度測(cè)得值與加入值之比,計(jì)算得回收率為102.9%、101.2%、97.1%。同法制得3種濃度血漿樣品,各5份,1d內(nèi)測(cè)定5次,連續(xù)測(cè)定5d,計(jì)算得日內(nèi)RSD(%,n=5)分別為3.18、4.36、5.24;日間RSD(%,n=5)分別為5.28、4.89、6.45。2.6藥動(dòng)學(xué)參數(shù)檢測(cè)14只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組,每組7只。試驗(yàn)組每天早、晚灌服護(hù)肝寧片75mg/kg(根據(jù)人與大鼠的體表面積換算而得),對(duì)照組則灌服相應(yīng)體積的生理鹽水,共10d。禁食12h后于d11上午,將大鼠用乙醚麻醉后,背式固定,于頸部距中線1cm處,行縱向切口約2cm,剝離右頸動(dòng)脈,用充滿肝素生理鹽水的管進(jìn)行插管,用絲線固定,術(shù)后大鼠清醒穩(wěn)定之后灌胃給藥。在給予護(hù)肝寧片和生理鹽水2h后,灌胃給藥1片50mg/kg(1片細(xì)粉溶于20%乙醇、50%丙二醇和水配成溶液)。分別于給藥前和給藥后0.25、0.5、1、2、4、6、8、12h,采頸動(dòng)脈血0.5ml,高速離心(5000r/min)10min,取血漿按“2.3”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定。單用1片及與護(hù)肝寧片合用后的1藥-時(shí)曲線見(jiàn)圖2。采用Prism4.0中的不配對(duì)t檢驗(yàn)分析結(jié)果顯示:兩組之間Ke、t1/2、CL、cmax、tmax藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無(wú)顯著性差異(P>0.05),說(shuō)明在大鼠體內(nèi)護(hù)肝寧片不影響1的消除過(guò)程。但試驗(yàn)組AUC0-12h低于對(duì)照組,具有顯著性差異(P<0.05),表明護(hù)肝寧片使1的吸收降低,其機(jī)理待進(jìn)一步研究。3護(hù)肝寧片對(duì)cyp3a4代謝的影響因?yàn)?是經(jīng)肝微粒體酶系CYP3A4所代謝的藥物,與護(hù)肝寧片合用后護(hù)肝寧片不影響1的代謝過(guò)程,說(shuō)明護(hù)肝寧片可能不影響CYP3A4的活性,因而推測(cè)護(hù)肝寧片與被CYP3A4酶所代謝的其它藥物合用時(shí)不影響其它藥物的體內(nèi)代謝過(guò)程。另外,護(hù)肝寧片的口服給藥可降低1的體內(nèi)吸收,因此在臨床上合用兩種藥物時(shí),應(yīng)注意觀察1的療效。雄性SD大鼠14只,體重(275±25)g(本校醫(yī)學(xué)部動(dòng)物科)。2.