免疫組化抗原修復(fù)簡(jiǎn)介課件

免疫組化抗原修復(fù)簡(jiǎn)介為何要進(jìn)行抗原修復(fù)抗原修復(fù)的種類(lèi)抗原修復(fù)的原理抗原修復(fù)的操作抗原操作的應(yīng)用為何要進(jìn)行抗原修復(fù)

常規(guī)的石蠟切片的組織要經(jīng)過(guò)福爾馬林固定和石蠟包埋，雖然上述過(guò)程能良好的保存標(biāo)本在光鏡下的形態(tài)，但是會(huì)不同程度地破壞組織的抗原，降低組織的抗原與抗體的免疫反響率?？乖迯?fù)的種類(lèi)

熱修復(fù)〔HIER〕蛋白酶修復(fù)〔PIER〕雙修復(fù)〔特殊抗原和雙染〕不修復(fù)抗原修復(fù)的原理抗原修復(fù)目前常用的有熱修復(fù)〔HIER〕，蛋白酶修復(fù)〔PIER〕和不修復(fù)。不同的修復(fù)的原理不同。熱修復(fù)的原理蛋白酶修復(fù)原理熱修復(fù)(HIER)的原理“石說(shuō)〞：固定通過(guò)改變蛋白結(jié)構(gòu)降低免疫反響性，AR逆轉(zhuǎn)大局部福爾馬林導(dǎo)致的蛋白修飾，冷卻后，會(huì)重建“近天然〞的結(jié)構(gòu)，免疫反響的恢復(fù)是通過(guò)蛋白表位的復(fù)性。熱修復(fù)的特點(diǎn)易于施行易于標(biāo)準(zhǔn)化蛋白酶修復(fù)(PIER)原理蛋白酶的消化通過(guò)破壞福爾馬林造成的蛋白交聯(lián)，實(shí)現(xiàn)抗原的修復(fù)。該方法的缺點(diǎn)是：破壞組織的完整性，會(huì)破壞抗原，而且酶的濃度，反響時(shí)間，反響溫度造成很大的差異，標(biāo)準(zhǔn)化難度較大?？乖迯?fù)的操作熱修復(fù)〔HIER〕蛋白酶修復(fù)〔PIER〕雙重修復(fù)熱修復(fù)〔HIER〕高壓修復(fù)煮沸法修復(fù)微波修復(fù)水浴加熱……高壓修復(fù)切片先脫蠟水化將修復(fù)液注入高壓鍋，將液體煮沸放入切片〔甩開(kāi)水分〕蓋上蓋子，等噴氣，計(jì)時(shí)1.5~2分鐘〔800W~1000W〕冷卻，沖洗玻片上的修復(fù)液1.5-2min10min＞高壓鍋直接修復(fù)高壓鍋隔水間接修復(fù)煮沸法修復(fù)將修復(fù)液注入不銹鋼鍋中煮沸后，參加切片〔甩干水分〕用保溫檔，處理20分鐘左右冷卻，沖洗玻片上的修復(fù)液蛋白酶修復(fù)〔PIER〕

切片脫蠟水化切片上滴加酶，放入孵育盒，處理一定時(shí)間時(shí)間到，取出切片，沖洗。雙重修復(fù)

脫蠟水化后，對(duì)切片進(jìn)行胰酶消化然后，對(duì)切片進(jìn)行熱修復(fù)抗原操作的應(yīng)用

時(shí)間溫度冷卻細(xì)節(jié)MOC31〔上皮糖蛋白-2，EGP-2)EGFR(CLONE:EGFR.113)HBcAg(兔多抗)C/HNO結(jié)論正確的修復(fù)對(duì)抗體的表達(dá)十分重要抗原修復(fù)是一個(gè)個(gè)性化的