高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)規(guī)范試行

高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療技術(shù)規(guī)范（試行）為規(guī)范高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療技術(shù)臨床應(yīng)用工作，制訂本規(guī)范。該規(guī)范重要涉及高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療的合用范疇、臨床服務(wù)流程和質(zhì)量控制等內(nèi)容。第一部分合用范疇一、合用目的疾病根據(jù)現(xiàn)在技術(shù)發(fā)展水平，高通量基因測序技術(shù)在產(chǎn)前篩查與診療領(lǐng)域合用的目的疾病為常見胎兒染色體非整倍體異常（即21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征）。二、合用時間高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療時間應(yīng)當(dāng)為12+0-26+6周，最佳檢測時間應(yīng)當(dāng)為12+0-26+6周。三、合用人群（一）血清學(xué)篩查、影像學(xué)檢查顯示為常見染色體非整倍體臨界風(fēng)險（即1/1000≤唐氏綜合征風(fēng)險值<1/270，1/1000≤18三體綜合征風(fēng)險值<1/350）的孕婦。（二）有介入性產(chǎn)前診療禁忌證者（先兆流產(chǎn)、發(fā)熱、有出血傾向、感染未愈等）。（三）就診時，患者為孕20+6周以上，錯過血清學(xué)篩查最佳時間，或錯過常規(guī)產(chǎn)前診療時機(jī)，但規(guī)定減少21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征風(fēng)險的孕婦。四、慎用人群有下列幾個情形的孕婦屬于慎用人群，即在該人群中本檢測的篩查效果較合用人群有一定程度下降，即篩查的檢出率下降，假陽性及假陰性率上升，或已符合介入性產(chǎn)前診療的指征，知情后回絕直接選擇介入性產(chǎn)前診療的孕婦。涉及：（一）產(chǎn)前篩查高風(fēng)險，預(yù)產(chǎn)期年紀(jì)≥35歲的高齡孕婦，以及有其它直接產(chǎn)前診療指征的孕婦。（二）孕周<12周的孕婦。（三）高體重（體重>100公斤）孕婦。（四）通過體外受精-胚胎移植（下列簡稱IVF-ET）方式受孕的孕婦。（五）雙胎妊娠的孕婦。（六）合并惡性腫瘤的孕婦。五、不合用人群（一）染色體異常胎兒分娩史，夫婦一方有明確染色體異常的孕婦。（二）孕婦1年內(nèi)接受過異體輸血、移植手術(shù)、細(xì)胞治療或接受過免疫治療等對高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療成果將造成干擾的。（三）胎兒影像學(xué)檢查懷疑胎兒有微缺失微重復(fù)綜合征或其它染色體異常可能的。（四）多個基因病的高風(fēng)險人群。六、其它（一）對未接受中孕期血清學(xué)篩查而直接進(jìn)行高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療的孕婦，應(yīng)當(dāng)在孕15周至20+6周期間進(jìn)行胎兒神經(jīng)管缺點(diǎn)風(fēng)險評定。（二）嚴(yán)禁高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療用于非醫(yī)學(xué)需要的胎兒性別鑒定。第二部分臨床服務(wù)流程一、臨床技術(shù)程序（一）凡符合合用人群原則并自愿進(jìn)行此項檢測的孕婦，或符合慎用人群原則但強(qiáng)烈規(guī)定進(jìn)行此項檢測的孕婦，醫(yī)師應(yīng)當(dāng)對孕婦本人及其家眷具體告知該檢測的目的病種、目的、意義、精確率、風(fēng)險和局限性，以及檢測的種類、費(fèi)用和技術(shù)流程。（二）在孕婦充足理解以上事項后，產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)收集孕婦病史、訂立知情同意書、采集外周血，根據(jù)檢測成果，生物信息學(xué)分析，擬定胎兒與否有對應(yīng)非整倍體綜合征高風(fēng)險。（三）醫(yī)師應(yīng)當(dāng)對孕婦提供檢測后臨床咨詢及高風(fēng)險孕婦的后續(xù)解決，在知情同意的前提下對高風(fēng)險孕婦進(jìn)行產(chǎn)前診療，并負(fù)責(zé)隨訪妊娠結(jié)局。二、知情同意書訂立（一）產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)只對已訂立知情同意書，同意參加該檢測的孕婦進(jìn)行檢測。（二）醫(yī)師在孕婦訂立知情同意書時應(yīng)當(dāng)告知當(dāng)事人下列要點(diǎn)（知情同意書模板見附圖1）：1.對存在產(chǎn)前診療指征的孕婦建議其優(yōu)先選擇介入性產(chǎn)前診療。2.告知該檢測能檢出的目的疾病種類。3.告知該檢測能夠達(dá)成的檢出率、假陽性率，強(qiáng)調(diào)該檢測成果不能視為產(chǎn)前診療，高風(fēng)險成果必須行介入性產(chǎn)前診療確診；以及低風(fēng)險成果含有假陰性的可能性。4.告知該檢測有失敗的風(fēng)險，可能會規(guī)定重新采血。5.根據(jù)知情同意書內(nèi)容告知該檢測的局限性。6.根據(jù)知情同意書內(nèi)容告知影響該檢測的因素。7.醫(yī)生對病例個案認(rèn)為應(yīng)當(dāng)闡明的有關(guān)問題。三、檢測申請單填寫（一）醫(yī)師應(yīng)當(dāng)詢問孕產(chǎn)史、孕周、胎數(shù)和已進(jìn)行的其它產(chǎn)前檢測、產(chǎn)前篩查或產(chǎn)前診療的成果，以及詢問與否進(jìn)行過細(xì)胞治療、異體輸血或與否為腫瘤患者等狀況（申請單參考格式見附圖2）。（二）醫(yī)師應(yīng)當(dāng)協(xié)助孕婦精確填寫檢測申請單上的內(nèi)容，涉及：孕婦姓名、出生日期、采血時體重、孕婦通訊地址和聯(lián)系電話、末次月經(jīng)日期、篩查孕周、早孕或中孕期血清學(xué)篩查成果等。四、臨床標(biāo)本的采集（一）采用唯一編號對采血管進(jìn)行編號。建議采血管采用條形碼作為編號標(biāo)示，該編號應(yīng)當(dāng)與知情同意書和送檢單上的編號一致。（二）按照無菌操作規(guī)定，采用孕婦靜脈血；樣本解決按試劑盒闡明書規(guī)定進(jìn)行。（三）標(biāo)本的貯存和運(yùn)輸。1.已分離的血漿標(biāo)本運(yùn)輸：在4-8℃冷藏條件，冷鏈運(yùn)輸，運(yùn)輸時間不得超出4小時；在0攝氏度下列的冷凍運(yùn)輸不應(yīng)超出72小時。2.已分離的血漿標(biāo)本長久保存應(yīng)在-70℃，保存過程中避免重復(fù)凍融。五、檢測報告的審核發(fā)放（一）自抽取孕婦外周血至出具檢測報告的周期不應(yīng)當(dāng)超出15個工作日，其中發(fā)出因檢測失敗須再次采樣的告知不應(yīng)當(dāng)長于10個工作日。（二）檢測報告須經(jīng)由1名含有產(chǎn)前診療臨床資質(zhì)的副高級以上職稱醫(yī)務(wù)人員審核并簽發(fā)（報告參考格式見附圖3）。（三）檢測報告應(yīng)當(dāng)以書面報告形式告知受檢者，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)告知受檢者或其家眷獲取該報告的地點(diǎn)和時間。（四）報告應(yīng)當(dāng)涉及下列信息：1.孕婦的姓名、年紀(jì)、孕周、末次月經(jīng)時間。2.樣本編號、樣本狀態(tài)、采樣日期和報告日期。3.檢測項目、檢測辦法。4.每一種目的疾病的檢測值，正常參考范疇。5.以目的疾病的低風(fēng)險或高風(fēng)險作為成果報告。6.檢測者、審核者。7.其它有關(guān)提示。（五）對高風(fēng)險成果的孕婦，試點(diǎn)產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)盡快通過電話或短信息等方式專門告知，建議該孕婦進(jìn)行后續(xù)產(chǎn)前診療，并做好追蹤隨訪。六、檢測后的臨床咨詢及高風(fēng)險孕婦的后續(xù)解決（一）對成果為低風(fēng)險的孕婦，應(yīng)當(dāng)提示此檢測并非最后診療，不排除漏檢的可能，且不能排除其它染色體疾病。（二）對成果為高風(fēng)險的孕婦，應(yīng)當(dāng)建議其進(jìn)行后續(xù)介入性產(chǎn)前診療；不應(yīng)當(dāng)僅根據(jù)本檢測高風(fēng)險的成果做終止妊娠的建議和解決。（三）試點(diǎn)產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)負(fù)責(zé)高風(fēng)險病例的后續(xù)臨床咨詢和產(chǎn)前診療，臨床咨詢率應(yīng)達(dá)100%，產(chǎn)前診療率應(yīng)達(dá)95%以上。（四）如果存在胎兒影像學(xué)檢查異常，無論該檢測成果是低風(fēng)險還是高風(fēng)險，都應(yīng)當(dāng)對其進(jìn)行專業(yè)的遺傳咨詢及后續(xù)對應(yīng)診療服務(wù)。七、檢測后妊娠結(jié)局的追蹤隨訪（一）試點(diǎn)產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)對全部檢測高風(fēng)險對象進(jìn)行妊娠結(jié)局（涉及后期流產(chǎn)、引產(chǎn)、早產(chǎn)或足月分娩等）的追蹤隨訪，隨訪率應(yīng)達(dá)100%，失訪率宜不大于10%。（二）試點(diǎn)產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)對于檢測低風(fēng)險對象妊娠結(jié)局的隨訪率應(yīng)不不大于90%，隨訪時限應(yīng)為胎兒出生后12周內(nèi)（建議有條件的試點(diǎn)產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)隨訪至產(chǎn)后1年）。（三）隨訪內(nèi)容涉及：妊娠結(jié)局、胎兒或新生兒與否為21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征患兒以及其它臨床診療和/或遺傳學(xué)診療（建議有條件的產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)對后期自發(fā)流產(chǎn)、死胎、致死性的早產(chǎn)胎兒開展遺傳學(xué)診療，作為妊娠結(jié)局隨訪的一部分內(nèi)容）。八、資料與標(biāo)本的保存高通量基因測序產(chǎn)前篩查與診療工作有關(guān)資料，涉及檢測送檢單、知情同意書以及有關(guān)的數(shù)據(jù)信息均應(yīng)當(dāng)在產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)保存3年以上，剩余血漿樣本應(yīng)保存至產(chǎn)后2年以上。第三部分臨床質(zhì)量控制一、21三體綜合征檢出率應(yīng)不低于99%，18三體綜合征檢出率應(yīng)不低于97%，13三體綜合征檢出率應(yīng)不低于90%；復(fù)合假陽性率應(yīng)不高于0.5%；復(fù)合陽性預(yù)測值應(yīng)不低于50%。二、試點(diǎn)產(chǎn)前診療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)按季度報送臨床應(yīng)用試點(diǎn)工作量及篩查成果，涉及篩查檢出率、假陽性率、陽性預(yù)測值和檢出21三體綜合征、18