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實(shí)驗(yàn)三、顆粒原種的制備與轉(zhuǎn)接1.了解原種常用培養(yǎng)基的種類2.掌握食用菌原種培養(yǎng)基的配制方法及消毒滅菌方法3.熟練原種的轉(zhuǎn)接技術(shù)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、材料:母種:平菇、杏鮑菇;糧食顆粒:小麥;碳酸鈣2.工具:超凈工作臺(tái)、酒精燈、75%酒精棉球、接種鏟、三角瓶、棉花、報(bào)紙、高壓滅菌鍋、托盤天平、培養(yǎng)箱二、實(shí)驗(yàn)材料
原種的生產(chǎn)是由母種移接入原種培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)而成,原種也稱二級(jí)種。生產(chǎn)程序是:培養(yǎng)基的配制→分裝→滅菌→接種→適溫培養(yǎng)。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法1、常用配方
(1)小麥99%、輕質(zhì)碳酸鈣1%
(2)高粱80%、小米19%、輕質(zhì)碳酸鈣1%(一)培養(yǎng)基的配制2、培養(yǎng)基的配制(1)糧食顆粒應(yīng)篩選干凈;(2)清水浸泡12小時(shí),低溫季節(jié)浸泡時(shí)間長(zhǎng)些,高溫季節(jié)浸泡時(shí)間短些,但要換水?dāng)?shù)次;(3)放入水中煮約20分鐘(理論值),一般以籽粒充分吸水,內(nèi)部沒(méi)有白芯而表皮又不破脹為度;(4)撈出,濾去多余水分,拌入輕質(zhì)碳酸鈣;(5)攪拌均勻、攤開、風(fēng)干顆粒表面水膜。
菌種瓶一般裝量上端距瓶口50毫米,可以有效減少培養(yǎng)期的污染和避免上部菌種的老化。
三角瓶一般裝量不超過(guò)半瓶,以便在菌絲萌發(fā)之后可以通過(guò)拉抖動(dòng)增快菌絲的生長(zhǎng)速度。
(二)分裝將栽培料袋放高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋中進(jìn)行滅菌。若采用高壓蒸汽滅菌,則標(biāo)準(zhǔn)為1.5kg/cm2(0.15MPa),126~128℃,1.5h~2h。如果采用常壓蒸汽滅菌,則標(biāo)準(zhǔn)為100℃下8~10h。(三)滅菌一般滅過(guò)菌的培養(yǎng)基應(yīng)放在較潔凈的室內(nèi)(也可放無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)中)冷卻至30℃左右方可接種。(四)冷卻1.將已滅菌的培養(yǎng)料瓶移入事先消毒過(guò)的超凈工作臺(tái)內(nèi),紫外滅菌20~30min。2.母種管、用具及手要進(jìn)行酒精消毒。(五)接種3.等培養(yǎng)料溫降至30℃左右時(shí),按無(wú)菌操作方法進(jìn)行接種,用接種鏟取菌種一塊放入種瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)料的孔隙邊,并使菌絲緊貼在培養(yǎng)料上,塞上硅膠塞,貼上標(biāo)簽,注明菌種名稱和接種日期。接種后,將種瓶置于20℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間進(jìn)行定期檢查,淘汰污染種瓶。一般兩周左右菌絲可長(zhǎng)滿菌種瓶。培養(yǎng)成的原種菌絲濃白健壯,菌絲緊貼瓶壁不干縮,生命力強(qiáng),具有一定清香味,無(wú)任何雜菌污染。(六)適溫培
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