臨床基因擴增檢驗實驗室規(guī)范化培訓(xùn)班試卷

臨床基因擴增檢查實驗室規(guī)范化培訓(xùn)班理論考試卷單位名稱姓名學(xué)員編號一.填空（每空0.5分，共15分）1.為加強醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增實驗室規(guī)范化管理，衛(wèi)生部于公布《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增實驗室管理方法》，北京市衛(wèi)生局為做好實驗室備案工作，于公布了《北京市醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢查實驗室技術(shù)審核暫行規(guī)定》。（）2.北京市衛(wèi)生局及各區(qū)縣衛(wèi)生局負(fù)責(zé)所轄行政區(qū)域內(nèi)地方醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢查實驗室的備案和監(jiān)督管理工作。其中備案的技術(shù)審核工作流程重要涉及：申報、資料審核、現(xiàn)場驗收、整治、告知實驗室資料審核成果。醫(yī)療機構(gòu)的醫(yī)學(xué)檢查科應(yīng)當(dāng)設(shè)有臨床細(xì)胞分子遺傳學(xué)專業(yè)診療科目。備案的臨床基因擴增檢查實驗室參加醫(yī)療機構(gòu)的年度校驗。（）3.臨床基因擴增檢測的分析中質(zhì)量確保核心內(nèi)容涉及：室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評。其中前者監(jiān)測和控制的是實驗室測定的重復(fù)性，而后者則通過對不同的實驗室測定成果的比對而評價實驗室測定的精確度。（）4.DNA雙螺旋構(gòu)造的特點是：螺旋中的兩條鏈為反向平衡，其中一條鏈的方向為5’-3’，另一條鏈的方向為3’-5’。（）5.核酸涉及兩種類型：脫氧核糖核酸和核糖核酸，兩者的重要區(qū)別為：前者由ATCG四種堿基構(gòu)成，而后者由AUCG四種堿基構(gòu)成。（）6.根據(jù)遺傳中心法則，遺傳信息的流動方向為DNARNA蛋白質(zhì)。（）7.普通臨床基因擴增檢查實驗室普通涉及下面四個分區(qū)：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。（）8.提純的核酸樣品可根據(jù)OD260波長的光吸取值算出其含量，通過計算260/280的比值計算出其純度。（）9.臨床基因擴增實驗室檢測用的試劑應(yīng)當(dāng)經(jīng)國家藥監(jiān)局同意。（）10.cfDNA的和中文名稱是細(xì)胞游離DNA，ctDNA的中文名稱是循環(huán)腫瘤DNA。（）11.在PCR前，為保護(hù)操作者和樣本，手工解決樣本應(yīng)當(dāng)在樣本制備區(qū)的生物安全柜中進(jìn)行，并使用帶濾芯的移液吸頭進(jìn)行樣本操作。（）12.醫(yī)療廢物垃圾袋結(jié)扎采用“鵝口頸”套扎結(jié)扎形式。（）13.銳器盒容積達(dá)成總體積的3/4時需要更換。（）14.核酸檢測中，全血樣本采集普通使用EDTA或枸櫞酸鹽抗凝，不使用肝素抗凝。（）15.熒光定量PCR使用的Taqman探針兩端標(biāo)記有熒光基團(tuán)和粹滅基團(tuán)。（）16.新冠病毒核酸檢測應(yīng)當(dāng)在生物安全Ⅱ級實驗室開展，同時采用生物安全Ⅲ級實驗室的個人防護(hù)。（）17.PCR的基本反映過程涉及變性、退火、延伸。（）18.DNA/RNA的紫外吸取在260nm附近有最大吸取值。（）19.核酸的基本構(gòu)造單位是：核苷酸，其構(gòu)成涉及堿基、核糖或脫氧核糖和磷酸。（）二．是非題（在你認(rèn)為對的的句子背面打√，錯誤的背面打×，每小題1分，共15分）DNA雙鏈中，堿基A-T之間以三個氫鍵相連，G-C以兩個氫鍵相連。（×）（）與細(xì)胞學(xué)初篩相比較，HPV核酸檢測初篩含有更高的敏感性。（√）（）使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR試劑盒，該酶能夠降解含有UTP的擴增產(chǎn)物。（√）（）DNA變性是指在物理或化學(xué)因素的作用下，造成兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的全部共價鍵同時也受影響。（×）（）自制室內(nèi)質(zhì)控品時，應(yīng)對質(zhì)控品的均勻性和穩(wěn)定性進(jìn)行評價。（√）（）定量PCR與定性PCR測定原理的最重要的區(qū)別點在于前者的測定點在PCR的指數(shù)擴增期，而后者多為擴增平臺期。（×）（）解決PCR標(biāo)本時，在沒有生物安全柜的狀況下，可用超凈臺操作。（×）（）臨床檢查中的系統(tǒng)誤差普通體現(xiàn)為質(zhì)控物測定成果的SD增大。（×）（）擴增管沒有蓋好會造成PCR反映液熱蒸發(fā)，直接影響成果，但不會成為一種污染源。（×）（）核酸是極性化合物，溶于水，不溶于乙醇等有機溶劑。（√）（）核酸的解鏈溫度（Tm）與G+C含量有關(guān)，G+C含量愈大，Tm愈低。（×）（）無法參加室間質(zhì)量評價計劃時，能夠用室內(nèi)質(zhì)控替代。（×）（）普通進(jìn)行HCV-RNA檢測時宜采用EDTA抗凝血，不適宜采用肝素抗凝。（√）（）以次氯酸為重要成分的清潔劑在配制后能夠長久使用。（×）（）質(zhì)量管理體系的要素涉及質(zhì)量方針、質(zhì)量目的和質(zhì)量指標(biāo)。（√）（）核酸的復(fù)制是由3’-5’方向進(jìn)行。（×）（）核酸的解鏈溫度（Tm）與G+C含量有關(guān)，G+C含量愈大，Tm愈高。（√）（）標(biāo)本差錯率和實驗室布局的合理性均為實驗室質(zhì)量體系監(jiān)控指標(biāo)。（√）（）實驗室質(zhì)量體系文獻(xiàn)無統(tǒng)一格式，無原則文獻(xiàn)，應(yīng)切合實際，怎么做怎么寫。（×）（）進(jìn)行新冠病毒核酸檢測時，采集鼻咽拭子標(biāo)本可使用棉簽。（×）（）在常規(guī)應(yīng)用前，可由制造商對實驗室未加修改而使用的已確認(rèn)的檢查程序進(jìn)行獨立驗證。（×）（）DNA在中性或弱堿性溶液中易水解，但在酸性溶液中較穩(wěn)定，RNA在堿性溶液中穩(wěn)定。（×）（）DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂。（√）（）DNA微溶于水，可溶于有機溶劑。（×）（）三．單選題（請將所選答案填寫在題后的括號中，每小題1分，共25分）1.PCR技術(shù)的發(fā)明人是：（C）（）A.WatsonJ.D.;B.CrickF.H.C.;C.KaryMullis;D.RosalindFranklin.2.二級生物安全柜能對下列哪些進(jìn)行防護(hù)：（D）（）A.人員B.實驗品C.環(huán)境D.以上都是3.在生物界尚無充足證據(jù)的信息流動過程的是（A）（）A．蛋白質(zhì)→RNAB．RNA→DNAC．DNA→DNAD．DNA→RNA4.核酸提取純化中，RNase潛在污染源是：（D）（）A.實驗室環(huán)境；B.實驗用品如吸頭、離心管等；C.實驗人員的手；D.以上都是5.生物安全水平的級別共分為幾個等級（D）（）A．1個B．2個C．3個D．4個6.有有關(guān)熒光定量PCR辦法，下述哪一條是錯誤的？（A）（）A.在擴增的指數(shù)期定量；B.采用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)辦法均可；C.可采用Taqman探針；D.在擴增的終點測定定量7.在選擇開展臨床檢查項目時，應(yīng)首先考慮：（B）（）A.臨床有效性和分析有效性；B.檢測精密度和檢測精確度；C.臨床有效性和檢測精密度；D.分析有效性和檢測精確度8下列哪項有助于DNA的保存：（A）（）A.加入EDTA螯合鈣離子，去除核酸酶的活性；B.加入少量DNase；C.溶于pH3.0溶液；D.加入少量RNase9.實驗室的清潔工作應(yīng)在下列狀況下進(jìn)行：（A）（）A.每次實驗后B.文獻(xiàn)規(guī)定清潔時間C.實驗室發(fā)生污染時D.以上都是10.熒光定量PCR檢測過程中，基線漂移的可能因素有：（D）（）A.蒸發(fā)；B.探針?biāo)釩.相鄰熒光通道干擾D.以上都是11.將基因擴增檢查實驗室的產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)立為負(fù)壓狀態(tài)，目的是：（B）（）A.避免有生物傳染危險的樣本逸出；B.避免擴增產(chǎn)物從該區(qū)逸出；C.避免該區(qū)灰塵的逸出；D.為了生物安全的目的12.慣用RNase克制劑是（B）（）A.乙醇；B.DEPC；C.異丙醇;D.精胺13.真核生物染色體DNA重要下列列哪種形式存在（D）（）A.環(huán)狀單鏈分子B.線性單鏈分子C.環(huán)狀雙鏈分子D.線性雙鏈分子14.TaqMan探針采用的是（A）（）A．熒光標(biāo)記的探針B．生物素標(biāo)記的探針C．同位素標(biāo)記的探針D．SYBRGreen熒光染料15.最大量程為200ul的微量移液器，顯示讀數(shù)為020，實際的吸液容量值為：(C）（）A．0.2ulB．2ulC．20ulD．200ul16.有關(guān)核小體的錯誤敘述是：（D）（）A．核小體是染色體的基本單位B．DNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體C．DNA和組蛋白H1構(gòu)成核小體連接區(qū)D．RNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體17.基因突變的實質(zhì)是：（A）（）A．染色體上的DNA序列變化了B．染色體上的DNA變成了RNAC．染色體上的DNA變成了蛋白質(zhì)D．染色體上的DNA高級構(gòu)造發(fā)生了局部變化18.如果一種PCR反映體系中加入模板200個，通過30個循環(huán)后擴增產(chǎn)物的數(shù)量將達(dá)成（C）（）A.200×30×2B.200×30C.200×230D.200×30219.Sanger測序體系與PCR反映體系的重要區(qū)別是前者含有：（B）（）A.模板B.ddNTPC.DNA聚合酶D.引物20.分子雜交實驗不能用于：（C）（）A.單鏈DNA分子之間的雜交B.單鏈DNA與RNA分子之間的雜交C.抗原與抗體分子之間的結(jié)合D.雙鏈DNA與RNA分子之間的雜交21.在Sanger基因測序技術(shù)中所使用的酶是:（A）（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.DNA連接酶D.DNA拓?fù)涿?2.雙鏈DNA中的堿基對有：（D）（）A．A-UB．G-TC．C-AD．T-A23.下列四個DNA片段中含有回文構(gòu)造的是（D）（）A.GAAGAAB.TGGAAAC.GAAAAGD.GAATTC24.核酸分子中儲存遺傳信息的核心部分是：（D）（）A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA25.核酸檢測探針的標(biāo)志性特性是：（A）（）A．一小段已知序列的單鏈核酸；B.一小段未知序列的單鏈核酸；C.一小段已知序列的雙鏈核酸；D.有同位素或非同位素標(biāo)記物。26.核酸分離純化的目的是：（D）（）A.除去PCR克制物B.增加靶核酸濃度，使之達(dá)成PCR測定范疇C.增加樣本均一性，確保測定精密度和重復(fù)性D.以上都是27.mRNA約占總RNA的百分?jǐn)?shù)為：（A）（）A.5％B.10％C.15％D.20％28.分子檢測對標(biāo)本采集容器的規(guī)定是：（E）（）A.密閉B.一次性C.無DNase和RNaseD.無菌E.以上均是29.有關(guān)基因擴增檢測實驗室分區(qū)，下列說法不對的的是：（D）（）A.外周血游離DNA標(biāo)本制備可與細(xì)胞/組織標(biāo)本制備區(qū)共用；B.須注意實驗室空氣流向；C.實驗室應(yīng)有充足的通風(fēng)換氣；D.緩沖間不是必需的；E.傳遞窗不是必需的30.“無基因”或“無核酸”概念是指：（E）（）A.在基因擴增檢測操作時，要注意避免由于擴增產(chǎn)物污染所致檢測假陽性；B.在基因擴增檢測操作時，要注意避免由于標(biāo)本間交叉污染所致檢測假陽性；C.每次檢測后實驗室內(nèi)的充足通風(fēng)及清潔；D.實驗室各區(qū)物品的專用；E.以上均是31.商品試劑的性能驗證的合格判斷原則是：（D）（）A.衛(wèi)生行業(yè)原則；B.國際原則；C.滿足臨床疾病的診療規(guī)定；D.試劑盒闡明書上所宣稱的檢測性能E.以上均是32.L-J指控圖的失控規(guī)則制訂的根據(jù)是：（B）（）A.各實驗室根據(jù)本身的狀況具體擬定；B.統(tǒng)計學(xué)的“小概率事件”原理；C.超出均值±3SD；D.超出均值±2SD；E.陰性質(zhì)控品檢測為陽性33.下列哪一種病毒遺傳物質(zhì)為RNA（D）（）A.乙肝病毒B.人乳頭瘤病毒C.巨細(xì)胞病毒D.新型冠狀病毒COVID-1934.下列在PCR反映中，對擴增產(chǎn)物的特異性起決定性作用的是：（B）（）A.模板B.引物C.dNTPD.鎂離子35.有有關(guān)熒光定量PCR辦法，下述哪一條是錯誤的？（A）（）A.在指數(shù)擴增早期定量；B.在擴增的終點定量；C.可采用Taqman探針；D.采用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)辦法均可36.在選擇開展臨床檢查項目時，應(yīng)首先考慮：（B）（）A.臨床預(yù)期用途；B.檢測精密度和檢測精確度；C.檢測精密度；D.檢測精確度37.一種PCR反映體系中起始模板量為500，通過30個循環(huán)后擴增產(chǎn)物的數(shù)量將達(dá)成（C）（）A.500×30×2B.5002×30C.500×230D.500×30238.對COVID-19疑似患者采樣，需要（C）級生物安全個人防護(hù)裝備（）A.ⅠB.ⅡC.ⅢD.Ⅳ39.手衛(wèi)生分為（D）步（）A.4B.5C.6D.740.除（A）外均可有效滅活新型冠狀病毒（）A.氯已定B.56℃30分鐘C.75%乙醇D.含氯消毒劑41.在基因擴增檢測中，全血或骨髓標(biāo)本不能用肝素抗凝，因素是（D）（）A.肝素是TaqDNA聚合酶活性的強克制劑B.肝素對Mg++有絡(luò)合作用C.典型的核酸提取辦法很難去除肝素D.以上A和C42.下列哪種狀況需對PCR檢測項目進(jìn)行辦法學(xué)驗證明驗：（D）（）A.開展新項現(xiàn)在B.更換試劑品牌C.更換儀器D.以上全是43.在臨床基因擴增檢查中，弱陽性室內(nèi)質(zhì)控品發(fā)生失控，常見的因素有下述各項，除（B）外（）A.核酸提取中的丟失、有機溶劑的去除不徹底、標(biāo)本中擴增克制物的殘留等B.擴增儀孔間溫度的不一致性C.擴增產(chǎn)物的污染D.Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活44.PCR擴增檢測采用內(nèi)標(biāo)，能夠識別擴增檢測的（C）（）A.假陰性B.假陽性C.假陰性、假陽性都能夠防止D.假陰性、假陽性都不能防止45.在一種DNA分子中，如G所占摩爾比為17.2%，則A所占摩爾比為（B）（）A.82.8%B.32.8%C.17.2%D.65.6%四.簡答題(每小題5分，共25分)1.簡述什么狀況下應(yīng)進(jìn)行性能驗證？(5分)（）答：（1）在常規(guī)應(yīng)用前，應(yīng)由實驗室對未加修改而使用的已確認(rèn)的檢查程序進(jìn)行獨立驗證。（2）任何嚴(yán)重影響檢測系統(tǒng)分析性能的狀況發(fā)生后，如儀器搬遷、設(shè)施、環(huán)境嚴(yán)重失控等。（3）常規(guī)使用期間，定時做。（4）啟用新的檢測系統(tǒng)：更換試劑、儀器、校準(zhǔn)品溯源性變化2.臨床PCR實驗室質(zhì)量管理體系文獻(xiàn)應(yīng)包含哪些內(nèi)容？(5分)（）答：（1《質(zhì)量手冊》：質(zhì)量方針和質(zhì)量目的的聲明。（2）準(zhǔn)則規(guī)定的程序和統(tǒng)計。（3）實驗室規(guī)定的文獻(xiàn)和統(tǒng)計：為確保有效策劃、運行并控制其過程。（4）合用的法規(guī)、原則及其它規(guī)范文獻(xiàn)。3.請簡述完整的員工培訓(xùn)計劃應(yīng)包含哪些內(nèi)容。(5分)（）答：（1）培訓(xùn)所涉及的范疇：儀器設(shè)備的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)。試劑辦法原理。質(zhì)量管理體系。有關(guān)法律法規(guī)，有關(guān)領(lǐng)域的新技術(shù)、新理念和新進(jìn)展。實驗操作技能等。（2）如何培訓(xùn)：講座，討論，自學(xué)和參加培訓(xùn)班。（3）培訓(xùn)的評定：書面考試，實驗考核，討論心得，論文，綜述等。4.感染性疾病的定量、定性檢測，人基因組的基因型檢測，對上述三類PCR檢測的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度水平和型別如何規(guī)定？(5分)（）答：定量PCR檢測的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度：測定線性范疇內(nèi)的高、中、低三種濃度，型別：生物DNA/RNA參考原則品；定性PCR檢測的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度：靠近辦法測定下限（2-4倍）的濃度，型別：生物DNA參考原則品；人基因組的基因型檢測的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度：型別：人類基因組DNA參考原則品。5.簡述生物安全的概念、實驗室生物安全水平的概念。(5分)（）答：實驗室生物安全：為了避免微生物和醫(yī)學(xué)實驗室中有害或有潛在危害的生物因子對人、環(huán)境和社會造成的危害或潛在危害，而采用的防護(hù)方法（硬件）和管理方法（軟件），達(dá)成對人、環(huán)境和社會的安全防護(hù)目的。生物安全水平：根據(jù)實驗室的工作性質(zhì)及可能分離到的病原體等級進(jìn)行安全防護(hù)水平的劃分。6.什么是室內(nèi)質(zhì)量控制？(5分)（）答：由實驗室工作人員，采用一定的辦法和環(huán)節(jié)，持續(xù)評價本實驗室工作的可靠性程度，旨在監(jiān)測和控制本實驗室工作的精密度，提高本實驗室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢查的一致性，以擬定測定成果與否可靠，可否發(fā)出報告的一項工作。涉及三個方面的內(nèi)容：測定前的質(zhì)量控制、統(tǒng)計學(xué)質(zhì)量控制、質(zhì)量控制的評價。7.請從氣流方向、高效過濾器位置、保護(hù)對象、操作對象