咖啡因的制備及藥理研究

咖啡因的制備及藥理研究

咖啡因（cafleet，咖啡因）是黃酮類化合物，一般包括水咖啡因和水咖啡因。咖啡因具有興奮心臟、骨骼肌和中樞神經(jīng)系統(tǒng),抗氧化,舒張血管、松弛平滑肌等生理作用;普遍存在于茶葉、咖啡、可可等各種食品當(dāng)中。近年來,咖啡因制品在食品工業(yè)和藥物中得到了日益廣泛的應(yīng)用?？Х纫蚝铣杉八幚響?yīng)用成為一個(gè)新的研究熱點(diǎn)。結(jié)合作者的研究工作,對(duì)咖啡因的制備和藥理作用的研究進(jìn)行了綜合評(píng)述。1咖啡因的制備1.1合成阿斯匹林以提高合成因果關(guān)系的效率Runge于1820年首先從咖啡豆中提取得到咖啡因,其后在茶葉,冬青茶中亦有發(fā)現(xiàn);1895~1899年由E.Fischer首先完成合成過程。中國在1950年從茶葉中提得咖啡因,1958年完成合成過程。中國是世界上咖啡因產(chǎn)銷大國,由于人工合成咖啡因的成本較天然咖啡因低,且生產(chǎn)能力大,所以,人工合成咖啡因仍是咖啡因的主要來源。人工合成的咖啡因工藝雖然收率較高,但合成路線較長、原料較多、受乙酸酐的影響比較大,存在著一定的問題;氫化還原中安全性小,催化劑成本偏高,生產(chǎn)過程中存在分離及后處理工藝過程(如精制、提取等);生產(chǎn)過程中有酸性廢水排放,會(huì)造成嚴(yán)重的水資源浪費(fèi)、中間體損耗,導(dǎo)致產(chǎn)率低,并污染環(huán)境,因此,需進(jìn)行廢水處理和改進(jìn)合成路線。1.1.1活性炭纖維在制備工藝中的應(yīng)用1,3-二甲基-5-亞硝基-6-氨基脲嘧啶(ANDMU)是咖啡因合成的重要中間體之一,其加氫還原生成5,6-二氨基-1,3-二甲基脲嘧啶(DADMU)的反應(yīng),是咖啡因合成工藝中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在這個(gè)環(huán)節(jié)中需排放含有雜質(zhì)和ANDMU的酸性廢水,因此,這一關(guān)鍵環(huán)節(jié)中的技術(shù)和工藝流程創(chuàng)新是研究其轉(zhuǎn)變?yōu)檠h(huán)經(jīng)濟(jì)模式的中心內(nèi)容。采用活性炭纖維(ACF)吸附處理這一環(huán)節(jié)中產(chǎn)生的廢水來研究ACF的電化學(xué)再生和電吸附法處理過程。在合成過程中產(chǎn)生的含ANDMU的酸性廢水經(jīng)ACF電極電吸附處理后,可以當(dāng)作工業(yè)用水循環(huán)使用,用ACF富集的ANDMU經(jīng)研究可以轉(zhuǎn)化為DADMU,且ACF得到再生,吸附劑材料可以循環(huán)使用,避免了浪費(fèi)和污染,成為循環(huán)經(jīng)濟(jì)模式。1.1.2電化學(xué)加氫還原法采用穩(wěn)態(tài)極化法、循環(huán)伏安法和恒電位庫侖法對(duì)ANDMU在鉑電極上的電化學(xué)加氫機(jī)理進(jìn)行的研究表明:在鉑電極上的電化學(xué)加氫過程受擴(kuò)散控制,增大攪拌速度和提高溫度均可提高反應(yīng)速度。電化學(xué)加氫還原優(yōu)點(diǎn)是可以在溫和的反應(yīng)條件下進(jìn)行,無二次污染,是新一代綠色工藝。通過紫外光輻射和H2O2作用,對(duì)咖啡因生產(chǎn)的廢水進(jìn)行光降解,可減小廢水對(duì)環(huán)境造成的污染。這種方法除了降解了該廢水中的咖啡因外,還可以降解醫(yī)療中的其他廢物。采用Fenton(Fe2++H2O2)試劑催化氧化法處理咖啡因亞硝化廢水,去除率達(dá)94.9%以上,達(dá)到廢水排放標(biāo)準(zhǔn)。1.1.3甲醇酯化法合成阿斯匹林文獻(xiàn)設(shè)計(jì)改進(jìn)了氯乙酰氯法和氰基乙酸法兩種合成路線。氯乙酰氯法是以氯乙酰氯作為原料與二甲基脲反應(yīng)得到1-(2-氯乙酞基)1,3-二甲基脲,然后經(jīng)環(huán)合、硝化、加氫、甲基化等得到產(chǎn)品咖啡因。氰基乙酸法是以氰基乙酸為原料,與甲醇酯化,然后以甲醇鈉作縮合劑,再經(jīng)環(huán)合、硝化、還原、甲基化得到咖啡因。這兩條路線,所需的原料分別為氯乙酰氯、氰化鈉和甲醇鈉,來源均容易,與乙酸酐為原料的傳統(tǒng)方法相比,價(jià)格低廉,成本低,操作簡便且安全性好,對(duì)目前咖啡因合成工藝的改進(jìn)是可行的。不足之處是:環(huán)合反應(yīng)時(shí)伴有自身環(huán)合反應(yīng),從而影響收率,因此,提高其縮合收率是合成工藝中的關(guān)鍵。中國咖啡因主要生產(chǎn)企業(yè)為山東新華制藥、石藥集團(tuán)、吉林省舒蘭合成藥業(yè)股份有限公司等。各企業(yè)的生產(chǎn)量雖有所增加,但仍不能滿足市場(chǎng)需求,因此,研究產(chǎn)品質(zhì)量高、生產(chǎn)成本低的合成路線是合成咖啡因的主要目標(biāo)?？s合反應(yīng)工序是整條生產(chǎn)線的龍頭,是關(guān)鍵工藝控制點(diǎn),中間體ANDMU的收率和質(zhì)量對(duì)咖啡因總收率和成品質(zhì)量起決定性作用。1.1.4-甲基黃系黃系統(tǒng)的活性酶在兩種或兩種以上酶(a、b、c、d)的組合的催化作用下,在生物體外,可進(jìn)行嘌呤環(huán)7位的黃嘌呤核苷的甲基化、嘌呤環(huán)9位的7-甲基黃嘌呤核苷的脫核糖化、嘌呤環(huán)3位的7-甲基黃嘌呤的甲基化、和/或在嘌呤環(huán)1位的可可堿的甲基化,生產(chǎn)7-甲基黃嘌呤、可可堿或咖啡因。a是具有催化嘌呤環(huán)7位的黃嘌呤核苷甲基化的活性酶;b是具有催化嘌呤環(huán)9位的7-甲基黃嘌呤核苷脫核糖化的活性,由大腸桿菌得到的細(xì)胞粗提取物;c是具有催化嘌呤環(huán)3位的7-甲基黃嘌呤甲基化的活性酶;d是具有催化嘌呤環(huán)1位的可可堿甲基化的活性的酶。1.2茶樹在不同生長階段的內(nèi)部小氣候因子中的含量人工合成的咖啡中由于含有原料殘留,如長期食用會(huì)產(chǎn)生殘毒作用,有的國家已禁止在飲料中使用合成咖啡因,因此,天然咖啡因的市場(chǎng)需求增大。茶葉是多酚類物質(zhì),茶多酚具有重要生理活性,用途廣泛,中國的茶葉資源豐富,咖啡因在茶葉中含量最高,可達(dá)2%~5%。茶葉中有咖啡因的生物合成和代謝,咖啡因主要分布于植物的幼嫩組織部位,如幼葉、嫩梢,在幼芽、果實(shí)、種子等部位也有較多的積累。文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)茶樹在非休眠和休眠生長階段的各種組織中咖啡因的含量不同。非休眠期與休眠期比較,咖啡因含量在幼莖、頂芽,特別是第一葉、第二葉組織中含量高,在衰葉中含量低。茶花部位的咖啡因含量也較好,而在衰老的植物組織部位,特別是衰老的子葉、變褐的芽及根部都未曾發(fā)現(xiàn)咖啡因。茶葉中咖啡因的生物合成受季節(jié)調(diào)節(jié)的影響,采集時(shí)間因季節(jié)不同,一般認(rèn)為春茶中的咖啡因含量比夏茶和秋茶高。1.2.1不同樹脂吸附的分離茶大孔吸附樹脂是一類有機(jī)高聚物吸附劑,具有吸附容量大,選擇性好、工藝操作簡單、吸附速度快、易于再生、使用周期長等諸多優(yōu)點(diǎn)。大孔樹脂主要應(yīng)用于植物活性成分的提取和分離,如黃酮類、皂苷類、色素、生物堿類等,且能滿足工業(yè)化(規(guī)?；?生產(chǎn)的需要。利用不同性質(zhì)的樹脂吸附層對(duì)茶多酚提取液中的各組分選擇吸附,極性RS-1樹脂對(duì)茶葉水提液具有明顯脫色除雜效果;具有較高比表面積的弱極性吸附樹脂RX-2對(duì)咖啡因具有較高的吸附容量和吸附選擇性,動(dòng)態(tài)吸附時(shí)發(fā)生層析分離,是一種較為理想的咖啡因脫除劑。比表面積是決定樹脂對(duì)咖啡因吸附容量的關(guān)鍵因素,樹脂表面極性的增加,有助于提高樹脂對(duì)咖啡因和兒茶素的吸附選擇性。1.2.2et提取-升華法利用咖啡因在235~238℃大量升華的性質(zhì)設(shè)計(jì)各種升華裝置提取咖啡因。Soxhlet提取-升華法廣泛應(yīng)用于提取綠茶、紅茶原料中的天然咖啡因,操作工藝簡單易行。利用此法從紅茶中提取天然咖啡因時(shí),水在咖啡因提取中有重要的作用,升華的溫度控制對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要,溫度太高,容易產(chǎn)生絨毛狀短晶,影響產(chǎn)品質(zhì)量。1.2.3微波分離技術(shù)超臨界流體萃取技術(shù)(supercriticalfluidextraction,SFE)與傳統(tǒng)方法相比,具有萃取溫度低、安全無毒、對(duì)環(huán)境污染小、傳質(zhì)速度高等自身獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于食品、化學(xué)、醫(yī)藥和污染治理等領(lǐng)域。利用此項(xiàng)技術(shù),在提取的不同階段,在超臨界流體中添加不同的添加溶劑來提取出茶葉中的咖啡因成分。文獻(xiàn)研究了萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間和改性劑對(duì)咖啡因和茶多酚的提取率的影響,結(jié)果表明:萃取壓力和改性劑對(duì)茶葉中茶多酚和咖啡因的萃取率影響最大,50%的乙醇作為改性劑能較大的提高咖啡因的萃取率。超臨界流體抗溶劑(supercriticalfluidanti·solvent,SAS)結(jié)晶是一門近年來逐漸興起的制粒分離技術(shù),被廣泛應(yīng)用于提取高分子材料和藥物的晶體和非晶體顆粒。其實(shí)質(zhì)是利用超臨界流體的膨脹使得結(jié)晶溶液脫溶,進(jìn)而析出溶質(zhì)粒子的操作。該技術(shù)在化工、食品與制藥等領(lǐng)域有著良好的應(yīng)用前景,可用于替代部分傳統(tǒng)的溶液冷卻結(jié)晶操作。文獻(xiàn)成功地用SAS重結(jié)晶了咖啡因,且咖啡因的結(jié)晶性較好、粒度達(dá)0.3~0.4μm。固相微萃取(solidphasemicroextraction,SPME)利用被萃取組分在兩相間的分配平衡,將萃取、濃縮、解吸和進(jìn)樣集為一體,具有操作簡單、分析時(shí)間短、有機(jī)溶劑用量少、樣品需要量少且容易與GC、HPLC、CE等聯(lián)用的特點(diǎn)。已經(jīng)制得的MAA/TRIM涂層對(duì)含有氨基的咖啡因與茶堿具有良好的萃取效率。微波法是近年來興起的一種分離方法,因具有促進(jìn)反應(yīng)的高效性和強(qiáng)選擇性,且操作簡便、副產(chǎn)物少、產(chǎn)率高及產(chǎn)物易提純等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用。提取工藝流程為原料→粉碎→加入溶劑→微波處理→過濾→離心→粗提液→測(cè)定吸光度。某些敏感特殊人群如孕婦,兒童、老人和失眠癥、高血壓患者過量攝入咖啡因?qū)】挡焕?。脫咖啡因技術(shù)日益受到國內(nèi)外科研人員的重視,保持茶葉風(fēng)味和營養(yǎng)成分的脫咖啡因茶和茶制品的需求量和消費(fèi)量正在快速增長。目前脫咖啡因茶在歐洲和北美等發(fā)達(dá)國家的需求量和消費(fèi)量正在快速增長。國內(nèi)隨著生活水平的提高,市場(chǎng)潛力很大。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所種植資源圃收集了大量國內(nèi)外種質(zhì)資源,并進(jìn)行了低咖啡因茶樹雜交親本的篩選。最近在廣東地區(qū)發(fā)現(xiàn)經(jīng)過自然選育,只含微量或甚至不含咖啡因、但含有大量可可堿的茶樹,為開發(fā)去咖啡因的茶飲料提供了良好的物質(zhì)基礎(chǔ)。文獻(xiàn)將含咖啡因的茶類提取物用單寧酶進(jìn)行處理之后,使非酯型兒茶素類和咖啡因的混合物析出,將其分離除去。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是不破壞茶本來香味的情況下,從含咖啡因茶類提取液中減少咖啡因的方法。概括講是從抑制咖啡因的生物合成及促進(jìn)咖啡因的體內(nèi)降解兩種途徑降低茶樹中咖啡因的含量。2治療心血管疾病咖啡因的中樞興奮作用較強(qiáng),臨床主要用作中樞興奮藥,對(duì)心血管系統(tǒng)具有正性作用,還能促進(jìn)胃酸分泌、利尿及治療偏頭痛等疾病,并在機(jī)體的多個(gè)系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的作用。2.1影響神經(jīng)系統(tǒng)的因素2.1.1全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)在許多類型的細(xì)胞中,咖啡因激發(fā)誘發(fā)Ca2+介導(dǎo)的Ca2+釋放(CICR),在神經(jīng)元中,咖啡因激發(fā)CICR突觸后神經(jīng)元,從而控制神經(jīng)傳遞素釋放。用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù),發(fā)現(xiàn)20mmol·L-1咖啡因可逆的提高了大腦皮層微興奮性突觸后電流(mEPSCs)的頻率,降低了mEPSCs在神經(jīng)元的幅度?？Х纫驕p少了外加谷氨酸激活電流,證實(shí)了單獨(dú)的突觸后采取行動(dòng)?？Х纫蛞鸬恼穹种苖EPSC是通過突觸谷氨酸受體阻斷非NMDA型離子型?？Х纫蛟谏窠?jīng)元興奮突觸前和后的行動(dòng)中均起作用。2.1.2對(duì)eae發(fā)病的影響咖啡因處理可以減少炎性因子干擾素-γ(IFN-γ)、提高轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)的含量,減輕實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)的中樞神經(jīng)組織損傷。將Wistar大鼠隨機(jī)分為EAE模型陽性對(duì)照組、咖啡因處理組(10、30mg·kg-1)、陰性對(duì)照組,應(yīng)用咖啡因干預(yù),觀察EAE發(fā)病率的變化,咖啡因處理組大鼠的EAE發(fā)病率下降,腦脊髓組織炎性細(xì)胞浸潤減輕;EAE模型陽性對(duì)照組、咖啡因處理組(10、30mg·kg-1)、陰性對(duì)照組頸髓中IFN-γ含量分別為1.23±0.58、0.65±0.10、0.25±0.07、0.26±0.12,TGF-β的含量分別為0.91±0.10、1.05±0.01、1.19±0.01、0.75±0.07。2.1.3-三磷酸肌醇受體腦癌患者體內(nèi)的三磷酸肌醇受體子型1,4,5-三磷酸肌醇受體相當(dāng)活躍。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示:咖啡因可選擇性地阻止三磷酸肌醇受體活動(dòng),從而抑制神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤生長,防止癌細(xì)胞擴(kuò)散。2.1.4阿酚咖片藥物咖啡因可顯著增強(qiáng)鎮(zhèn)痛效果,如常配伍麥角胺治療偏頭痛;配伍解熱鎮(zhèn)痛藥治療一般性頭痛。經(jīng)皮穴位電刺激配以口服咖啡因,可迅速緩解腰麻后的頭痛,由于收縮腦血管,減少腦血管搏動(dòng)的幅度而加強(qiáng)以上藥物止頭痛的作用。阿酚咖片是非甾體解熱鎮(zhèn)痛藥的復(fù)方制劑;用HPLC測(cè)定阿酚咖片藥物中咖啡因的生物利用度和藥代動(dòng)力學(xué)。文獻(xiàn)研究了氨酚匹林咖啡因片口服后人血漿中對(duì)乙酰氨基酚、阿司匹林、咖啡因的人體生物利用度和藥物動(dòng)力學(xué),由AUC0~24估算,咖啡因的相對(duì)生物利用度為99.2%±40.0%。2.1.5不同劑量充填的基因表達(dá)量對(duì)小鼠creb表達(dá)的影響咖啡因?qū)W(xué)習(xí)記憶的影響機(jī)制研究,使用不同劑量的咖啡因干預(yù)小鼠,采用Morris水迷宮評(píng)價(jià)空間記憶能力及Westernblot檢測(cè)CREB的表達(dá)量,結(jié)果顯示:小劑量的咖啡因能夠提高小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力,且增加海馬區(qū)CREB的表達(dá)。2.2咖啡是一種可以預(yù)防特殊的危險(xiǎn)文獻(xiàn)通過調(diào)整年齡、吸煙、酗酒等危險(xiǎn)因素,研究了絕經(jīng)后婦女死亡率與咖啡消費(fèi)的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)每日咖啡消費(fèi)量與死亡危險(xiǎn)度的關(guān)系成U形分布,反映飲用咖啡可以降低死于非感染性炎癥的危險(xiǎn)。該研究發(fā)現(xiàn)咖啡消費(fèi)可以抑制炎癥并降低絕經(jīng)后婦女死于心血管疾病和某些炎癥性疾病的危險(xiǎn)。該研究的結(jié)果對(duì)于心血管病等慢性疾病的預(yù)防提供了新思路。2.3影響循環(huán)系統(tǒng)的因素2.3.1b型理想國的作用機(jī)制急性酒精性肝損傷是指一次性大量飲酒,使血中乙醇量超過了肝臟的解毒能力而引起的肝損傷。飲用含咖啡因的飲料可以減小酒精性肝病患者的幾率,文獻(xiàn)以咖啡因組(5、15、30mg·kg-1)研究咖啡因?qū)Σ∽兡Ｐ蜋C(jī)體的保護(hù)作用及細(xì)胞因子、炎性介質(zhì)、氧自由基、肝細(xì)胞凋亡等作用機(jī)制的影響,探討B(tài)咖啡因的藥理作用。30mg·kg-1的咖啡因組病理組織學(xué)檢驗(yàn)顯示:咖啡因?qū)Ω纳聘渭?xì)胞脂肪變性有保護(hù)作用。預(yù)言其作用機(jī)制與抗氧化、抑制IL-1β和TNF-α的水平、降低肝臟中α-SMA的過度表達(dá)及抗HSC凋亡有關(guān)。肝細(xì)胞是肝中組織生長因子/CCN蛋白家族(CTGF/CCN2)的主要細(xì)胞來源,咖啡因消費(fèi)具有保肝作用。文獻(xiàn)首次研究報(bào)道了咖啡因抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β的成分,而與肝細(xì)胞中組織生長因子(CTGF)的表達(dá)無關(guān),因此,黃嘌呤生物堿是一種潛在的治療劑。2.3.2細(xì)胞周期阻滯的放療文獻(xiàn)選用肝癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株MHCC97H,咖啡因作為放療增敏劑,去除多種受照射細(xì)胞的周期阻滯,見其作用于肝癌的放療增敏并研究了放療增敏機(jī)制。結(jié)果說明:咖啡因增加了CDC2Tyr15的脫磷酸化,降低了CDC2的含量,而去除G2/M期阻滯,使細(xì)胞攜帶受損的DNA進(jìn)入下一細(xì)胞周期,并產(chǎn)生異常增殖性分裂,導(dǎo)致凋亡。2.3.3腸段吸收特性采用大鼠在體小腸回流裝置,在淺麻醉狀態(tài)下,從吸收部位、藥物濃度、pH值等3方面對(duì)咖啡因的腸段吸收特性進(jìn)行研究。以UV法和HPLC法分別測(cè)定酚紅和咖啡因的含量,結(jié)果顯示:一定范圍的藥物濃度對(duì)咖啡因Ka無影響,在pH7.8~5.4,藥物的Ka無顯著變化;藥物在十二指腸、空腸和回腸的吸收較好,在結(jié)腸的吸收較差;咖啡因在腸道的吸收呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程,吸收機(jī)制為被動(dòng)擴(kuò)散。2.4eitps腺苷與呼吸功能茶堿類藥物用于治療哮喘及慢性阻塞性肺疾病已有數(shù)十年,文獻(xiàn)通過對(duì)37例慢性阻塞性肺病(COPD)患者使用氨茶堿、咖啡因前、后用力肺活量-時(shí)間(FVC-t)曲線的改變,了解并比較兩種藥物對(duì)呼吸功能的作用。結(jié)果顯示:兩種藥物皆有增強(qiáng)呼吸肌力之功效,氨茶堿的作用優(yōu)于咖啡因,對(duì)于咖啡因?qū)粑δ艿淖饔脵C(jī)理存在爭(zhēng)議,另有報(bào)道,咖啡因有增強(qiáng)骨骼肌收縮力的作用,改善膈肌收縮力的作用可能比其擴(kuò)張支氣管的作用意義更大。腺苷(腺嘌呤核苷)作為支氣管肺疾病的一種介質(zhì),引起了人們的關(guān)注。在長期的咖啡因或溶劑治療的過程中,研究了豚鼠氣管離體的乙酰甲膽堿、去甲腎上腺素對(duì)腺苷的反應(yīng),結(jié)果表明:咖啡因治療引起EITPs腺苷的初步認(rèn)識(shí),接著引起上皮細(xì)胞中特定適應(yīng)過程的發(fā)展,從而抵消了腺苷氣管敏感性的增加?？Х纫蚰茉隗w內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性拮抗腺苷受體,因此,咖啡因的中樞興奮及舒張支氣管平滑肌的作用與其阻斷腺苷受體之效有關(guān)?？Х纫?qū)ρ合到y(tǒng)也有作用,如高濃度咖啡因具有在細(xì)胞分裂過程中對(duì)基因組穩(wěn)定性產(chǎn)生影響的藥理作用。2.5精子體外生長咖啡因是一種精子活性物質(zhì),作為體外精子促活劑的研究非常多。文獻(xiàn)利用液氮制作顆粒冷凍精液,結(jié)果表明:咖啡因添加量為4mmol·L-1時(shí),雞精液冷凍解凍效果最佳,精子活力最高,畸形率最低,精子體外存活時(shí)間最長。文獻(xiàn)用鈣離子載體,2mmol·L-1咖啡因,作用1min誘導(dǎo)綿羊精子體外獲能?？Х纫蚣捌潲}類主要是通過抑制環(huán)腺苷酸酶來提高細(xì)胞內(nèi)的cAMP環(huán)磷酸腺苷水平來增強(qiáng)精子的活動(dòng)能力并與肝素協(xié)同作用促進(jìn)精子的獲能。但是研究發(fā)現(xiàn):咖啡因促進(jìn)精子獲能的同時(shí)本身對(duì)胚胎有毒害作用,且毒性作用隨咖啡因濃度的增加和時(shí)間的增長而增強(qiáng),因此,在受精液中加入適宜濃度的咖啡因并盡量減少卵母細(xì)胞在受精液中的保留時(shí)間可避免卵母細(xì)胞與咖啡因過長時(shí)間接觸所造成的不良影響。2.6巨腦室性血藥濃度的變化文獻(xiàn)首次研究了咖啡因?qū)δX部結(jié)構(gòu)的影響,40%的大鼠在長期食用咖啡因時(shí)可引起巨腦室,在咖啡因引起的有巨腦室的大鼠中,有腦脊液在增加,與鈉、鉀、+ATP酶增長,以及腦血流量(CBF)的增加有關(guān)。研究表明:可以通過控制鈉、鉀、+ATP酶和腦血流量的表達(dá)腺苷受體信號(hào)來調(diào)節(jié)腦脊髓液的生產(chǎn)。2.7聯(lián)合作用和抗癲癇作用2.7.1治療骨肉瘤細(xì)胞的增殖和增效作用咖啡因在骨肉瘤細(xì)胞株(OS-U2)順鉑化療中的增效作用顯示:在添加咖啡因的各濃度順鉑組中,骨肉瘤細(xì)胞增殖明顯受抑,凋亡水平明顯升高?？Х纫?qū)樸K殺傷骨肉瘤細(xì)胞株的增效作用存在量效及時(shí)效關(guān)系。其機(jī)制可能是咖啡因能加強(qiáng)誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞凋亡,從而增強(qiáng)順鉑對(duì)骨肉瘤細(xì)胞株的殺傷作用。2.7.2光光度法檢測(cè)以健康大鼠為研究對(duì)象,分別做了格列齊特和二甲雙胍影響咖啡因血藥濃度的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。用紫外分光光度法分別檢測(cè)到,格列齊特對(duì)咖啡因的血藥濃度影響不大,但是二甲雙胍明顯影響了咖啡因的血藥濃度?？Х纫蛟谘獫{中的濃度大小影響了藥物的藥理或毒性作用,因此,糖尿病患者在服用二甲雙胍降血糖藥時(shí),應(yīng)該避免咖啡或含有咖啡因茶葉的過度消費(fèi),其護(hù)理和監(jiān)測(cè)是必要的。2.8胎鼠吸收胎、死胎、fgr發(fā)生率的變化咖啡因劑量較大時(shí)可致失眠、激動(dòng)不安、心悸、頭痛;劑量過大可引起驚厥。孕前和孕期使用咖啡因可致小鼠受孕延遲,胎鼠吸收胎、死胎、FGR發(fā)生率升高。孕婦或準(zhǔn)備懷孕的女性,懷孕前后都不要喝咖啡。咖啡因會(huì)給胎兒的新陳代謝系統(tǒng)增加負(fù)擔(dān),同時(shí)還可能減少胎盤血流量,對(duì)胎兒造成傷害。攝入加糖或減肥可樂類飲料與高血壓風(fēng)險(xiǎn)相關(guān),闡明可樂類飲料在高血壓發(fā)病中所起的作用目前處于研究中。以流行病學(xué)為依據(jù),驗(yàn)證了咖啡因和老年人認(rèn)知功能和白質(zhì)病變有關(guān)。3高效液相色譜法現(xiàn)有的咖啡因分析方法中,光譜法簡單、直接,但樣品基質(zhì)和其他物質(zhì)