一種在菌落總數(shù)測(cè)定中防止芽胞桿菌 菌落彌漫生長(zhǎng)的方法

來源六扇門Study，本文所用部分圖片源于互聯(lián)網(wǎng)，版權(quán)歸屬原作者所有。如有涉及版權(quán)問題，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系小編，協(xié)商刪除。隨著食品工業(yè)發(fā)展，食品種類越來越多，生產(chǎn)原料品種越來越廣，加工工藝也越來越復(fù)雜，但微生物的污染仍然無法避免，特別是糕點(diǎn)、面點(diǎn)等含高淀粉類食品受芽胞桿菌污染的機(jī)率大，加工過程中難以徹底滅菌，菌落計(jì)數(shù)時(shí)瓊脂平板上就會(huì)出現(xiàn)菌落彌漫生長(zhǎng)的現(xiàn)象，導(dǎo)致菌落難以計(jì)數(shù)，對(duì)菌落總數(shù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的準(zhǔn)確性造成嚴(yán)重的干擾。需氧細(xì)菌的新陳代謝作用能將2，3，5－三苯基氯化四氮唑（TTC）還原為紅色的三苯甲臢（TPF），使得菌落呈紅色，故可以將

TTC

作為細(xì)菌生長(zhǎng)的指示劑，同時(shí)TTC對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)有一定的抑制作用。因此，可以利用TTC這一特性，尋求抑制菌落彌漫生長(zhǎng)的有效方法，便于菌落計(jì)數(shù)。鄭連寶，陳文祥，嵇林風(fēng)等取適宜稀釋度的枯草芽胞桿菌（Bacillussubtilis）、蠟樣芽胞桿菌（Bacilluscereus）、大腸埃希菌（Escherichiacoli）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus），在平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基【平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）培養(yǎng)基】中分別添加0.01%、0.05%、0.08%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.8%、1.0%TTC水溶液，同時(shí)以不添加TTC的計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基作為對(duì)照，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)狀況。結(jié)果

TTC濃度為0.2%～0.3%

時(shí)，能有效防止枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌在計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落彌漫生長(zhǎng)，同時(shí)對(duì)大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)無顯著影響。不同濃度TTC對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響當(dāng)枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌液稀釋濃度分別為10－5和10－6時(shí)，菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍(30cfu/ml～300cfu/ml)。從表1可知，不同濃度TTC對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)呈現(xiàn)不同的抑制效果。低濃度TTC對(duì)菌落總數(shù)計(jì)數(shù)無顯著影響。不同濃度TTC對(duì)枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態(tài)的影響由圖1和圖2所示，不同濃度TTC對(duì)枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態(tài)也呈現(xiàn)出3種狀態(tài)。TTC濃度為0.2%～0.3%時(shí)，菌落顏色愈紅，菌落形態(tài)與直徑大小接近對(duì)照組，但計(jì)數(shù)平板上菌落彌漫生長(zhǎng)現(xiàn)象基本消失。綜上所述，TTC濃度為0.2%～0.3%時(shí)，能有效防止枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌在計(jì)數(shù)瓊脂上出現(xiàn)菌落彌漫生長(zhǎng)，同時(shí)對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)無顯著影響，而覆蓋法防止菌落彌漫生長(zhǎng)的效果欠佳。因此，食品微生物檢驗(yàn)中測(cè)定菌落總數(shù)時(shí)，遇到易受芽胞桿菌污染的食品，可在瓊脂中加入0.2%～0.3%的TTC防止菌落出現(xiàn)彌漫現(xiàn)象而導(dǎo)致無法計(jì)數(shù)的情況發(fā)生。內(nèi)容來源：鄭連寶,陳文祥,嵇林風(fēng),章小洪,丁琦,施華