甲乙流感病毒實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

甲型/乙型流感病毒實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定報(bào)告生物學(xué)特性種類和分型流行性感冒病毒（influenzavirus），是正粘病毒科（Orthomyxoviridae）的代表種，簡(jiǎn)稱流感病毒，涉及人流感病毒和動(dòng)物流感病毒，人流感病毒分為甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行性感冒（流感）的病原體。其中甲型流感病毒抗原性易發(fā)生變異，多次引發(fā)世界性大流行。例如1918～19的大流行中，全世界最少有萬(wàn)～4000萬(wàn)人死于流感；乙型流感病毒對(duì)人類致病性也比較強(qiáng)，但是人們還沒有發(fā)現(xiàn)乙型流感病毒引發(fā)過(guò)世界性大流行；丙型流感病毒只引發(fā)人類不明顯的或輕微的上呼吸道感染，極少造成流行。甲型流感病毒于1933年分離成功，乙型流感病毒于1940年獲得，丙型流感病毒直到1949年才成功分離。流感分類根據(jù)流感病毒感染的對(duì)象，能夠?qū)⒉《痉譃槿祟惲鞲胁《?、豬流感病毒、馬流感病毒以及禽流感病毒等類群，其中人類流感病毒根據(jù)其核蛋白的抗原性能夠分為三類:甲型流感病毒（InfluenzaAvirus），又稱A型流感病毒乙型流感病毒（InfluenzaBvirus），又稱B型流感病毒丙型流感病毒（InfluenzaCvirus），又稱C型流感病毒感染鳥類、豬等其它動(dòng)物的流感病毒，其核蛋白的抗原性與人甲型流感病毒相似，但是由于甲型、乙型和丙型流感病毒的分類只是針對(duì)人流感病毒的，因此普通不將禽流感病毒等非人類宿主的流感病毒稱作甲型流感病毒。在核蛋白抗原性的基礎(chǔ)上，流感病毒還根據(jù)血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA的抗原性分為不同的亞型。（二）形態(tài)構(gòu)造流感病毒呈球形，新分離的毒株則多呈絲狀，其直徑在80至120納米之間，絲狀流感病毒的長(zhǎng)度可達(dá)4000納米。流感病毒構(gòu)造自外而內(nèi)可分為包膜、基質(zhì)蛋白以及核心三部分。病毒的核心包含了存貯病毒信息的遺傳物質(zhì)以及復(fù)制這些信息必須的酶。流感病毒的遺傳物質(zhì)是單股負(fù)鏈RNA，簡(jiǎn)寫為ss-RNA，ss-RNA與核蛋白(NP)相結(jié)合，纏繞成核糖核蛋白體(RNP)，以密度極高的形式存在。除了核糖核蛋白體，尚有負(fù)責(zé)RNA轉(zhuǎn)錄的RNA多聚酶。甲型和乙型流感病毒的RNA由8個(gè)節(jié)段構(gòu)成，丙型流感病毒則比它們少一種節(jié)段，第1、2、3個(gè)節(jié)段編碼的是RNA多聚集酶，第4個(gè)節(jié)段負(fù)責(zé)編碼血凝素；第5個(gè)節(jié)段負(fù)責(zé)編碼核蛋白，第6個(gè)節(jié)段編碼的是神經(jīng)氨酸酶；第7個(gè)節(jié)段編碼基質(zhì)蛋白，第8個(gè)節(jié)段編碼的是一種能起到拼接RNA功效的非構(gòu)造蛋白，這種蛋白的其它功效尚不得而知?；|(zhì)蛋白構(gòu)成了病毒的外殼骨架，事實(shí)上骨架中除了基質(zhì)蛋白(M1)之外尚有膜蛋白(M2)。M2蛋白含有離子（重要是Na+）通道和調(diào)節(jié)膜內(nèi)PH值的作用，但數(shù)量極少?；|(zhì)蛋白與病毒最外層的包膜緊密結(jié)合起到保護(hù)病毒核心和維系病毒空間構(gòu)造的作用。當(dāng)流感病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)完畢其繁殖之后，基質(zhì)蛋白是分布在宿主細(xì)胞細(xì)胞膜內(nèi)壁上的，成型的病毒核衣殼能夠識(shí)別宿主細(xì)胞膜上含有基質(zhì)蛋白的部位，與之結(jié)合形成病毒構(gòu)造，并以出芽的形式突出釋放成熟病毒。

包膜是包裹在基質(zhì)蛋白之外的一層磷脂雙分子層膜，這層膜來(lái)源于宿主的細(xì)胞膜，成熟的流感病毒從宿主細(xì)胞出芽，將宿主的細(xì)胞膜包裹在自己身上之后脫離細(xì)胞，去感染下一種目的。包膜中除了磷脂分子之外，尚有兩種非常重要的糖蛋白：血凝素和神經(jīng)氨酸酶。這兩類蛋白突出病毒體外，長(zhǎng)度約為10至40納米，被稱作刺突。普通一種流感病毒表面會(huì)分布有500個(gè)血凝素刺突和100個(gè)神經(jīng)氨酸酶刺突。在甲型流感病毒中血凝素和神經(jīng)氨酸酶的抗原性會(huì)發(fā)生變化，這是辨別病毒毒株亞型的根據(jù)。血凝素(HA)呈柱狀，能與人、鳥、豬豚鼠等動(dòng)物紅細(xì)胞表面的受體相結(jié)合引發(fā)凝血，故而被稱作血凝素。血凝素蛋白水解后分為輕鏈和重鏈兩部分，后者能夠與宿主細(xì)胞膜上的唾液酸受體相結(jié)合，前者則能夠協(xié)助病毒包膜與宿主細(xì)胞膜互相融合。血凝素在病毒導(dǎo)入宿主細(xì)胞的過(guò)程中扮演了重要角色。血凝素含有免疫原性，抗血凝素抗體能夠中和流感病毒。

神經(jīng)氨酸酶(NA)是一種呈蘑菇狀的四聚體糖蛋白，含有水解唾液酸的活性，當(dāng)成熟的流感病毒經(jīng)出芽的方式脫離宿主細(xì)胞之后，病毒表面的血凝素會(huì)經(jīng)由唾液酸受體與宿主細(xì)胞膜保持聯(lián)系，需要由神經(jīng)氨酸酶將唾液酸水解，切斷病毒與宿主細(xì)胞的最后聯(lián)系,使病毒能順利從宿主細(xì)胞中釋放，繼而感染下一種宿主細(xì)胞。因此神經(jīng)氨酸酶也成為流感治療藥品的一種作用靶點(diǎn)，針對(duì)此酶設(shè)計(jì)的奧司他韋是最知名的抗流感藥品之一。

（三）命名方式根據(jù)世界衛(wèi)生組織1980年通過(guò)的流感病毒毒株命名法修正案，流感毒株的命名包含6個(gè)要素：型別/宿主/分離地區(qū)/毒株序號(hào)/分離年份(HnNn)，其中對(duì)于人類流感病毒，省略宿主信息，對(duì)于乙型和丙型流感病毒省略亞型信息。例如A/swine/Lowa/15/30(H1N1)表達(dá)的是核蛋白為A型的，1930年在lowa分離的以豬為宿主的H1N1亞型流感病毒毒株，其毒株序號(hào)為15，這也是人類分離的第一支流感病毒毒株。

[（四）病毒變異流感病毒變異有抗原性變異、溫度敏感性變異、宿主范疇以及對(duì)非特異性克制物敏感性等方面的變異，但最重要的是抗原性變異。抗原性變異與其它病毒不同，特點(diǎn)是表面抗原HA和NA易變異。變異有兩種形式，即抗原性轉(zhuǎn)變和抗原性漂移。流感病毒表面抗原變異幅度的大小，直接影響到流感規(guī)模。若變異幅度小，屬于量變，稱為抗原漂移，產(chǎn)生病毒的信株，可引發(fā)中小型流行。如果抗原變異幅度大，屬于質(zhì)變，稱為抗原性轉(zhuǎn)變，形成新的亞型，此時(shí)人群普遍缺少對(duì)它的免疫力，往往引發(fā)較大的流行，甚至世界性流行。如甲型流感病毒的HA，NA容易發(fā)生抗原轉(zhuǎn)變，構(gòu)成HA,NA的大部分或全部氨基酸均可發(fā)生變化，出現(xiàn)抗原性完全不同的新亞型。變異由量變累為質(zhì)變。當(dāng)新的流感病毒亞型出現(xiàn)時(shí)，人群普遍對(duì)其缺少免疫力，因此容易引發(fā)大流行。抗原轉(zhuǎn)變抗原性轉(zhuǎn)變（antigenicshift）變異幅度大，屬于質(zhì)變，即病毒株表面抗原構(gòu)造一種或兩種發(fā)生變異，與前次流行株抗原相異，形成新亞型（如H1N1→H2N2、H2N2→H3N2），由于人群缺少對(duì)變異病毒株的免疫力，從而引發(fā)流感大流行。如果兩種不同病毒同時(shí)感染同一細(xì)胞，則可發(fā)生基因重組形成新亞型。1978年前蘇聯(lián)流行的甲型流感病毒H1N1與香港甲型流感病毒H3N2同時(shí)感染人則分離出H3N1亞型，這闡明自然流行狀況下可發(fā)生這樣的變異。過(guò)去始終認(rèn)為新舊亞型病毒株間的交替是快速的，一旦新亞型出現(xiàn)，舊亞型就很快消失。但1997年夏甲1型（H1N1）雖再度出現(xiàn)，卻至今尚未能替代甲3型（H3N2），而是兩者共同流行。直到1998年甲3型（H3N2）代表株的抗原發(fā)生了變異，武漢株被悉尼株所取代，人們對(duì)新株沒有免疫力，造成了新的流行。[3]

抗原漂移抗原性漂移（antigenicdrift）變異幅度小或持續(xù)變異，屬于量變，即亞型內(nèi)變異。普通認(rèn)為這種變異是由病毒基因點(diǎn)突變和人群免疫力選擇所造成的，所引發(fā)的流行是小規(guī)模的。在感染人類的三種流感病毒中，甲型流感病毒有著極強(qiáng)的變異性，乙型次之，而丙型流感病毒的抗原性非常穩(wěn)定。乙型流感病毒的變異會(huì)產(chǎn)生新的主流毒株，但是新毒株與舊毒株之間存在交叉免疫，即針對(duì)舊毒株的免疫反映對(duì)新毒株仍然有效。甲型流感病毒是變異最為頻繁的一種類型，每隔十幾年就會(huì)發(fā)生一種抗原性大變異，產(chǎn)生一種新的毒株，這種變化稱作抗原轉(zhuǎn)變亦稱抗原的質(zhì)變；在甲型流感亞型內(nèi)還會(huì)發(fā)生抗原的小變異，其體現(xiàn)形式重要是抗原氨基酸序列的點(diǎn)突變，稱作抗原漂移亦稱抗原的量變?？乖D(zhuǎn)變可能是血凝素抗原和神經(jīng)氨酸酶抗原同時(shí)轉(zhuǎn)變，稱作大族變異；也可能僅是血凝素抗原變異，而神經(jīng)氨酸酶抗原則不發(fā)生變化或僅發(fā)生小變異，稱作亞型變異。對(duì)于甲型流感病毒的變異性，學(xué)術(shù)界尚無(wú)統(tǒng)一認(rèn)識(shí)，某些學(xué)者認(rèn)為，是由于人群中傳輸?shù)募仔土鞲胁《久媾R較大的免疫壓力，促使病毒核酸不停發(fā)生突變。另某些學(xué)者認(rèn)為，是由于人甲型流感病毒和禽流感病毒同時(shí)感染豬后發(fā)生基因重組造成病毒的變異。后一派學(xué)者的觀點(diǎn)得到某些事實(shí)的支持，實(shí)驗(yàn)室工作顯示，1957年流行的亞洲流感病毒(H2N2)基因的八個(gè)節(jié)段中中有三個(gè)是來(lái)自鴨流感病毒，而其它五個(gè)節(jié)段則來(lái)自H1N1人流感病毒。甲型流感病毒的高變異性增大了人們應(yīng)對(duì)流行性感冒的難度，人們無(wú)法精確預(yù)測(cè)即將流行的病毒亞型，便不能有針對(duì)性地進(jìn)行防止性疫苗接種，另首先，每隔十?dāng)?shù)年便會(huì)發(fā)生地抗原轉(zhuǎn)變更會(huì)產(chǎn)生根本就沒有疫苗的流感新毒株。

[3]

甲型流感病毒抗原變異狀況亞型名稱抗原構(gòu)造流行年代代表病毒株原甲型（A0）H0N11930～1946A/PR/8/34（H0N1)亞甲型（A1）H1N11946～1957A/FM/1/4/（H1N1）亞洲甲型（A2）H2N21957～1968A/Singapore/1/57（H2N2）香港亞型（A3）H3N21968～1977A/Hongkong/1/68（H3N2）新A1與A3交替型H3N2H1N11977～至今A/USSR/90/77（H1N1）A/BeiJing/32/92(H3N2)*代表病毒株命名法：型別/分離地點(diǎn)/毒株序號(hào)/分離年代（亞型）

[3]

（五）繁殖方式流感病毒能在雞胚羊膜腔和尿囊腔中增殖。增殖的病毒游離于羊水或尿囊液中，用紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)即可檢出。流感病毒雖可在組織培養(yǎng)細(xì)胞（人羊膜、猴腎、狗腎、雞胚等細(xì)胞）中增殖，但不引發(fā)明顯的CPE，可用紅細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)鑒定有無(wú)病毒增殖。易感動(dòng)物為雪貂，病毒在小鼠中持續(xù)傳代可提高毒力，使小鼠肺部發(fā)生廣泛的實(shí)質(zhì)性病變或死亡。

（六）重要特性流感病毒抵抗力較弱，不耐熱，56℃30分鐘即可使病毒滅活。室溫下傳染性很快喪失，但在0℃～4℃能存活數(shù)周，—70℃下列或凍干后能長(zhǎng)久存活。病毒對(duì)干燥、日光、紫外線以及乙醚、甲醛、乳酸等化學(xué)藥品也很敏感。

[5]

（七）傳輸途徑傳染源重要是患者，另首先為隱性感染者，被感染的動(dòng)物也可能是一種傳染源。重要傳輸途徑是帶有流感病毒的飛沫，經(jīng)呼吸道進(jìn)入體內(nèi)。少數(shù)也可經(jīng)共用手帕、毛巾等間接接觸而感染。病毒傳入人群后，傳染性強(qiáng)并可快速蔓延，傳輸速度和廣度與人口密度有關(guān)。進(jìn)入人體的病毒，如果不為咳嗽反射所去除，或不為機(jī)體的特異IgA抗體中和及粘膜分泌物中非特異性克制物滅活，則可感染少數(shù)呼吸道上皮細(xì)胞，引發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生空泡、變性并快速產(chǎn)生子代病毒體擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞，再重復(fù)病毒增殖周期。病毒的NA可減少呼吸道粘液層的粘度，不僅使細(xì)胞表面受體暴露，有助于病毒的吸附，并且還增進(jìn)含病毒的液體散布至下呼吸道，在短期內(nèi)使許多呼吸道細(xì)胞受損。流感病毒普通只引發(fā)表面感染，不引發(fā)病毒血癥。流感病毒侵襲的目的是呼吸道粘膜上皮細(xì)胞，偶有侵襲腸粘膜的病例，則會(huì)引發(fā)胃腸型流感。病毒侵入體內(nèi)后依靠血凝素吸附于宿主細(xì)胞表面，通過(guò)吞飲進(jìn)入胞漿；進(jìn)入胞漿之后病毒包膜與細(xì)胞膜融合釋放出包含的ss-RNA；ss-RNA的八個(gè)節(jié)段在胞漿內(nèi)編碼RNA多聚酶、核蛋白、基質(zhì)蛋白、膜蛋白、血凝素、神經(jīng)氨酸酶、非構(gòu)造蛋白等構(gòu)件；基質(zhì)蛋白、膜蛋白、血凝素、神經(jīng)氨酸酶等編碼蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體上組裝M蛋白和包膜；在細(xì)胞核內(nèi)，病毒的遺傳物質(zhì)不停復(fù)制并與核蛋白、RNA多聚酶等組建病毒核心；最后病毒核心與膜上的M蛋白和包膜結(jié)合，通過(guò)出芽釋放到細(xì)胞之外，復(fù)制的周期大概8個(gè)小時(shí)。流感病毒感染將造成宿主細(xì)胞變性、壞死乃至脫落，造成粘膜充血、水腫和分泌物增加，從而產(chǎn)生鼻塞、流涕、咽喉疼痛、干咳以及其它上呼吸道感染癥狀，當(dāng)病毒蔓延至下呼吸道，則可能引發(fā)毛細(xì)支氣管炎和間質(zhì)性肺炎。人群普遍易感，潛伏期長(zhǎng)短取決于侵入的病毒量和機(jī)體的免疫狀態(tài)，普通為1～4天。起病后患者有畏寒、頭痛、發(fā)熱、渾身酸痛、乏力、鼻塞、流涕、咽痛及咳嗽等癥狀。在癥狀出現(xiàn)的1～2天內(nèi)，隨分泌物排出的病毒量較多，后來(lái)則快速減少。無(wú)并發(fā)癥患者發(fā)病后第3～4天就開始恢復(fù)；如有并發(fā)癥，則恢復(fù)期延長(zhǎng)。流感的特點(diǎn)是發(fā)病率高，病死率低，死亡普通由并發(fā)細(xì)菌性感染所致。常見的細(xì)菌有肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌等。并發(fā)癥多見于嬰幼兒、老人和慢性?。ㄐ难芗膊?、慢性氣管炎和糖尿病等）患者。二、實(shí)驗(yàn)室有關(guān)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與控制（一）實(shí)驗(yàn)室感染性因子的種類、來(lái)源和危害1.感染性因子種類本實(shí)驗(yàn)室可能的感染因子的為流感病毒本身。2.感染性因子的的來(lái)源⑴用于流感病毒抗原檢測(cè)的咽拭子樣本。⑵樣本采集與檢測(cè)過(guò)程涉及的全部實(shí)驗(yàn)場(chǎng)合。⑶實(shí)驗(yàn)室操作中可能產(chǎn)生的含病毒的氣溶膠。3.感染性因子可能造成的危害⑴被污染的實(shí)驗(yàn)器材、器皿等對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。⑵實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境造成污染。⑶實(shí)驗(yàn)人員暴露后感染。⑷實(shí)驗(yàn)室含病毒的氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。（二）實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動(dòng)過(guò)程中的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與控制1.實(shí)驗(yàn)辦法⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若采用國(guó)標(biāo)、行業(yè)原則之外的其它未經(jīng)確認(rèn)的實(shí)驗(yàn)辦法，或在使用國(guó)標(biāo)、行業(yè)原則之前未進(jìn)行技術(shù)確認(rèn)，操作時(shí)可能存在安全風(fēng)險(xiǎn)。⑵風(fēng)險(xiǎn)控制方法盡量采用國(guó)標(biāo)、行業(yè)原則或通過(guò)充足驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)辦法；在使用新的或變更過(guò)的國(guó)標(biāo)、行業(yè)原則之前，必須通過(guò)嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。2.樣本采集⑴所用器材一次性咽拭子、消毒棉簽。⑵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別采集過(guò)程中，工作人員與患者近距離接觸，患者咳嗽、打噴嚏時(shí)，病毒隨飛沫排出，很容易通過(guò)口、咽、鼻部及眼結(jié)合膜入侵工作人員，此時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)最大。②若采樣操作不規(guī)范，則會(huì)發(fā)生樣本滴灑或?yàn)R出的狀況，產(chǎn)生的氣溶膠存在感染操作者的風(fēng)險(xiǎn)。③痰液、唾液標(biāo)本濺灑出來(lái)，對(duì)環(huán)境造成污染。⑶風(fēng)險(xiǎn)控制方法采集樣本前做好個(gè)人防護(hù)，穿戴防護(hù)服、手套、口罩、護(hù)目鏡和帽子，安撫好病人，做好解釋工作盡量爭(zhēng)取到病人的配合，消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專用袋中，統(tǒng)一消毒解決。3.樣本的包裝和運(yùn)輸⑴所用器材一次性使用咽拭子、微生物標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)箱、運(yùn)輸車輛。⑵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若使用不合格包裝進(jìn)行運(yùn)輸，容器密封不嚴(yán)，將不能安全有效地避免運(yùn)輸過(guò)程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生污染擴(kuò)散的可能。⑶風(fēng)險(xiǎn)控制方法嚴(yán)格按照生物安全的規(guī)定，使用普通采用微生物樣本轉(zhuǎn)運(yùn)箱且易于消毒。樣本應(yīng)由中心專人運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。4.樣本接受⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若運(yùn)輸途中出現(xiàn)樣本管破裂的狀況，則可能對(duì)樣本接受人員造成污染。 ⑵風(fēng)險(xiǎn)控制方法樣本直接送至實(shí)驗(yàn)室，由專業(yè)檢查人員接受，接受樣本前做好個(gè)人防護(hù)，穿戴防護(hù)服、手套、口罩和帽子。若發(fā)生樣本管破裂，應(yīng)立刻在生物安全柜內(nèi)將尚存留的樣本移出，廢棄物放入帶蓋的防刺破的塑料罐中，被污染的容器用0.5%過(guò)氧乙酸等消毒液浸泡后再清洗。5.樣品檢測(cè)⑴所用器材生物安全柜、移液器⑵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別咽拭子在研磨過(guò)程中產(chǎn)生大量氣溶膠，并造成環(huán)境污染。②添加樣本時(shí)液體濺出污染設(shè)備表面或工作臺(tái)面。⑶風(fēng)險(xiǎn)控制方法全部檢測(cè)操作均在BSL-2實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，檢測(cè)人員在實(shí)驗(yàn)前按照二級(jí)生物安全防護(hù)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)；加樣移液操作在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，動(dòng)作輕緩；判讀成果時(shí)，酶標(biāo)板應(yīng)輕拿輕放，避免液體濺出；待實(shí)驗(yàn)完畢，先消毒手部，再脫去手套并立刻洗手。6.陽(yáng)性樣本的保存⑴所用器材生物安全柜、移液器、帶螺旋蓋的塑料管及可密封的塑料凍存盒。⑵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別甲乙流感病毒抗原陽(yáng)性樣本若保存不當(dāng)，易造成人員或環(huán)境污染。⑶風(fēng)險(xiǎn)控制方法按照二級(jí)生物安全防護(hù)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)；樣本的保存在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，動(dòng)作要輕緩；全部樣本的血清或血漿都保存在帶螺旋蓋的塑料管內(nèi)，再裝入可密封的塑料凍存盒中，置－20℃下列冰箱內(nèi)保存，雙人雙鎖管理。7.實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別工作完畢后，若不及時(shí)對(duì)工作臺(tái)面、生物安全柜等進(jìn)行消毒，則有可能會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染或人員感染。⑵風(fēng)險(xiǎn)控制方法工作完畢后，及時(shí)對(duì)檢測(cè)所涉及的工作臺(tái)面、地面和生物安全柜進(jìn)行消毒，使用100倍稀釋的84消毒液擦拭，用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70%～75%的酒精進(jìn)行擦拭消毒。待實(shí)驗(yàn)和消毒完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，并對(duì)的使用肥皂和流水洗手。8.廢棄物處置⑴所用器材醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器。⑵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別剩余的陽(yáng)性樣本管是很大的污染源，采血過(guò)的針頭若解決不當(dāng)，則易產(chǎn)生人員刺傷風(fēng)險(xiǎn)。⑶風(fēng)險(xiǎn)控制方法實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的全部廢棄物，涉及不再需要的樣本、酶標(biāo)反映板，及其它物品，均視為感染性廢棄物，需置于裝有醫(yī)療廢棄物專用袋的硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶中，于121℃高壓滅菌15～20min后再運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。全部解決完畢的廢棄物集中寄存，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物解決單位上門收集、集中處置。同時(shí)，做好交接統(tǒng)計(jì)，全部有關(guān)統(tǒng)計(jì)定時(shí)整頓歸檔。（三）實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動(dòng)中其它風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與防止控制方法1.電力⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若實(shí)驗(yàn)室沒有布置雙路供電，或電力供應(yīng)不穩(wěn)定，則有可能造成實(shí)驗(yàn)活動(dòng)忽然中斷、實(shí)驗(yàn)設(shè)備停止工作等意外狀況的發(fā)生，從而帶來(lái)有關(guān)安全風(fēng)險(xiǎn)。⑵防止控制方法實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡量布置雙路供電，沒有布置雙路供電的應(yīng)配備備用電源，以確保高壓滅菌器、生物安全柜等重要設(shè)備的安全運(yùn)行。2.電氣操作⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及的電氣操作，涉及實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動(dòng)、關(guān)閉、安裝和維修;設(shè)備層內(nèi)UPS、空調(diào)機(jī)組等電氣設(shè)備的啟動(dòng)、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過(guò)程可能產(chǎn)生觸電、電擊、電氣故障等風(fēng)險(xiǎn)。⑵防止控制方法①電氣設(shè)備的設(shè)計(jì)及制造應(yīng)符合有關(guān)安全原則的規(guī)定。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域內(nèi)若有380V的電源插座，需明確標(biāo)記，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進(jìn)行操作。②新的、改裝過(guò)的或修理過(guò)的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員（如有資質(zhì)的電工）完畢電氣安全測(cè)試和設(shè)備符合安全使用規(guī)定之前，不允許使用。③電氣設(shè)備使用人員應(yīng)接受對(duì)的操作的培訓(xùn)，操作方式不減少電氣安全性。電氣設(shè)備使用人員要定時(shí)檢查設(shè)備可能引發(fā)電氣故障的破損。只有專業(yè)人員才可從事電氣設(shè)備和電路工作。嚴(yán)禁未經(jīng)授權(quán)的工作。④采用方法對(duì)設(shè)備去污染，以減少維護(hù)人員感染的風(fēng)險(xiǎn)。3.實(shí)驗(yàn)室給排水設(shè)施設(shè)備⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，涉及位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。管道意外破裂、排水管道阻塞均可能造成感染性材料溢出，有污染實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。⑵防止控制方法實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的全部染菌物及器具，必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌，產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池進(jìn)行消毒解決，嚴(yán)禁直接排放。最少每月監(jiān)測(cè)糞大腸菌群，定時(shí)檢查實(shí)驗(yàn)室給排水管道各界面的密封性，及時(shí)發(fā)現(xiàn)安全隱患。4.實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)構(gòu)造的部位可能存在密封不嚴(yán)的狀況。當(dāng)感染性材料溢出時(shí)，有污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。⑵防止控制方法全部管道穿越維護(hù)構(gòu)造的部位應(yīng)嚴(yán)格密封，并定時(shí)進(jìn)行檢查，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境。5.重要檢測(cè)儀器設(shè)備加樣槍風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)：操作過(guò)程中應(yīng)輕推輕吸，減少氣溶膠產(chǎn)生。6.生物安全設(shè)施設(shè)備⑴生物安全柜①風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若不按照安全柜操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)與檢測(cè)，其防護(hù)屏障效果會(huì)明顯減少，甚至消失，失去安全防護(hù)效果；若長(zhǎng)時(shí)間使用或未及時(shí)更換HEPA過(guò)濾膜，會(huì)使其功效喪失，造成工作窗口氣流速度減少或流向紊亂；使用后若不徹底消毒解決，對(duì)于清潔、維護(hù)人員將會(huì)產(chǎn)生污染。②防止控制方法對(duì)的選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受有關(guān)的操作、維護(hù)培訓(xùn)，日常操作和維護(hù)應(yīng)嚴(yán)格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用闡明書進(jìn)行；每年請(qǐng)有檢測(cè)資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對(duì)生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、氣流、塵埃粒子、紫外線強(qiáng)度等核心要素的檢測(cè)，確保其性能正常；一旦造成污染，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒解決。⑵高壓滅菌器①風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若不按照高壓滅菌器操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)，其效果會(huì)明顯減少，甚至失效，失去去污染與無(wú)害化的作用；若長(zhǎng)時(shí)間使用又不定時(shí)檢測(cè)滅菌效果，對(duì)其滅菌效果無(wú)從考證，可能造成功效缺損，存在滅菌不徹底從而引發(fā)污染的隱患；在長(zhǎng)久關(guān)停期間，若內(nèi)部水分不及時(shí)排干，將會(huì)造成內(nèi)部器件老化從而失去正常功效。②防止控制方法采用下排式高壓滅菌器，避免氣溶膠污染；規(guī)范操作，定時(shí)維護(hù)，確保高壓滅菌器性能正常；定時(shí)檢定、核查，做好使用統(tǒng)計(jì)，操作人員持證上崗；日常進(jìn)行滅菌效果監(jiān)測(cè)，以確保滅菌質(zhì)量。⑶個(gè)人防護(hù)用品①風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別個(gè)人防護(hù)用品若穿戴不規(guī)范、大小不適宜或使用過(guò)期的防護(hù)用品等，則將會(huì)造成防護(hù)效果減少，甚至失效。②防止控制方法進(jìn)行與流感病毒有關(guān)操作時(shí)要按二級(jí)生物安全防護(hù)水平進(jìn)行個(gè)人防護(hù)，必須選擇大小適宜、有效的防護(hù)用品，穿戴時(shí)互相檢查確認(rèn)，避免使用有破損、缺點(diǎn)和過(guò)期的防護(hù)用品。⑷應(yīng)急救治設(shè)施和用品①風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不適宜或過(guò)期，則會(huì)造成急用時(shí)無(wú)法發(fā)揮作用。②防止控制方法在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)的配備洗眼器，確保其功效正常。配備的75%乙醇、碘伏或其它消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)，并在使用期內(nèi)使用，專人負(fù)責(zé)管理，定時(shí)維護(hù)、清理和更新。⑸消毒滅菌劑①風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別消毒產(chǎn)品無(wú)生產(chǎn)許可證、過(guò)期、配制辦法或濃度不對(duì)的、種類選擇不合理，都將會(huì)造成消毒效果減少、生物滅活能力減少、或?qū)ξ锲犯g性增加、對(duì)皮膚造成刺激等問(wèn)題。②防止控制方法選擇符合國(guó)標(biāo)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇適宜的消毒劑，按照規(guī)定的消毒辦法、消毒時(shí)間和消毒濃度（劑量）進(jìn)行消毒，避免使用過(guò)期產(chǎn)品；消毒過(guò)程中，消毒人員應(yīng)做好必要的個(gè)人防護(hù)，避免發(fā)生意外。流感病毒抵抗力弱，對(duì)普通消毒劑均敏感。本實(shí)驗(yàn)室選用84消毒液（重要成分為次氯酸鈉）、碘伏、75%酒精、漂白粉等，就作為慣用消毒劑。7.管理體系的風(fēng)險(xiǎn)⑴風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別管理體系（涉及應(yīng)急預(yù)案）、程序文獻(xiàn)、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程都是確保生物安全的重要因素。如果組織構(gòu)造不健全、設(shè)立不合理，體系檔與實(shí)際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)龋投伎赡軒?lái)安全風(fēng)險(xiǎn)。⑵防止控制方法定時(shí)開展對(duì)管理體系的評(píng)審，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)修訂、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效地運(yùn)行。（四）工作人員的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與防止控制方法1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別⑴人員數(shù)量人員過(guò)少會(huì)因缺少互相提示或因工作量增大而造成操作過(guò)程中工作失誤增加，風(fēng)險(xiǎn)增加。⑵人員構(gòu)造及資質(zhì)新進(jìn)人員若沒有高資歷人員帶教操作，則不能較好地解決意外事件，風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加。實(shí)驗(yàn)人員不熟悉實(shí)驗(yàn)檢測(cè)辦法及操作規(guī)范，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前未進(jìn)行有關(guān)的專業(yè)知識(shí)培訓(xùn)，無(wú)法確保工作質(zhì)量和安全。⑶職業(yè)操守責(zé)任心不強(qiáng)的人員參加該項(xiàng)工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會(huì)安定的可能性較大。⑷健康管理健康狀況重要涉及生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng)身體出現(xiàn)呼吸道癥狀、腹瀉等胃腸道癥狀、手部皮膚有開放性損傷或其它不適合工作的狀況，職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加。⑸生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件解決能力工作人員上崗前沒有接受嚴(yán)格的生物安全和有關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易造成生物安全事故的發(fā)生。上崗后，沒有接受實(shí)驗(yàn)室突發(fā)事件解決的培訓(xùn)，一旦發(fā)生意外事件，就不能有效地進(jìn)行早期解決和控制生物安全事件。2.防止控制方法⑴人員數(shù)量盡量有2名工作人員同時(shí)進(jìn)行采樣、檢測(cè)或有質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)核心環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)督。⑵人員構(gòu)造及資質(zhì)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員的年紀(jì)和資歷構(gòu)造應(yīng)配備合理，新進(jìn)人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作。檢測(cè)技術(shù)人員需通過(guò)上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)。規(guī)定掌握有關(guān)專業(yè)知識(shí)和技能，能獨(dú)立純熟地操作，并經(jīng)考核合格，持證上崗。⑶職業(yè)操守加強(qiáng)職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。⑷健康管理健康狀況重要涉及生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng)身體出現(xiàn)呼吸道癥狀或其它不適合工作的狀況，職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加。⑸生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件解決能力檢測(cè)人員必須接受上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，每年參加本中心組織的生物安全知識(shí)或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照《實(shí)驗(yàn)室意外事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度》和《病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案》中規(guī)定的規(guī)定進(jìn)行應(yīng)急事件的處置，強(qiáng)化職業(yè)暴露的應(yīng)急解決能力，規(guī)范工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場(chǎng)急救解決方法。（五）實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng)中的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與防止控制方法1.實(shí)驗(yàn)室重要的非常規(guī)活動(dòng)⑴檢測(cè)外專業(yè)人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、維修、檢測(cè)驗(yàn)證（如重要設(shè)施設(shè)備的檢測(cè)驗(yàn)證）和更換（如高效過(guò)濾器等的更換）。⑵實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室及公共環(huán)境進(jìn)行保潔，對(duì)實(shí)驗(yàn)器材進(jìn)行洗刷消毒。⑶外部人員來(lái)實(shí)驗(yàn)室參觀及上級(jí)部門對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查。⑷任何其別人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)以外的行為。2.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別⑴進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室可能存在實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險(xiǎn)，特別是在不慎打翻、打破血管或損壞儀器部件狀況下。⑵實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過(guò)程中某些人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室參觀，存在影響實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)行的風(fēng)險(xiǎn)。3.防止控制方法⑴實(shí)施人員準(zhǔn)入、登記制度。外部人員來(lái)進(jìn)行參觀或檢查前，應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室作徹底毒；任何外來(lái)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)有實(shí)驗(yàn)室人員陪伴。⑵進(jìn)入人員絕對(duì)不能私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有標(biāo)記的危險(xiǎn)品，絕不能將未經(jīng)消毒解決的物品拿出實(shí)驗(yàn)區(qū)。⑶在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過(guò)程中，若發(fā)生意外事件，應(yīng)立刻報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定，并采用應(yīng)對(duì)方法。⑷對(duì)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)維修工作時(shí)應(yīng)動(dòng)作輕柔，避免產(chǎn)憤怒溶膠。檢測(cè)維修后、離開實(shí)驗(yàn)室前，必須洗手。（六）被誤用和惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)與防止控制方法1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若陽(yáng)性標(biāo)本未明確標(biāo)記并未實(shí)施雙人雙鎖管理，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)束后不及時(shí)對(duì)操作場(chǎng)合進(jìn)行消毒，其它工作人員在不知情的狀況下可能會(huì)誤用標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備等，從而造成人員感染和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染等。2.防止控制方法⑴實(shí)施嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。⑵全部獲得同意進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的人員，必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備。⑶發(fā)生事故時(shí)必須及時(shí)報(bào)告并作必要的解決和統(tǒng)計(jì)。⑷實(shí)驗(yàn)所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)記。（七）有關(guān)實(shí)驗(yàn)室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示現(xiàn)在，因流感病毒檢測(cè)明確引發(fā)實(shí)驗(yàn)室人員感染的有關(guān)報(bào)導(dǎo)極少，但任何一種病原微生物都有可能造成實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險(xiǎn)。因此，工作人員應(yīng)嚴(yán)格恪守實(shí)驗(yàn)室有關(guān)規(guī)定，做好個(gè)人防護(hù)和規(guī)范操作，減少和規(guī)避職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)。三、實(shí)驗(yàn)室理化因素風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定及安全防護(hù)方法（—）紫外線1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別生物安全柜及BSL-2實(shí)驗(yàn)室均使用紫外線燈進(jìn)行物體表面消毒。紫外線波長(zhǎng)為250～280nm，重要影響眼睛和皮膚，可引發(fā)急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼部疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈啟動(dòng)時(shí)，若人員在不知情的狀況下進(jìn)入，則可能會(huì)受到傷害。2.安全防護(hù)方法在實(shí)驗(yàn)室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面應(yīng)貼有紫外線危害的標(biāo)記。在進(jìn)行紫外線消毒時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域，基本能夠規(guī)避紫外線對(duì)人體的危害。（二）建設(shè)1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室籌建選址時(shí)未對(duì)周邊輻射源進(jìn)行排查，使用含輻射的儀器時(shí)未進(jìn)行嚴(yán)格管理，存在輻射源或輻射事故間接造成病原微生物屏障系統(tǒng)破壞的隱患。2.防止控制方法實(shí)驗(yàn)室籌建選址時(shí)，嚴(yán)格排查周邊建筑群的輻射源。（三）84消毒劑1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別84消毒液屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為4.55%～5.55%，次氯酸鈉為重要?dú)⒕蜃?。含氯的消毒液?huì)殘留在空氣中不揮發(fā)，長(zhǎng)久使用會(huì)使人感到頭疼、惡心。對(duì)于有過(guò)敏體質(zhì)的人，還容易引發(fā)過(guò)敏、哮喘等疾病。高濃度的含氯消毒劑對(duì)人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的刺激作用，可使人流淚、咳嗽，并刺激皮膚和黏膜，嚴(yán)重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者會(huì)出現(xiàn)躁動(dòng)、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。2.安全防護(hù)方法按照使用闡明，根據(jù)消毒對(duì)象不同而配制不同的濃度，避免使用不必要的高濃度的消毒液，稀釋和使用時(shí)戴好手套，消毒后及時(shí)開窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對(duì)人體的危害。（四）其它1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能因強(qiáng)光和噪聲而對(duì)人員造成損害。2.安全防護(hù)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，確保合格，避免強(qiáng)光和噪聲對(duì)人員造成損害。四、實(shí)驗(yàn)室火災(zāi)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與防止控制方法1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別⑴超負(fù)荷用電，電線過(guò)長(zhǎng)。⑵電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，如電纜的絕緣層破舊或損壞。⑶用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)怒災(zāi)。⑷儀器設(shè)備在不使用時(shí)未關(guān)閉電源。⑸使用的儀器設(shè)備不是專為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)。⑹易燃、易爆品解決、保存不當(dāng)。⑺不兼容化學(xué)品沒有對(duì)的隔離。⑻在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。⑼通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充足。2.防止控制方法⑴定時(shí)檢查電器插座、電線絕緣層與否完好，確保用電負(fù)荷，對(duì)易燃、易爆等危險(xiǎn)品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。⑵實(shí)驗(yàn)室配備滅火器。放置在易取的地點(diǎn)，擺放部位張貼滅火器標(biāo)記。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)，協(xié)助人員撤離火場(chǎng)；對(duì)滅火器進(jìn)行定時(shí)檢查和維護(hù)，確保其有效使用。⑶實(shí)驗(yàn)室需裝設(shè)應(yīng)急燈，全部出口都有黑暗中可見的“緊急出口”標(biāo)記。當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時(shí)，實(shí)驗(yàn)室全部出口的鎖必須處在啟動(dòng)狀態(tài)，出口的設(shè)計(jì)應(yīng)確保不通過(guò)高危險(xiǎn)區(qū)域就能逃脫，全部出口都能通向一種開放空間。⑷走廊、流通區(qū)域不放置障礙物，確保人員流動(dòng)和滅火設(shè)備移動(dòng)不受影響。⑸在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)明顯位置張貼火警電話標(biāo)記。實(shí)驗(yàn)室每年對(duì)工作人員進(jìn)行消防知識(shí)培訓(xùn)，涉及消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時(shí)的應(yīng)急行動(dòng)等。五、自然災(zāi)害風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與安全防護(hù)方法自然災(zāi)害可能造成的實(shí)驗(yàn)室緊急狀況重要涉及水災(zāi)和地震等。（一）水災(zāi)1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別水災(zāi)可能造成實(shí)驗(yàn)室維護(hù)構(gòu)造和設(shè)施損壞，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性材料隨水外溢。2.安全防護(hù)方法⑴在安全手冊(cè)中制訂《實(shí)驗(yàn)室緊急事件應(yīng)急預(yù)案》，并對(duì)全部實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)。⑵實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生水災(zāi)報(bào)警時(shí)，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、中心主任根據(jù)條件及時(shí)采用對(duì)策，第一時(shí)間聯(lián)系有關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)方法，并在受過(guò)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員陪伴下，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室完畢感染性物質(zhì)和人員的安全轉(zhuǎn)移。（二）地震1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別發(fā)生地震等自然災(zāi)害會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室維護(hù)構(gòu)造和設(shè)施損壞，造成人員傷害和實(shí)驗(yàn)室感染性材料外溢。2.風(fēng)險(xiǎn)控制方法實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用方法減少自然災(zāi)害帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)，確保災(zāi)害發(fā)生后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室，減少對(duì)人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立距實(shí)驗(yàn)室維護(hù)構(gòu)造20m范疇內(nèi)的封鎖區(qū)。另首先，對(duì)封鎖區(qū)進(jìn)行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個(gè)人防護(hù)的前提下對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理。如果保藏樣品的容器沒有被破壞，可把它安全轉(zhuǎn)移到其它安全的實(shí)驗(yàn)室寄存。如果保藏樣品的容器巳被破壞、發(fā)生外溢，則應(yīng)立刻用可靠辦法進(jìn)行徹底消毒滅菌。六、生物安全及其它緊急事件（事故）解決預(yù)案（一）實(shí)驗(yàn)室生物安全事件（事故）解決方法1.安全柜持續(xù)正壓當(dāng)生物安全柜出現(xiàn)持續(xù)正壓時(shí)，應(yīng)立刻停止操作，告知運(yùn)行保障人員采用方法恢復(fù)負(fù)壓。如果不能及時(shí)恢復(fù)和保持負(fù)壓，應(yīng)停止實(shí)驗(yàn)。發(fā)生這類事故或發(fā)生意外停電，造成含有傳染性物質(zhì)暴露潛在危險(xiǎn)的事故和污染時(shí)，工作人員除了采用緊急方法外，還應(yīng)立刻報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人，組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。2.咽拭子管破裂將破裂標(biāo)本平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，則用1%的次氯酸鈉消毒液消毒受污染的臺(tái)面、桌面。3.污染物潑濺或溢出發(fā)生污染物潑賤或溢出時(shí)，應(yīng)立刻用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上10～25倍稀釋的84消毒液，作用最少30min，方可清理全部污染物，用消毒劑擦拭污染區(qū)域時(shí)。全部這些操作過(guò)程中都應(yīng)戴手套。若發(fā)生大范疇污染物擴(kuò)散事故時(shí)，應(yīng)立刻告知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人達(dá)到事故現(xiàn)場(chǎng)。待其查清狀況，擬定消毒方案，組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。4.發(fā)生空氣污染發(fā)生空氣污染時(shí)，可采用低溫蒸汽甲醛氣體進(jìn)行消毒。甲醛有致癌作用，故不適宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。5.針頭刺傷或血液標(biāo)本濺灑若發(fā)生針頭刺傷或血液標(biāo)本濺灑，人員、器具或環(huán)境受到污染及其它意外時(shí)，應(yīng)及時(shí)采用有效的消毒解決方法。⑴被采血針頭刺傷應(yīng)立刻用肥皂和大量流水沖洗，盡量擠出損傷處的血液，并用碘伏等有效消毒劑對(duì)傷口進(jìn)行消毒解決。⑵皮膚或黏膜污染對(duì)于皮膚受污染部位可用肥皂和大量流水沖洗，并用75%酒精或碘伏等有效消毒劑進(jìn)行消毒解決；對(duì)于黏膜受污染則用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。⑶物品或環(huán)境污染耐煮沸的物品煮沸20min后清洗，對(duì)不能煮沸的物品可用1%漂白粉或0.5%過(guò)氧乙被等消毒劑浸泡2h后再用清水洗滌；地面、墻面等環(huán)境受到污染時(shí)可用3%漂白粉、2%過(guò)氧乙酸等消毒液噴霧進(jìn)行消毒或擦洗2次。⑷患者劇烈咳嗽、打噴嚏或樣本濺灑產(chǎn)生大量氣溶膠工作人員在采樣結(jié)束時(shí)，應(yīng)盡量對(duì)手套、口罩、護(hù)目鏡等個(gè)人防護(hù)用品進(jìn)行噴灑消毒后再摘除，然后對(duì)手部及面部進(jìn)行徹底清洗。（二）其它緊急事件（事故）解決方法在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)涉及消防人員和其它緊急救助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實(shí)驗(yàn)室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。全部實(shí)驗(yàn)室人員須理解緊急撤離的行動(dòng)計(jì)劃、撤離路線和集合地點(diǎn)。每年最少參加一次緊急撤離演習(xí)，涉及急救設(shè)備的使用和采用對(duì)應(yīng)急救方法。（三）生物安全及其它緊急事件（事故）報(bào)告和統(tǒng)計(jì)⑴發(fā)生生物安全及其它緊急事件時(shí)，在緊急解決的同時(shí)必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會(huì)報(bào)告。⑵對(duì)于生物安全事件必須進(jìn)行登記，統(tǒng)計(jì)發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及具體通過(guò)、解決辦法等。七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險(xiǎn)管理（一）評(píng)定目的評(píng)定目的：通過(guò)對(duì)流感病毒病毒的生物學(xué)特性、實(shí)驗(yàn)室有關(guān)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定與控制的分析，明確各潛在風(fēng)險(xiǎn)因素。選擇安全防護(hù)方法，制訂管理規(guī)程，將其在實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)中的風(fēng)險(xiǎn)降到可接受或可控水平。（二）生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定根據(jù)1.《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》2.《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用規(guī)定》3.《人間傳染的病原微生物名錄》4.《WHO實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》表4-1流感病毒危險(xiǎn)發(fā)生的概率評(píng)定（三）危險(xiǎn)發(fā)生的概率評(píng)定（見表4-1）序號(hào)潛在危險(xiǎn)因素危害程度發(fā)生概率固有風(fēng)險(xiǎn)方法合理性殘留風(fēng)險(xiǎn)風(fēng)險(xiǎn)可控程度1采血過(guò)程中患者咳嗽或打噴嚏造成其飛沫入侵采血人員口、鼻或眼結(jié)合膜高度可能高度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控2樣本運(yùn)輸過(guò)程中容器意外側(cè)翻、破裂造成樣本泄漏中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控3樣本接受、啟動(dòng)及加樣等常規(guī)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中產(chǎn)憤怒溶膠中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控4離心過(guò)程中樣本管破裂產(chǎn)生大量氣溶膠中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控5檢測(cè)未經(jīng)滅活的樣本對(duì)儀器與環(huán)境造成污染中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控6樣本、實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)施設(shè)備等被誤用中度較小可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控7陽(yáng)性樣本被惡意使用中度較小可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控8廢棄物解決不當(dāng)造成病原微生物的擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控9檢測(cè)人員及工勤人員破損的皮膚、黏膜接觸到血液樣本或被銳器刺傷等造成職業(yè)暴露輕度可能輕度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控10檢測(cè)人員個(gè)人防護(hù)不當(dāng)造成病原微生物的擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控11非檢測(cè)人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)等外來(lái)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的不當(dāng)操作造成病原微生物的擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控12水、電、火災(zāi)或自然災(zāi)害造成病原微生物的擴(kuò)散中度較小可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)不可控（四）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定人員由中心主任組織檢查科、質(zhì)量管理科及其它熟悉流感病毒檢查有關(guān)風(fēng)險(xiǎn)的專業(yè)人員進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定并形成風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定報(bào)告。形成的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定報(bào)告經(jīng)中心生物安全委員會(huì)審核，請(qǐng)省市熟悉有關(guān)病原微生物特性、實(shí)驗(yàn)設(shè)施設(shè)備、操作規(guī)程及個(gè)體防護(hù)設(shè)備的不同領(lǐng)域的專家進(jìn)行評(píng)定和討論，不停修訂完善。（五）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定報(bào)告風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定報(bào)告應(yīng)是實(shí)驗(yàn)室采用風(fēng)險(xiǎn)控制方法、建立安全管理體系