豬支原體肺炎

豬支原體肺炎一一豬氣喘病的診斷與防治摘要：豬霉形體肺炎是由豬肺炎支原體引起豬的一種接觸性呼吸系統(tǒng)傳染病。該病以咳嗽、氣喘為主要臨床表現(xiàn)，發(fā)病率高.死亡率低.易導致豬只長期生長發(fā)育不良，飼料轉(zhuǎn)化率嚴重下降，且很容易因繼發(fā)其他病原的感染，而誘發(fā)形成慢性肺炎。該病流行范圍廣，難以治愈，常給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，嚴重危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，是世界上最主要的豬病之一。從病原、流行病學、診治等方面進行闡述，以期為該病的科學防治提供參考依據(jù)。關(guān)鍵詞：豬霉形體肺炎；豬氣喘?。翰≡?；流行病學；診治豬霉形體肺炎(豬支原體肺炎)(mycoplasmahyopneu—moniaeofswine,MPS)是由豬肺炎支原體(Mycoplasmahy-opneumoniae,Mhp^|起豬的一種高發(fā)病率、低死亡率的慢性呼吸道傳染病，國外常稱為豬地方流行性肺炎(swineen-zooticpneumoilia,SEP)，在我國常被稱為豬氣喘病或喘氣病。病變一般只限于肺，而以心葉及尖葉肉樣或蝦樣實變最為常見?；疾∝i生長緩慢，易造成大量飼料和人力的浪費，雖死亡率不高。但是如果飼養(yǎng)管理條件不好，或在流行暴發(fā)的早期，也可造成大批死亡。早期人們對該病的病原體認識不清.認為是一種病毒，稱該病為“病毒性肺炎”。直到1965年Maxe和Goodwin等才證實為肺炎支原體，并建議將該病定名為“豬地方流行性肺炎”或“豬支原體肺炎”。該病廣泛分布于世界各地，被認為是對養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟損失最常發(fā)生、流行最廣、最難凈化的重要疫病之一。研究表明.Mhp還是豬呼吸道疾病綜合征(porcinerespiratorydiseasecomplex,PRDC)的一種重要的原發(fā)性病原。MPS廣泛分布于世界各國豬群，其感染率在30%?80%，目前大多數(shù)養(yǎng)豬國家均報道有該病的發(fā)生。據(jù)估測，1999年全世界僅用于通過疫苗防治豬支原體肺炎一項的費用就高達1.1億英鎊；而在我國，據(jù)初步統(tǒng)計，該病每年造成的直接經(jīng)濟損失高達40億元。我國于1973年首次在上海分離病原成功，以后在江蘇、廣東、廣西等8個省、自治區(qū)相繼分離到肺炎支原體。近年來，由于其經(jīng)常和PRRS、圓環(huán)病毒等其他病原混合感染，因此，常易造成重大的經(jīng)濟損失。1病原1.1分類地位 豬肺炎支原體(Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp)屬于支原體目支原體科(Mycoplasmataceae)支原體屬(Mycoplasma)的成員。1.2形態(tài)與染色特征霉形體又譯作支原體，是一種能夠自我復制、進化速率快的最小的原核生物，基因組大小只有典型細菌的20%—40%。該菌沒有細胞壁，呈球狀、環(huán)狀、兩極形等.大小為110?225nm，可通過300nm的濾器。革蘭氏染色陰性.著色不佳，姬姆薩或瑞氏染色良好。以狄奈氏(DiereesandWeiborger)染色法染色，可見清晰的藍色菌落、不褪色.而其他細菌的菌落在30min后褪色，可作為鑒別方法之一。其能夠合成自身大分子，但其基因組小(病毒＜支原體＜立克次氏體虹.coli)，攜帶信息量不多，而且G+C含量多低于30m01%，生物合成能力有限。整個細胞由DNA(1070kb)、核糖體和細胞膜3種細胞器組成，這是執(zhí)行自體繁殖和合成大分子所必需的最低限度的細胞器種類；缺少細胞壁，沒有固定的形態(tài)，在瓊脂培養(yǎng)基上一般不呈現(xiàn)為支原體特有的“煎蛋狀”菌落；細胞膜在電鏡下呈現(xiàn)為暗一亮一暗3層，其中，蛋白質(zhì)約占2/3，脂類約占1/3。體表的膜蛋白、脂多糖是主要抗原。3培養(yǎng)特性該菌兼性厭氧，生長需求極為苛刻，在一般的培養(yǎng)基中很難生長，是動物支原體中較難培養(yǎng)的一種.而且生長緩慢.常因豬鼻支原體的過度生長而被掩蓋。在A26液體培養(yǎng)基，保持一定濕度，37^培養(yǎng)2?10d，可長成直徑25?100斗m的菌落，但不呈“煎荷包蛋狀”?？稍?—7日齡雞胚卵黃囊中生長繁殖.也能適應家兔在細胞培養(yǎng)基上生長。菌落大小與培養(yǎng)基的質(zhì)量及接種密度有直接關(guān)系。若培養(yǎng)基質(zhì)量差，接種密度又高，則菌落細小扁平，表面呈花瓣狀。用液體培養(yǎng)基分離時，培養(yǎng)基是在細胞培養(yǎng)平衡鹽類緩沖液中加入乳清蛋白水解物、酵母浸液和豬血清，在37r、含5%?7%CO：條件下培養(yǎng)，首先可觀察到pH值改變，培養(yǎng)2—5d，pH值從7.6降至6.8，培養(yǎng)時間越長，pH值下降越多.這是觀察有無支原體生長的一種重要而又簡便的方法..弓1。細心觀察也可見到培養(yǎng)液有輕微的混濁，稍加振蕩還可見到有少量沉淀。也可用牛心消化湯加乳清蛋白水解物培養(yǎng)基或者Friis兔肉湯培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。肉湯中菌體的形態(tài).通過涂片、甲醇固定、姬姆薩染色，其形態(tài)為極小的球狀顆粒，幾個集聚成明，直徑0.4“m。培養(yǎng)物涂片一千燥后觀察.主要可見呈兩極狀、環(huán)狀等，直徑0.5—0.75“m，培養(yǎng)物中也有一些大的結(jié)構(gòu)，其作用不明，在一些新的分離物中多見。固體培養(yǎng)時，可將適應液體培養(yǎng)基生長的培養(yǎng)物接種于瓊脂培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)條件需體積分數(shù)為5%。10%CO：和潮濕空氣，在經(jīng)適當稀釋后接種2?3d可見到單個存在的針尖或露珠樣菌落，7—10d菌落直徑約4mm.傳代后生長不良。在血瓊脂上初代生長良好，在馬丁瓊脂培養(yǎng)基上生長不良D4］。該菌可在豬肺單層細胞上生長、繁殖。并對細胞有致病作用，也能在雞胚卵黃囊中生長。4致病性與理化特性Mhp的天然宿主儀限于豬，人工接種可適應于乳兔，倉鼠和雞胚。通過乳兔傳至600代后，毒力減弱。并仍保持較好的免疫原性。該菌的抗原性主要來萬方數(shù)據(jù)第7—8期金光明：豬支原體肺炎一一豬氣喘病的診斷與防治149自細胞膜（內(nèi)、外層的蛋白質(zhì)和中間的脂質(zhì)），外層蛋白質(zhì)是主要型特異性抗原，具有免疫原性。該菌對外界抵抗力低，在外界環(huán)境.如圈舍、飼槽、管理用具上存活一般不超過36h，病肺懸液中的Mhp在15—25oC36h失去致病力，1?4qc存活4?7d.—15°C保存30一45d。凍千后的支原體，保存于一15。-25oC.經(jīng)3.5—4.5年.再接種支原體培養(yǎng)基，仍生長良好。常用消毒藥為1%—2%苛性鈉、20%石灰乳、30%草木灰、O.5%福爾馬林、1%石炭酸和0.1%升汞等均可數(shù)分鐘將其滅活。對放線菌素D、絲裂菌素C最敏感。15藥物敏感性Mhp對青霉素類藥物和常規(guī)的磺胺類藥物不敏感，而對壯觀霉素、土霉素和卡那霉素敏感。恩諾沙星、環(huán)丙沙星和硫姆林等抗生素對Mhp最有效果。另外，林可霉素、四環(huán)素和泰樂菌素也具有很好的抑菌作用。2流行病學1傳染源病豬和隱性病豬是該病的傳染源。該病一旦傳人后，如不采取嚴密措施，很難徹底撲滅。新疫區(qū)多是由于引進帶菌豬.未經(jīng)嚴格檢疫和隔離觀察，就混入健康豬群.從而引起該病的暴發(fā)流行。老疫區(qū)帶菌母豬起著最主要的傳播作用，這類患病母豬，在一定時期內(nèi)帶菌，并向體外排菌.從而感染其所帶仔豬，而且大多數(shù)都能發(fā)病。2易感類群僅豬和野豬最易感，其他家畜、動物和人未見該病。人_T-感染其他動物，除可在乳兔、倉鼠、綿羊和山羊體內(nèi)傳代，而且不表現(xiàn)任何癥狀和病理變化外，其他動物均不感染。不同年齡、性別、品種的豬對該病均有易感性，但乳豬和斷乳仔豬易感性最高。其次是懷孕后期和哺乳的母豬，而成年育肥豬發(fā)病較少，多呈慢性。母豬和成年豬多呈慢性和隱性經(jīng)過，發(fā)病較少，土種豬較雜種豬和引進的純種豬發(fā)病率高。杜洛克、大約克、長白等品種及以大長、長大為主的雙肌臀雜交豬易感性較低，僅表現(xiàn)輕度咳嗽。我國的某些地方品種豬.尤其是繁殖率較高的太湖豬系列如梅山豬、二花臉豬、姜曲海豬等極為易感，仔豬最早在9月齡左右就可以表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀［15-16］。3傳播途徑感染的途徑是呼吸道，病豬和隱性帶菌豬咳嗽、打噴嚏時，隨飛沫及分泌物排出大量病原，與其接觸的健康豬岡吸入而受到感染。在某些情況下，Mhp可以隨風傳播距離長達3.2kmt"J。給豬皮下、靜脈、肌肉注射或胃管投入病原體都不能發(fā)病。4流行特點初次流行多為暴發(fā)，一年四季可發(fā)生，無明顯季節(jié)性，但冬春寒冷、雨雪、潮濕季節(jié)多發(fā)。飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生條件對該病的發(fā)生和流行有重要影響。飼料品質(zhì)低，營養(yǎng)不良，圈舍的溫度過高或濕度過大。以及環(huán)境的突然變更等因素常使發(fā)病率增高、病程延長、病情嚴重、病死率增高；條件好時，病勢緩和.有利于病豬康復。該病的流行多數(shù)是因為引種或診斷不嚴。又未進行隔離觀察.而直接與健康豬混群引起。流行過后，病豬癥狀雖消失，但其可長期帶菌，使得豬群中的病豬纏綿不斷.很難消除。有研究已初步調(diào)查清楚MPS在我國的流行情況及特點.并證明我國現(xiàn)在流行的菌株與歐洲、美國、日本流行株的抗原性相同［1s】。3臨床癥狀該病的潛伏期一般為11-16d。短則5?7d，長則可達1個月以上。根據(jù)該病病程和臨床表現(xiàn)，大致可分為急性型、慢性型和隱性型3型.最常見的為慢性型和隱性型。在我國.該病發(fā)生的初期，常呈急性，出現(xiàn)典型癥狀，有很高的死亡率.以后轉(zhuǎn)入慢性階段，癥狀減輕，間有發(fā)生死亡it9珈】.近年來.在各地以隱性型和慢性型居多，缺乏典型臨床癥狀。但有很高的感染率。據(jù)國內(nèi)的統(tǒng)計數(shù)字表明，我國MPS的發(fā)病率為30%—50%，而感染率則高達85%以上。1急性型常見于新疫區(qū)或新發(fā)病的豬群，尤以懷孕和哺乳母豬以及仔豬更為多見。突然發(fā)病，精神不振，但體溫沒有明顯變化，呼吸急促(60-120次/rain)，不愿走動。隨后呈現(xiàn)呼吸困難.腹式呼吸.兩前肢張開，并隨病程的發(fā)展而逐漸加重，嚴重時呈犬坐式，張口伸舌，121鼻流沫?？人陨俣统?偶爾也可出現(xiàn)痙攣性咳嗽。一般情況下體溫不升高，只有少數(shù)病例有微熱。通常食欲正常，只有當呼吸困難時食欲減退.很少有停食病例。該種類型病情較重，病程較短，一般為1，2周.病死率也比較高，多因窒息而死，耐過豬轉(zhuǎn)為慢性型。2慢性型常見于老疫區(qū)或由急性病例轉(zhuǎn)變而來，其病程很長.多數(shù)為2—3個月甚至可達半年以上，發(fā)病率高，病死率不高。慢性型最特征的癥狀是長期咳嗽，尤其是早晨、夜問及進食后或運動后咳嗽明顯，開始是短而干的咳嗽，隨著病情的發(fā)展.咳嗽由輕到重，最后發(fā)展為連續(xù)的痙攣性咳嗽。病豬咳嗽時站立不動，拱背伸頸，頭下垂，直到呼吸道分泌物咳出或咽下為止，甚至咳至嘔吐。隨著病程的延長，常出現(xiàn)不同程度的呼吸困難（見圖1），表現(xiàn)為呼吸次數(shù)增加，腹式呼吸.氣喘和鼾聲更明顯。癥狀隨著飼養(yǎng)管理和氣候環(huán)境的變化，表現(xiàn)時好時壞，體溫一般沒有明顯變化。育肥豬、雜交豬和后備豬經(jīng)過改善飼養(yǎng)和在良好環(huán)境條件下.會好轉(zhuǎn)并康復，否則會逐漸消瘦或生長遲滯成為僵豬。3隱性型育肥豬或成年公豬多見，有時是由慢性型、急性型轉(zhuǎn)變而來。目前，該型在我國最為多發(fā)，外觀無臨床癥狀。偶爾在夜間或驅(qū)趕運動時，出現(xiàn)輕度咳嗽和氣喘，生長發(fā)育無明顯異常。血清學檢查呈陽性.X射線胸透和副檢可發(fā)現(xiàn)具有典型的肺部炎癥病灶，這種病豬通常不被人們注意，但它是危險的傳染源，而且影響用疫苗免疫的效果。另外.許多病原體易與該病造成混合感染，如豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬流感病毒、豬網(wǎng)環(huán)病毒、豬副嗜j由l桿菌及敗血波氏桿菌等，易增加肺部疾病的復雜性和嚴重性，為準確診斷帶來困難t2t-221。X射線檢查法在臨床診斷和培育健康豬群上具有重要價值。以肺內(nèi)側(cè)區(qū)及心膈角區(qū)呈現(xiàn)不規(guī)則的云絮狀滲出性陰影為特征，陰影密度中等，邊緣模糊，根據(jù)不同病期表現(xiàn)為早期、嚴重期和消退期8】。4病理變化1病理剖檢肉眼檢查病程較長的慢性病例，外觀可見發(fā)育不良和極度消瘦。刮檢可見病變主要在肺臟、肺門淋巴結(jié)和縱隔淋巴結(jié)，其他組織器官沒有特殊病變。特征病變?yōu)椋寒敳√幵谘装Y發(fā)展期.肺臟膨大，有不同程度的氣腫和水腫。雙肺的心葉、尖葉、中間葉和部分病例的膈葉前下緣出現(xiàn)對稱性、融合性支氣管肺炎病變，其中以心葉最明顯，尖葉和中間葉次之。病變部位呈淡灰紅色或灰紅色、半透明狀、界限明顯、指壓無彈性、似鮮嫩的肌肉狀.俗稱“肉變”萬方數(shù)據(jù)150畜牧與飼料科學第30卷（見圖2）。隨著病程的延長和病情的加重.病變部位的顏色也逐漸加深，呈淡紫色、深紫色或灰白色、灰黃色，堅韌度增加.外觀像胰臟樣，俗稱“胰變”或“蝦肉樣變”。切面濕潤致密.支氣管流出渾濁、灰白色帶泡沫的漿液性或黏液性液體。肺小葉間結(jié)締組織增生、硬化。肺門淋巴結(jié)和縱隔淋巴結(jié)顯著腫大數(shù)十倍（見圖3）,呈灰白色，水腫；切面邊緣外翻.有時m現(xiàn)輕度充血。2組織學變化早期可見支氣管周圍及小血管周圍有大量的淋巴樣細胞浸潤和濾泡樣增生。形成管套。隨著病情的發(fā)展。小支氣管周圍的肺泡擴大，泡腔內(nèi)充滿大量的炎性滲m物，多超巨噬細胞、嗜中性粒細胞和淋巴細胞（見圖4）。滲m物呈漿液性。其中混有淋巴細胞和脫落的肺泡上皮細胞，并可見到多數(shù)小病灶融合成大片實圖lMPS病豬呼吸極度困難圖2MPS病豬肺對稱性肉樣病變圖3IMPS病豬肺門淋巴結(jié)腫大變區(qū)。肺泡壁上的毛細血管輕度充血；病灶周圍的怖泡氣腫，小支氣管周同積聚大量淋巴樣細胞，氣管黏膜上皮增生、變厚，管腔內(nèi)潴留數(shù)量不等的滲出物。小葉的間質(zhì)增寬，有水腫及炎性細胞浸潤。肺門和縱隔淋巴結(jié)細胞彌漫性增生和水腫。圖4MPS病豬肺泡腔炎性細胞浸潤5診斷1診斷要點①一年四季可發(fā)生，無明屁季節(jié)性，但冬春寒冷、雨雪、潮濕季節(jié)多發(fā)：②僅豬和野豬最易感，其他家畜、動物和人未見該??；（爹體溫一般不升高，有不同程度的呼吸困難、腹式呼吸、氣喘；④肺臟膨大，有不同程度的氣腫和水腫，肺門淋巴結(jié)和縱隔淋巴結(jié)顯著腫大數(shù)倍；⑤組織學檢測可見支氣管周圍及小血管周圍有大量的淋巴樣細胞浸潤和濾泡樣增生。形成管套。2類癥鑒別2.1豬肺疫：為散發(fā)性或地方流行性.臨床癥狀表現(xiàn)：體溫高達41°C以上，食欲廢絕，咳嗽重，喘氣輕，多呈犬臥式呼吸。病程為1—2d。主要病變?yōu)閿⊙Y變化或纖維索性肺炎?取病豬和病死豬心血或肝涂片，經(jīng)染色鏡檢可見兩極濃染的多殺性巴氏桿菌。而喘氣病的體溫基本正常，喘氣重，咳嗽輕，食欲正常，多呈側(cè)臥腹式呼吸。2.2豬傳染性胸膜肺炎：豬傳染性胸膜肺炎的急性病例與MPS相似.但前者由胸膜肺炎放線桿菌引起，臨床表現(xiàn)為突然發(fā)病，體溫高達4lC以上。精神沉郁：病豬呈犬坐姿勢，張口伸頸喘氣，呼吸急促，咳嗽較輕，鼻腔流m血紅色泡沫；剖檢可見肺、心臟與胸膜粘連、萎縮實變.氣管、支氣管充滿泡沫狀血樣黏性滲出物。而MPS體溫不升高.先干咳后喘氣.嚴重時發(fā)生喘嗚聲和鼾聲等癥狀。2.3豬肺絲蟲：相同點：都引起咳嗽。不同點：豬肺絲蟲主要病變是支氣管炎，炎癥多位于膈葉后端。切開病變部可發(fā)現(xiàn)肺絲蟲.糞便檢查可見到肺絲蟲幼蟲。2.4豬流感：豬流感是由豬流感病毒引起的.突然暴發(fā)，傳播迅速，2—3d可使豬群大部分發(fā)病.體溫升高到41C以上，不食，眼、鼻流出黏液性分泌物，連續(xù)咳嗽但無喘氣癥狀。而MPS體溫不高，病程長，傳播慢。5.3物理學診斷X射線檢查.在肺野的內(nèi)側(cè)區(qū)和心膈角區(qū)野呈現(xiàn)不規(guī)則的云絮狀滲出性陰影為特征.陰影密度中等、邊緣模糊。病期不同，病變陰影表現(xiàn)各異。疾病早期背腹位檢查.在心隔角肺野呈現(xiàn)輕度、密度較高的絮狀陰影，濃萬方數(shù)據(jù)第7—8期金光明：豬支原體肺炎一一豬氣喘病的診斷與防治151淡不均，邊緣模糊；側(cè)位檢查，心臟陰影濃淡不均，其后緣的肺野也有絮狀陰影出現(xiàn)。疾病嚴重期，背腹位檢查肺野中央?yún)^(qū)有廣泛的彌漫性云狀滲出性陰影；側(cè)位檢查，腹側(cè)部肺野有廣泛性高密度陰影，心臟被隱沒。疾病消退期，陰影為廣泛彌漫的滲m性陰影轉(zhuǎn)為較稀疏的陰影。肺野基本恢復充氣的透明狀態(tài).心臟輪廓可見［241。5.4實驗室診斷5.4.1病原學診斷：無菌采集肺臟實變區(qū)組織為原料，培養(yǎng)基常用A26液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。Mhp初次分離一般用液體培養(yǎng)基，隨后轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。Mhp的菌落很小.典型的菌落為圓形、邊緣整齊、灰白色、半透明、中間凸起呈乳頭狀，表面常有許多小的顆粒菌落，大小在100?300mm之間.液體培養(yǎng)時可通過酚紅指示劑能否使培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化.從而判斷有無菌體的生長。還可對菌落進行染色法分離診斷.Mhp經(jīng)姬姆薩氏染色呈纖細的兩極狀、車輪狀或戒指狀等許多形態(tài)，而且菌體中的細絲都著色深而粗。5.4.2血清學診斷5.4.2.1補體結(jié)合試驗(CFT)：cF'r與臨床診斷和病理顯微檢查綜合運用.是確定Mhp感染狀況的有效手段之一。該方法包括微管補體結(jié)合試驗和微量修正補體結(jié)合試驗。補體結(jié)合試驗在實驗接種豬和自然感染豬中，C盯陽性率與豬肺部病變有較好的相關(guān)性。但仍存在著很高的假陽性和假陰性。CFY在敏感性和特異性方面存在一定的局限性，其在早期檢測M幻抗體比較敏感，但對后期抗體檢測不敏感，4—9周齡豬的感染狀況不能確定。5.4.2.2間接血凝試驗(IHA)：IHA是診斷豬支原體肺炎的常用方法之一.具有一定的特異性和敏感性。但被感染豬的血清中由于含有特異吸附因子而易溶血，因此制備紅細胞存在一定的個體差異，很難標準化，在I臨床應用中受到了很大限制［引。5.4.2.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):該方法主要是用來檢測血清中的Mhp抗體.能進行定量分析、敏感性高、特異性強。是目前國內(nèi)外應用最廣、最為常用的方法。ELISA測定的抗體效價比用CFr和IHA高10。32倍，而且在后期檢測中ELISA的效價仍然很高涵］。ELlSA在接種和A然感染后2周可檢測到相應的抗體。在豬感染后3—5周用ELISA檢測比用C兀檢測靈敏.在感染后6?7周，2種方法效果相近。然而在接種感染后期檢測時發(fā)現(xiàn)，用ELISA在接種1年后仍能檢測到抗體，而Cn在接種后大約5個月就檢測不到抗體。5.4.2.4熒光抗體技術(shù)：熒光抗體技術(shù)特別適合于Mhp急性期感染，因為這時在肺部存在大量的病原。但當豬在受到抗生素治療后或轉(zhuǎn)為慢性感染時，血清陽性豬由于支原體數(shù)量不足以用免疫熒光技術(shù)檢出而易出現(xiàn)假陰性。Amanfu等用改良的直接熒光抗體技術(shù)連續(xù)檢測人工感染豬.結(jié)果接種后2?12周在患部細支氣管上皮檢測到Mhp.接種后4?6周熒光最強.8一12周熒光強度逐漸下降。而將間接免疫熒光技術(shù)用于冷凍切片檢測已在丹麥SPF豬群中應用。5.4.2.5免疫酶技術(shù)：酶聯(lián)免疫過氧化物(ELIP)和間接免疫過氧化物酶試驗用于檢測病肺中的Mhp，克服了熒光抗體技術(shù)不能有效檢測慢性感染豬、需要新鮮冰凍組織和熒光顯微鏡以及樣品不能長期保存的缺點。用ELIP檢查肺冰凍切片和支氣管的涂片時，支原體被染成淡紅褐色的多形態(tài)顆粒.反應很穩(wěn)定。Doster等用福爾馬林固定、石蠟包埋豬肺，用間接過氧化物酶試驗檢測Mhp，用光學顯微鏡就能觀察到結(jié)構(gòu)清晰的M如，而且樣品可長期保存，如果用于重新評價，比熒光抗體法更敏感。當沒有新鮮組織或其他特異性試驗時可采用該法8】。4.3分子生物學診斷：目前主要應用的是核酸探針技術(shù)和PCR技術(shù)。核酸探針技術(shù)可解決豬肺炎支原體培養(yǎng)和鑒定難、費時的難題。Stemke將MhpDNA的EcoRI酶切片段隨機克隆到M13mpl9中，用重組產(chǎn)物作探針來檢測Mhp。該方法敏感性高.但特異性不強，易與同源性高的絮狀支原體產(chǎn)生交叉反應。Futo等建立了用與MhprRNA互補的寡聚脫氧核苷酸作DNA探針，用印標記后檢測支氣管肺泡洗出液和病肺組織等臨診樣品的方法，其特異性和敏感性都大大提高。比用放射同位素測定的靈敏度高10倍。PCR技術(shù)不但可以克服支原體培養(yǎng)難、血清學檢測易產(chǎn)生交叉反應的缺點。還具有敏感性高、特異性強的特點。雖然這兩種常用方法具有敏感性高、特異性強、不需培養(yǎng)病原體和能區(qū)分強弱毒株等優(yōu)點.但由于試驗條件要求苛刻和試驗費用較高，使得其目前僅局限于實驗室研究。6防治措施1預防措施1.1加強飼養(yǎng)管理：由于該病與外界環(huán)境有很大關(guān)系，飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生條件不良是影響該病發(fā)生和加重病情的主要因素.因此加強飼養(yǎng)管理，提供一個理想的環(huán)境非常關(guān)鍵。要避免閃豬舍內(nèi)不同年齡豬只混群和過度擁擠、潮濕以及噪音等應激因素誘發(fā)豬氣喘?。槐３重i場環(huán)境衛(wèi)生，定期開展消毒滅源一r作.保持圈舍清潔、干燥，通風，還要保證豬舍冬暖夏涼。要處理好通風和保暖的關(guān)系，最大限度地降低豬舍內(nèi)有害氣體的濃度倒；發(fā)現(xiàn)可疑病豬，立即隔離，及早治療，切勿拖延；及時淘汰患病的公、母豬；保證豬群各個階段的合理營養(yǎng)，避免飼料霉變。1.2白繁自養(yǎng)與全進全出：堅持自繁自養(yǎng)的原則，防止從外地購進慢性或隱性病豬是預防該病的關(guān)鍵措施。對具有一定規(guī)模的養(yǎng)豬場必須要推行自繁自養(yǎng)、全進全｝n的飼養(yǎng)制度.嚴格控制外來疫病的侵入［29-3-。如不具備自繁自養(yǎng)能力，而又不得不從外地引進豬源時，必須要進行嚴格的檢疫檢測。首先對于種豬進行血清學檢查，認定陰性合格時.進場后應再隔離觀察3個月。并用X射線透視2?3次.確認無病時方可混群。有該病的豬場，可利用康復母豬或培育無特定病原豬建立健康豬群，逐步清除病豬，以最終徹底消滅該病。1.3定期檢疫：根據(jù)豬氣喘病的流行病學特點，定期開展疫情監(jiān)測和檢疫工作，做到盡早發(fā)現(xiàn)，及早隔離治療，對治療康復的母豬和檢測為陽性的豬要堅決淘汰，以確保豬群健康，最終徹底消滅該病。1.4免疫預防：目前，在國內(nèi)市場上出售的豬肺炎支原體萬方數(shù)據(jù)152畜牧與飼料科學第30卷疫苗有進口和國產(chǎn)2種。國產(chǎn)疫苗采用胸腔注射，免疫效果較好.但由于注射方式的原因容易引起不良反應，因此在應用范圍上受到限制。目前正在計劃改進抗原生產(chǎn)方式，減少不良反應。豬氣喘病乳兔弱毒菌苗，適用于疫點(區(qū))內(nèi)的斷奶后仔豬、后備架子豬、種豬又懷孕2個月以內(nèi)的母豬，免疫期8個月。豬氣喘病安寧168株弱毒苗，該苗對雜種豬較安全，免疫期9個月。2治療方法6.2.1西藥：①泰樂菌素肌肉注射.10mg/(kg?bw)；或者飲水0.2S/L，1次/d，連用3?5d。②林可霉素肌肉注射，50ms/(kg?bw)，1次/d，連用5d；或者每噸飼料加200g，拌料，飼喂3周。(爹土霉素堿油劑、土霉素堿粉70g、花生油100mL，混合均勻，0.2mL/(kg?bw)。肩背問或頸部深部肌肉分點輪流注射，每5d注射1次。連用2—3次。④鹽酸土霉素：每日30?40ms/(kg?bw)，用40%硼酸溶液稀釋后一次性肌肉注射，連用5—7do⑤硫酸卡那霉素：每天每千克體重5萬一7萬IU肌肉注射，2次，d，連用5—6d，必要時可用10—15d。6.2.2中藥：方劑1：定喘散。桔梗、陳皮、向前、杏仁各15g，紫菀、百部各109,生姜3片，研末，每頭豬每次飼喂15—259，乳豬可煎水摻入奶中飼喂。方劑2(虛喘)：炙麻黃109、炒白芍20g、葶藶子20g、桔梗15g、桂枝12g、花粉12g、連翹309、柴胡109、五味子12g、杏f_12g、黨參20甘、山藥309、甘草10g、金銀花30g,煎湯灌服。方劑3(實喘)：麻黃10g、白果25g、杏f_25g、蘇葉20g、甘草20g、石膏100g、黃芪209，煎湯灌服。方劑4：魚腥草制劑。取新鮮魚腥草制成4S/mL的蒸餾液，皮下注射，1次/2d,每次10mL,共用5次。方劑5：醉魚草根30g、臭牡丹30g、皂角20g、苦參20g、石菖蒲20g、甘草20g,水煎服用。方法6：針灸。穴位：蘇氣、肺俞、大椎。針法：白針。參考文獻：[1】PointonA胍ByrtD.HeapP.Effectofenzooticpneumoniaofpigsongrowthperformance[J].AustVetJ,1985.62(1)：13-18.南京農(nóng)學院畜牧獸醫(yī)系.豬病毒性肺炎研究(1957-1961)[M].南京：江蘇人民出版社，1962.肖國生，文心田，呂祖德，等.豬支原體肺炎診斷技術(shù)[J].中國獸藥雜志，2003，37(7)：36-39.【4JLivingstonCWJr,StairELUnderdahlNR.eta1.Pathogenesisofmycoplasmalpneumoniaeinswine[J].AmJVetRes，1972，33(11)：2249-2258.【5]辛彩云，譯.國際防治豬支原體肺炎會議報告簡介fJ].國外畜牧科技，2001.28(3)：45.【6]沈青春，寧宜寶。覃青松.豬肺炎支原體的研究進展[J].中國獸藥雜志.2003，37(6)：26-30.于敏，王文軍，李景鵬，等.豬肺炎支原體的研究近況[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2003(8)：14-16.李善友，董梅.豬霉形體肺炎的診治[J].中國獸醫(yī)科技，2002，32(8)：38.劉曉華，門志華，段立裁，等.豬霉形體肺炎診治初探[J].河北畜牧獸醫(yī).2004，20(11)：30—31.許生琪，董金蓮.豬地方流行性肺炎的防治[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2007(2)：98.[12][13][14][15][16][17][18][19][20][21][22][23][24][25][26][27][28][29][30][31]畢丁仁，王桂枝.動物霉形體及研究方法[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社.1998.LavritsenDT.TransferofpathogensfromSOWStooff-spring[J].PigProgressIPVSSpecial,2000,9：10-12.還紅華.邵國青，倪艷秀。等.豬肺炎支原體培養(yǎng)技術(shù)研究[J].中國人獸共患病雜志，2001,17(3)：70-71.李彥明.張映.豬肺炎支原體及其生物學研究進展[J].動物醫(yī)學進展，2003,24(3)：25—27.夏登銀.豬氣喘病的流行特點及防治[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2007(16)：160.劉榮.肺炎支原體的傳播[J].當代畜禽養(yǎng)殖業(yè)，2001(11)：8一lO.黃劍華.集約化豬場豬氣喘病的綜合調(diào)查及防制措施的探討[J].國外畜牧學：豬與禽，2001(4)：51—53.高健，高學坤.規(guī)?；i場豬氣喘病的綜合防治措施[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2006(5)：32—33.黃秋玲.趙永麗，張良濤.等.豬支原體肺炎的診斷與防治[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2006，34(12)：2668—2669.陳加勤.豬氣喘病的診斷與防治[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2007(3)：112-113.周學利。倪少江，吳義景.豬瘟、仔豬黃痢和豬氣喘病混合感染研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2006，34(16)：3987，3990.王玲初。黃正明，黃琴，等.豬支原體肺炎及其繼發(fā)性疾病的綜合防制[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008(11)：278—279.陳白希.豬喘氣病X線診斷的研究[J].畜牧獸醫(yī)學報，1980，11(1)：51—64.白文彬，于康震.動物傳染病診斷學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社.2002.LamK尬Swi紀erWP.Mycoplasmalpneumoniaofswine：activeandpassiveimmunizations[J].AmJVetRes，1971，32：1737—1741.P話rlA，YoungTF.PetenateA，eta1.Comparisonofcomplementfixationtestandenzyme—linkedimmunosorbentassayfordetectionofearhyinfectionwithMycoplasmahyopneumoniae[J].AmJVetRes，1984，45(6)：l122-1226.Dos據(jù)rAR，CinBC.IdentificationofMycoplosmahyopneumoniaeinformalinfixedporcinelungusinganindirectimmmunoperoxidasemethod［J］.AmJVetRes,1988,49(4)：1719—1721.賈德清，趙東升。劉有呂，等.豬支原體肺炎的致病危害及其免疫防制［J］.畜禽業(yè)，2009(1)：58—59.張萬忠，樂洪寶，劉正軍，等.豬氣喘病的診斷與防治［J］.畜禽業(yè)，2007(8)：44.石言洪.豬氣喘病的治療與預防［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008(13)：294.PangYG，Ji,哪JY，WangLz，eta1.Effectsofimmunologicalstressonimmuneresponseindifferentbreedsofpiglets［J］.AnimalHusbandryAndFeedScience，2009。l(2)：28—31.口萬方數(shù)據(jù)豬支原體肺炎一一豬氣喘病的診斷與防治作者：金光明作者單位：安徽科技學院動物科學學院，安徽，鳳陽,233100刊名：畜牧與飼料科學英文干刊名：ANIMALHUSBANDRYANDFEEDSCIENCE年，卷(期)：2009,30(7)被引用次數(shù)：6次參考文獻(31條)PifferIA;YoungTF;PetenateAComparisonofcomplementfixationtestandenzyme-linkedimmunosorbentassayfordetectionofearhyinfectionwithMycoplasmahyopneumoniae［期刊論文］-AmericanJournalofVeterinaryResearch1984(06)LamKM;SwitzerWPMycoplasmalpneumoniaofswine:activeandpassiveimmunizations［期刊論文］-AmericanJournalofVeterinaryResearch1971白文彬;于康震動物傳染病診斷學［期刊論文］-北京:中國農(nóng)業(yè)出版社2002PointonAM;ByrtD;HeapPEffectofenzooticpneumoniaofpigsongrowthperformance［期干干論文］-AustralianVeterinaryJournal1985(01)劉曉華;門志華;段立裁豬霉形體肺炎診治初探［期刊論文］-河北畜牧獸醫(yī)2004(11)李善友;董梅豬霉形體肺炎的診治［期刊論文］-中國獸醫(yī)科技2002(08)于敏;王文軍;李景鵬豬肺炎支原體的研究近況［期刊論文］-畜牧獸醫(yī)科技信息2003(08)沈青春;寧宜寶;覃青松豬肺炎支原體的研究進展［期刊論文］-中國獸藥雜志2003(06)辛彩云國際防治豬支原體肺炎會議報告簡介［期刊論文］-國外畜牧科技2001(03)LivingstonCWJr;StairEL;UnderdahlNRPathogenesisofmyeoplasmalpneumoniaeinswine［期刊論文［-AmericanJournalofVeterinaryResearch1972(11)肖國生;文心田;呂祖德豬支原體肺炎診斷技術(shù)［期刊論文］-中閏獸藥雜志2