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瘧原蟲的鏡檢技術(shù)信陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心
寄生蟲病防治科xycdcdfb@126.com瘧疾的實(shí)驗(yàn)室診斷1.病原學(xué)診斷:顯微鏡血涂片查見瘧原蟲,這種鏡檢確診最可靠。2.免疫學(xué)診斷:(1)循環(huán)抗原的檢測(cè)(2)循環(huán)抗體的檢測(cè)3.分子生物學(xué)技術(shù):PCR和DNA探針已應(yīng)用于瘧疾的診斷。
分子生物學(xué)、血清學(xué)技術(shù)發(fā)展迅猛,但是確診瘧疾的“金標(biāo)準(zhǔn)”
仍然是血液顯微鏡檢查。
瘧原蟲的鏡檢技術(shù)1.血膜制作與染色。2.厚、薄血膜中間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)及其鑒別要點(diǎn)。3.鏡檢示教。血膜的制作(所需設(shè)備)1.載玻片:新玻片浸入有液態(tài)洗滌劑的清水中10-20分鐘,干凈棉巾逐個(gè)擦拭,再用清水沖洗干凈,晾干,最后用干凈柔軟的棉巾將玻片擦亮。已用過的玻片浸泡于洗滌劑溶液中1-2天,或浸泡于煮沸的5%肥皂水中1-2小時(shí),再放入新配置的洗滌劑溶液中1-2小時(shí),逐個(gè)擦去血膜痕跡,清水漂洗干凈,擦亮。2.采血針:一次性3.玻片盒:防止污染和昆蟲吸食血膜4.75%酒精棉球:采血前后消毒5.記號(hào)筆(2B鉛筆):玻片上書寫號(hào)碼血膜的制作(取血時(shí)間)采血時(shí)間現(xiàn)癥病人和流調(diào)普查時(shí)可不考慮取血時(shí)機(jī),但在診斷或需要某期瘧原蟲作標(biāo)本時(shí),則應(yīng)掌握適宜的取血時(shí)機(jī)。瘧疾典型的臨床表現(xiàn)分前驅(qū)期、發(fā)冷(寒戰(zhàn))期、發(fā)熱期、出汗期和間歇期五期。
間日瘧在前驅(qū)期相當(dāng)于肝內(nèi)期瘧原蟲發(fā)育,因原蟲密度太低,鏡檢多為陰性;發(fā)冷(寒戰(zhàn))期相當(dāng)于紅內(nèi)期成熟裂殖體脹破紅細(xì)胞期,鏡檢多見裂殖體和環(huán)狀體;發(fā)熱期外周血中以環(huán)狀體(小滋養(yǎng)體)為主;出汗期因原蟲密度太低,鏡檢多為陰性;發(fā)作后數(shù)小時(shí)(h),間歇期外周血中以大滋養(yǎng)體為主,形態(tài)較易辯認(rèn),為診斷的有利時(shí)機(jī)。發(fā)作36-48h,可檢出裂殖體;發(fā)作1-2次后,配子體出現(xiàn)較多。惡性瘧較理想的取血時(shí)間是在發(fā)作后20h內(nèi)取血,初發(fā)患者退熱后常查不到原蟲。取血部位和方法
耳垂或無(wú)名指,通常在耳垂取血,先用75%酒精棉球消毒取血部位,待酒精干后,用左手拇指和食指緊捏耳垂上方或無(wú)名指指尖,右手持消毒針迅速刺入皮膚,不宜過深或過淺(1~2mm為宜)。然后用左手大拇指、食指和右手中指協(xié)同輕輕擠壓出血滴。血膜的制作用于檢查瘧原蟲的血涂片有兩種:一種是將血液涂成薄膜狀,稱薄血膜;一種是血液涂成圓盤狀,稱厚血膜。最好一張玻片上同時(shí)制作厚、薄兩種血膜。
薄血膜涂片操作
薄血膜
取潔凈的載玻片1張,左手持載玻片平置,右手持推片,推片一端邊緣的中點(diǎn)刮取血液1.0~1.5微升(相當(dāng)于1/4火柴頭大小),使血滴與平置的載玻片中線接觸,待血液向兩側(cè)擴(kuò)展約2cm寬時(shí),以25°~35°夾角均勻而迅速地向左推成舌狀薄血膜(約2.5cm長(zhǎng))。也可載玻片平置在桌面上操作
厚度以薄血膜上的紅細(xì)胞之間互相接觸而不相互重疊為佳。正確的推片姿勢(shì)厚血膜涂片操作
用推片的一角刮取4~5微升血量(相當(dāng)于火柴頭大?。?,使血滴涂于載玻片的中央偏右處,由里向外一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)2~4圈,涂成直徑0.8~1.0cm的圓形厚血膜,血膜厚薄均勻,過厚易于脫落,過薄達(dá)不到檢出率的要求(厚度以1個(gè)油鏡視野內(nèi)可見5~10個(gè)白細(xì)胞為宜)。血膜的制作(血膜的位置)
通常將厚、薄血膜涂在一張載玻片上。方法是將載片分為6等分,第1、2格備貼標(biāo)簽及編號(hào)用;厚血膜涂在第3格中央,薄血膜涂在第4格前緣至第6格中部。標(biāo)準(zhǔn)的瘧疾厚薄血膜片位置血膜的制作(編號(hào))血膜編號(hào)
血膜制成后,立即在玻片面上寫上受檢者的號(hào)碼,以防差錯(cuò);待薄血膜干后再用2B鉛筆于薄血膜中寫上受檢者的個(gè)人編號(hào),依次按順序插入標(biāo)本盒內(nèi)。制作血膜注意事項(xiàng)1.清洗玻片,且勿碰撞、磨損載玻片必須完全清潔無(wú)油漬或污垢。制片時(shí),手指勿接觸玻片表面,以免油污使薄血膜產(chǎn)生空白區(qū)以及厚血膜脫落。作為推片的玻片邊緣一定要平滑,才能使推出的血膜均勻一致。2.剛涂制的血膜要平放在標(biāo)本盒內(nèi)厚血膜未干前勿使標(biāo)本盒傾斜,以免血膜傾向一側(cè),造成血膜厚薄不均,厚處不易溶血和著色而影響檢查結(jié)果;晾干血膜時(shí)應(yīng)注意防塵,防止蒼蠅、蟑螂等昆蟲吮吸血膜;干后應(yīng)及時(shí)裝入標(biāo)本盒并蓋嚴(yán)。3.血膜應(yīng)自然干燥切忌在毒太陽(yáng)下曬或火烤,加快其干燥可采用手上或衣服摩擦、風(fēng)吹,干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天標(biāo)本盡可能24-48h內(nèi)固定染色;冬天也不能超過72h。放置時(shí)間越久,厚血膜越不易溶血,染色效果也差。若不能及時(shí)染色,薄血膜宜先用甲醇固定(1~3分鐘)然后用過濾清水對(duì)厚血膜溶血,晾干后裝入盒內(nèi)蓋嚴(yán),待以后染色。染液的種類
染液種類:目前臨床上應(yīng)用最廣泛的是瑞氏(Wrightstain)和吉氏染液(Giemsastain)。這些染液中的主要染劑都包含美藍(lán)、伊紅和由美藍(lán)氧化所成的天青,所以稱多色性染劑。我們主要用吉氏染液,它具有方便、染色效果穩(wěn)定、便于長(zhǎng)期保存的優(yōu)點(diǎn)。瑞氏染液染色時(shí)間短,但染色效果不如吉氏穩(wěn)定,主要在門診量大的門診實(shí)驗(yàn)室使用。染液的染色原理
紅細(xì)胞和瘧原蟲的蛋白質(zhì)均由氨基酸組成,每個(gè)氨基酸電離出一個(gè)帶正電荷的-NH3+和一個(gè)帶負(fù)電荷的-COO-。堿性染料美藍(lán)的有色基團(tuán)帶陽(yáng)離子,可與細(xì)胞中帶負(fù)電荷的-COO-部分結(jié)合,使之成為藍(lán)色。瘧原蟲、淋巴細(xì)胞和大單核細(xì)胞的胞漿、嗜堿性粒細(xì)胞的顆粒等酸性蛋白質(zhì),被染成藍(lán)色。酸性染料伊紅的有色基團(tuán)帶陰離子,可與細(xì)胞中帶正電荷的-NH3+部分結(jié)合,使之呈紅色;美藍(lán)與伊紅都不能使瘧原蟲和白細(xì)胞的核著色,但美藍(lán)氧化后產(chǎn)生的天青有媒染作用,在媒染物與染料的共同作用下,瘧原蟲和白細(xì)胞核被染成紫紅色。染色原理注意:蛋白質(zhì)和氨基酸都是兩性電解質(zhì),要求染液的pH值7.0-7.2較好。
染液偏酸時(shí),所帶的正電荷增加,易于伊紅結(jié)合,使紅細(xì)胞和瘧原蟲的核染成鮮紅色,而淋巴細(xì)胞和原蟲的胞漿著色較差;反之,當(dāng)染液偏堿時(shí),紅細(xì)胞和嗜伊紅白細(xì)胞的顆粒等被染成紫藍(lán)色,不易觀察。吉氏染液母液配置方法
吉氏染液:吉氏粉5克,甘油250ml,甲醇250ml。將吉氏粉置于研缽中,加入少量甘油充分研磨,邊加邊磨,至甘油加完為止,倒入500ml有塞玻璃瓶中。在研缽中加入少量甲醇,洗掉剩余部分,倒入瓶中,再次加甲醇洗后倒入瓶中,至洗凈研缽為止。塞緊瓶塞,充分搖勻,置于55℃~60℃水浴中或溫箱內(nèi)24h或室溫內(nèi)3~5天,每天用力搖動(dòng)5分鐘,即成原液。吉氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑,能長(zhǎng)期保存而不變質(zhì)。伊紅在水溶液內(nèi)遇到美藍(lán)或天青即可互相化合而產(chǎn)生沉淀,從而失去染色力,因此,吉氏母液絕對(duì)不能進(jìn)水。
整個(gè)染色液配制時(shí)間不能少于5個(gè)小時(shí)。
吉氏染液的染色方法成批血片染色:將已固定薄血膜的血片插入染色缸,倒入3%吉氏染液稀釋液(3毫升吉氏原液加緩沖液或蒸餾水97毫升,混勻)浸沒血片,同時(shí)對(duì)厚薄血膜染色30min(根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況,酌情增減染色時(shí)間和濃度),然后用清水輕輕將染液漂洗干凈,將血片標(biāo)本(血膜面朝下)插于晾片板上晾干,包裝,鏡檢。
單張血片染色:取蒸餾水或緩沖液1ml加入吉氏原液1滴,混合均勻后涂在厚、薄血膜上,染色30分鐘左右,然后用清水輕輕將載玻片上的染液沖洗干凈,晾干鏡檢。(勿直接傾倒掉玻片上的染液,防止渣滓附著在玻片上沖不掉影響鏡檢)注意:吸取母液時(shí),不要晃動(dòng)瓶子,以免沉淀物泛起影響染色效果.操作1(快染)
配制8%~10%,染色時(shí)間短,一般為15min左右,一定掌握好時(shí)間。操作2(慢染)配制3%~4%染液,染色30~40min,效果穩(wěn)定。隨具體情況而定。吉氏染液濃度門診染色影響染色效果的因素血片染色好壞除與玻片清潔度、血片制作質(zhì)量和染色技術(shù)等有關(guān)外,還受到以下因素的影響:(1)染劑、溶劑的質(zhì)量
染料、甲醇和甘油必須用分析純,且在配制時(shí)所用的器具必須干凈且無(wú)水份。(2)染液的新舊
染液存放時(shí)間越久,染色力越強(qiáng)。新配制的染液因色素尚未充分溶解,染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性。通常在染液配制1~2周后才使用,盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密,以防吸潮而影響染液質(zhì)量。(3)染液稀釋后使用時(shí)間
必須現(xiàn)用現(xiàn)稀釋染液,當(dāng)時(shí)使用,一般在0.5h內(nèi)染色力最強(qiáng)。吉氏和瑞氏染液的主要成份是美藍(lán)、伊紅和由美藍(lán)氧化產(chǎn)生的天青,三者能在酒精溶液中溶解,但在水溶液中伊紅遇到美藍(lán)和天青即產(chǎn)生沉淀。影響染色效果的因素(4)染液的稀釋濃度
染液的濃度高,著色就快而深,從而瘧原蟲寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著,但顏色常偏堿;染液濃度過低則染色時(shí)間久,顏色偏酸,薛氏點(diǎn)不明顯或消失。(5)染色時(shí)間
染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當(dāng)增減。染色時(shí)間長(zhǎng)染色效果好,反之較差。室溫高則著色快,染色時(shí)間可略縮短,氣溫低可適當(dāng)延長(zhǎng)。(6)染色用水
染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇pH6.8-7.2清潔水,通常使用新鮮的蒸餾水或過濾的冷開水。(7)沖洗方法
應(yīng)沿玻片或染色缸邊緣加水使染液表面一層溢出,并輕輕沖洗,以免染液色素顆粒沾污血膜。血片制作與染色注意事項(xiàng)
●使用前載玻片一定要清潔,否則會(huì)影響血片制作和鏡檢結(jié)果?!窈裱じ稍飼r(shí)勿加熱,加熱會(huì)使原蟲變形,影響鏡檢結(jié)果?!衽渲媚敢簳r(shí)過濾可除去雜質(zhì)顆粒,有助于提高鏡檢質(zhì)量。●固定薄血膜時(shí)勿將甲醇觸碰到厚血膜。●沖洗染液時(shí),水流輕緩,勿沖走厚血膜。1.在學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲之前,必須先對(duì)正常厚薄血膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)加以識(shí)別。2.鏡檢瘧原蟲,首先學(xué)看薄血膜,在基本上掌握薄血膜中瘧原蟲形態(tài)后,再學(xué)習(xí)鏡檢厚血膜。3.鏡檢瘧原蟲一般只查厚血膜,薄血膜僅作為原蟲分類時(shí)參考和血片編號(hào)之用。4.鏡檢瘧原蟲須用油鏡頭配合5X低倍目鏡鏡檢,當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑難問題時(shí)再調(diào)換10X目鏡進(jìn)行觀察。5.檢查時(shí)應(yīng)從厚血膜的上緣開始,使血膜從上而下,自左至右(或由右至左),一行接一行,一個(gè)視野稍疊一個(gè)視野順序地查完整個(gè)血膜。一般情況下,厚血膜四周(稍薄些)瘧原蟲數(shù)量較多,且形態(tài)較清楚,鏡檢時(shí)不要忽略。每張厚血膜檢查時(shí)間最少不低于20分鐘。血片的鏡檢看完血片后,若為陽(yáng)性,應(yīng)立即按血片編號(hào)登記原蟲的種、期,以防差錯(cuò)。為檢查后記錄結(jié)果方便起見,對(duì)瘧原蟲的種、期可使用英文字母縮寫作為代號(hào):間日瘧:P.v(Plasmodiumvivax)惡性瘧:P.f(P.falciparum)三日瘧:P.m(P.malarae)卵形瘧:P.o(P.ovale)環(huán)狀體:R(Ringform)大滋養(yǎng)體:T(trophozoite)裂殖體:S(Schizont)配子體:G(Gametocyte)原蟲密度計(jì)算估計(jì)瘧原蟲感染程度有三種方法:●半定量計(jì)數(shù)法檢查厚血膜●白細(xì)胞原蟲密度計(jì)數(shù)法檢查厚血膜●紅細(xì)胞感染率計(jì)算法檢查薄血膜用厚血膜每個(gè)視野中所觀察到瘧原蟲的平均數(shù)粗略地估計(jì)出瘧原蟲密度。這種方法簡(jiǎn)便,缺點(diǎn)是計(jì)數(shù)的瘧原蟲數(shù)受血膜厚薄影響,只能定性,不宜作定量分析。國(guó)內(nèi)常用。此方法將密度分為6級(jí):1.全厚血膜查見瘧原蟲數(shù)在10個(gè)以內(nèi),記錄實(shí)際數(shù)字2.全厚血膜查見瘧原蟲數(shù)在10個(gè)以上,但平均每個(gè)視野不到1個(gè)蟲,記錄“少”3.平均每個(gè)視野1~5個(gè)蟲,記錄“+”4.平均每個(gè)視野6~10個(gè)蟲,記錄“++”5.平均每個(gè)視野11~100個(gè)蟲,記錄“+++”6.平均每個(gè)視野100個(gè)蟲以上,記錄“++++”。半定量計(jì)數(shù)法白細(xì)胞瘧原蟲密度計(jì)數(shù)法(WHO推薦)白細(xì)胞瘧原蟲密度計(jì)數(shù)法重要性●用于瘧疾研究●用于臨床診斷●用于抗瘧后瘧疾考核●在厚血膜,按要求選擇視野,計(jì)數(shù)每個(gè)視野中的瘧原蟲數(shù)和白細(xì)胞數(shù),一般情況下計(jì)數(shù)200個(gè)白細(xì)胞,如果原蟲密度較低,可增加白細(xì)胞計(jì)數(shù)(500~1000個(gè))?!癜准?xì)胞瘧原蟲計(jì)算公式:瘧原蟲數(shù)÷白細(xì)胞數(shù)×每微升血中白細(xì)胞數(shù)=瘧原蟲數(shù)/微升血?!裰谱骱裱さ耐瑫r(shí)計(jì)數(shù)每微升血中白細(xì)胞數(shù),如果無(wú)法進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù),則以6000個(gè)/微升血計(jì)算。(國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)為8000個(gè)/微升血)。白細(xì)胞瘧原蟲密度計(jì)數(shù)法(WHO推薦)白細(xì)胞瘧原蟲計(jì)數(shù)法舉例●假設(shè)計(jì)數(shù)200WBC中有35個(gè)瘧原蟲,在不知患者白細(xì)胞數(shù)的情況下,以每微升血6000個(gè)白細(xì)胞計(jì)數(shù),由此計(jì)算出每微升血液瘧原蟲密度為:35(原蟲數(shù))÷200(白細(xì)胞數(shù))x6000=1050/μl答:該患者原蟲密度為1050/μl。如何確定瘧原蟲血片為陰性●檢查全部厚血膜未查見瘧原蟲?!褡钌贆z查100個(gè)厚血膜油鏡視野未查見瘧原蟲。
鏡檢時(shí)間應(yīng)不低于20分鐘。人體瘧原蟲的基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本構(gòu)造為細(xì)胞質(zhì)(胞漿)、核和瘧色素這三要素。1.細(xì)胞漿被染成蔚藍(lán)色或深藍(lán)色,隨著蟲體發(fā)育長(zhǎng)大,細(xì)胞漿逐漸增多。2.核即細(xì)胞核或染色質(zhì)粒。在正常情況下核呈鮮紅色。3.瘧色素不著色,顏色和顆粒的形狀,因瘧原蟲種類而異。間日瘧原蟲的色素顆粒呈短棒狀,黃褐色;惡性瘧原蟲的色素顆粒呈細(xì)砂狀,黑褐色。薄血膜中間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)薄血膜中常見的血液成分中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞血小板單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞紅細(xì)胞薄血膜瘧原蟲形態(tài)間日瘧環(huán)狀體感染的紅細(xì)胞:脹大不明顯,基本正常。蟲體大?。狠^大,約為紅細(xì)胞直徑1/3。胞漿:環(huán)狀,淺藍(lán)色。核:紅色,一個(gè),偶有二個(gè)。瘧色素:無(wú)。
約占寄生紅細(xì)胞的1/3,很少見到一個(gè)紅細(xì)胞寄生2個(gè)環(huán)狀體和一個(gè)環(huán)狀體有2個(gè)核。薄血膜瘧原蟲形態(tài)
惡性瘧環(huán)狀體感染的紅細(xì)胞:大小正常,顏色較深。蟲體大?。狠^小,約為紅細(xì)胞直徑1/5-1/6。胞漿:藍(lán)色,環(huán)狀纖細(xì),有時(shí)位于紅細(xì)胞的邊緣。常見多個(gè)原蟲同寄生于一紅細(xì)胞的現(xiàn)象。核:紅色一個(gè),常有二個(gè)。瘧色素:無(wú)。惡性瘧原蟲--環(huán)狀體環(huán)纖細(xì),約為RBC直徑的1/6,RBC不脹大核1個(gè),但2個(gè)常見,紅細(xì)胞常含2個(gè)以上原蟲薄血膜間日瘧大滋養(yǎng)體形態(tài)感染的紅細(xì)胞:脹大褪色,出現(xiàn)形狀大小相等、分布均勻、數(shù)目較多、鮮紅色的薛氏小點(diǎn)。蟲體大?。狠^大。胞漿:不規(guī)則,淺藍(lán)色,出現(xiàn)阿米巴偽足,有空泡。核:紅色,一個(gè)。瘧色素:有,細(xì)小桿狀,黃褐色,分布不均勻。間日瘧大滋養(yǎng)體
蟲體不規(guī)則,較大;阿米巴樣空泡明顯;瘧色素細(xì)小,黃褐色。
間日瘧大滋養(yǎng)體惡性瘧大滋養(yǎng)體受感染紅細(xì)胞:大小正常,顏色較深,可出現(xiàn)較粗、大小不一、分布不勻、數(shù)目較少紅色茂氏小點(diǎn)。蟲體大小:較小。胞漿:藍(lán)色,圓形,堅(jiān)實(shí),體積小。核:一個(gè),紅色。瘧色素:較細(xì)的黑褐色顆粒,常集成塊。
惡性瘧大滋養(yǎng)體紅細(xì)胞:脹大,褪色,可有薛氏小點(diǎn)。胞漿:較不規(guī)則,空泡小或消失,淺藍(lán)色。核:紅色,分裂為二個(gè)以上。色素:黃褐色,分布不均勻。間日瘧未成熟裂殖體薄血膜瘧原蟲形態(tài)間日瘧未成熟裂殖體
惡性瘧未成熟裂殖體紅細(xì)胞:大小正常,顏色較深,可有茂氏小點(diǎn)。大?。狠^小。胞漿:規(guī)則,圓形或卵圓形,藍(lán)色。核:分裂為二個(gè)以上,紅色。色素:黃褐色顆粒,常集成黑褐色團(tuán)塊。間日瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞:脹大,褪色,可見薛氏小點(diǎn)。大小:個(gè)體較大。胞漿和核:裂殖子12~24個(gè),通常為16~18個(gè),排列不規(guī)則,核紅色,胞漿淺藍(lán)色。瘧色素:黃褐色,常集于瘧原蟲的一邊。間日瘧裂殖體惡性瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞:大小正常,顏色較深,可見茂氏小點(diǎn)。大?。合x體較小。胞漿和核:裂殖子8~32個(gè),通常為8~18個(gè),排列不規(guī)則,核紅色,胞漿藍(lán)色。色素:黑褐色,集中于中央或一側(cè)。惡性瘧成熟裂殖體
裂殖子8~32個(gè),通常8~18個(gè),排列不規(guī)則瘧色素集中成團(tuán)塊狀蟲體占紅細(xì)胞體積的2/3至3/4薄血膜間日瘧雌(大)配子體形態(tài)形狀大小:圓形或橢圓形,較大。胞漿:深藍(lán)色。核:一個(gè),較小,深紅色,常偏于一邊,核周可見明顯不染色帶。瘧色素:黃褐色,均勻散在,數(shù)目較多。間日瘧原蟲雌配子體
間日瘧雄(?。┡渥芋w形態(tài)形狀大小:圓形,蟲體較大。胞漿:淺藍(lán)色。核:一個(gè),較大,疏松,位于中央,淺紅色,周圍有明顯不著色帶。瘧色素:黃褐色,散在分布。間日瘧原蟲雄配子體惡性瘧雌(大)配子體形態(tài)形狀:新月形,兩端稍尖。胞漿:深藍(lán)色。核:一個(gè),較小,致密,深紅色,位于中央,核周可見透明不染色帶。瘧色素:黑褐色,密布于核的周圍。薄血膜惡性瘧雄(?。┡渥芋w形態(tài)形狀:臘腸形,兩端鈍圓。胞漿:淺藍(lán)色或淡紫紅色。核:一個(gè),較大,疏松,位于中央,淺紅色,核周可見不染色帶。瘧色素:黑褐色,松散分布于核周圍。將(未)成熟雌配子體與成熟大滋養(yǎng)體
(核分裂前,剛要進(jìn)入裂殖體前期)的形態(tài)鑒別蟲體大小:幾乎充滿被寄生的紅細(xì)胞核:一個(gè),較大且致密,周圍有一圈空白的不染色帶胞漿:邊緣清楚,不含空泡瘧色素:顆粒較多較粗,均勻散在蟲體大小:不超過被寄生紅細(xì)胞的3/4核:一個(gè),延長(zhǎng)呈帶狀,周圍無(wú)明顯的不染色帶胞漿:邊緣不整齊,多有空泡瘧色素:顆粒較少較細(xì),分布不均勻厚血膜中間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)厚血膜中瘧原蟲的形態(tài)
厚血膜由于用血量較多,涂制的血膜小,紅細(xì)胞重疊且干燥慢,致使蟲體皺縮,空泡消失,胞漿變形,各期瘧原蟲的體積都略微縮小,其中只有大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變,而裂殖體和配子體的形態(tài)則無(wú)明顯變化。INTITUTEOFTROPICALDISEAASESHAINAN厚血膜環(huán)狀體體形態(tài)
環(huán)狀體:胞漿呈環(huán)狀或向核的一側(cè)或兩側(cè)收縮,使環(huán)的中間斷裂,或圍繞核。間日瘧原蟲的環(huán)較大,常呈分號(hào)“;”和感嘆號(hào)“!”狀;惡性瘧原蟲的環(huán)纖細(xì),常呈冒號(hào)“:”、飛鳥“⌒.⌒”、V狀和斷環(huán)狀。間日瘧小滋養(yǎng)體惡性瘧小滋養(yǎng)體厚血膜間日瘧大滋養(yǎng)體形態(tài)
間日瘧大滋養(yǎng)體呈阿米巴樣運(yùn)動(dòng),胞漿常斷裂幾塊或縮成圓形,核和瘧色素均被包在胞漿之中,著色深,只隱約可見紅色的核和黃綠色的瘧色素。胞漿可皺縮斷裂成幾個(gè)塊狀,大小不一,似互不連接。核位于胞漿之中或外邊。瘧色素分布不均勻。有些僅見胞漿和瘧色素而核看不清楚。大滋養(yǎng)體厚血膜惡性瘧
大滋養(yǎng)體形態(tài)
惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體與薄血膜形態(tài)相似,常呈圓形,體小結(jié)實(shí),瘧色素細(xì)小,金黃色,結(jié)成塊狀后,呈黑褐色。大滋養(yǎng)體厚血膜裂殖體形態(tài)裂殖體間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲的裂殖體前期及成熟裂殖體,除蟲體略微縮小著色較深外,均與薄血膜相似。
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