中藥治療急性濕疹的配伍應(yīng)用

中藥治療急性濕疹的配伍應(yīng)用

濕傷口屬于中醫(yī)學(xué)的“濕傷口”范疇。外部原因主要是風(fēng)、濕和熱。濕熱積聚在皮膚上，充滿水分和熱量。五倍子具有解毒消腫、收濕斂瘡的功效,黃柏與黃芩均具有清熱燥濕、瀉火解毒之功,為外用治療濕疹,皮炎等皮膚科疾病的常用中藥。在臨床上五倍子常與黃柏、黃芩配伍使用。在查閱的近10年文獻(xiàn)中,有多篇文獻(xiàn)記錄五倍子與黃柏提取物配伍、五倍子與黃芩提取物配伍應(yīng)用于濕疹、皮炎、燒燙傷的治療。有學(xué)者在外用中藥對(duì)急性濕疹治療作用的實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn),五倍子具有抑制細(xì)菌及真菌的作用,黃柏具有抗炎及抑制細(xì)菌的作用,黃芩具有抗炎、抑菌及抗過敏的作用。但是五倍子和黃柏、黃芩分別配伍后對(duì)藥效產(chǎn)生了不同影響。本文從抗炎、抗過敏和抑菌方面考察五倍子和黃柏、黃芩分別配伍對(duì)急性濕疹治療作用的影響,探討中藥的配伍應(yīng)用,優(yōu)選治療急性濕疹的配伍組合,為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。1材料表面1.1細(xì)胞器昆明小鼠,26~30g,雌雄各半,共140只;以上動(dòng)物均由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)菌種:金黃色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus),大腸埃希氏菌(Escherichiacoli),銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。1.2基質(zhì)、唇膏的制備中藥提取物的制備:采用乙醇回流提取,分別加10倍和8倍量乙醇,各提取50min后回收乙醇,濃縮,干燥,粉碎得固體粉末;藥材配比:黃芩與五倍子配伍的生藥量配比為2:1,黃柏與五倍子配伍的生藥量配比為2:1;軟膏基質(zhì):PEG400和PEG4000(6:1);軟膏制備:取含生藥量為黃芩10g、黃柏10g、五倍子5g的提取物或不同配伍的提取物,加至一定的基質(zhì)中,使之總重為50g,過膠體磨后得軟膏;艾洛松,上海先靈葆雅制藥有限公司;除濕止癢軟膏,四川同人泰藥業(yè)有限公司,批號(hào)100402;二甲苯,北京化工廠,批號(hào)20060702;2、4-二硝基氯苯(DNCB),天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所,20091223;丙酮,北京化工廠,批號(hào)20021216;脫毛膏,廣州諾菲化妝品有限公司,批號(hào)10RF9002。培養(yǎng)基:MH(A)培養(yǎng)基,批號(hào)20081012,MH(B)培養(yǎng)基,批號(hào)20081012,沙保弱氏肉湯培養(yǎng)基:自制,沙保弱氏瓊脂培養(yǎng)基:自制。2實(shí)驗(yàn)方法2.1試驗(yàn)分組和給藥26~30g雄性小鼠70只,隨機(jī)分為7組,每組10只。即對(duì)照組,陽性藥艾洛松組,黃柏組,黃芩組,五倍子組,黃柏五倍子組,黃芩五倍子組。于小鼠右耳前后兩面分別涂以相應(yīng)的受試藥物0.2g/只,對(duì)照組涂以等量的賦形劑,每日2次,連續(xù)3d,第4天涂藥后1h各組以蒸餾水洗去藥物,用干棉球擦凈。然后各組小鼠右耳前后兩面涂以二甲苯0.04mL/只,左耳作對(duì)照。于致炎后2h后處死動(dòng)物,用7mm打孔器將小鼠左右耳同等部位等面積切下,用電子天平稱重,以左右耳片重量之差為腫脹度,作為炎癥反應(yīng)強(qiáng)度的觀測(cè)指標(biāo)。2.22、單次給藥致敏實(shí)驗(yàn)小鼠70只,隨機(jī)分為7組:即對(duì)照組,陽性藥除濕止癢軟膏組,黃柏組,黃芩組,五倍子組,黃柏五倍子組,黃芩五倍子組。每組10只。分組后將各組小鼠腹部剃毛,面積3×3cm2。隨后對(duì)照組給予賦形劑,其余各組給相應(yīng)的受試藥1次,24h后用5%DNCB的丙酮溶液100μL涂于各小鼠腹部剃毛區(qū)致敏,對(duì)照組不涂。隨后各組每天早晚各給藥1次,連續(xù)8d。致敏6d后用1%DNCB溶液20μL涂于各小鼠右耳廓激發(fā)給藥。于誘發(fā)24h后(最后1次給藥后1h),斷頸處死小鼠,用7mm的打孔器在小鼠雙耳相同部位打下等面積耳片,置于電子分析天平上稱重。計(jì)算兩耳重量之差,作為超敏反應(yīng)的觀測(cè)指標(biāo)。2.3不同濃度從總體上看細(xì)菌感染黃柏提取物濃度為0.2g/mL,黃芩提取物濃度為0.2g/mL,五倍子提取物濃度為0.1g/mL,黃柏五倍子濃度為0.3g/mL,黃芩五倍子濃度為0.3g/mL。哌拉西林舒巴坦那濃度分別為200mg/L(用于金黃色葡萄球菌)和2000mg/L(用于大腸埃希氏菌和銅綠假單胞菌)。取無菌24孔平板若干個(gè),用相應(yīng)的培養(yǎng)基稀釋受試藥,黃柏提取物最終濃度分別為:0.1、0.05、0.025、0.013、0.006、0.003g/mL,黃芩、五倍子同黃柏;黃柏五倍子最終濃度分別為0.3、0.15、0.075、0.038、0.019、0.009g/mL,黃芩五倍子組同黃柏五倍子組。對(duì)照藥為哌拉西林舒巴坦那終濃度為1000mg/L(用于大腸埃希氏菌和銅綠假單胞菌)和100mg/L(用于金黃色葡萄球菌)。每孔裝1mL,每毫升含藥量呈一定比例遞減。然后在每孔加入10μL經(jīng)稀釋的新鮮菌液。置37℃的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h后觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng),如果藥物顏色深或不透明,無法判定有無細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)可把可疑的管再移種到平皿培養(yǎng)基上,培養(yǎng)18h后觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng)。以細(xì)菌不生長(zhǎng)的最高藥物稀釋度為該藥的最低抑菌度(MIC)2.4方差齊性和正態(tài)性時(shí)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,經(jīng)方差分析,組間總體差異有顯著性意義,且滿足正態(tài)性和方差齊性時(shí),兩兩比較用LSD;方差不齊時(shí),選用Tamhane法。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±sxˉ±s)表示,標(biāo)準(zhǔn)取α=0.05,P<0.05為差異有顯著性意義。3結(jié)果3.1dnmb為大鼠耳腫脹和延遲超敏反應(yīng)而誘導(dǎo)結(jié)果見表1。3.2對(duì)腸道埃希氏菌的mic、5倍子的影響對(duì)金黃色葡萄球菌,黃柏、黃芩、五倍子均有一定的抑制作用,黃芩與五倍子配伍后對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC與五倍子組比較降低,黃柏與五倍子配伍后對(duì)金葡菌的MIC與五倍子組比較升高。對(duì)大腸埃希氏菌,黃柏、黃芩沒有抑制作用,五倍子對(duì)大腸埃希氏菌有一定的抑制作用。黃芩五倍子組對(duì)大腸埃希氏菌的MIC與五倍子組比較減低,黃柏五倍子組對(duì)大腸埃希氏菌的MIC與五倍子組比較升高。對(duì)銅綠假單胞菌,黃柏、黃芩沒有抑制作用,五倍子對(duì)銅綠假單胞菌有一定的抑制作用。黃柏五倍子組對(duì)銅綠假單胞菌的MIC與五倍子組比較減低,黃柏五倍子組對(duì)銅綠假單胞菌的MIC與五倍子組比較升高。陽性藥對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌具有一定的抑制作用。結(jié)果見表2。4遲發(fā)作的反應(yīng)值濕疹在急性階段其特征表現(xiàn)為皮損多形性、潮紅腫脹、水皰、糜爛、滲液、劇烈瘙癢、易于感染等特點(diǎn),濕疹發(fā)病原因和病理機(jī)制比較復(fù)雜,現(xiàn)在多認(rèn)為其病機(jī)與Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)有關(guān)。因此我們從抗炎、止癢、抗過敏、抑菌等方面選擇藥物進(jìn)行治療。上述抗炎實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果表明,單味中藥黃芩、黃柏、五倍子及黃芩五倍子配伍組均具有降低小鼠耳廓腫脹的作用,而黃柏五倍子配伍組作用不明顯。在抗Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),單用黃柏、黃芩或者黃芩五倍子配伍使用,都可以降低遲發(fā)型超敏反應(yīng)值,而黃柏五倍子配伍后,使遲發(fā)型超敏反應(yīng)值升高。在抑菌實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果可見,五倍子具有很好的抗金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌和銅綠假單胞菌的作用。黃芩與五倍子配伍后對(duì)金葡、大腸、綠膿的MIC與五倍子組比較均降低,黃柏與五倍子配伍后對(duì)金葡、大腸、綠膿的MIC與五倍子組比較均升高。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明黃芩、五倍子配伍使用使藥效增強(qiáng),而五倍子與黃柏配伍使用后藥效降低。五倍子含有60%~70%的鞣質(zhì),具有極強(qiáng)的抑制細(xì)菌及真菌的作用;黃柏含有小檗堿、黃柏堿、木蘭花堿、藥根堿、掌葉防己堿等多種生物堿,對(duì)常見皮膚癬菌具有抑制作用,并且能夠抑制免疫反應(yīng)和減輕炎癥損傷的作用;黃芩含黃芩苷、漢黃芩苷等成分,具有抗炎、抑制細(xì)菌及抗Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)的作用。由于五倍子中含有大量的鞣酸,與黃柏中的生物堿發(fā)生了化學(xué)反應(yīng),形成難溶物,降低了機(jī)體對(duì)藥物的吸收,從而降低了藥效。而黃芩中主要含有黃芩苷,不與鞣酸發(fā)生化學(xué)發(fā)應(yīng),能起到增強(qiáng)藥效的作用。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成藥制劑)記載,8種中成藥含有五倍子和黃柏配伍外用治療炎癥、燒燙傷等,其中3種中成藥中將黃柏與五倍子的提取物入藥;并記載7種中成藥含有黃芩和五倍子配伍使用。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果,黃芩和五倍子配伍使用,有利于藥效的發(fā)揮;而含有黃柏與五倍子配伍的處方雖然符合傳統(tǒng)中醫(yī)