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紫外可見吸取光譜及熒光光譜分析公司內(nèi)部檔案編碼:[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]簡述熒光光譜法與紫外-可見光吸取光譜法的原理及兩種方法的異同點。①熒光光譜法原理:原子熒光光譜法(AFS)是原子光譜法中的一個重要分支,是介于原子放射(AES)和原子吸取(AAS)之間的光譜分析技術(shù),它的根本原理就是:固態(tài)、液態(tài)樣品在消化液中經(jīng)過高溫加熱,發(fā)生氧化復(fù)原、分解等反響后樣品轉(zhuǎn)化為清亮液態(tài),將含分析元素的酸性溶液在預(yù)復(fù)原劑的作用下,轉(zhuǎn)化成特定價態(tài),復(fù)原劑KBH4反響產(chǎn)生氫化物和氫氣,在載氣(氬氣)的推動下氫化物和氫氣被引入原子化器(石英爐)中并原子化。特定的基態(tài)原子(一般為蒸氣狀態(tài))吸取適宜的特定頻率的輻射,其中局部受激發(fā)態(tài)原子在去激發(fā)過程中以光輻射的形式放射出特征波長的熒光,檢測器測定原子發(fā)出的熒光而實現(xiàn)對元素測定的痕量分析方法。②紫外-可見光吸取光譜法的原理:紫外-可見吸取光譜法是利用某些物質(zhì)的分子吸取紫外-可見吸取光譜法是利用某些物質(zhì)的分子吸取190-750nm的輻射來進(jìn)展分析測定的方法,是基于分子內(nèi)電子躍遷產(chǎn)生的吸取光譜。在有機(jī)化合物分子中有形成單鍵的σ電子、有形成雙鍵的π電子、有未成鍵的孤對來進(jìn)展分析測定的方法,是基于分子內(nèi)電子躍遷產(chǎn)生的吸取光譜。在有機(jī)化合物分子中有形成單鍵的σ電子、有形成雙鍵的π電子、有未成鍵的孤對n電子。當(dāng)分子吸取肯定能量的輻射能時,這些電子就會躍遷到較高的能級,此時電子所占的軌道稱為反鍵軌道而這種電子躍遷同內(nèi)部的構(gòu)造有親熱的關(guān)系。在紫外吸取光譜中,電子的躍遷有σ→σ*、n→σ*、π→π*和n→π*四種類型,各種躍遷類型所需要的能量依以下σ→σ*>n→σ*>π→π*>n→π*。當(dāng)某種物質(zhì)受到光的照耀時,物質(zhì)分子就會與光發(fā)生碰撞,其結(jié)果是光子的能量傳遞到了分子上。這樣,處于穩(wěn)定狀態(tài)的基態(tài)分子就會躍遷到不穩(wěn)定的高能態(tài),即激發(fā)態(tài):M〔基態(tài)〕+hv M*〔激發(fā)態(tài)〕由于物質(zhì)的能量是不連續(xù)的,即能量上一量子化的。只有當(dāng)入射光的能量〔hv〕與物質(zhì)分子的激發(fā)態(tài)和基態(tài)的能量差相等時才能發(fā)生吸取:△E=E2-E1=hv=hc/λ而不同的物質(zhì)分子因其構(gòu)造的不同而具有不同的量子化能級,即△E不同,故對光的吸取也不同。這就是對光的吸取作用。紫外-可見吸取光譜定性分析的依據(jù):光吸取程度最大處的波長叫做最大吸取波長,用λmax表示,同一種吸光物質(zhì),濃度不同時,吸取曲線的外形不同,λmax不變,只是相應(yīng)的吸光度大小不同,這是定性分析的依據(jù)。紫外-可見吸取光譜定量分析的依據(jù):朗伯-比爾定律,當(dāng)單色光通過液層厚度肯定的含吸光物質(zhì)的溶液后,溶液的吸光度A與溶液的濃度c成正比,此公式的物理意義是,當(dāng)一束平行的單色光通過均勻的含有吸光物質(zhì)的溶液后,溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度及吸取層厚度成正比。③兩者異同:在原理方面:?兩者都是吸取肯定的光輻射能從較低的能級躍遷到較高的能級,不同的是,吸光光度法測量的是物質(zhì)對光的選擇性吸取,而在原理方面:?兩者都是吸取肯定的光輻射能從較低的能級躍遷到較高的能級,不同的是,吸光光度法測量的是物質(zhì)對光的選擇性吸取,而熒光分析法測量的是從較高能級以無輻射躍遷的形式回到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級,再輻射躍遷到電子基態(tài)的任一振動能級過程中放射出的熒光的強(qiáng)度。?也就是說熒光光譜儀屬于放射光譜的一種,而后者是吸取光譜。然后是分析譜線波長的不同:熒光光譜儀分析的是吸取光譜。然后是分析譜線波長的不同:熒光光譜儀分析的是X射線熒光波長或許是50nm以下的波段,而后者分析的是紫外光和可見光〔150~800〕。選擇性:紫外可見分光光度法,一個物質(zhì)假設(shè)含有生色基團(tuán),它就會產(chǎn)生紫外和可見吸取,反過來依據(jù)紫外-可見吸取光譜便可推斷某些官能團(tuán)的存在,即進(jìn)展官能團(tuán)的鑒別,紫外-可見吸取光譜的獲得是建立在測定出物質(zhì)對不同波長光〔單色光〕吸取的根底上的。選擇性較高;分子熒光光度法,一個物質(zhì)只要能產(chǎn)生熒光,則可以依據(jù)熒光光譜判別物質(zhì)的種類〔前提是量子產(chǎn)率到達(dá)要求〕,物質(zhì)都有熒光光譜,應(yīng)用有肯定限制。查詢熒光分析法在其它領(lǐng)域中的應(yīng)用。醫(yī)藥以及生物領(lǐng)域:作為一種的非同位素標(biāo)記分析技術(shù),區(qū)分熒光分析法的主要優(yōu)勢是擁有高度的靈敏度、選擇性佳以及避開放射性污染的產(chǎn)生。該技術(shù)通過消退背景熒光以及雜質(zhì)的方式提升信噪比,在藥物含量測定、DNA石油行業(yè):格外適合用于各類輕油、重油、原油等石油產(chǎn)品的硫含量測量,汽油中硫含量測定?。環(huán)境中應(yīng)用:①環(huán)境監(jiān)測中,主要是用于對單項指標(biāo)的測定,多用于無機(jī)物。日本美國等除此之外,還將熒光分析法應(yīng)用于環(huán)境有機(jī)物綜合指標(biāo)的測定。常利用脂肪族有機(jī)物和某種試劑反響的特性來檢測。②水質(zhì)分析

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