艾葉及其炮制品的揮發(fā)油成分對比研究

艾葉及其炮制品的揮發(fā)油成分對比研究

艾葉是薔薇科植物的愛斯基亞、et總莖。是中醫(yī)臨床常用藥。其味苦、辛,性溫;有小毒。歸肝、脾、腎經。有散寒止痛,溫經止血之功。其炮制方法以醋制和炒炭為主。醋制后溫而不燥,并能增強逐寒止痛作用,適用于虛寒之癥。揮發(fā)油為艾葉的主要成分之一,具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌抗病毒、鎮(zhèn)咳平喘、祛痰、鎮(zhèn)靜、利膽、抗癌等功效。已有文獻報道,艾葉炮制后其揮發(fā)油總含量降低,但其成分組成、各成分含量以及成分的變化與藥效的關系尚不明確。本文采用水蒸氣蒸餾法提取艾葉及各炮制品揮發(fā)油,采用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術進行分析,為從揮發(fā)油角度探討艾葉的炮制目的提供參考。1儀器和試劑盒1.1提取器和相色譜-質譜條件美國Agilent6890GC/5973MS氣相色譜-質譜聯(lián)用儀;HP-5MS(30.0m×250mm×0.25mm)彈性石英毛細管柱;揮發(fā)油提取器;中藥炮制控溫爐(哈爾濱市測電器廠)。1.2測試劑1.3培育抗艾植物艾艾葉購自安徽滬譙中藥飲片廠,產地安徽,經山東省中醫(yī)藥研究院李英霞副研究員鑒定為菊科植物艾ArtemisiaargyiLevl.etVant.的干燥葉。醋炒品、清炒品、清炒拌醋品、生拌醋品均為實驗室自制。2方法和結果2.1最佳的采出液,把好國內熱2.1.1醋炒品的制備照《中國藥典》2005版一部附錄ⅡD項下醋炙法,取艾葉適量,除去雜質及梗,加15%醋及適量水,拌勻,悶透,置鍋內,炒干,取出,放涼。2.1.2清炒品的制備取艾葉適量,除去雜質及梗,加適量水(加水量與醋炒品中醋水總量一致),拌勻,悶透,置鍋內,炒干,取出,放涼。2.1.3清炒拌醋品的制備照醋炒品制備法制備清炒品,根據(jù)飲片相當于生艾葉飲片的量,加15%醋與適量水(醋水總量同上),拌勻,悶透,攤開晾干。2.1.4生拌醋品的制備取艾葉適量,除去雜質及梗,加15%醋及適量水(醋水總量同上),拌勻,悶透,攤開晾干。2.2揮發(fā)油含量測定分別取艾葉生品、醋炒品、清炒品、清炒拌醋品、生拌醋品粉末(過二號篩),照《中國藥典》2005版一部附錄XD揮發(fā)油測定法甲法提取。所得揮發(fā)油用無水硫酸鈉脫水。結果生拌醋品揮發(fā)油含量與生品比較無明顯差異,含量均為0.87%;加熱炮制品(醋炒品,清炒品,清炒拌醋品)含量較生品明顯降低,均為0.51%。艾葉經加熱炮制(醋炒品、清炒品和清炒拌醋品)后揮發(fā)油含量降低,而生拌醋品與生品比較無明顯差異。2.3條件2.2回用溫度氣相色譜條件:色譜柱為HP-5MS(30.0m×250mm×0.25mm)彈性石英毛細管柱;載氣為氦氣(99.99%),流速為1mL/min;進樣量為1μL。進樣口溫度:220℃;柱溫:40℃;程序升溫:45℃保持1min,再以15℃/min升至280℃穩(wěn)定5min;傳輸線溫度:250℃。質譜條件:電離方式為EI源,源溫:250℃,電離電壓為100ev,質量范圍m/z38~400全程掃描。2.4揮發(fā)油中總離子的測定對各供試樣品進行了分析,獲得了各樣品的總離子圖(見圖1~5),鑒定了含量大于0.1%的78個成分,并求得它們在揮發(fā)油中的相對百分含量。結果見表1。3不同制劑醋對艾葉揮發(fā)油組分含量的影響3.1GC-MS測定結果表明,含量大于0.1%的成分在生品中鑒定出42個,占揮發(fā)油總量的89.23%;醋炒品中鑒定出42個,占揮發(fā)油總量的88.10%;清炒品中鑒定出44個,占揮發(fā)油總量的88.46%;清炒拌醋品中鑒定出37個,占揮發(fā)油總量的83.00%;生拌醋品中鑒定出36個,占揮發(fā)油總量的3.2艾葉經炮制后揮發(fā)油在成分組成上發(fā)生了較大變化。醋炒品中檢出了17個生品中沒有的新成分,清炒品檢出了17個新成分,清炒拌醋品中檢出了15個新成分,生拌醋品中檢出了13個新成分。醋炒品、清炒品與清炒拌醋品中有而生拌醋品中無的新成分有1個,醋炒品、清炒拌醋品與生拌醋品中有而清炒品中無的成分有2個。醋炒品、清炒品和清炒拌醋品中特有的成分各有5個,生拌醋品中特有成分有3個。因此,炮制及輔料醋對艾葉揮發(fā)油有較大的影響,且不同炮制方法(加熱與加醋)影響有所差異。3.3生品中的廣藿香烷(10.565%)經炮制后消失,醋炒品與清炒拌醋品中產生了新成分藍桉醇(含量分別為12.343%、13.491%),清炒品與生拌醋品中產生了新成分愈創(chuàng)木烯(含量分別為11.187%、11.335%),三種成分的結構相似,且含量相近。各化合物的結構圖見下圖。故推測艾葉生品中的廣藿香烷在醋炒品和清炒拌醋品中轉化為藍桉醇,在清炒品和生拌醋品中轉化為愈創(chuàng)木烯。這些結構上的轉化可能是加熱或加醋的作用下產生的,動態(tài)變化過程及其對藥理作用的影響均有待于進一步研究。3.4艾葉生品中的異龍腦(6.555%)在加醋的炮制品(醋炒品、清炒拌醋品和生拌醋品)中消失,且均產生了新的成分龍腦(含量分別為6.664%、6.323%、7.005%),二者為差向異構體,故推測生品中的異龍腦在加醋的炮制品中轉化為龍腦,此構型轉化可能是輔料醋的作用。有文獻報道,龍腦的毒性較異龍腦小,這可能與艾葉醋制后毒性降低有關。3.5艾葉及其炮制品揮發(fā)油中均含有石竹烯及其氧化物、桉油精、4-萜品烯醇、α-松油醇等主要成分,但同一成分含量變化較大。具有平喘作用及抗菌活性的石竹烯及其氧化物經炮制后均顯著增加,并以醋炒品中含量最高,在各樣品中的含量分別為:R118.587%、R518.833%、R319.492%、R419.832%、R221.794%;具有解熱、抗炎、抗菌作用的桉油精經炮制后均顯著減少,在各樣品中的含量分別為:R111.25%、R59.293%、R38.762%、R26.476%、R44.938%;具有止咳、解熱、抑菌作用的α-松油醇經炮制后均減少,在各樣品中的含量分別為:R13.333%、R53.265%、R32.96%、R42.946%、R22.845%;具有鎮(zhèn)咳祛痰作用的4-萜品烯醇經炮制后均顯著減少,在各樣品中的含量分別為:R15.879%、R55.871%、R35.557%、R4