動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)-(唐麗靈老師)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)組織培養(yǎng)的分類及基本概念

分類:1.組織培養(yǎng)(TissueCulture)指的是從體內(nèi)取出組織，在模擬體內(nèi)生理環(huán)境，無菌、適當(dāng)溫度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下，使之生存和生長(zhǎng)并維持其結(jié)構(gòu)和功能的方法。2.細(xì)胞培養(yǎng)(CellCulture)培養(yǎng)物是單個(gè)細(xì)胞和細(xì)胞群。3.器官培養(yǎng)（OrganCulture）培養(yǎng)的是器官的一部分或整個(gè)器官，使之在體外生存、生長(zhǎng)和保持一定功能的方法。培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)

1.貼附型：1）成纖維細(xì)胞：心肌細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞等2）上皮型細(xì)胞：消化管外皮細(xì)胞，肝臟上皮細(xì)胞等3）游走型細(xì)胞：神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞4）多形型細(xì)胞：神經(jīng)組織細(xì)胞2.懸浮型：如癌細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖

1.原代培養(yǎng)（PrimaryCulture）階段：或稱初代培養(yǎng)。從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代，隨不同的組織時(shí)間長(zhǎng)短不一，一般為1~4w2.傳代培養(yǎng)（Subculture）階段：或稱繼代培養(yǎng)。也就是細(xì)胞系（Cellline）階段，細(xì)胞增殖旺盛，一般細(xì)胞可傳代10-50代）。培養(yǎng)細(xì)胞的傳代培養(yǎng)

當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)到一定密度后，都需要做傳代處理，傳代的頻率或間隔與培養(yǎng)液的性質(zhì)、接種細(xì)胞的數(shù)量和細(xì)胞增殖速度有關(guān)。所謂細(xì)胞“一代”，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間。如某一細(xì)胞系為50代即該細(xì)胞已傳代50次。

指數(shù)生長(zhǎng)期是細(xì)胞活力最好的時(shí)期，在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下，指數(shù)生長(zhǎng)期持續(xù)3-5d后，隨細(xì)胞數(shù)量不斷增多，生長(zhǎng)空間日趨減少，細(xì)胞相互接觸匯合成片，呈現(xiàn)接觸抑制（Contactinhibition）。而惡性細(xì)胞則無接觸抑制現(xiàn)象，因此接觸抑制可作為區(qū)分正常與癌細(xì)胞標(biāo)志之一。癌細(xì)胞則由于營(yíng)養(yǎng)成分的消耗和細(xì)胞代謝產(chǎn)物的影響而發(fā)生密度抑制（Densityinhibition）細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件

1)儀器和設(shè)備:常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備：如CO2孵箱；培養(yǎng)器材：如培養(yǎng)瓶，純水設(shè)備，干燥消毒除菌設(shè)備，清洗設(shè)備等。2)培養(yǎng)液:目前常用的基礎(chǔ)培