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第六章
免疫學(xué)應(yīng)用*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·預(yù)防、診斷、治療·第一節(jié)*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系免疫預(yù)防思考題:疫苗預(yù)防動(dòng)物傳染病的基本原理·疫苗的概念:由病原微生物、寄生蟲(chóng)等完整病原或其組分或代謝產(chǎn)物制成的、具有良好免疫原性的、用于人工主動(dòng)免疫的生物制品,稱為疫苗。*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·作用:給動(dòng)物機(jī)體接種后,能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,以抵制特定病原微生物或寄生蟲(chóng)的感染,從而預(yù)防疫病?!し诸悾焊爬ㄆ饋?lái)分為活疫苗、滅活疫苗、代謝產(chǎn)物疫苗、微生物亞單位疫苗和基因工程疫苗等。滅活苗:指用免疫原性優(yōu)良的病原微生物(包括標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株和免疫原性優(yōu)良的弱毒株),經(jīng)人工
大量培養(yǎng)后將其殺死,使其失去生物活性,而保留
其免疫原性,并加入佐劑制成的疫苗,稱為滅活苗。*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·分類按照使用佐劑:鋁膠苗、油乳苗、蜂膠苗按照毒種來(lái)源:一般滅活苗、自家滅活苗(培養(yǎng)物苗、組織滅活苗)針對(duì)病原不同:細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)等·活苗:制病原微生物通過(guò)人工誘變使其毒力減弱或喪失;或通過(guò)自然篩選,選擇免疫原性優(yōu)良的弱毒株,而制成的含有活病原體的疫苗,稱為活苗或弱毒苗。*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·分類:按照毒種來(lái)源:同源活疫苗、異源活疫苗按照毒力強(qiáng)弱:強(qiáng)毒、中等毒力、弱毒活苗按照制備工藝:濕苗、凍干苗*
鄭鄭州州牧牧業(yè)業(yè)工工程程高高等等專專科科學(xué)學(xué)校校動(dòng)動(dòng)物物醫(yī)醫(yī)學(xué)學(xué)系系活疫苗滅活苗可在體內(nèi)繁殖,故少量接種即可使機(jī)體產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力,且不必使用佐劑。不能在體內(nèi)繁殖,故接種劑量大,且必須使用佐劑。免疫產(chǎn)生快免疫產(chǎn)生較慢可產(chǎn)生局部免疫不能產(chǎn)生局部免疫可用多種途徑免疫僅能皮下注射免疫要求凍干冷凍或冷藏保存易于保存(2-8℃)毒力有返強(qiáng)的潛在危險(xiǎn)安全性好,不散毒研制周期長(zhǎng)研制周期短·類毒素:細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素,用適當(dāng)濃度的甲醛溶液使其脫毒,但仍保留其免疫原性而制成的生物制品。如破傷風(fēng)類毒素*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·應(yīng)用:A、直接作疫苗注射B、反復(fù)注射免疫馬匹,制備抗毒素血清·基因工程疫苗:應(yīng)用基因工程技術(shù)處理微生物基因制成的疫苗為基因工程苗。它包括基因工程亞單位苗、基因工程活載體苗和基因缺失苗?!せ蚬こ桃呙缬幸韵聝?yōu)點(diǎn):*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系把保護(hù)性抗原基因插入載體的能力,修飾的載體能表達(dá)來(lái)自病原微生物的保護(hù)性抗原基因,細(xì)菌和病毒載體,都能產(chǎn)生兼有活疫苗和滅活苗優(yōu)點(diǎn)的疫苗,這種類型的疫苗具有亞單位苗的安全性又具有活疫苗的效力;它們易于大規(guī)模使用(噴霧或氣霧);生產(chǎn)費(fèi)用相對(duì)較低,目前世界上幾個(gè)研究組織正在生產(chǎn)特定的禽用疫苗載體。是指它只含有病原體的一種或幾種抗原。而不含有病原體的其他遺傳信息。原則上講,用這些疫
苗接種動(dòng)物,都可使之獲得抗性而免受病原體的感
染。亞單位疫苗不合有感染性組分,因而無(wú)須滅活,也無(wú)致病性。如豬口蹄疫、偽狂犬病、狂犬病、水皰性口炎、大腸桿菌、禽巴氏桿菌微莢膜苗等。如致病性大腸桿菌K88、K99亞單位苗用于口服,可阻止致病性大腸桿菌在腸黏膜表面的附著作用,對(duì)防止大腸桿菌病有一定的作用。*鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系基因工程亞單位苗*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系制備的細(xì)菌或病毒中編碼保護(hù)性蛋白抗原的基因(目的基因)與表達(dá)質(zhì)粒(載體)重組轉(zhuǎn)化宿主細(xì)菌或細(xì)胞大量培養(yǎng)轉(zhuǎn)化菌或細(xì)胞,表達(dá)保護(hù)性蛋白抗原純化表達(dá)的抗原+佐劑人們可以用基因工程的方法對(duì)細(xì)菌和病毒進(jìn)行改造,使之成為活體重組疫苗。這種活體重組疫苗可以是非致病性微生物通過(guò)基因工程的方法使之?dāng)y帶并表達(dá)某種特定病原物的抗原決定簇基因,產(chǎn)生免疫原性。工藝:制備目的基因與痘病毒弱毒苗的基因組重組(可聯(lián)接多個(gè)外源基因)給動(dòng)物接種重組活痘苗
重組活痘苗在動(dòng)物體內(nèi)繁殖,表達(dá)外源基因抗原,產(chǎn)生免疫如:禽流感活載體疫苗*鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系病毒基因組中有編碼抗原基因和編碼毒力的基因應(yīng)用基因切除、插入、缺失等方法,去除毒力基因接種動(dòng)物,只表達(dá)抗原,產(chǎn)生免疫(無(wú)毒、安
全、有效)如豬偽狂犬病毒(prv)糖蛋白e基因缺失(ge-)及胸腺核苦酸激酶基因突變失活(tk-)株的活疫苗,ge和tk基因產(chǎn)物的缺失,使野毒prv的致病性顯著減弱。*鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系*鄭州牧業(yè)工程高等專??瓶茖W(xué)學(xué)校校動(dòng)動(dòng)物物醫(yī)醫(yī)學(xué)學(xué)系系按照病原微生物保護(hù)性抗原決定簇的氨基酸序列,人工合成類似病原微生物亞單位多肽所制成的疫苗稱為合成肽疫苗?!あ俨灰l(fā)疾病、無(wú)毒力·②不會(huì)出現(xiàn)遺傳變異·③不需低溫保存·④可制成多價(jià)、多聯(lián)苗·多價(jià)苗——同種病原微生物多種型或毒株制成的疫苗(例如大腸桿菌多價(jià)苗、禽流感多價(jià)苗)·多聯(lián)苗——不同種病原微生物聯(lián)合制成的疫苗例:豬瘟-豬丹毒-豬肺疫三聯(lián)苗·特點(diǎn):一針?lè)蓝喾N病,節(jié)約人力、物力·注意:疫苗不能任意混合注射,可能互相抑制干擾*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·1、特異性治療用生物制品---高免卵黃、高免血清、免疫球蛋白制劑·2、非特異性治療用生物制品---干擾素、白細(xì)胞介素、轉(zhuǎn)移因子、免疫增強(qiáng)劑等。·3、微生態(tài)制劑:由正常菌群微生物制成,使用后可調(diào)節(jié)、扶持正常菌群,抑制病原體,可治療家畜因菌群失調(diào)引起的腹瀉等疾病。*鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·第二節(jié)*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系免疫治療·1、高免卵黃:高免卵黃則是用上述抗原免疫產(chǎn)蛋母雞,用其高免蛋制成的卵黃抗體制劑。本品可用于被動(dòng)免疫和治療。*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·2、高免血清:系用健康動(dòng)物經(jīng)抗原強(qiáng)化免疫后,無(wú)菌采血,分離血清,加適量防腐劑制成的;·3、干擾素:通過(guò)注射疫苗或干擾素誘導(dǎo)劑。微生物的防御策略*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系(1)躲避識(shí)別①細(xì)胞內(nèi)棲息:如病毒、結(jié)核菌傷寒沙門、布氏桿菌、衣原體、立克次氏體等②抗原性變異:通過(guò)突變改變抗原:如流感;與動(dòng)物病毒核酸重組;表達(dá)不同抗原序列:如疏螺旋體。③偽裝或分子模擬:微生物有與宿主相同的抗原:如鏈球菌以自身蛋白包被:用血清蛋白覆蓋表面:如血吸蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)免疫分散:有些微生物產(chǎn)生刺激許多不同的超抗原以稀釋特異性抗原作用(2)、使宿主免疫機(jī)制失活①吞噬作用:有些細(xì)菌被囊化抑制吞噬:如肺炎球菌、大腸桿菌②抗體:通過(guò)產(chǎn)生大量可溶性抗原中和抗體如肺炎鏈球菌;產(chǎn)生低親和力抗體如密螺旋體。③干擾素:抑制干擾素合成如乙肝病毒④補(bǔ)體:通過(guò)宿主補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白摻入道微生物細(xì)胞壁來(lái)抑制補(bǔ)體活化如HIV⑤細(xì)胞免疫:感染病殺死T細(xì)胞如HIV⑥抗原加工和遞呈:抑制抗原加工如HIV*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系·第三節(jié)*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系免疫診斷1、診斷抗原:診斷抗原包括細(xì)菌液、病毒液、毒素等,是將病原微生物培養(yǎng)后,將其滅活或裂解制成。*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系變態(tài)反應(yīng)性抗原-----如結(jié)核菌素、鼻疽菌素血清反應(yīng)性抗原----如雞白痢平板凝集抗原2、診斷血清:診斷血清包括陽(yáng)性血清、定型血清、標(biāo)記抗體等,是用抗原反復(fù)免疫動(dòng)物后,采集免
疫動(dòng)物的血液,分離血清,并加入一定量的防腐
劑而制成?!あ倌磻?yīng)用:雞白痢、布氏桿菌、雞支原體平板凝集抗原與陰、陽(yáng)性血清等。*鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系②沉淀反應(yīng)用:如炭疽沉淀素與炭疽沉淀素血清③補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)用:綿羊紅血球、溶血素與補(bǔ)體·④標(biāo)記抗原與標(biāo)記抗體·⑤中和試驗(yàn)用抗原與血清·⑥定型血清及因子血清·⑦變態(tài)反應(yīng)診斷抗原:1、用于家畜傳染病的檢疫或病原的鑒定與分型用血清學(xué)方法診斷傳染?。孩儆靡阎目乖\斷液,檢測(cè)動(dòng)物血清中是否有相應(yīng)的抗
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