1型糖尿病患者胰島細(xì)胞分泌胰島素的研究進(jìn)展

1型糖尿病患者胰島細(xì)胞分泌胰島素的研究進(jìn)展

現(xiàn)在，1型糖尿?。╥類）被認(rèn)為是由t細(xì)胞誘導(dǎo)的自身免疫性疾病。根據(jù)遺傳因素（微生物、化學(xué)品和食品成分）的影響，一些環(huán)境因素（微生物、化學(xué)品和食品成分）的影響下，以胰島炎為病理特征的胰島細(xì)胞本身的免疫反應(yīng)，因?yàn)橐葝u細(xì)胞失去了合成和分泌胰島素的功能，導(dǎo)致糖代謝障礙。研究證明,T1DM占糖尿病總發(fā)病人數(shù)的7%~10%,臨床癥狀較嚴(yán)重,且近年來該病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。1大鼠糖尿病模型血清中細(xì)胞自身抑制劑的檢測(cè)β細(xì)胞自身抗原都是胰島細(xì)胞抗體(ICAs)的靶分子。胰島細(xì)胞抗體普遍存在于T1DM病人的血清中。在人類、NOD小鼠和BB大鼠糖尿病模型血清中已檢出的β細(xì)胞自身抗原包括:胰島素、胰島素受體、52-kD蛋白、69-kD蛋白(即谷氨酸脫羧酶,Glutamicaciddecarboxylase,GAD)、ICA512結(jié)合抗原(IA-2)、熱休克蛋白65(HSP65)、羧肽酶H(CPH)、38-kD自身抗原。目前己知化學(xué)本質(zhì)的自身抗原是GAD、胰島素和ICA512結(jié)合抗原。1.1第二、特殊類型的細(xì)胞內(nèi)表達(dá)免疫反應(yīng)谷氨酸脫羧酶是誘發(fā)T1DM的關(guān)鍵抗原。GAD是抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(DABA)的生物合成酶,主要存在于胰島β細(xì)胞內(nèi)突觸樣的小囊泡內(nèi),也少量分布于哺乳動(dòng)物的睪丸、卵巢、胃、大腦等。目前確定GAD分為兩型:GAD67和GAD65,分別由不同的基因編碼,其氨基酸順序有70%相似。二者在胰島中的表達(dá)有種屬差別,GAD65主要表達(dá)于人類和大鼠,而GAD67主要表達(dá)于小鼠。據(jù)報(bào)道GAD的氨基酸序列與柯薩奇病毒蛋白序列相似,當(dāng)病毒感染后,因病毒與β細(xì)胞具有相同抗原性而產(chǎn)生交叉免疫反應(yīng),針對(duì)病毒的抗體及效應(yīng)T細(xì)胞在消滅病毒的同時(shí)也破壞β細(xì)胞。1993年Kaufman指出NOD小鼠的起始免疫應(yīng)答主要是由Th1細(xì)胞針對(duì)GAD片斷(氨基酸509~528和524~543)反應(yīng),后期免疫應(yīng)答則是對(duì)GAD另一區(qū)域(氨基酸246~266)和其它的自身抗原如HSP65和胰島素反應(yīng)。用純化的GAD免疫NOD小鼠,可以導(dǎo)致GAD特異的T細(xì)胞產(chǎn)生耐受,同時(shí)也阻止T細(xì)胞對(duì)其它的β細(xì)胞抗原產(chǎn)生反應(yīng),能預(yù)防胰島炎和糖尿病。從糖尿病NOD小鼠中分離出的GAD反應(yīng)性CD4+Th1細(xì)胞可以在NOD聯(lián)合免疫缺陷小鼠引起糖尿病。Chen利用NOD小鼠、以及同種的NOD.B10.H-2g7和NOD.B6I12-Tshb小鼠證明對(duì)GAD65524~543片段的反應(yīng)是受MHCII類分子限制,同時(shí)還可以引發(fā)T細(xì)胞對(duì)GAD的其它短肋片段產(chǎn)生耐受。利用NOD小鼠MHCI類分子作為增強(qiáng)因子克隆擴(kuò)增GAD65,將其在小鼠體內(nèi)完全表達(dá),發(fā)現(xiàn)體內(nèi)高水平的GAD65加速了糖尿病的發(fā)生和發(fā)展。為進(jìn)一步明確GAD的作用,Ji-wonYoona等人運(yùn)用轉(zhuǎn)基因方法發(fā)現(xiàn),使β胰島細(xì)胞的GAD表達(dá)缺失可保護(hù)細(xì)胞免受T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫攻擊,防止NOD小鼠發(fā)生l型糖尿病。他們先在NOD小鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)基因表達(dá)反義GAD,當(dāng)β細(xì)胞內(nèi)的GAD完全被抑制表達(dá)時(shí),可以抑制T1DM的發(fā)生發(fā)展。而在轉(zhuǎn)基因小鼠β細(xì)胞內(nèi)任何水平的GAD表達(dá)都可以引起T1DM的發(fā)生發(fā)展。這些結(jié)果暗示GAD在NOD小鼠T1DM的發(fā)生發(fā)展過程中,起著觸發(fā)性抗原的作用,可以引起一系列的連鎖免疫反應(yīng)。1.2其他自身抗體對(duì)t細(xì)胞內(nèi)溶膠的作用胰島素是T1DM已知的β細(xì)胞特異性抗原。在59%的前臨床糖尿病晚期和新診T1DM的病人體內(nèi)都可以檢測(cè)到胰島素自身抗體。體內(nèi)對(duì)胰島素B鏈特異的CD4+T細(xì)胞克隆可以加速幼年NOD小鼠糖尿病的發(fā)生,并可以將疾病過繼轉(zhuǎn)移給聯(lián)合免疫缺陷的NOD小鼠。新近在幼年NOD小鼠體內(nèi)檢測(cè)到的一種CD8+T細(xì)胞克隆,可以識(shí)別胰島素B鏈氨基酸片段15~23,引起幼年NOD小鼠發(fā)病。NOD小鼠口服人胰島素后可以激活免疫調(diào)節(jié)的T細(xì)胞,阻止疾病的發(fā)展,胰島素B鏈胸腺內(nèi)注射、皮下注射或者滴鼻都可以預(yù)防糖尿病的發(fā)生。改變B鏈一個(gè)氨基酸得到的代謝失活性胰島素同樣對(duì)T1DM具保護(hù)性作用。還發(fā)現(xiàn)胰島素自身抗體對(duì)胰島素和胰島表達(dá)的逆轉(zhuǎn)錄病毒抗原p73有交叉反應(yīng),但是這種交叉反應(yīng)在T1DM中的病理作用還不明確。以上結(jié)果表明,在T1DM的發(fā)生過程中,胰島素作為自身抗原起著重要的作用。但是,抗胰島素抗體和胰島素激活的T細(xì)胞的病理作用還在進(jìn)一步的研究中。1.3ia-2抗體ICA512結(jié)合抗原即IA-2是新發(fā)現(xiàn)的受體型蛋白酪氨酸磷酸[酯]酶家族(PTP)的成員之一,也是T1DM的主要自身抗原之一。IA-2蛋白是37/40-kD的胰島胰蛋白酶片斷的前體,分子量為38kD,僅在β細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。抗原表達(dá)水平低但抗原性很強(qiáng)。在新診斷為糖尿病的患者中可檢出IA-2的特異性自身反應(yīng)T細(xì)胞?？笽A-2抗體(IA-2Ab)可以在60%~80%的新診TlDM病人中檢測(cè)出,并且是先于臨床癥狀多年出現(xiàn),但在NOD小鼠或者BB大鼠未檢測(cè)到這種抗體。研究發(fā)現(xiàn),IA-2Ab聯(lián)合GADAb及胰島素抗體(IAA)是預(yù)測(cè)T1DM,篩查DM前期個(gè)體最可靠的免疫學(xué)標(biāo)志。因此IA-2Ab對(duì)于T1DM的早期診斷及防治有重要的應(yīng)用價(jià)值。2與1型糖尿病有關(guān)的免疫細(xì)胞2.1參與氧自由基損傷細(xì)胞的調(diào)節(jié)胰島炎早期的胰島浸潤(rùn)細(xì)胞主要是巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞,以后主要是T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和B細(xì)胞。用硅酸使NOD小鼠或者BB大鼠的巨噬細(xì)胞失活,可以近乎完全地阻止糖尿病和胰島炎的發(fā)生。這個(gè)結(jié)果表明在糖尿病動(dòng)物模型的發(fā)病機(jī)制中巨噬細(xì)胞起著重要作用。為了了解巨噬細(xì)胞是否是效應(yīng)性T細(xì)胞破壞β細(xì)胞的必要因素,有研究證實(shí)用lip-C12MDP從巨噬細(xì)胞缺乏的糖尿病NOD小鼠中提取的脾細(xì)胞不能將疾病轉(zhuǎn)移給聯(lián)合免疫缺陷的NOD小鼠(NOD/SCID),而用同樣方法從對(duì)照NOD小鼠中提取的脾細(xì)胞則可以轉(zhuǎn)移疾病給免疫缺陷的NOD小鼠,這說明在針對(duì)β細(xì)胞的細(xì)胞毒性T細(xì)胞的產(chǎn)生過程中,巨噬細(xì)胞的存在是必需的。研究還發(fā)現(xiàn),缺乏巨噬細(xì)胞的受者NOD小鼠T細(xì)胞不能損傷體內(nèi)移植的胰島。這些結(jié)果說明,在巨噬細(xì)胞缺陷的環(huán)境中,T細(xì)胞不能分化為β細(xì)胞細(xì)胞毒性T細(xì)胞。將T細(xì)胞重新置于巨噬細(xì)胞的環(huán)境中,T細(xì)胞則能分化為β細(xì)胞細(xì)胞毒性T細(xì)胞。究其主要原因?yàn)榫奘杉?xì)胞缺乏的NOD小鼠細(xì)胞因子IL-12表達(dá)減少,引起免疫平衡改變,使Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)減弱而由Th2細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)增強(qiáng),同時(shí)Fas配基表達(dá)和穿孔素顯著減少,引起效應(yīng)T細(xì)胞活化不足。若增加IL-12則可以在巨噬細(xì)胞缺乏的NOD小鼠內(nèi)重新誘發(fā)糖尿病。巨噬細(xì)胞除了通過激活T細(xì)胞損傷β細(xì)胞以外,其分泌的可溶性中介物也參與β細(xì)胞損傷,這些物質(zhì)包括:氧自由基和一些細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IFN-α和IFN-γ)。在對(duì)巨噬細(xì)胞缺乏的NOD小鼠與PBS處理的對(duì)照組NOD小鼠的比較觀察中發(fā)現(xiàn),前者體內(nèi)的IL-1β、TNF-α和IFN-γ的表達(dá)水平顯著下降。研究認(rèn)為這些由激活的巨噬細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子對(duì)β細(xì)胞有毒性作用。β細(xì)胞對(duì)自由基極敏感,原因之一是β細(xì)胞捕捉氧自由基的酶活性低,其二是胰島中幾種抗氧化酶:Mn-SOD、Cu-Zn-SOD、過氧化酶(CAT)的基因表達(dá)要低于其他組織。而胰腺浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子可能就是通過誘導(dǎo)產(chǎn)生氧自由基損傷β細(xì)胞的。這種毒性作用最終是由超氧離子和過氧化氫介導(dǎo)的。2.2抗尿髂啶抗體在NOD小鼠的自身免疫性糖尿病的發(fā)病機(jī)制中,B細(xì)胞作為抗原呈遞細(xì)胞(APC)起著關(guān)鍵性作用。以前認(rèn)為B細(xì)胞主要是生成抗β細(xì)胞自身抗原的抗體,后來研究證明,在NOD小鼠自身免疫性糖尿病的發(fā)病起始過程中,B細(xì)胞是關(guān)鍵的抗原呈遞細(xì)胞。B細(xì)胞缺乏的NOD小鼠不會(huì)自發(fā)產(chǎn)生糖尿病。用抗尿嘧啶抗體促使體內(nèi)B細(xì)胞衰竭可以完全阻止胰島炎的發(fā)展。從糖尿病NOD小鼠中提取的T淋巴細(xì)胞,可以將疾病過繼轉(zhuǎn)移給缺乏B細(xì)胞的幼年受體小鼠,暗示在糖尿病致病性效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生后,B細(xì)胞對(duì)β細(xì)胞的損傷并不是必需的。2.3cd8+t細(xì)胞在t1d細(xì)胞上的作用1型糖尿病主要病理學(xué)特征是發(fā)生CD4+和CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞浸潤(rùn)的胰島炎,引起選擇性的胰島β細(xì)胞損傷,從而使胰島素分泌減少或缺乏。一般認(rèn)為其中胰島反應(yīng)性CD4+和CD8+T細(xì)胞與促進(jìn)1型糖尿病的發(fā)生有密切關(guān)系。一般認(rèn)為T1DM的發(fā)病機(jī)制是被Th1/Tc1依賴性自身免疫反應(yīng)介導(dǎo)產(chǎn)生,而通過Th2和/或調(diào)節(jié)性免疫反應(yīng)緩解。這里主要闡述CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞在引起糖尿病過程中的作用。2.3.1CD4+T細(xì)胞CD4+T細(xì)胞分為Th1和Th2兩個(gè)細(xì)胞亞群。Th1T細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β;Th2細(xì)胞分泌IL-4、5、6、10、13等細(xì)胞因子。Th1細(xì)胞主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫,通過其細(xì)胞因子破壞β細(xì)胞,促進(jìn)胰島炎和T1DM的發(fā)病,而Th2細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫,通過細(xì)胞因子對(duì)胰島細(xì)胞起保護(hù)性作用。正常情況下Th1和Th2的兩類細(xì)胞反應(yīng)交叉調(diào)節(jié)相互抑制,維持機(jī)體處于免疫平衡狀態(tài)。研究表明,1型糖尿病患者是因體內(nèi)某些免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的失衡,導(dǎo)致自身免疫平衡失常,使Th1細(xì)胞的功能占主導(dǎo)地位,其分泌的大量細(xì)胞因子參與β細(xì)胞自身免疫反應(yīng)過程。其中,Th1細(xì)胞產(chǎn)生的大量IFN-γ,對(duì)發(fā)病極為重要。IFN-γ可抑制Th2細(xì)胞增殖,抑制IL-4、IL-10的產(chǎn)生,上調(diào)β細(xì)胞的MHC-I類分子表達(dá),增強(qiáng)抗原提呈作用,增加β細(xì)胞對(duì)胰島浸潤(rùn)T細(xì)胞破壞的敏感性,并輔助CD8+T細(xì)胞活化、克隆增殖為細(xì)胞毒性T細(xì)胞。比如有報(bào)道注射IFN-γ單克隆抗體可使NOD小鼠內(nèi)的T細(xì)胞反應(yīng)性從Th1轉(zhuǎn)向Th2,其脾細(xì)胞表達(dá)更多的Th2型細(xì)胞因子,從而有效防止NOD小鼠糖尿病的發(fā)生。2.3.2CD8+T淋巴細(xì)胞試驗(yàn)證明,將抗CD8+抗體注入NOD鼠體內(nèi),前五周能完全阻止NOD小鼠的胰島炎和T1DM的發(fā)生,表明CD8+T細(xì)胞在T1DM的起病階段起重要作用。另有研究表明CD8+T細(xì)胞在NOD小鼠胰島β細(xì)胞的破壞過程中起著效應(yīng)細(xì)胞的作用。從糖尿病NOD小鼠胰島分離出的CD8+T細(xì)胞中有一部分CD8+T細(xì)胞克隆可獨(dú)立過繼轉(zhuǎn)移糖尿病,但大部分情況下是在CD4+T細(xì)胞的協(xié)助下轉(zhuǎn)移糖尿病,這說明CD8+T細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞在T1DM的發(fā)病過程中有著協(xié)同作用。研究發(fā)現(xiàn)從NOD小鼠胰島浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞中分離出的CD8+T細(xì)胞,在細(xì)胞外可以被胰島細(xì)胞抗原激活并表現(xiàn)出增殖反應(yīng)和細(xì)胞毒活性。但是在注入抗MHCI類分子的抗體后,不能表現(xiàn)細(xì)胞毒活性,這說明CD8+T細(xì)胞對(duì)胰島細(xì)胞的反應(yīng)是受MHCI類分子限制的。CD8+T細(xì)胞主要是通過分泌穿孔蛋白和顆粒酶完成細(xì)胞毒功能,導(dǎo)致β細(xì)胞的破壞。但顆粒酶單獨(dú)不能破壞β細(xì)胞,有實(shí)驗(yàn)證實(shí)將表達(dá)LCMV-GP(Lymphocylicchoriomeningilisvirus-glycoprotein)的轉(zhuǎn)基因鼠與穿孔蛋白缺乏鼠雜交,子代鼠未發(fā)生T1DM。另外有實(shí)驗(yàn)說明不表達(dá)穿孔蛋白的NOD小鼠只能產(chǎn)生胰島炎但不產(chǎn)生糖尿病,而缺乏Fas的NOD小鼠,不發(fā)生胰島炎和糖尿病,說明在穿孔蛋白/顆粒酶途徑不足以介導(dǎo)T1DM時(shí),由Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是CD8+T細(xì)胞損傷β細(xì)胞的一個(gè)主要途徑。當(dāng)胰島內(nèi)有大量的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)時(shí),產(chǎn)生細(xì)胞因子如IFN-γ等可以使胰島的Fas表達(dá)上調(diào),而CD8+T細(xì)胞識(shí)別表達(dá)Fas的β細(xì)胞后即表達(dá)FasL,通過Fas/FasL的相互作用引起β細(xì)胞的凋亡,隨后發(fā)生胰島炎或者糖尿病。31t1d的免疫干預(yù)治療多種免疫機(jī)制參與T1DM的發(fā)病,對(duì)這些機(jī)制的研究為疾病的防治提供了途徑和方向。當(dāng)T1DM發(fā)病時(shí),β細(xì)胞已經(jīng)有80%左右被破壞,所以早期的免疫干預(yù)治療是目前的研究重點(diǎn)。當(dāng)前國(guó)內(nèi)外利用糖尿病動(dòng)物模型所進(jìn)行的免疫抑制、免疫刺激以及免疫耐受等實(shí)驗(yàn),都取得了令人滿意的效果,為人類的糖尿病治療提供了基礎(chǔ)。3.1抗tcr單抗和肽-mhc組合針對(duì)T1DM的發(fā)病機(jī)制與由細(xì)胞因子介導(dǎo)的自身免疫平衡發(fā)生變化,Th1細(xì)胞亞群占優(yōu)勢(shì)有關(guān),那么用某種手段(免疫調(diào)節(jié)劑)使Th2細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)或者恢復(fù)免疫平衡狀態(tài)就可能阻斷這種自身免疫反應(yīng),預(yù)防1型糖尿病。近年來運(yùn)用細(xì)菌、病毒或者某些免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子的單克隆抗體所作的人和動(dòng)物試驗(yàn)的結(jié)果均支持這種推論。如Qin和Shehadeh等人分別用完全弗氏佐劑(CFA)和卡介苗(BCG)注入未發(fā)病的NOD小鼠體內(nèi),發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,其糖尿病的發(fā)生率和胰島炎的病理損壞程度都相對(duì)較輕。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),處理組的小鼠T細(xì)胞產(chǎn)生了比對(duì)照組多的IL-4,而且對(duì)自身抗原GAD67的T細(xì)胞的增殖反應(yīng)明顯減弱,并伴有持久高滴度的抗GAD67抗體產(chǎn)生。這從一定程度上說明CFA和BCG的保護(hù)作用是通過促使T細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化,從而使針對(duì)GAD的致糖尿病的細(xì)胞免疫向保護(hù)性的體液免疫轉(zhuǎn)化。有研究發(fā)現(xiàn)T1DM病人或者NOD小鼠體內(nèi)的自然殺傷性T細(xì)胞(NaturalkillerTcell,NKT細(xì)胞)水平下降,提高NKT細(xì)胞含量后可以通過其分泌的IL-4將Th1反應(yīng)性轉(zhuǎn)向Th2反應(yīng)性,從而增加對(duì)T1DM的抵抗力。最近還有報(bào)道α-半乳糖腦苷脂也可以通過刺激NKT細(xì)胞釋放Th2細(xì)胞的細(xì)胞因子發(fā)揮保護(hù)作用,這也說明一些糖脂或小分子擬態(tài)物通過調(diào)節(jié)免疫對(duì)糖尿病的預(yù)防也有一定的應(yīng)用前景。除了刺激免疫療法外,還有用免疫抑制的方法來防治T1DM。如用T細(xì)胞功能抑制劑硫唑嘌呤、環(huán)孢菌素A等,雖一定程度上能緩解細(xì)胞免疫對(duì)胰島帶來的損傷,但是也產(chǎn)生了對(duì)整個(gè)免疫系統(tǒng)的普遍抑制。Menard等給雌性NOD小鼠注射抗GAD單克隆抗體干擾T細(xì)胞對(duì)GAD的識(shí)別,可預(yù)防糖尿病的發(fā)生,而且這種特異性免疫抑制也避免了對(duì)整個(gè)免疫系統(tǒng)的抑制。另外根據(jù)TCR和其同源肽-MHC發(fā)生高度特異性結(jié)合的特點(diǎn),可開發(fā)出可溶性的肽-MHC復(fù)合物,這種復(fù)合物可以識(shí)別抗原特異性的T細(xì)胞并且與其反應(yīng)。有關(guān)實(shí)驗(yàn)暗示這類復(fù)合物表現(xiàn)出的免疫調(diào)節(jié)能力在治療包括1型糖尿病在內(nèi)的自身免疫病中有發(fā)展?jié)摿?。一般而?用可溶性的肽-MHC多聚物治療疾病的作用方式相似于抗TCR-CD3單抗,在缺乏協(xié)同刺激信號(hào)的情況下TCR可以產(chǎn)生免疫無反應(yīng)信號(hào)。但是,與抗TCR單抗治療不同之處為,抗TCR單抗治療會(huì)影響所有介導(dǎo)免疫反應(yīng)的T細(xì)胞,而肽-MHC治療只會(huì)和自身反應(yīng)性T細(xì)胞發(fā)生特異反應(yīng),而且,單抗肽鏈半衰期較短,限制自身作用的效應(yīng),而MHC-肽多聚物的分子量很大,體內(nèi)的半衰期較長(zhǎng),可以提高作用的效應(yīng)。這種特異性免疫治療方法的提出為T1DM的治療指出了新的方向。3.2應(yīng)用胰島素b鏈或gad對(duì)大鼠的免疫預(yù)防口服胰島細(xì)胞抗原可以誘導(dǎo)自身耐受,機(jī)理可能是通過激活腸道相關(guān)淋巴組織,誘導(dǎo)選擇性免疫反應(yīng),導(dǎo)致局部Th2細(xì)胞激活,分泌Th2型細(xì)胞因子,進(jìn)而抑制Th1型細(xì)胞因子的分泌,即促使Th1細(xì)胞向Th2細(xì)胞免疫轉(zhuǎn)向(Immunedeviation),避免了胰島細(xì)胞的損壞。如Maron等發(fā)現(xiàn)給予NOD鼠口服或滴鼻胰島素或者GAD,NOD鼠產(chǎn)生的IL-10和TGF-β增加,而IFN-γ顯著減少;來自胰島素B鏈或GAD處理鼠的T細(xì)胞克隆分泌IL-4、IL-10和TGF-β,而來自對(duì)照組鼠的T細(xì)胞克隆分泌IL-2和IFN-γ;將已發(fā)生糖尿病的NOD鼠的Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)移進(jìn)NOD鼠或NOD/SCID鼠,能加速糖尿病的發(fā)生,而將來自胰島素B鏈或GAD處理鼠的Th2細(xì)胞轉(zhuǎn)移進(jìn)NOD鼠或NOD/SCID鼠則能夠抑制糖尿病的發(fā)生,這些都說明了口服自身抗原對(duì)體內(nèi)免疫方向的調(diào)節(jié)。目前主要用于免疫耐受的胰島自身抗原包括胰島素、GAD和HSP-60等,其中GAD和胰島素在NOD鼠T1DM的發(fā)病中是最強(qiáng)烈的刺激因素。對(duì)這些抗原產(chǎn)生耐受的研究近年來已經(jīng)成為預(yù)防T1DM的熱點(diǎn)。而且,這些方法在動(dòng)物試驗(yàn)中已經(jīng)取得了較滿意的結(jié)果,大規(guī)模人群試驗(yàn)正在進(jìn)行中。Ma等報(bào)道應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可利用植物合成、組裝糖尿病相關(guān)抗原,并且將這種植物制造的GAD作為飲食給予NOD