貝殼類中藥碳酸鈣含量測定及紅外光譜比較

貝殼類中藥碳酸鈣含量測定及紅外光譜比較杜成智;鄧家剛;侯小濤;杜正彩;郝二偉【摘要】采用EDTA滴定法對碳酸鈣含量進行測定，運用紅外光譜分析不同產(chǎn)地蛤殼、海螵蛸、牡蠣化學(xué)成分的差異.結(jié)果測得，蛤殼碳酸鈣含量在79.74%~98.34%,海螵蛸碳酸鈣含量在81.07%-94.51%,牡蠣碳酸鈣含量在66.71%-96.92%.紅外分析表明，蛤殼、海螵蛸、牡蠣三者的主要成分均為碳酸鈣，并含有少量有機質(zhì).說明不同產(chǎn)地蛤殼、海螵蛸、牡蠣碳酸鈣含量及紅外光譜沒有明顯差異,以碳酸鈣含量及紅外光譜作為其評價指標性成分，未能從整體上反映中藥的內(nèi)在質(zhì)量，也難以進行定性鑒別.【期刊名稱】《湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)》【年(卷)，期】2018(057)017【總頁數(shù)】4頁(P84-87)【關(guān)鍵詞】貝殼類中藥;EDTA滴定法;紅外光譜【作者】杜成智;鄧家剛;侯小濤;杜正彩;郝二偉【作者單位】廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南寧530200;廣西中藥藥效重點實驗室，南寧530200;廣西農(nóng)作物廢棄物功能成分研究協(xié)同創(chuàng)新中心，南寧530200;廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南寧530200;廣西中藥藥效重點實驗室，南寧530200;廣西農(nóng)作物廢棄物功能成分研究協(xié)同創(chuàng)新中心，南寧530200;廣西中藥藥效重點實驗室，南寧530200;廣西農(nóng)作物廢棄物功能成分研究協(xié)同創(chuàng)新中心，南寧530200;廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南寧530200;廣西中藥藥效重點實驗室，南寧530200;廣西農(nóng)作物廢棄物功能成分研究協(xié)同創(chuàng)新中心，南寧530200【正文語種】中文【中圖分類】O614.23+1;O657.33蛤殼為簾蛤科動物文蛤(MeretrixmeretrixLinnaeus)或青蛤(CyclinasinensisGmelin)的貝殼。海螵蛸為烏賊科動物無針烏賊(SepiellamaindronideRoehebrune)或金烏賊(SepiaesculentaHoyle)的干燥內(nèi)殼。牡蠣為牡蠣科動物長牡蠣(OstreagigasThunberg)、大連灣牡蠣(OstreatalienwhanensisCrosse)或近江牡蠣(Ostreariv-ularisGould)的貝殼［1］。蛤殼、海螵蛸和牡蠣三者均為介類藥物，但三者性效存在差異，蛤殼味苦、咸，性寒，歸肺、腎、胃經(jīng)，可清熱化痰，軟堅散結(jié)，制酸止痛；夕卜用收濕斂瘡。海螵蛸味咸、澀，性溫，歸脾、腎經(jīng)，可收斂止血，澀精止帶，制酸止痛，收濕斂瘡。牡蠣味咸，性微寒，歸肝、膽、腎經(jīng)，具有重鎮(zhèn)安神，潛陽補陰，軟堅散結(jié)的功效。藥理和臨床應(yīng)用亦存在差異。蛤殼可治療胃酸，胃潰瘍，抗腫瘤活性，抗衰老、抗炎活性，治療咳嗽、哮喘等病征；海螵蛸可治療消化性潰瘍出血，治療沙眼、未破裂卵泡黃素化綜合征、反流性食道炎、宮頸糜爛、骨刺等［2,3］。牡蠣藥理研究表明其有抗氧化、抗腫瘤、降血糖、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等作用；海螵蛸具有中和胃酸，護黏膜、抗?jié)?，成骨的藥理作用?,5］。三者主要成分均為碳酸鈣。李蘭等［6］對海螵蛸化學(xué)成分的研究結(jié)果表明其主要成分為碳酸鈣，結(jié)構(gòu)型為文石，并含有豐富的微量元素。牡蠣殼主要成分有碳酸鈣、微量元素和氨基酸［7］。這類藥材長期以來一直缺乏適合的質(zhì)量評價方法，現(xiàn)在大多以碳酸鈣的含量來評價該類藥材質(zhì)量。目前對三者質(zhì)量控制以及藥效的文獻報道甚少，對三者紅外光譜的測定及比較亦是。本研究對蛤殼、海螵蛸、牡蠣的碳酸鈣含量及紅外光譜進行比較，為蛤殼、海螵蛸、牡蠣的臨床合理應(yīng)用、質(zhì)量評價及定性鑒別提供科學(xué)依據(jù)。1材料與方法1.1儀器METTLER-AE100型電子分析天平（瑞士METTLER公司）；NicoletNexus470型紅外光譜儀（美國尼高儀器公司）；FW-4型壓片機（天津光學(xué)儀器廠）；瑪瑙乳缽等。1.2試劑pH10氨性緩沖溶液、K-B指示劑、EDTA滴定溶液、碳酸鈣等均為分析純，漠化鉀（光譜純）試驗用水為純化水。蛤殼、海螵蛸和牡蠣于2014年7月購買，藥材樣品蛤殼樣品7批，海螵蛸10批，牡蠣樣品10批，并對所收集樣品進行了鑒定。藥材樣品見表1及表2。1.3碳酸鈣含量測定用分析天平分別精密稱取藥粉1.2~1.3g于3個250mL錐形瓶中，加人20mLpH10氨性緩沖溶液和2~3滴K-B指示劑，用已標定好的EDTA溶液滴定至溶液由紫紅色變成藍紫色為終點。記下耗用EDTA的體積。根據(jù)耗用EDTA溶液的體積算藥粉鈣的百分含量，最后算出藥粉的平均百分含量。1.4紅外分析1.4.1樣品預(yù)處理蛤殼、海螵蛸和牡蠣放入烘箱烘干后，分別研磨，過100目篩，制成貝殼粉。預(yù)先在105°C烘箱中烘2h，備用。1.4.2紅外光譜測定在紅外燈下將樣品粉末與漠化鉀按1:100的比例在瑪瑙研缽中研磨混合均勻，在手動壓片機上制成透明薄片進行測試。在4000-400cm-1的掃描范圍內(nèi)進行紅外掃描。壓片模具每次用后應(yīng)立即用無水乙醇擦洗干凈，以免吸濕腐蝕模具。各樣品重復(fù)測定3次，得到供試品圖譜。表1碳酸鈣含量測定藥材來源注：編號“G”表示蛤殼；編號“H”表示海螵蛸；編號“M”表示牡蠣。下同編號G1G2G3G4G5G6G7H1H2H3H4H5H6H7H8H9H10MlM2M3M4M5M6M7M8M9M10藥材名稱蛤殼蛤殼蛤殼蛤殼蛤殼蛤殼蛤殼海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸海螵蛸牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣牡蠣產(chǎn)地廣西廣東高要廣東廣東浙江浙江廣西廣西廣東廣西廣西浙江廣西海南廣西廣西廣東廣西廣東遼寧遼寧廣東廣西江蘇廣西廣西廣東批號120701130224140101120406140401130901130622140101131006140305131001140401131201140403140101140103140605140401表2紅外光譜分析藥材來源編號G1G2G3H1H2H3M1M2M3藥材名稱蛤殼蛤殼蛤殼海螵蛸海螵蛸海螵蛸牡蠣牡蠣牡蠣產(chǎn)地廣西廣東廣東廣西廣東廣西廣西廣東遼寧2結(jié)果與分析2.1碳酸鈣含量測定結(jié)果按“1.3”的方法進行測定，計算出樣品粉末的平均百分含量，結(jié)果見表3。從表3中可知，測得蛤殼碳酸鈣的含量在79.74%~98.34%，海螵蛸碳酸鈣的含量在81.07%~94.51%，牡蠣碳酸鈣的含量在66.71%~96.92%。各藥未達到2015年版《中國藥典》碳酸鈣含量的限定，主要為粉末類型藥材，說明粉末類型飲片確實存在質(zhì)量問題。表3碳酸鈣含量測定結(jié)果注：“+”表示符合藥典的規(guī)定；“-”表示不符合藥典的規(guī)定；“*”表示藥典還未對海螵蛸設(shè)含量設(shè)定項編號G1平均值％藥典規(guī)定平均值％是否符合藥典規(guī)定G2G3G4G5G6G7H1H2H3H4H5H6H7H8H9H10M1M2M3M4M5M6M7M8M9M10藥材類型粉末飲片粉末飲片粉末粉末粉末粉末粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末飲片粉末粉末粉末粉末粉末粉末粉末粉末粉末粉末粉末平均含量%79.7498.3495.6194.5193.2893.2193.2981.0788.7090.1294.5189.4689.1391.7189.2190.6288.7782.2393.4096.9290.9095.8166.7189.5978.4485.4186.3292.5795.0089.3386.5794.00-++----**********--+-+ 2.2紅外分析結(jié)果圖1為不同產(chǎn)地蛤殼、海螵蛸和牡蠣樣品粉末進行漠化鉀壓片后所測得的紅外光譜。由圖1可見蛤殼、海螵蛸、牡蠣不同產(chǎn)地待測樣品紅外吸收峰的波數(shù)和峰形基本相似，說明三者的主要化學(xué)組分及組成物質(zhì)基本相同。2800-3000cm-1附近是有機物的C-H伸縮振動峰，2520cm-1附近吸收峰也是有機物質(zhì)引起。礦物質(zhì)中碳酸鹽離子被證實以CO32-內(nèi)部振動形式存在，有713、700~864、844~1090、1490cm-14個特征峰［8,9］。3小結(jié)與討論試驗結(jié)果表明，收集到的粉末類型藥材大部分未達到藥典的要求。為保證中藥材質(zhì)量的均一性、穩(wěn)定性及臨床療效，必須從源頭控制藥材質(zhì)量，制定藥材入選標準，同時相關(guān)部門要引起足夠重視。紅外光譜具有專屬性、特征性強、取樣量小、準確簡便、化學(xué)污染小、不需要貴重儀器等優(yōu)點，故用于中藥的定性鑒別具有一定的客觀性和可靠性。而蛤殼、海螵蛸、牡蠣紅外原始光譜圖極其相似，僅僅通過原始光譜難以進行定性鑒別。不同產(chǎn)地石決明、牡蠣、珍珠母碳酸鈣含量及紅外光譜沒有明顯差異，以碳酸鈣的含量及紅外光譜作為其評價指標性成分，未能從整體上反映中藥的內(nèi)在質(zhì)量，也難以進行定性鑒別。圖1紅外光譜圖結(jié)果參考文獻：【相關(guān)文獻】[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.85.高爽海洋中藥蛤殼的應(yīng)用研究進展[A].2008年中國藥學(xué)會學(xué)術(shù)年會暨第八屆中國藥師周論文集[C].石家莊：中國藥學(xué)會，2008.劉永剛，趙富花，何進來.海螵蛸的研究概況[J].時珍國醫(yī)國藥，2005,16(1):72-73.[4]趙思遠，吳楠，孫佳明，等.近10年牡蠣化學(xué)成分及藥理研究[J].吉林中醫(yī)藥，2014,34(8):821-824.沈亞芬，沈金根，朱曙東.中藥海螵蛸藥理作用研究進展[J].中國藥業(yè)，2010,19(10):87-88.李蘭，吳啟南.海螵蛸的化學(xué)成分研究[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2009,23(2):52-54.張晗，張磊，劉洋.龍骨、牡蠣化學(xué)成分、藥理作用比較研究[J].中國中藥雜志，2011,36(13):1839-1840.[8]WHITEAJE,CATALLOBWJ,LEGENDREAB